專利名稱：美蘭預防齲病的新作用及其應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種解毒劑----美蘭預防齲病的新作用。本發明還涉及美蘭的這些預防齲病的新作用在防齲制劑(包括牙膏、漱口劑、口香糖、防齲涂膜和窩溝封閉劑)領域中的應用。
背景技術：
美蘭(methylene blue，又稱亞甲基藍)是一種解毒劑，常作為氰化物和硝酸鹽的解毒藥物；也可作為消毒劑，用于皮膚或口腔粘膜消毒。Wilson等(Wilson M，Gibson M，Strahan D et al.A Preliminary evaluation of theuse of a redox agent in the treatment of chronic periodontitis.J Periodont Res，1992；27(5)522-527)報道在慢性牙周炎患者的牙周袋內應用美蘭，可以達到減少牙周可疑致病菌、治療牙周炎的目的。這方面的治療技術獲得英國專利(專利號2202442)，并在美國、日本和歐洲得到專利的使用權。但是，美蘭對于齲病預防作用的研究，目前還未見報道。
變形鏈球菌作為口腔主要致齲菌，其致齲特性是基于其利用糖的產酸能力，耐酸能力以及對堅硬牙齒表面的附著能力。變形鏈球菌粘附于牙齒表面，形成菌斑，在菌斑環境中產生有機酸并保持菌斑環境較高的酸濃度，酸使得牙釉質發生脫礦破壞，導致齲病發生，同時在酸性環境中，變形鏈球菌能夠生長良好，并進行正常的生化代謝活動。目前，文獻報道美蘭對變形鏈球菌的生長和產酸以及對體外人工菌斑的產酸具有抑制作用(王成龍等。美蘭抑制變形鏈球菌產酸的實驗研究。臨床口腔醫學雜志，2000；16(4)202-203；王成龍。美蘭對體外菌斑糖代謝模型產酸代謝的抑制作用。實用口腔醫學雜志，2001；17(5)419--421)。
發明內容
我們根據文獻報道美蘭對變形鏈球菌的生長和產酸以及對體外人工菌斑的產酸具有抑制作用，分析美蘭抑制變形球菌的生長和減少變形球菌的產酸的作用機理生物體的正常生長和繁殖需要大量還原性物質的參與，如NADH和NADPH，這些還原性物質在生物體的合成代謝中起重要作用，而生物體的正常代謝過程中以可產成大量的NADH和NADPH，能夠滿足其合成代謝的要求，生物體的生長繁殖能夠順利進行，美蘭作為需氧脫氫酶類的人工受氫體，它取代了氧的作用，使得生物體代謝過程中產生的電子(或者說氫離子)，不能傳遞給氧，而傳遞給了美蘭。這樣，一方面，生物體的氧化作用不能順利進行，也就沒有足夠的能量產生，生物體的生長和繁殖必然受到抑制，另一方面，雖然氧化作用不能順利進行，但需氧脫氫酶類催化的反應卻仍然繼續進行，這就意味著有大量的還原性物質被消耗，生物體合成代謝由于缺少“原材料”，其生長受到抑制。另外，還原性物質被消耗(如NADH)，也將影響生物體的其它代謝活動(如糖代謝)，缺乏NADH，生物體糖代謝不能順利進行，特別是糖酵解過程，因此酸的產生也將受到抑制。通過實驗證實美蘭對由變形鏈球菌引起的Spraague-Dawley大鼠的齲病發生具有明顯的抑制作用，目的是尋找預防齲病的新途徑。本發明的美蘭預防齲病的新作用完全不同于上述美蘭治療牙周病的作用。
本發明的目的是提供美蘭預防齲病的新作用。
本發明的另一目的是提供美蘭預防齲病的新作用在防齲制劑(包括牙膏、漱口劑、口香糖、防齲涂膜和窩溝封閉劑)領域中的用途。
本發明的美蘭預防齲病的新作用具體表現為美蘭對由變形鏈球菌引起的Spraague-Dawley大鼠的齲病發生具有明顯的抑制作用。
傳統上，人們使用殺菌、抑菌劑預防齲病的發生，效果并不理想。我們根據美蘭是需氧脫氫酶類的人工受氫體，能夠阻斷生物體的氧化過程的作用，直接阻斷致齲菌的產酸代謝，從根本上消除了齲病發生的病因，這就為齲病這一臨床常見病和多發病的預防找到新的出路。
本發明對研制新型防齲制劑具有重要意義，并具有廣泛的應用價值及廣闊的市場前景。另外，美蘭作為顯色劑也有潛在的應用價值，如可用于窩溝封閉劑的顯色或生產彩色牙膏等。
圖1是美蘭抑制Spraague-Dawley大鼠齲病發生的Keyes齲齒記分結果。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明作進一步詳細說明。
實施例、美蘭對由變形鏈球菌引起的Spraague-Dawley大鼠齲病發生的作用1、實驗方法將大鼠隨機分為三組，每組12只(雌雄各半)。均于出生后21d斷奶，記錄體重，21--23d鼠齡期間給予含有廣譜抗生素(氨芐青霉素0.5g/瓶×2瓶、氯霉素0.25g/瓶×4瓶、羧芐青霉素0.25g/粒×4粒)的致齲飼料2000#，用量為lg/kg飼料。24--27d鼠齡期間，連續4d于大鼠口腔內接種變形鏈球菌。自28d起各組分別用2.5×10-4g/L美蘭溶液，0.2％氟化鈉水溶液，蒸餾水處理大鼠取仰臥位，將藥物用鈍針頭注射器注入0.3ml于大鼠牙面及口腔，維持15s，每天處理1次，處理后30min內禁飲、禁食。連續處理60d。89d鼠齡時，記錄體重，麻醉大鼠(肌肉注射861合劑，0.75mg/kg體重)，處死大鼠，取頜骨標本，根據Keyes經典評分法，將齲病進展劃分為釉質層(E級)、牙本質淺層(Ds)、牙本質中層(Dm)及牙本質深層(Dx)四個級別對鼠磨牙齲進行記分。
2、實驗結果經統計分析，三組相差非常顯著(P＜0.01)。E級齲損美蘭組與蒸餾水相差非常顯著(P＜0.01)；與氟化鈉組無顯著差異(P＞0.05)。Ds級齲損美蘭組與蒸餾水相差十分顯著(P＜0.01)；與氟化鈉組沒有統計意義上的差別(P＞0.05)。Dm級齲損僅見于蒸餾水組，美蘭組及氟化鈉組均未發生。Dx級齲損在三組中均未出現。參見附圖1。
權利要求
1.美蘭預防齲齒的新作用，其特征在于美蘭對口腔齲病的發生具有抑制作用。
2.權利要求1所述的美蘭預防齲齒的新作用在制備以美蘭為有效成分的防齲制劑中的應用。
全文摘要
本發明涉及美蘭預防齲齒的新作用。本發明的美蘭預防齲齒的新作用可用于制備以美蘭為有效成分的防齲制劑。
文檔編號A61P1/00GK1672684SQ20041003351
公開日2005年9月28日 申請日期2004年3月27日 優先權日2004年3月27日
發明者王成龍, 劉洪臣, 李振鋼, 儲冰峰 申請人:中國人民解放軍總醫院