專利名稱：茯苓乙醇提取物用于生物農藥的用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及茯苓乙醇提取物的一種新用途，具體涉及茯苓乙醇提取物在農藥方面的應用。
背景技術：
棉鈴蟲(Heliothis armigera)為鱗翅目夜蛾科昆蟲，寄主范圍廣，繁殖能力強，是亞洲、大洋洲、非洲及歐洲各地為害棉花及其他作物的主要害蟲之一，是世界性的農作物害蟲。自上個世紀90年代以來，棉鈴蟲在我國黃河、長江、遼河流域及新疆等主要棉產區大發生年頻率明顯增加，致棉花減產率高達35 50%，有些地區的部分田地甚至絕收。
小麥穎枯病菌(Septoria nodorum)是引發小麥穎枯病的主要病原菌之一,主要為害小麥未成熟穗部和莖桿，也為害葉片和葉鞘。穗部染病后，先在頂端或上部小穗上發生， 穎殼上開始為深褐色斑點，后變為枯白色并擴展到整個穎殼，其上長滿菌絲和小黑點(分生孢子器)；莖節染病后呈褐色病斑，能侵入導管并將其堵塞，使節部畸變、扭曲，上部莖桿折斷而死；葉片染病后，初為長梭形淡褐色小斑，后擴大成不規則形大斑，邊緣有淡黃暈圈， 中央灰白色，其上密生小黑點，劍葉被害扭曲枯死。葉鞘發病后變黃，使葉片早枯。小麥穎枯病危害較大，已成為我國小麥生產上的一類重要病害，多雨年份和潮濕地區發生尤其嚴重。
早疫病菌(Alternaria solani)是引發茄科植物早疫病的病原菌，主要為害西紅柿、馬鈴薯、辣椒、茄子等蔬菜。多在苗期發病，葉尖或頂芽產生暗褐色水潰狀病斑，引起腐爛，手感滑溜，幼苗上部腐爛后，形成無頂苗，甚至爛到床土面，致使苗期就死亡，危害很大。
為了防治病害，人們一方面通過選育抗病品種來增加抗性，一方面進行化學防治。 前者有一定的局限性，后者會帶來環境污染。因此開發高效、低毒、低殘留的新型農藥尤其是生物源農藥越來越受到重視。
茯苓為多孔菌科真菌茯苓Poria cocos (Schw. ) Wolf的干燥菌核，別名茯菟、茯靈、 茯奪、伏苓、伏菟、松腴、絳晨伏胎、云苓、茯兔、松薯、松木薯、松苓，性味甘、淡、平，歸心經、 肺經、脾經、腎經，主治小便不利、水腫脹滿、痰飲咳逆、嘔吐、脾虛食少、泄瀉、心悸不安、失眠健忘、遺精白濁，現代研究表明其具有利尿、抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、變形桿菌、 抗腫瘤、使環磷酰胺所致大白鼠白細胞減少加速回升、提高免疫等作用。但未有其在農藥方面的應用。發明內容
為了開發新的生物源農藥，本發明提供了茯苓乙醇提取物在農藥方面的用途，主要涉及毒殺棉鈴蟲(Heliothis armigera)、抗小麥穎枯病(Septoria nodorum)及抗植物早疫病(Alternaria solani)。
茯苓乙醇提取物在應用時，先用DMSO溶解制備成母液。
當應用在防治棉鈴蟲時，將上述母液用O. 025%吐溫20稀釋至茯苓乙醇提取物的濃度為60 μ g/cm2。
當應用在防治茄科植物早疫病和小麥穎枯病時，將上述母液用O. 025%吐溫20稀釋至獲茶乙醇提取物的濃度為20 200ppm(mg/L)。
本發明相比現有技術具有以下優點利用茯苓乙醇提取物作為殺蟲、抗菌劑，能有效殺蟲、抑制植物病原菌；茯苓乙醇提取物來源廣泛；茯苓乙醇提取物對人畜無毒，易降解，不會產生化學農藥使用過程中產生的“三R”，對環境的污染較小。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明茯苓乙醇提取物在農藥方面的應用進行詳細說明。
供試樣品茯苓藥材購于南京藥業股份有限公司。
實驗儀器高速萬能粉碎機；立式自動壓力蒸汽滅菌器；搖床；超聲波震蕩儀；旋轉蒸發儀；恒溫水浴鍋；電子天平；智能人工氣候箱；真空泵。
提取方法茯苓藥材用8倍量70%乙醇(W/V)回流提取2小時后過濾，濾渣再用8 倍量70%乙醇回流提取2小時后過濾，濾液合并，減壓濃縮，60°C下干燥，得褐色浸膏。
母液配置取茯苓乙醇提取物(褐色浸膏)用DMSO溶解，制備成濃度為10mg/mL 的母液。
測試溶液的配置使用時將母液用O. 025% Tween 20稀釋至適當濃度。
實施例一
供試昆蟲棉鈴蟲(Heliothisarmigera)、小菜蛾(Plutella xylostella)和豆蟲牙(Aphis craccivora),由湖北省農科院提供。
試驗方法以小菜蛾和棉鈴蟲為試蟲時，卵用10%的甲醛溶液消毒15min，采用經改進的北京農科 院梁革梅的飼料配方，室內人工飼養。飼養條件溫度25°C，相對濕度為 755^-855"^將樣品稀釋至一定濃度后涂布于人工飼料表面。米用96孔細胞培養板,每孔加入人工飼料300 μ L和稀釋藥液20 μ L，一周后檢查實驗結果。初篩時藥液濃度為1. Omg/ mL,復篩濃度根據初篩結果進行調整。
以豆蚜為試蟲時采用浸泡法。初篩濃度為1. Omg/mL，直接將長有豆蚜的豆苗浸泡在藥液中，一周后檢查結果。復篩濃度根據初篩結果進行調整。
試驗結果茯苓乙醇提取物在濃度為60 μ g/cm2時對棉鈴蟲有100%毒殺作用，對小菜蛾和豆蚜無毒殺作用。
實施例二
供試菌終極腐霉菌(Pythium ultimum)、灰霉菌(Botrytis cinerea)、小麥穎枯病原菌(Septoria nodorum)、早疫病病原菌(Alternaria Solani)、小麥赤霉病原菌 (Fusarium culmorum)、立枯病病原菌(Rhizoctonia solani),由湖北省農科院提供。
試驗方法半固體培養基法。采用96孔細胞培養板，每孔加入90 μ L培養基和待測真菌的菌絲體或孢子的混合物，每孔加入藥液量為 ο μ L。初篩濃度為20ppm，復篩濃度根據初篩結果進行調整。
試驗結果茯苓乙醇提取物在濃度為20ppm時對小麥穎枯病原菌和早疫病病原菌有較強的抑制作用，抑制率為77%。
權利要求
1.茯苓乙醇提取物在農藥方面的用途。
2.權利要求1所述的茯苓乙醇提取物為茯苓藥材用60% 100%乙醇回流提取后過濾、濃縮所得的褐色浸膏。
3.根據權利要求1所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物用于毒殺棉鈴蟲。
4.根據權利要求3所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物在應用時，先采用DMSO溶解制備母液，使用前取所述母液用O. 025%吐溫20溶液稀釋至茯苓乙醇提取物的應用濃度為60 μ g/cm2。
5.根據權利要求1所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物可以抑制小麥穎枯病原菌，用于防治小麥穎枯病。
6.根據權利要求1所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物可以抑制早疫病病原菌，用于防治茄科植物早疫病。
7.根據權利要求5-6所述的用途，其特征在于所述茯苓乙醇提取物在應用時，先采用DMSO溶解制備母液，使用前取所述母液用O. 025%吐溫20稀釋至茯苓乙醇提取物的應用濃度為20ppm。
全文摘要
本發明公開了茯苓乙醇提取物在農藥方面的用途，尤其涉及茯苓乙醇提取物在毒殺棉鈴蟲、抗小麥穎枯病和植物早疫病方面的用途。本發明所述茯苓乙醇提取物能有效毒殺棉鈴蟲、抑制小麥穎枯病及植物早疫病病原菌，擴大了生物農藥的選擇范圍。
文檔編號A01P3/00GK102986738SQ20121054993
公開日2013年3月27日 申請日期2012年12月18日 優先權日2012年12月18日
發明者馬麗, 李維林, 王開梅, 顧玉誠, 劉玲玲 申請人:江蘇省中國科學院植物研究所