專利名稱：一種促進油松人工幼林生長的方法
技術領域：
本發明涉及促進樹木生長的研究，具體地說是一種促進油松人工幼林生長的方法。
背景技術：
菌根真菌與樹木形成共生營養體系，不僅對樹木有著多種有益功能，而且在整個 森林生態系統中的物質轉化、能量循環等過程中具有重要作用；尤其在荒山、荒地、干旱風 沙地區、侵蝕地等土壤貧瘠缺乏菌根資源的地區造林，菌根生物接種技術更能發揮巨大的 作用。菌根菌具有降解土壤中復雜的礦物質和有機質并把它轉化為可被林木吸收、利用 的有效養分的功能。利用菌根接種技術育苗，提高造林成活率已受到國內外學者的高度重 視，但此項技術應用于改造土壤貧瘠的油松幼林，在國內外至今很少報道。遼西地區是遼寧省西部的低山丘陵區，人工栽植的水保林多為油松林。嚴重干旱 和水土流失為其自然特征，土壤中的營養物質經長年的流失已十分貧乏，土壤中微生物減 少，樹木生長緩慢；
發明內容
本發明的目的在于提供一種促進油松人工幼林生長的方法。為實現上述目的，本發明采用的技術方案為—種促進油松幼林生長的方法將混合培養后真菌與土壤混配成菌劑，而后將菌 劑接種到油松幼林的土壤中，進而促進油松生長。所述混合培養真菌為劣味乳菇(Lactarius insulsus Fr.)、赫絲膜菌(Cofinarus russus Fr.)、褐環乳牛肝菌(Suillus luteus (L. ex Fr.) Gray)和毛邊滑繡傘菌(Hebloma mesophaeum(Fr.)Quel.)。所述混合培養后真菌與土壤混配成菌劑的用量為112. 5kg ·1 Γ2。本發明具有如下優點采用本發明方法接種混合培養的菌劑促使油松根部受到菌根真菌侵染，形成了二 分叉后與沒有接菌的林木相比，除了具有增大吸收面積，可以吸收更多的養分和水分的同 時，外生型菌根在林木根系上存在時間較普通非菌根長，從而延長了吸收根的效能；真菌的 菌絲套成為病原菌侵染根表皮細胞的一種機械障礙，抑制了病原菌對吸收根的侵染，從而 提高了林木的抗病能力，同時其樹高和地徑的生長都有明顯的提高；采用本發明方法種植 的油松，具有大量的外生型菌根，與沒接菌林木相比，長得較為粗壯，其是由于根部受到菌 根菌侵染，形成了二分叉，增大了對養分的吸收面積，而且菌根上共生的真菌菌絲體伸向四 周，擴大到土壤中，進一步增大了對土壤養分的吸收區域，特別是對氮的吸收。
具體實施例方式下面通過實施例對本發明作進一步說明
實施例試驗地概況試驗地位于遼寧省凌源市欺天林場，屬低山丘陵區，海拔530m，年平 均氣溫7. 9°C，年降水量400-600mm，年蒸發量為1800-2100mm，無霜期125d，土壤質地為砂 壤質，土層厚度20-30cm，母巖為砂頁巖。試驗材料供試菌株參見表1。菌根真菌菌劑的制備采用一級斜面菌種，二級液體 種子液，三級固體基質擴大培養方法。劣味乳菇的培養過程將冰箱中保存的菌種取出，放入基本培養基培養使其活化， 方法為消好毒滅好菌的超凈工作臺上挑取其中菌絲，劃線接種到PDA斜面上靜置培養 5d。之后將活化培養后的菌種再分別劃線接種至三個PDA斜面上，靜置培養3d使其抱 子長滿斜面。再將IOOmL液體培養基放人250mL的錐形瓶中，滅菌30min，取出冷卻到 室溫。在消毒后的超凈工作臺上接種，再在瓶中加入玻璃珠，用以打碎菌絲球，接種后置于
和120rpm搖床培養72小時。重復3次a. PDA基本培養基馬鈴薯200g，蔗糖20g，瓊脂20g，蒸餾水lOOOmL，pH自然。b.液體培養基(NH4)2SO4 1. 4g/L ；脲 0. 3g/L ；KH2PO4 2. Og/L ；CaCl2O. 3g/L ； MgSO4. 7H20 0. 3g/L ；蛋白胨 0. 5-1. Og/L ；吐溫 80 1. 0-2. 0g/L 微量元素=FeSO4. 7H20 5. 0mg/L ；ZnSO4. 7H20 1. 4mg/L ；MnSO4. H2O 1. 6mg/L ；CoCl2 2. 0mg/L ;pH5_6。赫絲膜菌的培養過程將4°C冰箱中保存的試管斜面菌種取出，室溫下緩菌ld，挑 去斜面邊緣菌絲轉接與hchlewski平板培養基上轉那個粗菌絲后再連續轉接2 3次， 25°C暗培養7d備用。平板菌絲長好后，接入裝有50ml改良MMN液體培養基的500ml三角 瓶培養10d，用分散機(IKL T 18basic) 10000r/min粉碎lmin,隨后定量接入裝有50ml液 體培養基的500ml搖瓶中培養。a. Pachlewski固體培養基葡萄糖2%，酒石酸0. 25%，硫酸鎂0. 05%，磷酸二氫 鉀0. 1 %，麥芽汁1.5%，檸檬酸鐵0. 003 %，微量元素Iml，0. 004 % VB1Iml，瓊脂1. 8 %。b.液體培養基葡萄糖1%，麥芽汁1%，蛋白胨0.2%酵母浸膏0.5%，磷酸二氫 鉀 0.05%，檸檬酸 0.01%，氯化鈣 0.05%，磷酸二氫銨 0.025%，!^eCl 0. 12%,0. 04% VB^. 5%。褐環乳牛肝菌的培養過程將4°C冰箱中保存的試管斜面菌種取出，室溫下緩菌 ld，挑去斜面邊緣菌絲轉接與I^chlewski平板培養基上轉那個粗菌絲后再連續轉接2 3 次，25 0C暗培養7d備用。平板菌絲長好后，接入裝有50ml改良MMN液體培養基的500ml三 角瓶培養10d，用分散機(IKL T18basic) lOOOOr/min粉碎lmin，隨后定量接入裝有50ml液 體培養基的500ml搖瓶中培養。a. Pachlewski固體培養基葡萄糖2%，酒石酸0. 25%，硫酸鎂0. 05%，磷酸二氫 鉀0. 1 %，麥芽汁1.5%，檸檬酸鐵0. 003 %，微量元素Iml，0. 004 % VB1Iml，瓊脂1. 8 %。b.液體培養基葡萄糖1%，麥芽汁1%，蛋白胨0.2%酵母浸膏0.5%，磷酸二氫 鉀 0.05%，檸檬酸 0.01%，氯化鈣 0.05%，磷酸二氫銨 0.025%，!^eCl 0. 12%,0. 04% VB^. 5%。毛邊滑繡傘菌的培養過程將冰箱中保存的菌種取出，放入基本培養基培養使其 活化，方法為消好毒滅好菌的超凈工作臺上挑取其中菌絲，劃線接種到PDA斜面上靜 置培養5d。之后將活化培養后的菌種再分別劃線接種至三個PDA斜面上，靜置培養3d使其抱子長滿斜面。再將IOOmL液體培養基放人250mL的錐形瓶中，滅菌30min，取出 冷卻到室溫。在消毒滅菌后的超凈工作臺上接種，再在瓶中加入玻璃珠，用以打碎菌絲球， 接種后置于和120rpm搖床培養72小時。重復3次a.基本培養基馬鈴薯200g，蔗糖20g，瓊脂20g，蒸餾水lOOOmL，pH自然。b.液體培養基(NH4)2SO4 1. 4g/L ；脲 0. 3g/L ；KH2PO4 2. Og/L ；CaCl2O. 3g/L ； MgSO4. 7H20 0. 3g/L ；蛋白胨 0. 5-1. Og/L ；吐溫 80 1. 0-2. 0g/L 微量元素=FeSO4. 7H20 5. 0mg/L ；ZnSO4. 7H20 1. 4mg/L ；MnSO4. H2O 1. 6mg/L ；CoCl2 2. 0mg/L ;pH5_6。混合培養過程在純培養下，將分別培養好的菌種混合接種于PDA斜面上靜 置培養5d。使其抱子長滿斜面。再將IOOmL液體培養基放入250mL的錐形瓶中，滅菌 30min，取出冷卻到室溫。在消毒滅菌后的的超凈工作臺上接種，再在瓶中加入玻璃珠，用以 打碎菌絲球，接種后置于和120rpm搖床培養72小時。最后將其接種于固體培養基中 進行擴大培養。a.基本培養基馬鈴薯200g，蔗糖20g，瓊脂20g，蒸餾水lOOOmL，pH自然。b.液體培養基葡萄糖1%，麥芽汁1%，蛋白胨0.2%酵母浸膏0.5%，磷酸二氫 鉀 0.05%，檸檬酸 0.01%，氯化鈣 0.05%，磷酸二氫銨 0.025%，!^eCl 0. 12%,0. 04% VB^. 5%。c固體培養基麩皮與木屑比為1 4。珍珠與巖泥炭比為7 1。基質與水比為 1 28表1菌根真菌菌種名稱
權利要求
1.一種促進油松幼林生長的方法，其特征在于將混合培養后真菌與土壤混配成菌 劑，而后將菌劑接種到油松幼林的土壤中，進而促進油松生長。
2.按權利要求1所述的促進油松幼林生長的方法，其特征在于所述混合培養真菌為 劣味乳 (Lactarius insulsus Fr.)、赫絲膜菌(Cofinarusrussus Fr·)、褐環乳牛肝菌 (Suillus luteus (L. ex Fr. ) Gray)禾口毛邊滑繡傘菌(Hebloma mesophaeum(Fr. ) Quel.)。
3.按權利要求1所述的促進油松幼林生長的方法，其特征在于所述混合培養后真菌 與土壤混配成菌劑的用量為112. 5kg · hm_2。
全文摘要
本發明涉及促進樹木生長的研究，具體地說是一種促進油松人工幼林生長的方法。將混合培養后真菌與土壤混配，而后將油松幼苗接種到混配后土壤中，進而促進油松生長。采用本發明方法接種混合培養的真菌的土壤促使油松根部受到菌根真菌侵染，形成了二分叉后與沒有接菌的林木相比，除了具有增大的吸收面積，可以吸收更多的養分和水分的同時，外生型菌根在林木根系上存在時間較普通非菌根長，從而延長了吸收根的效能。另外真菌的菌絲套成為病原菌侵染根表皮細胞的一種機械障礙，抑制了病原菌對吸收根的侵染，從而提高了林木的抗病能力。
文檔編號C05F11/08GK102100167SQ20091024846
公開日2011年6月22日 申請日期2009年12月16日 優先權日2009年12月16日
發明者于占源, 姜鳳岐, 曾德慧, 林鶴鳴 申請人:中國科學院沈陽應用生態研究所