專利名稱：作為impdh抑制劑的草酰胺的制作方法
技術領域：
本發明涉及新穎的草酰胺衍生物、它們的制備方法、含有這些衍生物的藥物制劑和這些衍生物作為藥物的用途。確切地說，本發明涉及新穎的草酰胺衍生物，它們是肌苷一磷酸脫氫酶(IMPDH)抑制劑。
肌苷一磷酸脫氫酶(IMPDH)是參與鳥嘌呤核苷酸從頭合成的酶。該酶催化肌苷-5’-一磷酸(IMP)的依賴于NAD的氧化作用，生成黃苷-5’-一磷酸，該氧化作用是鳥嘌呤核苷酸合成中的限速步驟。由于該酶在鳥嘌呤核苷酸生物合成中的關鍵作用，該酶代表了抑制劑研究的重要目標，該抑制劑在涉及IMPDH病程的治療中將被用作治療劑。
鳥嘌呤核苷酸的從頭合成對B-和T-淋巴細胞是特別重要的，為后者提供充足的核苷酸水平，以支持對有絲分裂原或抗原產生增殖性應答[Wu,J.C.《藥物發現與設計展望》2,185-204,(1994)]。IMPDH抑制作用因此是誘人的目標，用以選擇性地抑制免疫系統。IMPDH抑制劑是已知的[Pankiewicz,K.W.,Exp.Opin.Ther.Patents.,9,55-65,(1999)]，非競爭性抑制劑霉酚酸(MPA)已被證實可抑制B-和T-細胞對有絲分裂原或抗原產生應答[Allison,A.C.和Eugui,E.M.,Transplant.Proc.,25,8-18,(1993)]。MPA因此已被用作免疫抑制劑。
人們還認識到，IMPDH在其它快速增殖性細胞內發揮作用，例如腫瘤細胞系，提示IMPDH抑制作用也是抗癌化學療法的目標[Nagai,M.等,51,3886-3890,(1990)]。
IMPDH抑制作用還顯示出在某些支持病毒復制的細胞系內的病毒復制中發揮作用[Pankiewicz,K.W.,Exp.Opin.Ther.Patents.,9,55-65,(1999)]。例如，利巴韋林是廣譜抗病毒劑，已被美國食品與藥品管理局批準以氣霧劑方式使用，用于治療嬰兒由呼吸道合胞病毒引起的嚴重呼吸感染，也用作丙型肝炎病毒感染患者的治療劑，此時與干擾素聯合使用[Patterson,J.L.和Fernandez-Larsson,R.《傳染病評論》12,1139-1146,(1990)；McHutchison,J.G.等《新英格蘭醫學雜志》339,1549-1550,(1998)]。利巴韋林在細胞內轉化為利巴韋林-5’-一磷酸，后者是IMPDH抑制劑。
另外，IMPDH抑制劑利巴韋林和MPA已經顯示可抑制黃熱病毒(RNA病毒)的復制，MPA已經證實可體外抑制乙型肝炎病毒(DNA病毒)的復制，這些都支持了這些抑制劑的廣泛抗病毒活性[Neyts,J.等《抗病毒研究》30,125-132,(1996)；Gong,Z.J.等《病毒性肝炎雜志》6,229-236,(1999)]。此外，MPA已經顯示在體外和動物模型內都可加強核苷類似物的抗病毒作用[Neyts,J.和De Clercq,E.《國際抗病毒報導》7,134-136,(1999)]。這些觀察結果都說明，IMPDH抑制劑可用作廣譜抗病毒劑。
IMPDH抑制劑因此將具有作為免疫抑制劑、抗癌劑和抗病毒劑的治療潛力。具體來說，這樣的化合物可用于移植排斥的治療、癌癥的治療，作為抗病毒劑還可用于病毒性疾病的治療，例如逆轉錄病毒感染和丙型肝炎病毒感染(單獨或者聯合其它抗病毒劑，例如干擾素或其衍生物，例如與聚乙二醇的共軛物)。
由本發明所提供的新穎的草酰胺衍生物是通式(Ⅰ)化合物 其中R1代表雜環基；R2代表氫、未取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素、羥基或氰基；R3代表氫、未取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素或氰基；
R4代表氫、低級烷基、低級環烷基、芳基或雜環基；R5代表氫、未取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素或氰基；R6代表氫、未取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素或氰基；R7代表氫或未取代的低級烷基；R8代表氫或未取代的低級烷基；或者R4與R8以及它們所連接的氮原子一起代表雜環基；和其藥學上可接受的鹽。
由本發明所提供的草酰胺衍生物是肌苷一磷酸脫氫酶(IMPDH)抑制劑。它們能夠用作藥物，尤其用于治療免疫介導的病癥或疾病、病毒性疾病、細菌性疾病、寄生蟲性疾病、炎癥、炎性疾病、血管過度增生性疾病、腫瘤和癌癥。它們能夠單獨使用，或者與其它治療學上的活性試劑聯合使用，例如免疫抑制劑、化療劑、抗病毒劑、抗生素、抗寄生蟲劑、抗炎劑、抗真菌劑和/或抗血管過度增生劑。
確切地說，本發明的化合物和含有它們的組合物可用作化療劑、病毒復制抑制劑和免疫系統調節劑，能夠用于治療病毒性疾病，例如逆轉錄病毒感染和丙型肝炎病毒感染(單獨或者聯合其它抗病毒劑，例如干擾素或其衍生物，例如與聚乙二醇的共軛物)；炎性疾病，例如骨關節炎、急性胰腺炎、慢性胰腺炎、哮喘和成人呼吸窘迫綜合征；血管過度增生性疾病，例如再狹窄、狹窄和動脈粥樣硬化；癌癥，例如淋巴瘤和白血病；作為免疫抑制劑用于治療自體免疫性疾病、移植物抗宿主疾病和移植排斥。
具有抗病毒作用和/或免疫抑制性質的本發明化合物特別可用于治療HCV感染。
本文所用的術語“低級烷基”指直鏈或支鏈烷基，含有至多10個碳原子，優選為1至8個碳原子，更優選為1至6個碳原子，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基和1,1-二甲基乙基；并且任選地被下列基團中的一個或多個取代，例如氰基、鹵素、羧基、羥基，低級烷氧基、低級環烷氧基、芳氧基、雜環氧基、雜環基-(低級烷氧基)-芳基-氨基-草酰-氧基，低級烷氧基-羰基，芳基、芳基-羰基-氨基-芳基、低級烷基-羰基-氨基-芳基，雜環基、低級烷基-雜環基，低級環烷基、低級鏈烯基、低級炔基，氨基、一-或二-(低級烷基)氨基、低級環烷基氨基、芳基氨基、雜環基氨基、低級烷基-芳基-低級烷基-氨基、低級烷氧基-羰基-氨基、低級鏈烯基-羰基-氨基、低級烷基-羰基-氨基、二-(芳基)-低級烷基-羰基-氨基、低級烷基-磺酰-低級烷基-羰基-氨基、低級環烷基-低級烷基-羰基-氨基、雜環基-低級烷基-羰基-氨基、低級烷氧基-低級烷基-羰基-氨基、二-芳基-低級烷基-羰基-氨基、芳基-羰基-氨基、低級烷基-芳基-羰基-氨基、三-(低級烷基)-芳基-羰基-氨基、一-或二-(低級烷氧基)-芳基-羰基-氨基、二-(低級烷基)-氨基-芳基-羰基-氨基、低級烷基-羰基-氨基-芳基-羰基-氨基、雜環基-芳基-羰基-氨基、低級環烷基-羰基-氨基、一-或四-(低級烷基)-低級環烷基-羰基-氨基、雜環基-羰基-氨基、一-或二-(低級烷基)-雜環基-羰基-氨基、三-(低級烷基)-芳基-草酰-氨基，低級烷基-氨基甲酰基、芳基-氨基甲酰基，硫代、低級烷硫基、低級環烷硫基、芳硫基、雜環硫基、低級烷基磺酰、低級環烷基磺酰、芳基磺酰、雜環基磺酰。
當存在不止一個取代基時，每個取代基可以是相同或不同的，例如三氟甲基、三苯甲基、1-[1-甲基-1-[甲基甲酰基]-2-苯基]乙基或2-[1-羥基-3-環己基]。
術語“未取代的低級烷基”指如上所定義的烷基，其中不存在取代基。
術語“低級鏈烯基”指含有2至7個碳原子的鏈烯基，例如烯丙基、乙烯基和丁烯基。
術語“低級炔基”指含有2至7個碳原子的炔基，例如炔丙基或丁炔基。
術語“低級環烷基”單獨或以“低級環烷基-低級烷基”的聯合方式指含有3至10個碳原子、優選為3至7個碳原子的環烷基，例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基和金剛烷基，它們可以任選地被例如低級烷基、羧基、羥基或芳基中的一個或多個取代，或者任選地是苯并稠合的，例如與芳基。當存在不止一個取代基時，每個取代基可以是相同或不同的。環丙基甲基、2-環丁基-乙基和3-環己基-丙基是低級環烷基-低級烷基的例子。
術語“鹵素”表示氟、氯、溴或碘。
術語“低級烷氧基”表示任選被取代的如上所定義的低級烷基，它通過氧原子鍵合，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基等。適合的取代基是可用于“低級烷基”的那些。
術語“芳基”單獨或以“芳基-低級烷基”的聯合方式指苯基或萘基，任選地是苯并稠合的，例如與低級環烷基環進行苯并稠合，和/或任選地被下列基團中的一個或多個取代，例如鹵素，氰基、羧基，低級烷基-硫代、硝基，氧代、羥基、低級烷氧基、低級環烷氧基、芳氧基、雜環氧基，低級烷基-雜環基、雜環基，低級烷氧基-羰基、低級烷基-羰基、雜環基-羰基、低級烷基-雜環基-羰基，氨磺酰、低級烷基-氨磺酰，硫代、低級烷硫基、低級環烷硫基、芳硫基、雜環硫基、低級烷基-磺酰、低級環烷基磺酰、芳基磺酰、雜環基-磺酰，氨基、一-或二-(低級烷基)氨基、低級烷基-磺酰-氨基、二-(低級烷基)-雜環基-氨基、低級烷基-羰基-氨基、(低級烷基-羰基)(低級烷基)-氨基、低級烷氧基-羰基-氨基、芳基-羰基-氨基，一-或二-(低級烷基)-氨基甲酰基、芳基-氨基甲酰基，低級烷基、芳基-低級烷基、氨基-低級烷基、雜環基-低級烷基、低級烷氧基-羰基-低級烷基、低級烷基-氨磺酰-低級烷基、芳基-磺酰-氨基-低級烷基、低級烷基-磺酰-氨基-低級烷基、低級烷氧基-羰基-氨基-低級烷基、雜環基-氧基-羰基-氨基-低級烷基、芳氧基-羰基-氨基-低級烷基、低級烷基-羰基-氨基-低級烷基、低級烷氧基-羰基-(低級烷基)-氨基-低級烷基、低級烷基-氨基甲酰基-低級烷基、低級烷基-芳基-羰基-氨基-低級烷基、芳基-氨基甲酰基-低級烷基、低級環烷基-羰基-氨基-低級烷基、雜環基-羰基-氨基低級烷基或芳基-羰基-氨基-低級烷基。當存在不止一個取代基時，每個取代基可以是相同或不同的，例如1-(3-甲氧基-4-噁唑基)苯基、1-(3-氯-4-甲氧基)苯基、1-(3-氯-4-甲基)苯基和1-(3-氟-4-甲基)苯基。
上列相同取代基適用于所有含有“任選被取代的苯基……”的術語。
術語“芳氧基”表示如上所定義的芳基，它通過氧原子鍵合，例如苯氧基等。
本文所用的術語“雜環基”單獨或以“雜環基-低級烷基”的聯合形式指飽和、不飽和或部分飽和的單環或二環的環系，含有一個或多個選自氮、硫和氧的雜原子；它通過環系內的碳原子(C-連接)或氮原子(N-連接)與分子的其余部分連接，并且任選地以與如上所定義的芳基相同的方式被取代和/或被氧橋取代。當存在不止一個取代基時，每個取代基可以是相同或不同的。
雜環基的例子是噁唑基、異噁唑基、呋喃基、四氫呋喃基、1,3-二氧戊環基、二氫吡喃基、噻吩基、吡嗪基、異噻唑基、異喹啉基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、二氫噁唑基、嘧啶基、苯并呋喃基、四唑基、吡咯烷酮基、(N-氧化物)-吡啶基、吡咯基、三唑基(例如1,2,4-三唑基)、吡唑基、苯并三唑基、哌啶基、嗎啉基、噻唑基、吡啶基、二氫噻唑基、咪唑烷基、吡唑啉基、苯并噻吩基、哌嗪基、咪唑基、噻二唑基(例如1,2,3-噻二唑基)和苯并噻唑基。
任何存在于側鏈中的官能團(即反應性基團)可以用本身已知的保護基團加以保護，例如《有機合成中的保護基團》第2版所述，T.W.Greene和P.G.M.Wuts,John Wiley＆Sons,New York，NY,1991。例如，氨基能夠被叔丁氧基羰基、甲酰基、三苯甲基、芐氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、三氟乙酰基、2-(聯苯基)異丙氧基-羰基或異冰片基氧基羰基保護起來，或者是苯二甲酰亞氨基的形式；或者羥基能夠被叔丁基二甲基甲硅烷基、四氫吡喃基、4-甲氧基芐基或芐基保護起來；或者羧基能夠以酯的形式被保護起來，例如甲基或叔丁基酯。保護基團可以保留在最終的化合物中，或者任選地通過本領域已知的技術除去。
本發明化合物可以含有一個或多個不對稱碳原子，因此可以存在外消旋物和外消旋混合物、單一的對映體、非對映混合物和個別的非對映體。此外，若本發明化合物含有烯屬雙鍵，則它可以具有(E)或(Z)構型。而且，每個手性中心可以是R或S構型。本發明包含這些化合物的所有這樣的異構形式。
式(Ⅰ)化合物的例子顯示在下表1a和1b中
表1a 表1b 優選的式(Ⅰ)化合物是其中R2、R3、R5和R6中至少一個不是氫的那些。
此外，優選的式(Ⅰ)化合物是其中R1代表任選被取代的噁唑環的那些。
特別優選的式(Ⅰ)化合物是根據通式(Ⅸ)的那些 其中R2至R8是如上所定義的；R9是氫、低級烷基、芳基-低級烷基；R10是氫。
更確切地說，優選的式(Ⅰ)化合物是根據通式(Ⅸ)的那些，其中R2是甲氧基或氯；R3是氫；R4是雜環基、芳基或任選被取代的支鏈低級烷基；R5是氫；R6是氫；R7是氫；R8是氫；R9是氫；R10是氫。
特別優選的式(Ⅰ)化合物也是根據下列通式的那些 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，m=1至5，R12是雜環基或芳基，其前提條件是R12不代表4-氟苯基。
特別優選的式(Ⅺa)或(Ⅺb)化合物是如下那些，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫，其中R12是任選被取代的苯基和任選被取代的雜芳基，其前提條件是R12不代表4-氟苯基。
這樣的化合物例子列在表1c中。
表1c 特別優選的式(Ⅰ)化合物也是根據通式(Ⅻ)的那些 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11、R13、R14、R15、R16、R17和R18是H或低級烷基，R19是烷基、環烷基、雜環基烷基或芳基烷基。
特別優選的式(Ⅻ)化合物是如下那些，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫。
這樣的化合物例子列在下表1d中。
表1d 特別優選的式(Ⅰ)化合物也是根據通式(ⅩⅢ)的那些 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11、R13、R14、R15、R16、R17和R18是H或低級烷基，R20是烷基、環烷基、芳基、雜環基。
特別優選的式(ⅩⅢ)化合物是如下那些，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫。
這樣的化合物例子列在下表1e中。
表1e 特別優選的式(Ⅰ)化合物也是根據通式(ⅩⅧ)的那些 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，n=0或1，Ra、Rb是低級烷基，或者Ra與Rb以及它們所連接的碳原子一起構成3至7元碳環，R12是雜環基、芳基或低級環烷基，Z是O、S或NR28，其中R28是H或低級烷基。
進一步優選的式ⅩⅧ化合物是根據下列通式的那些 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，n=0或1,m=1至5，R12是雜環基、芳基或低級環烷基。
特別優選的式(ⅩⅣ)化合物是如下那些，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫。
這樣的化合物例子列在下表1f1中。
表1f1 進一步優選的式ⅩⅧ化合物是根據通式ⅩⅨ的那些 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，n=0或1，Ra、Rb是低級烷基，或者Ra與Rb以及它們所連接的碳原子一起構成3至7元碳環，R12是雜環基、芳基或低級環烷基。
特別優選的式(ⅩⅨ)化合物是其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫的那些。
這樣的化合物例子列在下表1f2中。
表1f2 進一步優選的式(ⅩⅧ)化合物是根據通式ⅩⅩ的那些 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11、R13和R28是H或低級烷基，n=0或1，Ra、Rb是低級烷基，或者Ra與Rb以及它們所連接的碳原子一起構成3至7元碳環，R12是雜環基、芳基或低級環烷基。
特別優選的式(ⅩⅩ)化合物是其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫，R28是氫或甲基的那些。
這樣的化合物例子列在下表1f3中。
表1f3 特別優選的式(Ⅰ)化合物也是根據通式ⅩⅤ的那些 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，n=0或1，R21是任選被取代的烷基、環烷基、苯基、雜環基，任選被取代的環烷基烷基、苯基烷基或雜環基烷基，任選被取代的烷基羰基、環烷基羰基、苯基羰基、雜環基羰基，任選被取代的烷基磺酰、環烷基磺酰、苯基磺酰、雜環基磺酰。
特別優選的式(ⅩⅤ)化合物還有其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫的那些。
這樣的化合物例子列在下表1g中。
表1g 特別優選的式(Ⅰ)化合物也是根據通式ⅩⅥ的那些
其中R2、R3、R5、R6、R7、R9、R10和R13是如上所定義的，R22、R23、R24、R25和R26是H或低級烷基，R27是烷基、芳基或雜環基、烷氧基、芳氧基、雜環氧基。
特別優選的式(ⅩⅥ)化合物是其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R13、R22、R23、R24、R25和R26是氫的那些。
這樣的化合物例子列在下表1h中。
表1h 特別優選的式(Ⅰ)化合物也是根據通式ⅩⅤⅡ的那些 其中R2、R3、R5、R6、R7和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，R12是雜環基、芳基或低級環烷基。
特別優選的式(ⅩⅦ)化合物是如下那些，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫，R12是任選被取代的苯基或 其中R21同上。
這樣的化合物例子列在下表1i中。
表1i 式(Ⅳ)和(Ⅷ)化合物是前述過程中的中間體，它們是新穎的，也是由本發明所提供的。反應方案A 根據反應方案A，第一步包括式(Ⅱ)化合物與諸如氯乙醛酸甲酯(methyl chlorooxoacetate)等活化草酰基衍生物的偶聯，得到式(Ⅲ)化合物。反應可以以常規方式進行適當的是在反應條件下為惰性的有機溶劑中，在有機堿的存在下，在約0℃至約室溫下。適合的溶劑包括鹵代烴，例如二氯甲烷。可以采用的有機堿例如可以提到吡啶和三(低級烷基)胺，例如三乙胺。
隨后，式(Ⅲ)化合物的水解得到式(Ⅳ)的酸化合物，該反應可以這樣進行，在適合的溶劑系統中，例如含水甲醇，用堿金屬氫氧化物溶液處理，例如氫氧化鈉。
或者，式(Ⅱ)化合物可以與氯乙醛酸叔丁酯偶聯，然后用酸處理，除去叔丁基，得到式(Ⅳ)化合物。
然后在鹽酸1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺的存在下，利用標準的肽偶聯劑，例如羥基苯并三唑，將式(Ⅳ)化合物與式(Ⅴ)的胺化合物偶聯，得到式(Ⅰ)的草酰胺化合物。
該偶聯步驟后，所得化合物的R基團可以進一步按照本領域已知的技術加以改性，例如官能團可以被改變和/或與其它基團連接。反應方案B 根據反應方案B，第一步包括式(Ⅵ)化合物與諸如氯乙醛酸甲酯等活化草酰基衍生物的偶聯，得到式(Ⅶ)化合物。反應方式與上述從式(Ⅱ)化合物生成式(Ⅲ)化合物相同。
隨后，式(Ⅶ)化合物的水解得到式(Ⅷ)的酸化合物，該水解同上述式(Ⅲ)化合物的水解。
或者，式(Ⅵ)化合物可以與氯乙醛酸叔丁酯偶聯，然后用酸處理，除去叔丁基，得到式(Ⅷ)化合物。
在上述式(Ⅳ)化合物與式(Ⅴ)化合物偶聯的條件下，將式(Ⅷ)化合物與式(Ⅴ)的胺化合物偶聯，得到式(Ⅸ)的草酰胺化合物。
該偶聯步驟后，所得化合物的R基團可以進一步按照本領域已知的技術加以改性，例如官能團可以被改變和/或與其它基團連接。反應方案C 或者，式(Ⅰ)化合物是這樣制備的，在鹽酸1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺的存在下，利用標準的肽偶聯劑，例如羥基苯并三唑，將式(Ⅱ)化合物與式(Ⅹ)的草酰胺酸(oxalamic acid)化合物偶聯，得到式(Ⅰ)的草酰胺化合物。
該偶聯步驟后，所得化合物的R基團可以進一步按照本領域已知的技術加以改性，例如官能團可以被改變和/或與其它基團連接。
如上所述，式(Ⅰ)化合物及其鹽是體外與體內的IMPDH酶抑制劑，可用于IMPDH介導的病癥或疾病的控制或預防。
利用Carr報導的改進方法能夠測定IMPDH活性(S.Carr等《生物化學雜志》268,p.27286(1993))，其公開內容引用在此作為參考文獻。用分光光度法測量IMPDH活性，即在340nm下監測由于NAD還原生成NADH(ε340是6220M-1 cm-1)所引起的吸光度增加。IMPDH反應混合物含有0.1M Tris pH 8.0、0.1M KCl、1mM DTT、3mM EDTA、100mM IMP和100mM NAD。加入IMPDH(人Ⅱ型)引發反應，以IMPDH四聚物計，測定中的最終濃度在1nM與5nM之間。在37℃下，監測吸光度在340nm下的線性增加45分鐘測量最初速率。在96孔平皿中利用Spectromax 190(Molecular Devices)分光光度計進行讀數，最終的反應體積為200μl。
關于抑制劑測定分析，將化合物溶于DMSO，最終濃度為10mM，取5μl加入到最初的反應混合物中，得到DMSO的最終濃度為2.5％。加入IMPDH引發酶反應，如上測量最初速率。IC50測定是這樣進行的，在10種濃度抑制劑的存在下測量最初速率，利用由Softmax pro軟件(Molecular Devices)擬合的4參數曲線擬合數據。
在上述測定中測試的本發明優選化合物具有高達500nM、即0.5μM的IC50值。
優選的式(Ⅰ)化合物的IC50值的具體例子列在下表2中
表2 酸性式(Ⅰ)化合物能夠與無機堿和有機堿生成藥學上可接受的鹽，無機堿例如堿金屬氫氧化物，如氫氧化鈉和氫氧化鉀；堿土金屬氫氧化物，如氫氧化鈣、氫氧化鋇和氫氧化鎂等；有機堿例如N-乙基哌啶、二芐胺等。堿性式(Ⅰ)化合物能夠與無機酸和有機酸生成藥學上可接受的鹽，無機酸例如氫鹵酸(例如鹽酸和氫溴酸)、硫酸、硝酸和磷酸等；有機酸例如乙酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸、水楊酸、檸檬酸、甲磺酸和對甲苯磺酸等。鹽的生成和分離能夠按照本領域已知的方法進行。
由本發明所提供的草酰胺衍生物(即式(Ⅰ)化合物及其藥學上可接受的鹽)可用作藥物，例如以藥物制劑的形式。藥物制劑能夠通過腸內方式給藥，例如口服，例如以片劑、包衣片、錠劑、硬明膠膠囊和軟明膠膠囊、溶液、乳液或懸浮液的形式，或者經鼻給藥，例如以鼻用噴霧劑的形式。它們也能夠通過直腸方式給藥，例如以栓劑的形式，或者通過腸胃外方式給藥(例如肌內、靜脈內或皮下)，例如以注射溶液的形式。
關于藥物制劑的制備，可將草酰胺衍生物與治療學上的惰性、無機或有機載體進行配制。可以使用乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽，例如作為片劑、包衣片、錠劑和硬明膠膠囊的載體。適合于軟明膠膠囊的載體例如為植物油、蠟、脂肪、半固體和液體多元醇等。不過因活性成分的性質而異，軟明膠膠囊一般不需要載體。適合于溶液和糖漿劑制備的載體例如為水、多元醇、蔗糖、轉化糖、葡萄糖等。適合于注射溶液制備的載體例如為水、鹽水、醇、多元醇、甘油、植物油等。適合于栓劑制備的載體例如為天然或硬化油、蠟、脂肪、半固體或液體多元醇等。本發明的藥物制劑也可以是緩釋制劑或其它適當的制劑。
藥物制劑也可以含有防腐劑、增溶劑、穩定劑、濕潤劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、矯味劑、用于調節滲透壓的鹽、緩沖劑、掩蔽劑或抗氧化劑。它們也可以含有其它治療學上的活性物質，例如免疫抑制劑、化療劑、抗病毒劑、抗生素、抗寄生蟲劑、抗真菌劑、抗炎劑和/或抗血管過度增生劑。優選可以與本發明化合物一起使用的試劑是干擾素或其衍生物，例如與聚乙二醇的共軛物。
含有式(Ⅰ)化合物或其鹽和治療學上可接受的載體的藥物以及該藥物的制備方法也是本發明的目的。該方法包括將式(Ⅰ)化合物或其藥學上可接受的鹽與治療學上的惰性載體原料一起制成蓋侖給藥劑型，如果需要的話，還有一種或多種其它治療學上的活性物質。
本發明的進一步目的包括由本發明所提供的草酰胺衍生物在下列疾病治療中的用途免疫介導的病癥或疾病、病毒性疾病、細菌性疾病、寄生蟲性疾病、炎癥、炎性疾病、血管過度增生性疾病、腫瘤或癌癥。劑量可以在寬泛的范圍內變化，當然在各種特定情況中將根據個體需要進行調整。在單一療法和/或聯合療法中，優選的劑量水平為約0.01至約100mg/kg體重/天(優選為0.5-75mg/kg/天)，每天給藥約1-5次。活性成分可以與載體原料結合。典型的制劑將含有約5％-95％活性化合物(w/w)(優選為約20％-80％活性化合物)。每日劑量可以分單次或多次給藥。
本發明的化合物和組合物可以用在單一療法和/或聯合療法中，也就是說，治療可以結合一種或多種其它治療學上的活性物質給藥而進行。當治療是聯合療法時，這種給藥可以與本發明草酰胺衍生物同時或先后進行。本文所用的同時給藥包括所結合或聯合的試劑一起給藥，或者彼此先后給藥。
不言而喻的是，本文所稱的治療延及對現有病癥的預防及治療。本文所用的疾病或病癥的治療也包括預防、抑制、退化、逆轉、減輕或緩解疾病或病癥或它們的臨床癥狀。本文所用的術語“受治療者”指動物，包括人和其它哺乳動物。
下列實施例闡述本發明。
關于原料，它們是已知的化合物，有些可以從供應商處購買。其它已知的原料及其類似物可以按照本領域熟知的方法制備。可從供應商處得到的化合物例子和對其它化合物及其類似物的合成的引證如下式(Ⅱ)化合物和式(Ⅵ)化合物是從供應商處得到的(例如4-(5-噁唑基)苯胺，Maybridge目錄號DFP 00120)，或者按照專利申請公開說明書WO 974002所公開的方法制備，或者按照Palacz等提供的方法制備，《FEBS快報》1984,176(2),365-370。
式(Ⅴ)化合物是從供應商處得到的(例如叔丁胺，Aldrich目錄號B8,920-5；枯基胺，TCI-US目錄號C1293)，或者按照Kazuo Achiwa等提供的方法制備，《化學與藥學公報》1998,46(4),697-670。
式(Ⅹ)化合物按照Minisci等提供的方法制備，《有機化學雜志》1995,60(17),5430-5433。
商業上可得到的試劑例子包括實施例7、10和11所用的那些(分別是2-甲氧基-4-硝基苯甲酸，Aldrich目錄號42,291-6；叔丁基乙酸，Aldrich目錄號B8,840-3；對甲苯甲醛，Aldrich目錄號T3,560-2)。
在Bruker DRX 400MHz分光計上記錄NMR光譜，探針溫度設為300K。
“(M+；EI)”表示質譜是在電子碰撞(EI)條件下記錄的，儀器是THERMOQUEST MAT95 S，光源溫度為200℃。其它質譜是在電子噴射電離光譜(ESI)條件下記錄的，儀器為下列之一a)THERMOQUEST SSQ 7000(溶劑含0.085％TFA的90％乙腈/水；流速100微升/分鐘；毛細管250℃；噴射電壓5KV；鞘氣體80psi)，或b)LC-MS系統(液相色譜-質譜聯用)THERMOQUEST TSQ7000 ELECTROSPRAY或MICROMASS PLATFORMELECTROSPRAY(溶劑含0.1％TFA的水或含0.085％TFA的90％乙腈/水或含0.085％TFA的乙腈)。
除非另有指定，在MS(ES)柱上記錄的質譜數值指(M+H)+值，表示為(M+；EI)者除外。實施例1N-叔丁基-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺
將26mg(0.1mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸、15mg(0.2mmol)叔丁胺、28mg(0.15mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺與15mg(0.11mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑的1ml二甲基甲酰胺溶液在室溫下攪拌4小時，然后用乙酸乙酯稀釋，用2M鹽酸、飽和碳酸氫鈉和水洗滌。所得溶液經硫酸鎂干燥，蒸發至干。殘余物用二乙醚/汽油(1∶1)研制，過濾收集，得到11mg N-叔丁基-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e318.0[M+H]+原料是如下制備的ⅰ)將5.7g(30mmol)3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯胺和3.33g(33mmol)三乙胺溶于50ml二氯甲烷，溶液冷卻至0℃。滴加3.86g(31.5mmol)甲基草酰氯的10ml二氯甲烷溶液，所得混合物攪拌1小時，然后用2M鹽酸洗滌。過濾收集所沉淀的固體，用二氯甲烷和水洗滌，得到6.2g N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸甲酯，為黃色固體。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ:3.88(3H,s),3.94(3H,s),7.48(1H,s),7.58(1H,dd),7.65(1H,d),7.68(1H,d)),8.39(1H,s),10.92(1H,s).
ⅱ)將6.2g(22.46mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸甲酯和1.2g(30mmol)氫氧化鈉在240ml甲醇/水(1∶1)中回流2小時，然后冷卻，過濾，用2M鹽酸酸化。過濾收集所沉淀的固體，用水、丙酮和二乙醚洗滌，得到5.1g N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸，為淡黃色固體。MS:m/e 262.9[M+H]+或者，N-叔丁基-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺可以如下制備將95mg(0.5mmol)3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯胺、73mg(0.5mmol)N-叔丁基草酰胺酸、134mg(0.7mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺與75mg(0.55mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑的4ml二氯甲烷溶液在室溫下攪拌18小時。所得混合物用2M鹽酸和飽和碳酸氫鈉洗滌，經硫酸鎂干燥，蒸發至干。殘余物用汽油研制，過濾收集，得到N-叔丁基-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為淡黃色固體。MS:318[M+H]+實施例2[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯 將2.04g(7.79mmol)如上實施例1所述制備的N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸、1.9g(8.56mmol)(3-氨基芐基)氨基甲酸叔丁酯、1.8g(9.4mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺與1.3g(9.6mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑在30ml二甲基甲酰胺中的混合物在室溫下攪拌20小時。過濾收集所得沉淀，用二氯甲烷洗滌，得到1.8g[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯，為白色固體。MS:m/e 466 M+實施例3N-[3-(氨基甲基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽
在室溫下，將15mg(0.032mmol)如上實施例2所述制備的[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯溶于1ml二氯甲烷與1ml三氟乙酸，經過5分鐘。溶液蒸發至干，殘余物用二乙醚研制，過濾收集，得到11mg N-[3-(氨基甲基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽，為白色固體。MS:m/e408[M+H+MeCN]+實施例4N-[3-(苯甲酰氨基甲基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺 將29mg(0.21mmol)苯甲酰氯加入到100mg(0.21mmol)如上實施例3所述制備的N-[3-(氨基甲基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽與46mg(0.46mmol)三乙胺的2ml二甲基甲酰胺與5ml二氯甲烷溶液中，在室溫下攪拌18小時。溶液用2M鹽酸和飽和碳酸氫鈉洗滌，然后經硫酸鎂干燥，蒸發至干。殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(2∶1)洗脫。用二乙醚研制后，得到45mg N-[3-(苯甲酰氨基甲基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 471.0[M+H]+實施例5N-[3-[(苯磺酰氨基)甲基]苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺 按類似于實施例4所述方式，但是用苯磺酰氯代替苯甲酰氯，得到N-[3-[(苯磺酰氨基)甲基]苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 507[M+H]+實施例6[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸甲酯 按類似于實施例4所述方式，但是用氯甲酸甲酯代替苯甲酰氯，得到[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸甲酯，為白色固體。MS:m/e 425[M+H]+實施例7N-叔丁基-N’-[3-甲氧基-4-(4-噁唑基)苯基]草酰胺 將371mg(1mmol)N-[4-(溴乙酰)-3-甲氧基苯基]-N’-叔丁基草酰胺與315mg(5mmol)甲酸銨的混合物在10ml甲酸中回流4小時，然后冷卻，蒸發至干。將殘余物溶于乙酸乙酯，用2M氫氧化鈉洗滌，經硫酸鎂干燥。溶液蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(7∶18)洗脫。用二乙醚/汽油(1∶1)研制后，得到65mg N-叔丁基-N’-[3-甲氧基-4-(4-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e318[M+H]+原料是如下制備的ⅰ)將3.94g(20mmol)2-甲氧基-4-硝基苯甲酸、3.9g(40mmol)鹽酸N,O-二甲基羥胺、5.73g(29.92mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、3.37g(22mmol)1-羥基苯并三唑水合物與5.06g(44mmol)N-乙基嗎啉在50ml二氯甲烷中的混合物在室溫下攪拌3小時，然后用2M鹽酸和飽和碳酸氫鈉洗滌。所得溶液經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物用二乙醚研制，過濾收集，得到3.95g 2-甲氧基-4-硝基苯基異羥肟酸N,O-二甲酯，為白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.37(3H,s),3.48(3H,s),3.97(3H,s),7.45(1H,d),7.80(1H,d),7.91(1H,dd).
ⅱ)將1.2g(5mmol)2-甲氧基-4-硝基苯基異羥肟酸N,O-二甲酯與4.75g(25mmol)氯化錫(Ⅱ)在40ml乙醇中的混合物在80℃下加熱30分鐘，然后冷卻，蒸發至干。將殘余物溶于二氯甲烷，用2M氫氧化鈉洗滌，有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，得到960mg 4-氨基-2-甲氧基苯基異羥肟酸N,O-二甲酯，為灰白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:3.25(3H,s),3.62(3H,s),3.79(3H,s),6.22(1H,d),6.28(1H,dd),7.09(1H,d).
ⅲ)將700mg(3.33mmol)4-氨基-2-甲氧基苯基異羥肟酸N,O-二甲酯、483mg(3.33mmol)N-叔丁基草酰胺酸、600mg(3.92mmol)1-羥基苯并三唑水合物與960mg(5.01mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺在15ml二氯甲烷中的混合物在室溫下攪拌3小時，然后用2M鹽酸和飽和碳酸氫鈉洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(3∶1)洗脫，得到960mg 4-[[(叔丁氨基)草酰]氨基]-2-甲氧基苯基異羥肟酸N,O-二甲酯，為白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:1.46(9H,s),3.25-3.4(3H,br.s.),3.45-3.65(3H,br.s.),3.89(3H,s),7.08(1H,dd),7.29(1H,d),7.44(1H,s),7.53(1H,d),9.40(1H,s).
ⅳ)將3.1ml(4.34mmol)含1.4M甲基溴化鎂的四氫呋喃歷經1小時分批加入到337mg(1mmol)4-[[(叔丁氨基)草酰]氨基]-2-甲氧基苯基并羥肟酸N,O-二甲酯的10ml無水四氫呋喃溶液中。所得溶液用二乙醚稀釋，用2M鹽酸洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(3∶7)洗脫，得到255mgN-(4-乙酰-3-甲氧基苯基)-N’-叔丁基草酰胺，為白色固體。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:1.45(9H,s),2.61(3H,s),3.96(3H,s),7.03(1H,dd),7.43(1H,s),7.64(1H,d),7.82(1H,d),9.47(1H,s).
ⅴ)將320mg(0.85mmol)苯基三甲基三溴化銨歷經10分鐘分批加入到攪拌著的247mg(0.85mmol)N-(4-乙酰-3-甲氧基苯基)-N’-叔丁基草酰胺的5ml無水四氫呋喃溶液中。15分鐘后，再加入100mg(0.26mmol)苯基三甲基三溴化銨。所得懸浮液用二乙醚稀釋，用水洗滌，有機相經硫酸鎂干燥。蒸發得到膠狀物，經過硅膠色譜分離，先用含0.5％甲醇的二氯甲烷、然后用含1％甲醇的二氯甲烷洗脫。將產物溶于二乙醚/汽油(2∶1)，過濾收集所得晶體，得到135mg N-[4-(溴乙酰)-3-甲氧基苯基]-N’-叔丁基草酰胺，為白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:1.44(9H,s),3.99(3H,s),4.61(2H,s),7.06(1H,dd),7.42(1H,s),7.68(1H,d),7.93(1H,d),9.51(1H,s).實施例8-11 實施例8[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]氨基甲酸叔丁酯將77mg(0.87mmol)(2-氨基-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯、207mg(1.05mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、166mg(1.08mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑和200mg(0.76mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸溶于5ml二氯甲烷與5ml二甲基甲酰胺，在室溫下攪拌16小時。混合物然后用50ml二氯甲烷稀釋，用10％檸檬酸溶液和鹽水洗滌。有機層然后用無水硫酸鎂干燥，過濾，蒸發至干。殘余物經過硅膠色譜分離，用含30％乙酸乙酯的己烷洗脫，得到165mg[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]氨基甲酸叔丁酯，為黃色固體。1H NMR(400MHz,d6 DMSO)δ:1.35(s,6H),1.45(s,9H),3.25(d,2H),3.95(s,3H),7.25(t,1H),7.55(s,1H),7.70(m,2H),7.80(s,1H),8.25(s,1H),8.50(s,1H),10.8(s,1H).
實施例9N-(2-氨基-1,1-二甲基乙基)-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽(1∶1)將26mg(0.29mmol)[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]氨基甲酸叔丁酯溶于10ml 1,1,1-三氟乙酸與二氯甲烷的1∶1混合物并攪拌。1小時后，將溶劑混合物用甲苯共蒸發三次，用二氯甲烷共蒸發兩次。所得膠狀物然后用40-60石油醚研制，得到124mg N-(2-氨基-1,1-二甲基乙基)-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽(1∶1)，為黃色固體。1H NMR(400MHz,d6 DMSO)δ:1.40(s,6H),3.20(m,2H),3.90(s,3H),7.50(s,1H),7.60-7.74(m,2H),7.80(s,1H),7.90(s(br),3H),8.30(s,1H),8.40(s,1H),10.80(s,1H).
使前述三氟乙酸鹽在飽和碳酸氫鈉溶液與乙酸乙酯之間分配。有機層然后用硫酸鎂干燥，過濾，蒸發，得到游離堿，用在實施例10中。
實施例10N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[2-(3,3-二甲基丁酰氨基)-1,1-二甲基乙基]草酰胺將30mg(0.09mmol)N-(2-氨基-1,1-二甲基-乙基)-N’-(3-甲氧基-4-噁唑-5-基-苯基)-草酰胺、52mg(0.45mmol)叔丁基乙酸、86mg(0.45mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和69mg HOAt溶于2ml二甲基甲酰胺并攪拌。攪拌16小時后，混合物用10ml二氯甲烷稀釋，用10％檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌。有機溶液然后用固體硫酸鎂干燥，過濾，蒸發，得到N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[2-(3,3-二甲基丁酰氨基)-1,1-二甲基乙基]草酰胺，為淡黃色固體。MS:m/e 431.3[M+H]+實施例11N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[2-(4-甲基芐氨基)-1,1-二甲基乙基]草酰胺將30mg(0.09mmol)N-(2-氨基-1,1-二甲基-乙基)-N’-(3-甲氧基-4-噁唑-5-基-苯基)-草酰胺、11.3mg(0.095mmol)4-甲基苯甲醛和30mg(0.14mmol)三乙酰氧基硼氫化鈉溶于2ml含5％乙酸的二氯甲烷混合物，經過16小時。反應混合物然后用8ml二氯甲烷稀釋，用水、飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌。所得有機溶液然后用硫酸鎂干燥，過濾，蒸發，得到N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[2-(4-甲基芐氨基)-1,1-二甲基乙基]草酰胺，為黃色固體。MS:m/e 437.3[M+H]+實施例122-[[[3-甲氧基4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙酸 將161mg(0.446mmol)2-[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基草酰]氨基]-2-甲基丙酸甲酯與56mg(1.33mmol)氫氧化鋰水合物在3ml甲醇與0.5ml水中的混合物在50℃下加熱2小時，然后用水稀釋，用二乙醚洗滌。含水相用2M鹽酸酸化至pH2，用乙酸乙酯萃取兩次。合并后的有機萃取液經硫酸鎂干燥，蒸發至干。殘余物經過硅膠色譜分離，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(120∶15∶3∶2)洗脫。用乙醚研制后，得到70mg 2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙酸，為白色固體。MS:m/e 247.9[M+H]+實施例13N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1-甲基-1-(苯基氨基甲酰基)乙基]草酰胺
將30mg(0.086mmol)2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙酸、16mg(0.172mmol)苯胺、18mg(0.132mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑與25mg(0.131mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺的2ml二甲基甲酰胺溶液在室溫下攪拌18小時，然后用乙酸乙酯稀釋，用2M鹽酸和飽和碳酸氫鈉洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發后，殘余物用二乙醚研制，過濾收集，得到20mg N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1-甲基-1-(苯基氨基甲酰基)乙基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 423.0[M+H]+實施例14N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1-甲基-1-(甲基氨基甲酰基)乙基]草酰胺 將30mg(0.086mmol)2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙酸、12mg(0.178mmol)鹽酸甲胺、18mg(0.132mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑、25mg(0.131mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺與22mg(0.218mmol)三乙胺在2ml二甲基甲酰胺中的混合物在室溫下攪拌18小時，然后用乙酸乙酯稀釋，用2M鹽酸和飽和碳酸氫鈉洗滌。有機溶液經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用二氯甲烷/甲醇(24∶1)洗脫。用乙醚研制后，得到17mg N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1-甲基-1-(甲基氨基甲酰基)乙基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 361.0[M+H]+
實施例152-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]苯基]乙酸 將740mg(1.81mmol)2-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]苯基]乙酸甲酯與152mg(3.62mmol)氫氧化鋰水合物的10ml甲醇、10ml 1,4-二噁烷與5ml水溶液在室溫下攪拌18小時。蒸發除去溶劑，將殘余物溶于水。水溶液用二乙醚洗滌，用檸檬酸溶液酸化。過濾收集所沉淀的固體，用水、乙醇和二乙醚洗滌，得到414mg 2-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]苯基]乙酸，為白色固體。MS:m/e 396.0[M+H]+實施例16N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[3-[(苯基氨基甲酰基)甲基]苯基]草酰胺 將30mg(0.076mmol)2-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]苯基]乙酸與11mg(0.096mmol)N-乙基嗎啉的1ml二甲基甲酰胺溶液冷卻至0℃，加入12mg(0.088mmol)氯甲酸異丁酯的1ml二氯甲烷溶液。所得混合物在0℃下攪拌30分鐘，然后加入7mg(0.075mmol)苯胺的1ml二氯甲烷溶液，繼續在0℃下攪拌一小時。在室溫下18小時后，將混合物蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脫。得到3mg N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[3-[(苯基氨基甲酰基)甲基]苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 471.0[M+H]+實施例17N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[3-[(甲基氨基甲酰基)甲基]苯基]草酰胺 將30mg(0.076mmol)2-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]苯基]乙酸、22mg(0.115mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、14mg(0.092mmol)1-羥基苯并三唑水合物、26mg(0.385mmol)鹽酸甲胺與52mg(0.452mmol)N-乙基嗎啉在1ml二甲基甲酰胺中的混合物在室溫下攪拌18小時。蒸發除去溶劑，殘余物經過硅膠色譜分離，用二氯甲烷/甲醇(1∶19)洗脫。得到15mg N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[3-[(甲基氨基甲酰基)甲基]苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 409[M+H]+實施例18N-(3-氨基苯基)-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽 在室溫下，將20mg(0.043mmol)[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]苯基]氨基甲酸叔丁酯溶于1ml二氯甲烷與1ml三氟乙酸的混合物，經過10分鐘。蒸發除去溶劑，殘余物用二乙醚研制。過濾收集所得固體，得到18mg N-(3-氨基苯基)-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽，為白色固體。MS:m/e 394.0[M+H+MeCN]+實施例19N-[3-(苯甲酰氨基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺 將30mg(0.064mmol)N-(3-氨基苯基)-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽、9mg(0.074mmol)苯甲酸、15mg(0.078mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、15mg(0.096mmol)1-羥基苯并三唑水合物與22mg(0.19mmol)N-乙基嗎啉在0.5ml二甲基甲酰胺中的混合物在室溫下攪拌18小時，然后用乙酸乙酯稀釋，用10％檸檬酸溶液、飽和碳酸氫鈉和水洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用二氯甲烷/甲醇(19∶1)洗脫。用二乙醚/汽油(1∶1)研制后，得到12mg N-[3-(苯甲酰氨基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 457.0[M+H]+實施例20N-[3-(甲磺酰氨基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺 將12mg(0.011mmol)甲磺酰氯加入到50mg(0.011mmol)N-(3-氨基苯基)-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽與32mg(0.317mmol)三乙胺的0.5ml二甲基甲酰胺溶液中。所得溶液在室溫下放置18小時，然后用乙酸乙酯稀釋，用10％檸檬酸溶液、飽和碳酸氫鈉和水洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(1∶1)洗脫。得到5mg N-[3-(甲磺酰氨基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 431.0[M+H]+實施例21N-[2-(4-氨基苯基)-1，1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺 將44mg(0.1mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(4-硝基苯基)乙基]草酰胺與90mg(0.5mmol)氯化錫(Ⅱ)在2ml乙醇與1ml 1,4-二噁烷中的混合物攪拌，并在85℃下加熱5小時。所得溶液冷卻，用乙酸乙酯稀釋，用2M氫氧化鈉洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(2∶1)洗脫。用汽油研制后，得到31mg N-[2-(4-氨基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e409[M+H]+實施例22N-[2-(4-苯甲酰氨基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺 將30mg(0.074mmol)N-[2-(4-氨基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺、10mg(0.082mmol)苯甲酸、14mg(0.092mmol)1-羥基苯并三唑水合物、21mg(0.11mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺與18mg(0.16mmol)N-乙基嗎啉在2ml二氯甲烷中的混合物在室溫下攪拌18小時，然后用二氯甲烷稀釋，用2M鹽酸和飽和碳酸氫鈉洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(2∶1)洗脫。得到9mgN-[2-(4-苯甲酰氨基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 513[M+H]+實施例23N-[2-(4-乙酰氨基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺
將30mg(0.074mmol)N-[2-(4-氨基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺、8mg(0.078mmol)乙酸酐與17mg(0.15mmol)N-乙基嗎啉在1ml二氯甲烷中的混合物在室溫下攪拌2小時。蒸發除去溶劑，殘余物用二乙醚研制，過濾收集，得到14mgN-[2-(4-乙酰氨基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 451[M+H]+實施例24N2-[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]-N1,3-二甲基-L-纈氨酰胺(valinamide) 將含290mg(0.75mmol)N-[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]-3-甲基-L-纈氨酸甲酯的3ml甲醇和1ml 1M含水氫氧化鈉小心地加熱，所得溶液在室溫下放置18小時。混合物用水稀釋，用二乙醚洗滌，含水相用2M鹽酸酸化。溶液用乙酸乙酯萃取，有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/乙酸(99∶1)洗脫。用二乙醚研制后，得到110mg N2-[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]-N1,3-二甲基-L-纈氨酰胺，為白色固體。MS:m/e 376.0[M+H]+實施例25[3-[[[4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯 按類似于實施例1所述方式，但是用4-(5-噁唑基)苯胺代替3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯胺，用N-[3-[(叔丁氧基甲酰氨基)甲基]苯基]草氨酸代替N-叔丁基草酰胺酸，得到[3-[[[4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯，為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:1.4(9H,s),4.1(2H,d),7.02(1H,d),7.32(1H,t),7.40(1H,t),7.63(1H,s),7.69(1H,d),7.70-7.79(3H,m,7.97(2H,d),8.43(1H,s),10.82(1H,s),10.99(1H,s).
原料是如下制備的ⅰ)將586mg(4.78mmol)甲基草酰氯加入到1g(4.5mmol)(3-氨基芐基)氨基甲酸叔丁酯與508mg(5.03mmol)三乙胺的10ml二氯甲烷溶液中。所得溶液在室溫下攪拌30分鐘，然后用5％檸檬酸溶液和飽和碳酸氫鈉洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發除去溶劑，得到1.5gN-[3-[(叔丁氧基甲酰氨基)甲基]苯基]草氨酸甲酯，為粘性膠狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:1.43(9H,s),3.96(3H,s),4.31(2H,d)4.9-5.0(br.s,1H),7.11(1H,d),7.33(1H,t),7.51(1H,s),7.52(1H,d),8.86(br.s.1H).
ⅱ)將1.232g(4mmol)N-[3-[(叔丁氧基甲酰氨基)甲基]苯基]草氨酸甲酯與0.24g(6mmol)氫氧化鈉在15ml甲醇/水(2∶1)中的混合物在室溫下攪拌2小時。蒸發除去溶劑，將殘余物溶于水和二乙醚。含水層用檸檬酸酸化，用乙酸乙酯洗滌兩次。合并后的有機溶液經硫酸鎂干燥，蒸發除去溶劑，得到670mg N-[3-[(叔丁氧基甲酰氨基)甲基]苯基]草氨酸，為白色固體。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ:1.48(9H,s),4.17(2H,d),7.09(1H,d),7.36(1H,t),7.49(1H,t),7.64(1H,d),7.74(1H,s),10.75(1H,s).
實施例26[2-[[[4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯 按類似于實施例25所述方式，但是用N-[2-[(叔丁氧基甲酰氨基)甲基]苯基]草氨酸代替N-[3-[(叔丁氧基甲酰氨基)甲基]苯基]草氨酸，得到[2-[[[4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯，為白色固體。MS:m/e 437.0[M+H]+實施例27[4-[[[4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯 按類似于實施例25所述方式，但是用N-[4-[(叔丁氧基甲酰氨基)甲基]苯基]草氨酸代替N-[3-[(叔丁氧基甲酰氨基)甲基]苯基]草氨酸，得到[4-[[[4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯，為白色固體。MS:m/e 436.6[M]+實施例28N-叔丁基-N’-[4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺 按類似于實施例1所述方式，但是用4-(5-噁唑基)苯胺代替3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯胺，得到N-叔丁基-N’-[4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為淡黃色固體。MS:m/e 329.0[M+H+MeCN]+實施例29N-[3-(氨基甲基)苯基]-N’-[4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽 按類似于實施例3所述方式，但是用[3-[[[4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯代替[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]芐基]氨基甲酸叔丁酯，得到N-[3-(氨基甲基)苯基]-N’-[4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽，為白色固體。MS:m/e 336[M]+實施例30-193按類似于實施例1所述方式，從N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸(如實施例1第(ⅰ)和(ⅱ)部分所述制備)和適當的胺開始，制備如表3所示化合物
表3 實施例194-214按類似于實施例4所述方式，從N-[3-(氨基甲基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺三氟乙酸鹽(如實施例3所述制備)和適當的羧酸衍生物開始，制備如表5所示化合物表5 實施例215-301
按類似于實施例10所述方式，從N-(2-氨基-1,1-二甲基乙基)-N’-(3-甲氧基-4-噁唑-5-基苯基)草酰胺(如實施例9所述制備)和適當的羧酸開始，制備如表4所示化合物表4 實施例302-315；438-458和653-663用于制備表1c化合物的典型方法如下所述實施例440N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(1-氧橋-4-吡啶基)乙基]草酰胺將30mg(0.1mmol)60％3-氯過苯甲酸加入到攪拌著的20mg(0.051mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(4-吡啶基)乙基]草酰胺的1ml二氯甲烷溶液中。混合物攪拌1小時，然后用乙酸乙酯稀釋，用亞硫酸氫鈉溶液、碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌。有機溶液經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物用二乙醚研制，得到13mgN-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(1-氧橋-4-吡啶基)乙基]草酰胺，為灰白色固體。MS:m/e 411[M+H]+原料是如下制備的
ⅰ)在冰/鹽浴冷卻下，將17.4g(0.115mol)α,α-二甲基-4-吡啶乙醇的115ml乙酸溶液滴加到115ml乙酸、58ml濃硫酸與6.8ml(0.126mmol)乙腈的混合物中。所得混合物在室溫下攪拌2小時，在冰冷卻下加入6M氫氧化鈉溶液使pH升至10。漿液過濾，用乙酸乙酯洗滌，含水濾液用乙酸乙酯萃取兩次。合并后的有機萃取液經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/甲醇(1∶19)、(1∶9)和(3∶17)梯度洗脫。得到1.87g N-[1,1-二甲基-2-(4-吡啶基)乙基]乙酰胺，為橙色的油。1H NMR(400MHzCDCl3)δ:1.29(6H,s),1.91(3H,s),3.11(2H,s),5.10(1H,br.s.),7.07(2H,d),8.50(2H,d).
ⅱ)將1.8g(9.3mmol)N-[1,1-二甲基-2-(4-吡啶基)乙基]乙酰胺、2.66g(9.3mmol)異丙醇鈦(Ⅳ)與2.56g(14mmol)二苯基硅烷的10ml四氫呋喃溶液在室溫下攪拌20小時。所得混合物經過硅膠色譜分離，用二氯甲烷/甲醇/乙酸/水(60∶18∶2∶3)洗脫。將產物溶于20ml濃鹽酸與50ml甲醇，蒸發至干。殘余物用甲苯蒸發五次，得到620mg鹽酸α,α-二甲基-4-吡啶乙胺(1∶1)，為淡棕色固體。1H NMR(400MHzDMSO)δ:1.31(6H,s),3.26(2H,s),8.02(2H,d),8.4-8.6(3H,br.s),8.88(2H,d).
ⅲ)將100mg(0.45mmol)鹽酸α,α-二甲基-4-吡啶乙胺(1∶1)、120mg(0.45mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸、105mg(0.68mmol)1-羥基苯并三唑水合物、105mg(0.54mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺與127mg(1.1mmol)N-乙基嗎啉在4ml二氯甲烷中的混合物在室溫下攪拌20小時，然后用乙酸乙酯稀釋，用水和鹽水洗滌。有機溶液經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/甲醇(19∶1)洗脫。用二乙醚研制后，得到32mg N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(4-吡啶基)乙基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 395[M+H]+實施例4552-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]-5-苯并呋喃羧酸將68mg(0.12mmol)2-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]-5-苯并呋喃羧酸芐基酯的10ml四氫呋喃溶液用20mg 10％碳上的鈀氫化4小時。所得懸浮液過濾，蒸發至干，殘余物用二乙醚研制，得到41mg 2-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]-5-苯并呋喃羧酸，為白色固體。MS:m/e 477.9[M+H]+原料是如下制備的ⅰ)在氮氣氛下，將1.976g(22.46mmol)異丁酸的8ml無水四氫呋喃溶液加入到攪拌著的1.078g(26.95mmol)60％氫化鈉與2.268g(22.46mmol)二異丙胺的40ml無水四氫呋喃懸浮液中，混合物加熱至回流15分鐘。冷卻至0℃后，加入14.04ml(22.46mmol)1.6M丁基鋰的己烷溶液，保持溫度在0-5℃。在0℃下5分鐘后，混合物加熱至30-35℃，經過20分鐘冷卻至0℃，加入5.3g(22.46mmol)2-(溴甲基)-5-苯并呋喃甲腈的15ml無水四氫呋喃溶液，保持溫度在0℃。懸浮液在0℃下攪拌5分鐘，然后加熱至30-35℃，經過20分鐘，冷卻至15℃，小心地加入50ml水終止反應，用50ml二乙醚稀釋。分離含水相，用濃鹽酸酸化，用二乙醚萃取。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(1∶2)洗脫。得到670mg 5-氰基-α,α-二甲基-2-苯并呋喃丙酸，為白色固體。1H NMR(400MHz CDCl3)δ:1.23(6H,s),3.01(2H,s),6.46(1H,s),7.38(1H,d),7.42(1H,d),7.75(1H,s).
ⅱ)將652mg(2.68mmol)5-氰基-α,α-二甲基-2-苯并呋喃丙酸、732mg(2.68mmol)二苯基磷酰基疊氮化物與269mg(2.66mmol)三乙胺在8ml叔丁醇中的混合物回流8小時，然后蒸發至干，將殘余物溶于乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(2∶3)洗脫，得到225mg白色固體，將其懸浮在10ml 2M氫氧化鈉溶液中，攪拌并回流20小時。所得懸浮液冷卻，蒸發至干，加入5ml乙二醇和400mg氫氧化鉀。在190℃下加熱20分鐘后，加入2ml水，再過20分鐘后另加入15ml水，繼續加熱20分鐘，殘留稠的糊狀物，將其冷卻，溶于20ml水。加入濃鹽酸，使pH為2，然后加入25ml二噁烷、3g(21.74mmol)碳酸鉀和1.5g(6.88mmol)重碳酸二叔丁酯，混合物攪拌24小時。蒸發除去溶劑，將殘余物溶于二乙醚與水。分離含水相，用2M鹽酸酸化，用二乙醚萃取。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，得到106mg 2-[2-(叔丁氧基甲酰氨基)-2-甲基丙基]-5-苯并呋喃羧酸，為無色膠狀物。
ⅲ)將105mg(0.32mmol)2-[2-(叔丁氧基甲酰氨基)-2-甲基丙基]-5-苯并呋喃羧酸、80mg(0.53mmol)芐基溴與200mg(1.45mmol)碳酸鉀在4ml二甲基甲酰胺中的混合物在室溫下攪拌1小時，然后用二乙醚和水稀釋。有機相用水洗滌兩次，經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(1∶5)洗脫。得到104mg2-[2-(叔丁氧基甲酰氨基)-2-甲基丙基]-5-苯并呋喃羧酸芐基酯，為無色膠狀物。1H NMR(400MHz CDCl3)δ:1.39(6H,s),1.50(9H,s),3.23(2H,s),4.49(1H,s),5.41(2H,s),6.52(1H,s),7.34-7.52(6H,m),8.02(1H,d),8.30(1H,s).
ⅳ)將103mg(0.24mmol)2-[2-(叔丁氧基甲酰氨基)-2-甲基丙基]-5-苯并呋喃羧酸芐基酯溶于5ml三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)，經過10分鐘，然后蒸發至干，將殘余物溶于1ml二甲基甲酰胺，加入到攪拌著的66mg(0.25mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸、115mg(1mmol)N-乙基嗎啉、45mg(0.29mmol)1-羥基苯并三唑水合物與70mg(0.37mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺的2ml二甲基甲酰胺溶液中，所得混合物在室溫下攪拌18小時。用乙酸乙酯稀釋后，有機溶液用2M鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌，經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(45∶55)洗脫。用二乙醚研制后，得到81mg 2-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]-5-苯并呋喃羧酸芐基酯，為白色固體。MS:m/e 568[M+H]+實施例4432-[3-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]苯氧基]乙酸將45mg(0.081mmol)2-[3-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]苯氧基]乙酸芐基酯的5ml乙醇/四氫呋喃(1∶1)溶液用4mg 10％碳上的鈀催化劑氫化5小時。所得懸浮液過濾，蒸發至干，用二乙醚研制，得到29mg 2-[3-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]苯氧基]乙酸，為白色固體。MS:m/e468[M+H]+原料是如下制備的ⅰ)將8mg(0.2mmol)60％氫化鈉加入到攪拌著的85mg(0.2mmol)N-[2-(3-羥基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺的1ml二甲基甲酰胺溶液中。10分鐘后，加入55mg(0.24mmol)溴乙酸芐基酯，混合物在室溫下攪拌4小時。所得溶液用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌兩次，經硫酸鎂干燥，蒸發至干。殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(2∶1)洗脫。得到51mg 2-[3-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基]苯氧基]乙酸芐基酯，為白色固體。MS:m/e 558[M+H]+按類似于實施例1所述方式，從如實施例1第(ⅰ)和(ⅱ)部分所述制備的N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸和適當的胺開始，制備如表1c所示的其它化合物。
表1c
實施例316-330按類似于實施例11所述方式，從如實施例21所述制備的N-[2-(4-氨基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺和適當的醛化合物開始，制備如表1d所示的化合物。
表1d 實施例331-395和596-597按類似于實施例22所述方式，從如實施例21所述制備的N-[2-(4-氨基苯基)-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺和適當的羧酸化合物開始，制備如表1e所示的化合物。
表1e 實施例396-406；433-437；542-595和635-650用于制備表1f1、1f2和1f3化合物的典型方法如下所述實施例398N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-3-(4-硝基苯氧基)丙基]草酰胺(ⅰ)在氮氣氛下，將0.5g(3.94mmol)2,4,4-三甲基-5,6-二氫-1,3(4H)噁嗪與0.5g(3.6mmol)4-硝基苯酚的混合物在180℃下加熱6小時。所得混合物冷卻，經硅膠色譜法純化，用乙酸乙酯洗脫。得到524mg N-[1,1-二甲基-3-(4-硝基苯氧基)丙基]乙酰胺。
(ⅱ)將693mg(2.61mmol)N-[1,1-二甲基-3-(4-硝基苯氧基)丙基]乙酰胺、815mg(2.87mmol)異丙醇鈦和719mg(3.91mmol)二苯基硅烷溶于8ml四氫呋喃，在室溫下放置18小時。將所得溶液溶于乙酸乙酯與飽和碳酸氫鈉溶液，過濾，有機相用2M鹽酸萃取兩次。合并后的酸萃取液用2M氫氧化鈉溶液堿化，用乙酸乙酯萃取，有機萃取液經硫酸鎂干燥，過濾，蒸發至干，得到266mg 1,1-二甲基-3-(4-硝基苯氧基)丙胺。然后按類似于實施例1所述程序，將1,1-二甲基-3-(4-硝基苯氧基)丙胺與N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸偶聯，得到N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-3-(4-硝基苯氧基)丙基]草酰胺，為淡黃色固體。MS:m/e 469[M+H]+實施例4334-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸將650mg(1.17mmol)4-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸芐基酯的20ml四氫呋喃溶液用65mg10％碳上的鈀催化劑氫化48小時，24小時后另加入65mg催化劑，44小時后再加入一次。所得懸浮液過濾，蒸發至干，殘余物用二乙醚研制，得到415mg 4-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸，為白色固體。MS:m/e 468[M+H]+原料是如下制備的(ⅰ)將1.14g(5mmol)4-羥基苯甲酸芐基酯與800mg(6.3mmol)2,4,4-三甲基-5，6-二氫-1,3(4H)噁嗪的混合物攪拌，并在180℃下加熱3小時。加入另外600mg(4.72mmol)噁嗪并繼續加熱21小時。所得混合物冷卻，經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(3∶1)洗脫。得到1.52g 4-(3-乙酰氨基-3-甲基丁氧基)苯甲酸芐基酯，為白色固體。1H NMR(400MHz CDCl3)δ:1.43(6H,s),1.94(3H,s),2.26(2H,t),4.14(2H,t),5.36(2H,s),5.65(1H,s),6.91(2H,d),7.35-7.52(5H,m),8.05(2H,d).
(ⅱ)將1.05(4.23mmol)4-(3-乙酰氨基-3-甲基丁氧基)苯甲酸芐基酯、1.166g(6.35mmol)二苯基硅烷和1.2g(4.23mmol)異丙醇鈦(Ⅳ)溶于4ml四氫呋喃，在室溫下攪拌6小時。所得混合物用二乙醚/2M氫氧化鈉溶液稀釋，過濾，有機相用2M鹽酸萃取兩次。合并后的含水萃取液用2M氫氧化鈉溶液堿化，用乙醚萃取，有機萃取液經硫酸鎂干燥，蒸發至干，得到1.16g 4-(3-氨基-3-甲基丁氧基)苯甲酸芐基酯，為淺色膠狀物。1H NMR(400MHz CDCl3)δ:1.22(6H,s),1.92(2H,t),4.08(2H,t),5.36(2H,s),6.90(2H,d),7.33-7.48(5H,m),8.05(2H,d).
ⅲ)將873mg(3.33mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸、500mg(3.27mmol)1-羥基苯并三唑水合物、1.2g(3.83mmol)4-(3-氨基-3-甲基丁氧基)苯甲酸芐基酯與1g(5.22mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺的10ml二甲基甲酰胺溶液在室溫下攪拌24小時。所得混合物用乙酸乙酯稀釋，用2M鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌，然后經硫酸鎂干燥，蒸發至干，經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(2∶1)洗脫。用二乙醚研制后，得到765mg 4-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸芐基酯，為白色固體。MS:m/e 558[M+H]+
實施例4342-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸按類似于實施例433所述方式，但是用2-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸芐基酯代替4-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸芐基酯，得到2-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸，為白色固體。MS:m/e 468[M+H]+原料是如下制備的ⅰ)將917mg(3.5mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸、650mg(4.66mmol)鹽酸3-氨基-3-甲基-1-丁醇(1∶1)、612mg(4mmol)1-羥基苯并三唑水合物、690mg(6mmol)N-乙基嗎啉與960mg(5mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺的10ml二甲基甲酰胺溶液在室溫下攪拌20小時。所得混合物用乙酸乙酯稀釋，用2M鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液和水洗滌，然后經硫酸鎂干燥，蒸發至干，經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(3∶1)洗脫。得到410mg N-(3-羥基-1,1-二甲基丙基)-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為淡黃色固體。MS:m/e 348[M+H]+ⅱ)將48mg(0.276mmol)偶氮二羧酸二乙酯的2ml四氫呋喃溶液加入到72mg(0.275mmol)三苯膦、57mg(0.25mmol)水楊酸芐基酯與87mg(0.25mmol)N-(3-羥基-1,1-二甲基丙基)-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺的混合物中，在室溫下放置1小時。所得混合物經過硅膠色譜分離兩次，先用乙酸乙酯/汽油(1∶1)、然后用甲醇/二氯甲烷(1∶49)洗脫。得到29mg 2-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸芐基酯，為無色膠狀物。MS:m/e 558[M+H]+實施例4353-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸按類似于實施例433所述方式，但是用3-羥基苯甲酸芐基酯代替4-羥基苯甲酸芐基酯，得到3-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-3-甲基丁氧基]苯甲酸，為白色固體。MS:m/e 468[M+H]+實施例5534-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙氧基]苯甲酸按類似于實施例433所述方式，但是用4-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙氧基]苯甲酸芐基酯代替4-[3-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙氧基]苯甲酸芐基酯，得到4-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙氧基]苯甲酸，為白色固體。MS:m/e 454[M+H]+原料是如下制備的(ⅰ)將0.280g(4mmol)2,2-二甲基氮丙啶(Cairns《美國化學會會志》1941,63,871)與9g(40mmol)4-羥基苯甲酸芐基酯的30ml氯仿溶液在回流下加熱3小時。反應混合物冷卻，用二氯甲烷稀釋。溶液用2M氫氧化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鎂干燥，在真空中濃縮。殘余物經過柱色譜分離，用二氯甲烷∶甲醇∶乙酸∶水(240∶12∶3∶2)洗脫，得到4-(2-氨基-2-甲基丙氧基)苯甲酸芐基酯(0.300g,1mmol，25％)。
(ⅱ)按類似于實施例433第(ⅲ)部分所述方式，將4-(2-氨基-2-甲基丙氧基)苯甲酸芐基酯與N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸偶聯，得到4-[2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙氧基]苯甲酸芐基酯，為白色固體。
按類似于實施例433第(ⅰ)和(ⅱ)部分所述方式，用3-氰基苯酚代替4-羥基苯甲酸芐基酯，制備實施例561。
按照S.J.Wittenberger和B.G.J.Donner《有機化學雜志》1993，58,4139-4141的方法，使腈取代基與三甲基甲硅烷基疊氮化物和二丁基氧化錫反應，分別從實施例583、587和586化合物制備實施例585、588和589。
例如在含有未保護的羥基或氨基的表1f1中，使用適當的保護基團，例如用芐基保護羥基，用芐氧基羰基保護氨基，或前述本領域熟知的類似基團。
表1f1 實施例615-631和664-670實施例615N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙基]草酰胺(ⅰ)將2g(17.7mmol)2,4,4-三甲基-2-噁唑啉與1.95g(17.7mmol)苯硫酚的混合物在120℃下加熱18小時。冷卻后，所得固體用二乙醚/汽油(1∶2)研制，濾出，得到2.55g N-[1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙基]乙酰胺，為白色固體。
(ⅱ)將2.5g(11.2mmol)N-[1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙基]乙酰胺、3.18g(11.2mmol)異丙醇鈦與3.09g(16.8mmol)二苯基硅烷的12ml四氫呋喃溶液在室溫下攪拌18小時。所得混合物經過硅膠色譜分離，用含3％、6％和10％甲醇的二氯甲烷洗脫。得到2g 1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙胺，為淡橙色油。然后按類似于實施例1所述程序，將1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙胺與N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸偶聯，得到N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙基]草酰胺。MS:m/e 426 [M+H]+按類似于實施例615所述方法，但是用4-芐氧基苯硫酚代替苯硫酚，并用含溴化氫的乙酸混合物除去保護基團，制備實施例616。
按類似于實施例615所述方式，通過適當的硫醇與2,4,4-三甲基-2-噁唑啉或2,4,4-三甲基-5,6-二氫-1,3(4H)噁嗪的反應，必要時按常規方法除去所有保護基團，另外制備表1f2中的化合物。
表1f2 實施例632-634按類似于表1f1中實施例398所述方式，通過用適當的苯胺代替4-硝基苯酚，并與2,4,4-三甲基-2-噁唑啉或2,4,4-三甲基-5,6-二氫-1,3(4H)噁嗪反應，必要時按常規方法除去所有保護基團，制備表1f3中的化合物。
表1f3 實施例407-414；459-541和651-652用于制備表1g化合物的典型方法如下所述實施例408N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[2-[4-(4-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]-1,1-二甲基乙基]草酰胺(ⅰ)將攪拌著的3.23g(16.8mmol)1-(4-甲氧基苯基)哌嗪、2.00g(16.8mmol)2-甲基-2-硝基丙-1-醇與5.34g(50.4mmol)碳酸鈉的40ml正丁醇溶液回流16小時。反應混合物冷卻，用100ml二氯甲烷稀釋。溶液過濾，在真空中濃縮。殘余物經硅膠快速色譜法純化，用石油醚/乙酸乙酯(10∶1)洗脫，得到1.86g(6.34mmol,38％)1-(4-甲氧基苯基)-4-(2-甲基-2-硝基丙基)哌嗪，為白色固體。
(ⅱ)將1.86g(6.34mmol)1-(4-甲氧基苯基)-4-(2-甲基-2-硝基丙基)哌嗪與0.5g活性碳上的鈀的50ml乙醇溶液在室溫、氫氣氛下攪拌48小時。反應混合物過濾，濾液在真空中濃縮，得到1.59g(6.04mmol,95％)2-[4-(4-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]-1,1-二甲基乙胺，為澄清的油。然后按類似于實施例1所述方式，將2-[4-(4-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]-1,1-二甲基乙胺與N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸偶聯，得到N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[2-[4-(4-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]-1,1-二甲基乙基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 508[M+H]+按相似程序，用適當取代的哌嗪代替1-(4-甲氧基苯基)哌嗪，制備實施例407、409、410、411、412和類似結構化合物。
按相似程序，用1-哌嗪羧酸叔丁基酯代替1-(4-甲氧基苯基)哌嗪，得到4-(2-氨基-2-甲基丙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，然后與N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸偶聯，制備實施例413和414。所得產物然后去保護，得到N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(1-哌嗪基)乙基]草酰胺，后者可用于制備實施例413、414和其它各種N-酰基和N-磺酰衍生物，例如表1g所示，其中利用適當的酰化劑或磺酰化劑。
實施例489N-[2-[4-(環己基甲基)-1-哌嗪基]-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺將攪拌著的48mg N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(1-哌嗪基)乙基]草酰胺(1.2mmol)與13mg環己烷甲醛(1.2mmol)的1ml 5％乙酸/二氯甲烷溶液用38mg三乙酰氧基硼氫化鈉(1.8mmol)的1ml 5％乙酸/二氯甲烷溶液處理。在室溫下攪拌過夜后，反應混合物用10ml二氯甲烷稀釋，先用8ml碳酸氫鈉溶液、再用8ml水洗滌。有機層然后蒸發，用硅膠柱快速色譜法純化，用5％甲醇/二氯甲烷洗脫，蒸發洗脫部分后得到14.3mg(0.3mmol,25％)N-[2-[4-(環己基甲基)-1-哌嗪基]-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為白色固體。MS:m/e 498.2 [M+H]+按相似方法制備表1g所示其它N-烷基化化合物。
表1g
實施例415-420按類似于實施例4所述方式，從N-[3-(氨基甲基)苯基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺和適當的羧酰氯化合物開始，制備表1h所示化合物。
表1h
實施例421-427和598-614用于制備表1b化合物的典型方法如下所述實施例421和423通過N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(4-哌啶基)乙基]草酰胺與適當酰化劑的反應加以制備。
按類似于實施例1所述方式，從如實施例1第(ⅰ)和(ⅱ)部分所述制備的N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸和適當的胺開始，制備實施例424。
實施例422N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙基]草酰胺(ⅰ)將2g(17.7mmol)2,4,4-三甲基-2-噁唑啉與1.95g(17.7mmol)苯硫酚的混合物在120℃下加熱18小時。冷卻后，所得固體用二乙醚/汽油(1∶2)研制，濾出，得到2.55g N-[1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙基]乙酰胺，為白色固體。
(ⅱ)將2.5g(11.2mmol)N-[1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙基]乙酰胺、3.18g(11.2mmol)異丙醇鈦與3.09g(16.8mmol)二苯基硅烷的12ml四氫呋喃溶液在室溫下攪拌18小時。所得混合物經過硅膠色譜分離，用含3％、6％和10％甲醇的二氯甲烷洗脫。得到2g 1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙胺，為淡橙色油。按類似于實施例1所述程序，將1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙胺與N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸偶聯，得到N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(苯硫基)乙基]草酰胺。MS:m/e 426[M+H]+按類似于實施例422所述方法，但是用4-芐氧基苯硫酚代替苯硫酚，用含溴化氫的乙酸混合物除去保護基團，制備實施例427。
實施例607是這樣制備的，從苯并呋喃-3-乙酸乙酯開始，通過碘甲烷烷基化作用，使用叔丁醇鉀作為堿，然后通過堿解、庫爾提斯反應、在180℃乙二醇與水中的水解。所得的胺然后如實施例1所述與N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸偶聯。
按類似于表1g中實施例408所述方式，用四氫喹啉代替1-(4-甲氧基苯基)哌嗪，制備實施例426。
實施例610N-[2-[1-(甲磺酰)-4-哌啶基]-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺將14mg(0.12mmol)甲磺酰氯加入到40mg(0.1mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(4-哌啶基)乙基]草酰胺的1ml二氯甲烷溶液中，然后加入17mg(0.15mmol)N-乙基嗎啉，混合物在室溫下攪拌4小時。所得溶液用乙酸乙酯稀釋，用2M鹽酸和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物用二乙醚研制。得到23mg N-[2-[1-(甲磺酰)-4-哌啶基]-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為灰白色固體。MS:m/e 479[M+H]+原料是如下制備的ⅰ)將4.65g(31mmol)α,α-二甲基-4-吡啶乙胺、15.6g(0.154mol)三乙胺與13.5g(61.9mmol)重碳酸二叔丁酯的100ml甲醇溶液在室溫下攪拌2天，然后蒸發至干。將殘余物溶于乙酸乙酯，用水洗滌，經硫酸鎂干燥，蒸發至干，經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(2∶1)洗脫。得到2.12g[1,1-二甲基-2-(4-吡啶基)乙基]氨基甲酸叔丁酯，為淡橙色固體。1H NMR(400MHzCDCl3)δ:1.29(6H,s),1.49(9H,s),3.04(2H,s),4.30(1H,br.s),7.10(2H,d),8.52(2H,d).
ⅱ)將20ml甲醇中的2.1g(8.4mmol)[1,1-二甲基-2-(4-吡啶基)乙基]氨基甲酸叔丁酯用400mg 10％碳上的鈀催化劑在70℃和7巴下氫化6天。所得懸浮液過濾，蒸發至干，殘余物用二乙醚/汽油(1∶9)研制，得到1.2g[1,1-二甲基-2-(4-哌啶基)乙基]氨基甲酸叔丁酯，為白色固體。1H NMR(400MHz DMSO)δ:1.18(6H,s),1.28-1.41(2H,m),1.37(9H,s),1.52-1.69(3H,m),1.75-1.83(2H,d),2.74-2.84(2H,t),3.12-3.21(2H,d),6.40-6.48(1H,br.s),8.60-8.95(1H,br.s).
ⅲ)將1.2g(4.68mmol)[1,1-二甲基-2-(4-哌啶基)乙基]氨基甲酸叔丁酯、945mg(9.36mmol)三乙胺與2.33g(9.36mmol)N-(芐氧基羰基氧基)琥珀酰亞胺的20ml二氯甲烷溶液在室溫下攪拌18小時，然后用10％檸檬酸溶液和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(1∶2)洗脫。得到1.89g 4-[2-(叔丁氧基甲酰氨基)-2-甲基丙基]-1-哌啶羧酸芐基酯。1H NMR(400MHz CDCl3)δ:1.15-1.32(2H,m),1.29(6H,s),1.42(9H,s),1.49-1.78(5H,m),2.75-2.90(2H,m),4.05-4.16(2H,m),4.41(1H,br.s),5.12(2H,s),7.27-7.42(5H,m).
ⅳ)將1.79g(4.6mmol)4-[2-(叔丁氧基甲酰氨基)-2-甲基丙基]-1-哌啶羧酸芐基酯的6ml三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)溶液在室溫下攪拌5分鐘，然后蒸發至干。將殘余物以及1.2g(4.58mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸、1.1g(5.74mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、1.32g(11.5mmol)N-乙基嗎啉和1.1g(6.9mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑溶于20ml二氯甲烷。攪拌過夜后，溶液用乙酸乙酯稀釋，用10％檸檬酸溶液和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，經硫酸鎂干燥，蒸發至干，經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(1∶1)洗脫。得到1.14g 4-{2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基｝-1-哌啶羧酸芐基酯，為白色泡沫。MS:m/e 535[M+H]+ⅴ)將1.1g(2.05mmol)4-{2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基氨基]草酰]氨基]-2-甲基丙基}-1-哌啶羧酸芐基酯的25ml甲醇溶液用100mg10％碳上的鈀催化劑氫化4小時。所得懸浮液過濾，蒸發至干，得到732mg N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(4-哌啶基)乙基]草酰胺，為灰白色固體。MS:m/e 401[M+H]+實施例616是這樣制備的，從苯并呋喃-3-乙酸乙酯開始，通過碘甲烷烷基化作用，使用叔丁醇鉀作為堿，然后通過堿解、庫爾提斯反應、在180℃乙二醇與水中的水解。所得的胺然后如實施例1所述與N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸偶聯。
實施例619N-[2-[1-(甲磺酰)-4-哌啶基]-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺將14mg(0.12mmol)甲磺酰氯加入到40mg(0.1mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(4-哌啶基)乙基]草酰胺的lml二氯甲烷溶液中，然后加入17mg(0.15mmol)N-乙基嗎啉，混合物在室溫下攪拌4小時。所得溶液用乙酸乙酯稀釋，用2M鹽酸和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物用二乙醚研制。得到23mg N-[2-[1-(甲磺酰)-4-哌啶基]-1,1-二甲基乙基]-N’-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺，為灰白色固體。MSm/e 479[M+H]+原料是如下制備的ⅰ)將4.65g(31mmol)α,α-二甲基-4-吡啶乙胺、15.6g(0.154mol)三乙胺與13.5g(61.9mmol)重碳酸二叔丁酯的100ml甲醇溶液在室溫下攪拌2天，然后蒸發至干。將殘余物溶于乙酸乙酯，用水洗滌，經硫酸鎂干燥，蒸發至干，經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(2∶1)洗脫。得到2.12g[1,1-二甲基-2-(4-吡啶基)乙基]氨基甲酸叔丁酯，為淡橙色固體。1H NMR(400MHz CDCl3)δ:1.29(6H,s),1.49(9H,s),3.04(2H,s),4.30(1H,br.s),7.10(2H,d),8.52(2H,d).
ⅱ)將20ml甲醇中的2.1g(8.4mmol)[1,1-二甲基-2-(4-吡啶基)乙基]氨基甲酸叔丁酯用400mg 10％碳上的鈀催化劑在70℃和7巴下氫化6天。所得懸浮液過濾，蒸發至干，殘余物用二乙醚/汽油(1∶9)研制，得到1.2g[1,1-二甲基-2-(4-哌啶基)乙基]氨基甲酸叔丁酯，為白色固體。1H NMR(400MHz DMSO)δ:1.18(6H,s),1.28-1.41(2H,m),1.37(9H,s),1.52-1.69(3H,m),1.75-1.83(2H,d),2.74-2.84(2H,t),3.12-3.21(2H,d),6.40-6.48(1H,br.s),8.60-8.95(1H,br.s).
ⅲ)將1.2g(4.68mmol)[1,1-二甲基-2-(4-哌啶基)乙基]氨基甲酸叔丁酯、945mg(9.36mmol)三乙胺與2.33g(9.36mmol)N-(芐氧基羰基氧基)琥珀酰亞胺的20ml二氯甲烷溶液在室溫下攪拌18小時，然后用10％檸檬酸溶液和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。有機相經硫酸鎂干燥，蒸發至干，殘余物經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(1∶2)洗脫。得到1.89g 4-[2-(叔丁氧基甲酰氨基)-2-甲基丙基]-1-哌啶羧酸芐基酯。1H NMR(400MHz CDCl3)δ:1.15-1.32(2H,m),1.29(6H,s),1.42(9H,s),1.49-1.78(5H,m),2.75-2.90(2H,m),4.05-4.16(2H,m),4.41(1H,br.s),5.12(2H,s),7.27-7.42(5H,m).
ⅳ)將1.79g(4.6mmol)4-[2-(叔丁氧基甲酰氨基)-2-甲基丙基]-1-哌啶羧酸芐基酯的6ml三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1)溶液在室溫下攪拌5分鐘，然后蒸發至干。將殘余物以及1.2g(4.58mmol)N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸、1.1g(5.74mmol)鹽酸1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、1.32g(11.5mmol)N-乙基嗎啉和1.1g(6.9mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑溶于20ml二氯甲烷。攪拌過夜后，溶液用乙酸乙酯稀釋，用10％檸檬酸溶液和飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，經硫酸鎂干燥，蒸發至干，經過硅膠色譜分離，用乙酸乙酯/汽油(1∶1)洗脫。得到1.14g 4-{2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基氨基[草酰]氨基]-2-甲基丙基}-1-哌啶羧酸芐基酯，為白色泡沫。MS:m/e 535[M+H]+ⅴ)將1.1g(2.05mmol)4-{2-[[[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基氨基]草酰[氨基]-2-甲基丙基}-1-哌啶羧酸芐基酯的25ml甲醇溶液用100mg10％碳上的鈀催化劑氫化4小時。所得懸浮液過濾，蒸發至干，得到732mg N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]-N’-[1,1-二甲基-2-(4-哌啶基)乙基]草酰胺，為灰白色固體。MS:m/e 401[M+H]+適當地按類似于上述結構的方法或按前述相關結構的方法制備表1b中的其余實施例。
表1b 實施例428-432按類似于表1g中實施例408所述方式制備表1i的實施例428、431和432，但是用N-[3-甲氧基-4-(4-噁唑基)苯基]草酰胺酸或N-[3-甲氧基-4-(2-甲基-4-噁唑基)苯基]草酰胺酸代替N-[3-甲氧基-4-(5-噁唑基)苯基]草酰胺酸進行偶聯步驟。
按類似于表1f化合物制備所述程序制備表1i的實施例429和430。
表1i 本說明書中，“包含”指“包括”或“由……組成”。
前述說明或下列權利要求或附圖
中所公開的特征表達了具體的形式，或實現所公開功能的手段，或達到所公開結果的方法或過程；視情況而定，這些特征可以單獨或組合用于實現發明的不同形式。
權利要求
1.下列通式化合物 其中R1代表雜環基；R2代表氫、未取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素、羥基或氰基；R3代表氫、未取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素或氰基；R4代表氫、低級烷基、低級環烷基、芳基或雜環基；R5代表氫、未取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素或氰基；R6代表氫、未取代的低級烷基、低級烷氧基、鹵素或氰基；R7代表氫或未取代的低級烷基；R8代表氫或未取代的低級烷基；或者R4與R8以及它們所連接的氮原子一起代表雜環基；和其藥學上可接受的鹽。
2.根據權利要求1的化合物，其中R2、R3、R5和R6至少有一個不是氫。
3.根據權利要求1或權利要求2的化合物，其中R1代表任選被取代的噁唑環。
4.根據在先權利要求任意一項的化合物，其中R1代表任選被取代的噁唑環，且符合下列通式 其中R2至R8是如權利要求1所定義的，R9代表氫、低級烷基或芳基-低級烷基；R10代表氫。
5.根據權利要求4的化合物，其中R9代表甲基、乙基或芐基。
6.根據權利要求4的化合物，其中R9和R10是氫。
7.根據權利要求1或權利要求2的化合物，其中R1代表三唑基。
8.根據在先權利要求任意一項的化合物，其中R2是低級烷氧基。
9.根據權利要求8的化合物，其中R2是甲氧基。
10.根據在先權利要求任意一項的化合物，其中R4代表支鏈低級烷基。
11.根據在先權利要求任意一項的化合物，其中R7是氫。
12.根據在先權利要求任意一項的化合物，其中R8是氫。
13.根據權利要求1、2、3、4或6任意一項的化合物，選自 或其藥學上可接受的鹽。
14.根據權利要求1的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，m=1至5，R12是雜環基或芳基，其前提條件是R12不代表4-氟苯基。
15.根據權利要求14的化合物，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫，其中R12是任選被取代的苯基和任選被取代的雜芳基，其前提條件是R12不代表4-氟苯基。
16.根據權利要求14或15的化合物，選自表1c
17.根據權利要求1的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11、R13、R14、R15、R16、R17和R18是H或低級烷基，R19是烷基、環烷基、雜環基烷基或芳基烷基。
18.根據權利要求17的化合物，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫。
19.根據權利要求17或18的化合物，選自
20.根據權利要求1的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11、R13、R14、R15、R16、R17和R18是H或低級烷基，R20是烷基、環烷基、芳基、雜環基。
21.根據權利要求20的化合物，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫。
22.根據權利要求20或21的化合物，選自表1e
23.根據權利要求1的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，n=0或1，Ra、Rb是低級烷基，或者Ra與Rb以及它們所連接的碳原子一起構成3至7元碳環，R12是雜環基、芳基或低級環烷基，Z是O、S或NR28，其中R28是H或低級烷基。
24.根據權利要求23的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，n=0或1，(CH2)m,m=1至5，R12是雜環基、芳基或低級環烷基。
25.根據權利要求23或24的化合物，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫。
26.根據權利要求23至25任一項的化合物，選自表1f1
27.根據權利要求23的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，n=0或1，Ra、Rb是低級烷基，或者Ra與Rb以及它們所連接的碳原子一起構成3至7元碳環，R12是雜環基、芳基或低級環烷基。
28.根據權利要求27的化合物，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫。
29.根據權利要求23、27或28的化合物，選自表1f2
30.根據權利要求23的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9和R10是如上所定義的，R11、R13和R28是H或低級烷基，n=0或1，Ra、Rb是低級烷基，或者Ra與Rb以及它們所連接的碳原子一起構成3至7元碳環，R12是雜環基、芳基或低級環烷基。
31.根據權利要求30的化合物，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫，R28是氫或甲基。
32.根據權利要求23、30或31的化合物，選自表1f3
33.根據權利要求1的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7、R8和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，n=0或1，R21是任選被取代的苯基、任選被取代的苯基烷基、任選被取代的苯基羰基、任選被取代的苯基磺酰。
34.根據權利要求33的化合物，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫。
35.根據權利要求33或34的化合物，選自
36.根據權利要求1的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7、R9、R10和R13是如上所定義的，R22、R23、R24、R25和R26是H或低級烷基，R27是烷基、芳基或雜環基、烷氧基、芳氧基、雜環氧基。
37.根據權利要求36的化合物，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R13、R22、R23、R24、R25和R26是氫。
38.根據權利要求36或37的化合物，選自表1h
39.根據權利要求1的下式化合物 其中R2、R3、R5、R6、R7和R10是如上所定義的，R11和R13是H或低級烷基，R12是雜環基、芳基或低級環烷基。
40.根據權利要求39的化合物，其中R2是甲氧基，R3、R5、R6、R9、R10、R11和R13是氫，R12是任選被取代的苯基或 其中R21同上。
41.根據權利要求39或40的化合物，選自表1i
42.根據權利要求1的下式化合物表1b
43.權利要求1至42任意一項所要求保護的式(Ⅰ)化合物及其藥學上可接受的鹽的制備方法，該方法包括下列一般反應方案 其中R1至R8是如權利要求1所定義的，任選地將式(Ⅰ)化合物轉化為藥學上可接受的鹽。
44.下列通式化合物 其中R1、R2、R3、R5、R6和R7是如權利要求1所定義的。
45.權利要求4所要求保護的化合物及其藥學上可接受的鹽的制備方法，該方法包括下列一般反應方案 其中R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8是如權利要求1所定義的，R9和R10是如權利要求4所定義的，任選地將式(Ⅸ)化合物轉化為藥學上可接受的鹽。
46.下列通式化合物 其中R2、R3、R5、R6和R7是如權利要求1所定義的，R9和R10是如權利要求4所定義的。
47.權利要求1至42任意一項所要求保護的式(Ⅰ)化合物及其藥學上可接受的鹽的制備方法，該方法包括下列一般反應方案 其中R1至R8是如權利要求1所定義的，任選地將式(Ⅰ)化合物轉化為藥學上可接受的鹽。
48.根據權利要求1至42任意一項的化合物及其藥學上可接受的鹽，根據權利要求43或權利要求47所要求保護的方法或其等價方法加以制備。
49.根據權利要求4的化合物及其藥學上可接受的鹽，根據權利要求45的方法或其等價方法加以制備。
50.藥物組合物，包含根據權利要求1至42、48或49任意一項的化合物或其藥學上可接受的鹽和藥學上可接受的載體、稀釋劑或助劑，和任選的一種或多種其它治療學上的活性物質。
51.根據權利要求50的藥物組合物，其中該一種或多種其它治療學上的活性物質是免疫抑制劑、化療劑、抗病毒劑、抗生素、抗寄生蟲劑、抗炎劑、抗真菌劑和/或抗血管過度增生劑。
52.根據權利要求51的藥物組合物，其中該一種或多種其它治療學上的活性物質是干擾素或其衍生物。
53.根據權利要求1至42、48或49任意一項的化合物或其藥學上可接受的鹽或根據權利要求50至52任意一項的組合物，用于治療。
54.根據權利要求53的化合物，用于單一療法。
55.根據權利要求53的化合物，用于聯合療法。
56.藥物的制備方法，該方法包括將根據權利要求1至42、48或49任意一項的化合物或其藥學上可接受的鹽與藥學上可接受的載體、稀釋劑或助劑和任選的一種或多種其它治療學上的活性物質一起制成蓋侖給藥劑型。
57.根據權利要求56的方法，其中該一種或多種其它治療學上的活性物質是免疫抑制劑、化療劑、抗病毒劑、抗生素、抗寄生蟲劑、抗炎劑、抗真菌劑和/或抗血管過度增生劑。
58.根據權利要求57的方法，其中該一種或多種其它治療學上的活性物質是干擾素或其衍生物。
59.治療患者免疫介導的病癥或疾病、病毒性疾病、細菌性疾病、寄生蟲性疾病、炎癥、炎性疾病、血管過度增生性疾病、腫瘤或癌癥的方法，包括將治療學上有效量的根據權利要求1至42、48或49任意一項的化合物或其藥學上可接受的鹽或根據權利要求50至52任意一項的組合物對該患者給藥的步驟。
60.治療患者免疫介導的病癥或疾病、病毒性疾病、細菌性疾病、寄生蟲性疾病、炎癥、炎性疾病、血管過度增生性疾病、腫瘤或癌癥的方法，包括下列步驟(a)將治療學上有效量的根據權利要求1至42、48或49任意一項的化合物或其藥學上可接受的鹽對該患者給藥，和(b)同時或先后將一種或多種其它治療學上的活性物質對該患者給藥。
61.根據權利要求60的方法，其中該一種或多種其它治療學上的活性物質選自由免疫抑制劑、化療劑、抗病毒劑、抗生素、抗寄生蟲劑、抗炎劑、抗真菌劑和抗血管過度增生劑。
62.根據權利要求61的方法，其中該一種或多種其它治療學上的活性物質是干擾素或其衍生物。
63.根據權利要求1至42、48或49任意一項的化合物或其藥學上可接受的鹽的用途，用于IMPDH介導疾病的治療或預防。
64.根據權利要求1至42、48或49任意一項的化合物或其藥學上可接受的鹽單獨或同時或先后與一種或多種其它治療學上的活性物質在治療方法中的用途，尤其用于治療免疫介導的病癥或疾病、病毒性疾病、細菌性疾病、寄生蟲性疾病、炎癥、炎性疾病、血管過度增生性疾病、腫瘤或癌癥。
65.根據權利要求1至42、48或49任意一項的化合物在藥物制備中的用途，該藥物用在治療方法中，尤其用于治療免疫介導的病癥或疾病、病毒性疾病、細菌性疾病、寄生蟲性疾病、炎癥、炎性疾病、血管過度增生性疾病、腫瘤或癌癥。
66.根據權利要求65的用途，其中該藥物與一種或多種其它治療學上的活性物質是同時或先后給藥的。
67.根據權利要求1至42、48或49任意一項的化合物聯合一種或多種其它治療學上的活性物質在藥物制備中的用途，該藥物用在治療方法中，尤其用于治療免疫介導的病癥或疾病、病毒性疾病、細菌性疾病、寄生蟲性疾病、炎癥、炎性疾病、血管過度增生性疾病、腫瘤或癌癥。
68.根據權利要求63至67任意一項的用途，用于治療免疫介導的病癥或疾病，尤其用于治療自體免疫疾病、移植物抗宿主疾病或移植排斥。
69.根據權利要求63至67任意一項的用途，用于治療病毒性疾病，尤其用于治療其中病毒是正粘病毒、副粘病毒、皰疹病毒、逆錄病毒、黃病毒、瘟病毒、肝營養性(hepatrophic)病毒、本雅病毒、漢坦病毒、卡拉帕魯病毒、人乳頭瘤病毒、腦炎病毒、沙粒病毒、呼腸孤病毒、水泡性口炎病毒、鼻病毒、腸道病毒、拉沙熱病毒、披膜病毒、痘病毒、腺病毒、麻疹(rubiola)病毒、風疹病毒或肝炎病毒的病毒性疾病。
70.根據權利要求69的用途，其中該病毒是丙型肝炎病毒。
71.根據權利要求69的用途，其中該病毒是HIV。
72.根據權利要求63至67任意一項的用途，用于治療血管過度增生性疾病，尤其用于治療其中該血管過度增生性疾病是再狹窄、狹窄或動脈粥樣硬化的血管過度增生性疾病。
73.根據權利要求63至67任意一項的用途，用于治療炎癥或炎性疾病的治療，尤其用于治療其中該炎性疾病是骨關節炎、急性胰腺炎、慢性胰腺炎、哮喘或成人呼吸窘迫綜合征的炎性疾病。
74.根據權利要求63至67任意一項的用途，用于治療腫瘤或癌癥，尤其用于治療其中該癌癥是淋巴瘤或白血病的癌癥。
75.根據權利要求63或65至74任意一項的用途，其中該一種或多種其它治療學上的活性物質是免疫抑制劑、化療劑、抗病毒劑、抗生素、抗寄生蟲劑、抗炎劑、抗真菌劑和/或抗血管過度增生劑。
76.根據權利要求75的用途，其中該一種或多種其它治療學上的活性物質是干擾素或其衍生物。
77.如上所述的發明。
全文摘要
公開了下列通式化合物，其中R
文檔編號A61P33/00GK1310179SQ0110490
公開日2001年8月29日 申請日期2001年2月23日 優先權日2000年2月24日
發明者M·J·布勞德赫斯特, C·H·希爾, D·N·赫斯特, P·S·瓊斯, P·B·凱, I·R·奇爾弗德, R·M·麥克奇奈爾 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司