專利名稱：冷凍法處理帶毒灰飛虱的制作方法
技術領域：
本發明是處理攜帶病毒的灰飛虱一種新方法，屬于植物病害抗性鑒定技術領域。
背景技術：
水稻條紋病毒(RSV)引起的水稻條紋葉枯病最早于1897年在日本關東發現，后在朝鮮、烏克蘭和中國均有發生。我國自1962年在江浙發現該病毒以來，已經在全國16個省、市、自治區發生，目前以江蘇省為主的長江下游稻區仍處于流行期。據不完全統計，僅2004年江蘇省水稻條紋葉枯病發生面積就達2700萬畝，占江蘇省水稻面積的79％，專家預計2006后的五年內水稻條紋葉枯病仍將呈偏重發生趨勢，預防工作刻不容緩。
水稻條紋葉枯病是一種由灰飛虱傳播的植物病毒病，一旦發病為害后便基本無藥可治，目前生產上多采用治蟲防病、調整播栽期等措施，但是在蟲量大，灰飛虱帶毒率高，若、成蟲峰期長的病害大發生年份，兩者的控害效果都不理想。國外的防治經驗表明，針對這一病害最為經濟有效的方法是選育抗病品種應用于生產。研究表明苗期室內接種鑒定的鑒定結果穩定可靠，是抗性鑒定的首選方法，但由于傳毒介體灰飛虱的移動性較強，定量接種灰飛虱一直是一件操作復雜而繁瑣的工作。因而，發明一種方便、快速的灰飛虱處理方法，可以大大加快灰飛虱傳病毒病接種鑒定的速度，進而加快抗病品種的鑒出速度和選育進程。
發明內容
本發明的目的是為水稻條紋葉枯病等灰飛虱傳病毒病的接種鑒定提供一種處理攜帶病毒的灰飛虱的新方法。
本發明所提供的方法是通過冷凍方法使灰飛虱的移動能力暫時下降，以開展定量取蟲操作，隨著體溫的回升，灰飛虱重新恢復移動、取食和傳毒能力，進而達到快速定量地移動灰飛虱的目的。
在上述方法中，選取的是2～5齡可用于接種病毒的灰飛虱，冷凍的溫度是-20℃，冷凍時間是20分鐘。
所述用于處理的灰飛虱冷凍前應在相對封閉的容器中，其可以是以尼龍紗布封口玻璃杯或圓形開口塑料容器，要求有較好的空氣流動性確保灰飛虱存活，同時又可防止灰飛虱逃出容器。
將冷凍后暫時喪失活動性的灰飛虱，即可進行類似數水稻種子的定量計數操作，準備好足量的灰飛虱后將其放入預先備好的栽有需鑒定水稻苗的接種容器中，待灰飛虱體溫回升，活動能力恢復，即可進行傳毒接種。
本發明提供了一種處理攜帶病毒的灰飛虱的新方法，取名為“冷凍法處理帶毒灰飛虱”。該方法較傳統的灰飛虱取蟲方法等具有以下優點①更方便的開展預定數量的接種病毒用灰飛虱的處理；②更快速的開展接種病毒用灰飛虱的處理；③便于選取適宜齡期的接種病毒用灰飛虱。因而可以大大加快灰飛虱傳病毒病接種鑒定的速度和準確度，進而加快抗病品種的鑒出速度和選育進程。
具體實施例方式 下面實施例中所用方法如無特別說明均為常規方法。
實施例1、帶毒灰飛虱的冷凍時間梯度實驗 取6個干燥玻璃杯，編號，選取按一定比例攜帶水稻條紋病毒的灰飛虱置于其中，每杯100蟲左右。同時放于冰箱中于-20℃條件下開始冷凍并計時 每10分鐘取出1杯，取出后迅速將飛虱倒于白紙上，用毛筆數數，觀察并記錄灰飛虱活躍狀態，蘇醒時間及死蟲數。將冷凍的灰飛虱用武育粳3號單獨飼養，于第二天統計死亡蟲數。
結果表明冷凍10分鐘，灰飛虱不昏迷，仍然可以跳動，不利于在紙上數蟲；但是，隨著冷凍時間超過30分種，灰飛虱的生命力會受影響，死亡率隨冷凍時間的增大而增大(表1)。綜合蘇醒時間與死亡率可知帶毒灰飛虱的冷凍處理以-20℃下冷凍20分鐘左右比較合適。
表1 不同冷凍時間灰飛虱的狀態
實施例2、冷凍處理對帶毒灰飛虱傳毒能力的影響試驗 將武育粳3號浸種，催芽，至0.5葉時播于玻璃杯中；每杯播苗12株，播6杯。從按一定比例攜帶水稻條紋病毒灰飛虱群體中取120頭左右，按上述方法-20℃下將灰飛虱冷凍20分鐘，數取120蟲，接于1.5葉齡的武育粳3號上，重復3次。同時用吸管準確吸取120蟲接于1.5葉齡的武育粳3號上，重復3次。玻璃杯用紗布封口，48小時后，將灰飛虱移走。移栽于大田，注意田間管理。7天后開始調查植株發病情況(病級劃分標準參照發明內容)，隨后每隔3～6天調查一次，以發病高峰期且最能反映抗(感)病性差異的調查記載數據為依據作出抗病性評價，要求顯癥期間平均氣溫不低于20℃，最低氣溫不低于15℃。
表2 冷凍灰飛虱對傳毒能力的影響
結果表明冷凍處理的灰飛虱接種后武育粳3號的發病率低于不冷凍的處理，可是顯著性分析發現二者間無顯著性差異，可見冷凍處理對帶毒灰飛虱傳播水稻條紋病毒的能力沒有影響。
本發明主要服務于針對水稻條紋葉枯病開展抗病品種選育工作，為水稻條紋葉枯病等灰飛虱傳病毒病的接種鑒定提供一種處理攜帶病毒的灰飛虱的新方法。該方法的應用可以大大加快灰飛虱傳病毒病接種鑒定的速度和準確度，進而加快抗病品種的鑒出速度和選育進程。
上述實施不以任何形式限定本發明。
權利要求
1、一種處理攜帶病毒的灰飛虱的新方法，其特征在于通過冷凍方法使灰飛虱的移動能力暫時下降，以開展定量取蟲操作，隨著體溫的回升，灰飛虱重新恢復移動、取食和傳毒能力，進而達到快速定量地移動灰飛虱的目的。其關鍵在于(一)選取的是2～5齡可用于接種病毒的灰飛虱；(二)冷凍的溫度是-20℃；(三)冷凍時間是20分鐘。
全文摘要
本發明公開了一種處理攜帶病毒的灰飛虱的新方法。本發明的實質是通過冷凍方法使灰飛虱的移動能力暫時下降，以開展定量取蟲操作，隨著體溫的回升，灰飛虱重新恢復移動、取食和傳毒能力，進而達到快速定量地移動灰飛虱的目的。本發明較原有的方法具有更方便、快捷的特點，可應用于水稻條紋葉枯病等灰飛虱傳病毒病的接種鑒定。
文檔編號A01K67/033GK101292640SQ20081012393
公開日2008年10月29日 申請日期2008年6月12日 優先權日2008年6月12日
發明者彤 周, 周益軍, 潔 陳, 程兆榜, 季英華, 熊如意 申請人:江蘇省農業科學院