少花龍葵根組織培養方法建立的制作方法
【專利摘要】本發明的少花龍葵根組織培養方法是首先利用15%次氯酸鈉溶液消毒種子，時間15分鐘，然后在超凈工作臺把用無菌水清洗后的種子放置在MS基本培養基上，進行光照培養，待20天后取無菌苗的根，制備外植體，放置在誘芽培養基上培養，待芽長到2-3cm時切下來，放置在生根培養基上培養，待幼苗的根長到3-4cm時，即可煉苗移栽。
【專利說明】少花龍葵根組織培養方法建立
【技術領域】
[0001]本發明屬于植物基因工程【技術領域】，具體涉及少花龍葵根組織培養方法建立。
【背景技術】
[0002]少花龍葵{Solariumphoteinocarpum Nakamuraet Odashima)別名白花菜、扣子草等，是茄科(Solanaceae)茄屬多年生草本植物，分布于我國大部分地區、多生長在果園、田邊、村邊路旁等。少花龍葵主治痢疾、高血壓和黃疸等。外治皮膚濕毒、烏皰和老鼠咬傷等。它不僅具有重要的藥用價值，同時也可以食用，所以越來越受到人們的關注。目前人們已經建立少花龍葵子葉、龍葵葉、原生質體和幼莖表皮細胞再生體系，曾祥偉等利用野生少花龍葵種子萌發后長出的無菌苗子葉作為外植體，通過在MS培養基中添加一定濃度的
6-BA和NAA誘導分化出胚狀體，再通過對幼苗誘導生根最后培養成完整植株。劉連芬等利用龍葵幼苗的葉片經表面消毒后制備外植體，在MS培養基中添加0.5mg/L 6BA和2 mg/LIAA能夠誘導出芽，在MS培養基中添加0.05mg/L 6BA和1 mg/L IAA能夠誘導出根。王光遠等利用從龍葵葉肉細胞分離出的原生質體進行組織培養，最后再生成完整的植株。何奕昆等利用龍葵表皮及皮下1-6層細胞為實驗材料，通過添加一定濃度的6-BA和2，4-D，能夠誘導出幼芽。但截至目前為止未見根組織培養方法相關研究。
【發明內容】
[0003]本發明的少花龍葵根組織培養方法是首先利用15%次氯酸鈉溶液消毒種子，時間15分鐘，然后在超凈工作臺用無菌水清洗5次，把消毒后的種子放置在MS基本培養基上，25°C光照培養，待培養20天后在超凈工作臺取無菌苗的根，用無菌水洗去瓊脂后切成l-2cm數段，作為外植體，放置誘芽培養基培養，該培養基配方是在MS基本培養基中添加lmg/L 6BA 、0.25 mg/L TDZ和0.2 mg/L IAA。待幼芽長到2_3cm時切下，放置在生根培養基上培養，生根培養基配方是在MS基本培養基添加0.5mg/L NAA ;待幼苗的根長到3-4cm時，即可煉苗移栽。
[0004]本發明的目的在于提供一種少花龍葵根組織培養方法。
[0005]為了實現上述目的，本發明第一方面提供了一種少花龍葵種子的消毒方法。
[0006]本發明的第二個方面提供了少花龍葵根誘芽培養基的配方。
[0007]本發明的第三個方面提供了芽誘導生根培養基的配方。
[0008]關于少花龍葵根組織培養方法，國內外至今未見報道。本發明首先利用15%次氯酸鈉溶液消毒種子，然后利用培養20天后無菌苗的根，制備外植體，進行誘芽培養，待芽長到2-3cm時切下來，放置在生根培養基上培養，待幼苗的根長到3-4cm時，即可煉苗移栽。
【權利要求】
1.利用15%次氯酸鈉溶液消毒少花龍葵種子，時間15分鐘，然后在超凈工作臺用無菌水清洗5次，用于制備無菌苗。
2.在超凈工作臺取生長20天少花龍葵無菌苗的根，用無菌水清洗后切成l-2cm數段，放置在誘芽培養基培養，該培養基配方是在MS基本培養基中添加lmg/L 6BA 、0.25 mg/LTDZ 和 0.2 mg/L ΙΑΑ。
3.待幼芽長到2-3cm時切下，放置在生根培養基上誘導生根，該培養基配方是在MS基本培養基中添加0.5mg/L NAA，待幼苗的根長到3_4cm時，即可煉苗移栽。
【文檔編號】A01H4/00GK104273026SQ201310272723
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2013年7月2日 優先權日:2013年7月2日
【發明者】不公告發明人 申請人:四川農業大學