專利名稱：中風速溶栓的制作方法
技術領域：
本發明涉及中藥、特別是治療中風的中藥。
背景技術：
目前用于治療中風的病的西藥種類繁多，但療效不好，副作用也大，而治療中風的中藥療效顯著的藥品還不多見，特別是現有中藥給藥方式都是口服或肌肉注射，給患者帶來許多不便解決這一問題已成為急需。
發明的內容克服現有技術存在的不足，提出一種采用鼻腔給藥的中風速溶栓。該中藥由下述重量配比的原料制成三七400--500份、川芎400--500份、水蛭130--170份、冰片0.5-1.5份；其生產工藝是取三七加5.5、4、4倍量65％的乙醇加熱回流提取三次，每次1小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮150g。川芎加80％的乙醇加熱回流提取二次，加醇量為8倍、6倍，提取時間為2小時、1.5小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60g。水蛭加8倍量水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至450g，加1倍量乙醇，靜置12小時，濾取上清液。回收乙醇，濃縮至80g。另取CMC及β環糊精適量，與上述提取物攪勻，加熱溶化，加入甘油明膠基質，置水浴熔化，攪拌，冰片加適量乙醇溶解，混勻，注模，制得1000粒，即得。
本發明的中風速溶栓以醒神開竅，活血通絡立方。方中水蛭可逐惡血瘀血月閉，破血癥積聚，無子、利水道、墮胎、治女子月閉，欲成血勞，咂赤白游疹及癰腫，治折傷墜撲蓄血有功。中醫認為它有破血、逐瘀、通經的功效，歷來用于治療癓瘕、痞塊、血瘀閉經、跌打損傷等癥。三七具有滋補強壯、止血化瘀、消腫鎮痛等功效.是中醫治療各種血癥及血瘀癥的“圣藥”。同時三七還可以緩解水蛭破血過烈，起到活血而不傷血的功效；川芎具有活血行氣、祛風止痛的功能。用于血瘀氣滯的痛證。上述各味藥綜合作用的結果使本發明辛散溫通，既能活血，又能行氣，為“血中氣藥”在方中起到行氣活血，舒經通絡的功效；冰片性寒辛散，芳香走串，善開竅醒神，辟穢化濁。“大通利關膈熱塞，大人小兒風涎閉塞及暴得驚熱，甚為濟用。”一方面，可以使腑氣通暢，氣血得以敷布、經脈通暢，有利于半身不遂的恢復，有利于神志轉清；另一方面，痰瘀同治，可使血活痰化，痰消瘀散，血行風息，經脈通暢，則諸癥易愈。具有醒神開竅，活血通絡。用于腦動脈硬化、腦萎縮、腦梗塞所致之中風(風痰瘀阻型)后遺癥的治療；同時，本發明的中藥以栓狀的形式采用鼻腔給藥，用藥十分方便。
具體實施例方式取三七500kg、川芎400kg、水蛭130kg、冰片0.5kg；其生產工藝是取三七加5.5、4、4倍量65％的乙醇加熱回流提取三次，每次1小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮150g。川芎加80％的乙醇加熱回流提取二次，加醇量為8倍、6倍，提取時間為2小時、1.5小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60g。水蛭加8倍量水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至450g，加1倍量乙醇，靜置12小時，濾取上清液。回收乙醇，濃縮至80g。另取CMC及β環糊精適量，與上述提取物攪勻，加熱溶化，加入甘油明膠基質，置水浴熔化，攪拌，冰片加適量乙醇溶解，混勻，注模，制得1000粒，即得。
本發明的第二個實施例，取三七400kg、川芎500kg、水蛭150kg、冰片1.5kg；其生產工藝同實施例1。
該藥的用法用量仰臥位，將栓劑輕輕塞入一側鼻腔內，左半身癱瘓塞入右側，右半身癱瘓塞入左側。一次1粒，一日3次。
該中藥的治病機理是近來，隨著對缺血性中風病因病機認識的不斷深人，痰瘀相關在缺血性中風發病中的地位和作用逐漸受到學者的關注，有關這方面的臨床報道也逐漸增多。《素問·通評虛實論》云“仆擊，肥貴人則膏梁之疾也”。明確提出肥胖之多痰濕者，以及嗜食膏梁厚味滋生痰濕者易患中風。朱丹溪治中風以痰濕立論，強調中風病乃“濕土生痰，痰生熱，熱生風也”。又曰“半身不遂大率多痰......在右屬痰”。《張氏醫通》更明確指出“凡癱瘓瘛疭、半身不遂等證，皆伏痰留滯而然......不祛痰邪，病何由愈”。現代研究亦表明痰濁證患者血脂、血液流變學、動脈粥樣硬化指數等均明顯異常，而這些均是缺血性中風的危險因素。
瘀血與中風的關系，在《內經》中也有所認識，《素問·生氣通天論》曰“陽氣者，大怒則形氣絕，而血苑于上，使人薄厥”。朱丹溪謂中風半身不遂“在左屬死血少血”。《血證論》說“化其痕滯則偏枯疾廢自愈也”。現代研究表明血瘀證患者血液流變學、微循環、血小板功能等均明顯異常，這些因素均能導致缺血性中風的發生。故而有人認為瘀血是中風的基本病理轉歸瘀血阻竅阻絡是腦卒中的主要病機。中風病位在腦，氣機升降逆亂是中風的主要病機，痰瘀互結是中風的病機核心。
中風速溶栓急性毒性試驗一、最大耐受量試驗1 試驗目的用昆明種小白鼠對中風速溶栓進行急性毒性試驗，闡明中風速溶栓的急性毒性反應特征及毒性劑量，為長期毒性試驗和臨床試驗提供依據。
2.試驗材料2.1.受試藥品受試藥品中風速溶栓，由黑龍江省濟仁藥業有限公司提供。批號031101。規格0.65g/粒(相當于1.05g生藥/粒)，功能主治醒神開竅，活血通絡。用于中風(瘀血阻竅阻絡型)，半身不遂，口眼喎邪，舌強話蹇，頭昏目眩。用法用量將栓劑輕輕塞入一側鼻腔內，左半身癱瘓塞入右側，右半身癱瘓塞入左側。一次1粒，一日2次。擬人臨床用量0.022g/kg/d。
2.2.試驗動物Wistar大鼠，雄性，體重200±20g。由黑龍江省藥檢所動物室提供。動物合格證號黑動字第00102001號。飼養條件安靜、清潔、干燥、通風。室溫22±2℃，濕度60±10％。飼料來源中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所提供。
3.試驗內容3.1最大耐受量試驗選取體重200±20g的健康大鼠20只，雌雄各半，經飼養觀察后，于實驗前禁食12小時，不禁水，采用與臨床一致的給藥途徑，速飼給藥，以最大濃度、最大容積(1.0g/kg)，使栓劑與速粘膜接觸直至完全融化吸收，24小時連續三次給予動物，間隔7小時，連續觀察一周。記錄動物的毒性反應情況及死亡數；對死亡的動物及時尸檢，詳實記錄毒性反應的癥狀及其損傷的靶器官。
4.試驗結果4.1.毒性反應鼻飼中風速溶栓后，動物偶有搔速反應，30min后恢復正常，尿、大便正常，泌尿、生殖系統正常，毛色光潔完整，瞳孔正常，眼睛未見分泌物，一周后未出現死亡，亦未見明顯的異常反應情況。
4.2.體重及食量變化試驗動物在觀察期間的體重及食量變化，結果見表1.
表1.一周內動物體重及食量變化表(X±SD n＝20)
4.3.最大耐受量的計算MTD＝1.0g/kg×3/d＝3.0g/kg/d相當于臨床日治療量的倍數＝MTD÷臨床日治療量＝3.0g/kg÷0.022g/kg＝136.4倍。
5.試驗結論固本止急性毒性試驗中，試驗動物未見明顯毒性反應。其昆明種小白鼠灌胃給藥的最大耐受量(MTD)為3.0g/kg/d。相當于推薦臨床日治療量136.4倍。
二、刺激性試驗取健康新西蘭白兔12只，隨機分成3組，每組4只，分別給與中風速溶栓、甘油明膠基質和生理鹽水0.2g/kg，連續給藥3次，于末次給藥后24小時處死動物，取出鼻粘膜觀察有無充血、水腫、速孔周圍有無分泌物、結痂等。
結果表現為鼻粘膜未見充血、水腫、結痂等現象，說明該栓劑粘膜毒性甚小，可供臨床速腔給藥。
一、抗體外血栓形成試驗中風速溶栓可抑制血栓的形成，其作用與陽性藥川芎嗪無明顯差異，而與空白對照組比較差異顯著(P＜0.01)。
1.試驗目的研究中風速溶栓對體外血栓形成的影響，闡明其抑制血栓形成的作用，為臨床試驗提供依據。
2.試驗原理體外血栓形成試驗是按照Chandler法、在體外旋轉環內血液流動狀態下形成的血栓。體外旋轉環內流動狀態下形成的血栓，同體內形成血栓有完全類似的結構，故能客觀地反映出凝血因子在凝血過程中的功能、血液的凝固性質和形成血栓的能力。
3.試驗材料3.1.試驗動物Wistar大鼠，雄性，體重200±20g。由黑龍江省藥檢所動物室提供。動物合格證號黑動字第00102001號。飼養條件安靜、清潔、干燥、通風。室溫22±2℃，濕度60±10％。飼料來源中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所提供。
3.2.受試藥物及試劑受試藥品中風速溶栓，由黑龍江省濟仁藥業有限公司提供。批號031101。規格0.65g/粒(相當于1.05g生藥/粒)，功能主治醒神開竅，活血通絡。用于中風(瘀血阻竅阻絡型)，半身不遂，口眼喎邪，舌強話蹇，頭昏目眩。用法用量將栓劑輕輕塞入一側鼻腔內，左半身癱瘓塞入右側，右半身癱瘓塞入左側，然后用棉球堵住鼻孔，防止藥物溶化外流。一次1粒，一日2次。
陽性對照藥鹽酸川芎嗪注射液，由北京永康制藥廠生產，批號031006，規格2ml含川芎嗪40mg，用法用量1、缺血性腦血管病急性期及其他缺血性血管疾病，一般用靜脈點滴。以本品注射液40～80mg(1支～2支)，稀釋于5％葡萄糖注射液或氯化鈉注射液250～500m1中靜脈點滴。速度不宜過快，一日1次，10日為一療程，一般使用1～2個療程。2、缺血性腦血管疾病恢復期及后遺癥一般穴位注射。每次選3～4個穴位，每穴注射10～20mg(1/4～1/2支)，隔日1次，15次為一療程，一般使用1～2個療程，在給藥間隔日可配合頭皮針治療。功能主治用于閉塞性腦血管疾病如腦供血不全、腦血栓形成、腦栓塞及其他缺血性血管疾病如冠心病、脈管炎等。
甘油明膠基質由黑龍江省濟仁藥業有限公司提供試劑生理鹽水，批號030612由哈藥集團制藥六廠提供。
3.3儀器XSN-R I型體外血栓形成儀及WTP-A型血栓自動恒溫烤箱，均為無錫石塘灣電子儀器二廠產品。手術器械，JZ-A型精密扭力天平，硅化塑料膠管、硅化5ml注射器、眼科鑷子、刻度尺、濾紙及普通小紙片若干。
4.分組與劑量4.1.分組選取符合要求的大鼠60只，雄性，體重220±20g，隨機分成6組，每組10只。分別為高、中、低劑量組、陽性對照組、基質組空白對照組。
4.2.劑量與給藥高、中、低劑量組均將中風速溶栓置于鼻內，劑量分別為高劑量組，0.33g/kg.d(相當于臨床15倍，相當于0.348g生藥/kg)；中劑量組，0.22g/kg.d(相當于臨床10倍，相當于0.232生藥/kg)；低劑量組，0.11g/kg.d(相當于臨床5倍，0.116g生藥/kg)；陽性對照組，鹽酸川芎嗪2mg/kg.d；腹腔注射，基質組，給與甘油明膠基質0.2g/kg.d；空白對照組滴注生理鹽水0.2ml/kg.d。
5.試驗方法與結果5.1.試驗內容5.1.1.試驗方法取合格大鼠，雄性，隨機分六組，每組10只，給藥組分別給與中風速溶栓高、中、低劑量，基質組給與甘油明膠基質，采用速飼給藥；陽性對照組腹腔注射鹽酸川芎嗪2mg/kg.d，空白對照組鼻腔滴注生理鹽水0.2ml/kg.d。連續給藥7天。末次給藥后30分鐘，將各鼠以20％烏拉坦腹腔麻醉，手術剝離頸總動脈，結扎右側頸總動脈遠心端，從近心端行動脈插管，用硅化注射器取血2ml注入已標好刻度線(1.8ml)的硅膠血栓管中，套緊血栓管，裝入體外血栓形成儀中，啟動轉盤，計時，轉動15分鐘后停機，取下血栓環，打開，將管內血液及形成血栓一同迅速倒在預先鋪好濾紙的培養皿上，用眼科鑷子輕提起血栓頭，令其自然下垂移放在干燥的濾紙上，用分規、刻度尺測量血栓長度(mm)并記錄；用眼科鑷子輕提起血栓頭放在干燥的濾紙上，令其表面鮮血吸干，將預先剪好的濾紙(50mg)小片，在紙角上注明編號，將血栓盤放在小濾紙片上，用精密扭力天平稱重，記錄血栓濕重(mg)；將放有血栓的紙片放入玻璃培養皿，置恒溫烤箱終于64℃，20-30分鐘烤干，用扭力天平稱取血栓干重(mg)。進行組間比較。
5.2.試驗結果中風速溶栓對體外血栓形成的影響結果見表表 中風速溶栓對體外血栓形成的影響(x±s)
注與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01由此可見，中風速溶栓各劑量組與空白對照組和基質組之間比較血栓長度、血栓濕重、血栓干重均出現較顯著變化P＜0.01，說明該制劑可明顯抑制血栓的形成，其作用強度基本與陽性對照藥川芎嗪注射液相當。
二、治療急性缺血性中風的實驗研究摘要中風速溶栓可使缺血腦皮層的SOD、GSH-Px的活性保持在較高水平，減少LPO和NO的生成，從而保護神經元，舒張腦血管，改善腦血流供應，減輕腦皮層的缺血性損傷。其清除自由基、抑制NO增高、保持SOD、GSH-Px活性的作用與陽性藥川芎嗪無明顯差異，而與空白對照組比較差異顯著(P＜0.01)。
1.試驗目的研究中風速溶栓對急性缺血性中風模型皮層內自由基、NO等的影響，闡明其保護試驗動物腦神經細胞，改善皮層缺血性損傷的機制，為臨床試驗提供依據。
2.試驗原理急性腦缺血后，腦組織內自由基生成增多而清除發生障礙，自由基含量迅速升高，破壞中樞神經，導致神經細胞膜結構的破壞和細胞功能的喪失。SOD被自由基氧化而失活。局部腦缺血再灌流時，局灶缺血區的NOx-含量升高。攻擊神經細胞或血管內皮細胞，再加上NO與周圍一些超氧基團發生作用，產生一系列毒性更強的超氧自由基，使損害細胞的毒性進一步擴大。
3.試驗材料3.1.試驗動物豚鼠，雌雄各半，體重300±20g。由黑龍江中醫藥大學試驗動物中心提供。動物合格證號醫動字第09-2-2號。飼養條件安靜、清潔、干燥、通風。室溫22±2℃，濕度60±10％。飼料來源中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所提供。
3.2.受試藥物及試劑受試藥品中風速溶栓，由黑龍江省濟仁藥業有限公司提供。批號031101。規格0.65g/粒(相當于1.05g生藥/粒)，功能主治醒神息風，活血通絡。用于中風(瘀血阻絡型)，半身不遂，口眼歪邪，舌強話蹇，頭昏目眩。醒神開竅，活血通絡。用法用量仰臥位，將栓劑輕輕塞入一側鼻腔內，左半身癱瘓塞入右側，右半身癱瘓塞入左側。一次1粒，一日3次。
陽性對照藥鹽酸川芎嗪注射液，由北京永康制藥廠生產，批號031006，規格2ml含川芎嗪40mg，用法用量1、缺血性腦血管病急性期及其他缺血性血管疾病，一般用靜脈點滴。以本品注射液40～80mg(1支～2支)，稀釋于5％葡萄糖注射液或氯化鈉注射液250～500ml中靜脈點滴。速度不宜過快，一日1次，10日為一療程，一般使用1～2個療程。2、缺血性腦血管疾病恢復期及后遺癥一般穴位注射。每次選3～4個穴位，每穴注射10～20mg(1/4～1/2支)，隔日1次，15次為一療程，一般使用1～2個療程，在給藥間隔日可配合頭皮針治療。功能主治用于閉塞性腦血管疾病如腦供血不全、腦血栓形成、腦栓塞及其他缺血性血管疾病如冠心病、脈管炎等。
甘油明膠基質由黑龍江省濟仁藥業有限公司提供試劑生理鹽水，批號030612由哈藥集團制藥六廠提供。
4.分組與劑量4.1.分組選取符合要求的豚鼠60只，雌雄各半，體重300±20g，隨機分成6組，每組10只。分別為高、中、低劑量組、陽性對照組、基質組空白對照組。
4.2.劑量與給藥高、中、低劑量組均將中風速溶栓置于鼻內，劑量分別為高劑量組，0.33g/kg.d(相當于臨床15倍，相當于0.348g生藥/kg)；中劑量組，0.22g/kg.d(相當于臨床10倍，相當于0.232生藥/kg)；低劑量組，0.11g/kg.d(相當于臨床5倍，0.116g生藥/kg)；陽性對照組，鹽酸川芎嗪2mg/kg.d；腹腔注射，基質組，給與甘油明膠基質0.2g/kg.d；空白對照組滴注生理鹽水0.2ml/kg.d。
5.試驗方法與結果5.1.試驗內容
5.1.1.試驗方法取300g豚鼠，雌雄不限，隨機分六組，給藥組分別給與中風速溶栓高、中、低劑量，基質組給與甘油明膠基質，采用鼻飼給藥；陽性對照組腹腔注射鹽酸川芎嗪2mg/kg.d，空白對照組鼻腔滴注生理鹽水0.2ml/kg.d。連續給藥7天。末次給藥后30分鐘，用雙頸總動脈結扎并低血壓法制備腦缺血模型。用0.5％戊巴比妥鈉10mL/kg右下腹腔注射麻醉動物，手術行頸正中切口暴露雙側頸總動脈置線備用。結扎右側頸總動脈遠心端，造成永久性閉塞，從近心端行動脈插管，并放取占動物血液總量20％的血液，造成低血壓，然后結扎左頸總動脈遠心端。缺血45min后，從左頸總動脈近心端動脈插管，抽取5mL血液，入試管中待測血液流變學指標及一氧化氮(NO)含量。然后斷頭處死動物，快速取皮層腦組織約1g，用1ml生理鹽水浸泡并置冰浴中制備腦勻漿，待測自由基3項。
5.2.試驗結果中風速溶栓對中風模型豚鼠的血流變的影響結果見表表 中風速溶栓對中風模型豚鼠的血流變的影響(x±s)
注與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01由此可見，中風速溶栓各劑量組與空白對照組和基質組之間比較血流變指標均出現較顯著變化，說明該制劑可明顯改善中風模型鼠的血流變指標，其作用強度基本與陽性對照藥川芎嗪注射液相當，從而起到增加腦血流量，改善腦缺血狀態的作用。
表 中風速溶栓對中風模型豚鼠自由基、NO等影響(x±s)
注與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01由此可見，中風速溶栓各劑量組均可使缺血時皮層的超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)高于空白對照組和基質組(P＜0.01)；過氧化脂質(LPO)，NO低于空白對照組和基質組(P＜0.01)，高劑量組均與陽性對照藥組比較在SOD、LPO方面均優于陽性藥組(p＜0.05)。
結論通過以上實驗可得出以下結論1、大鼠體外血栓形成試驗的結果表明，中風速溶栓可以減少血栓的形成，從而改善中風病人的中風癥狀。
2、急性缺血性中風試驗結果表明，中風速溶栓可明顯改善中風模型鼠的血流變，從而起到增加腦血流量，改善腦缺血狀態的作用；并可使缺血是皮層SOD、GSH-Px活性保持在較高水平，減少LPO和NO的生成，從而保護神經元，舒張腦血管，改善腦血流供應，減輕腦皮層的缺血性損傷。
試驗單位黑龍江中醫研究院中藥研究所藥理實驗室實驗日期2003年12月1日-2004年1月15日實驗資料保存黑龍江中醫研究院中藥研究所藥理實驗室中風速溶栓臨床總結一組對腦動脈硬化、腦萎縮、腦梗塞所致之中風(風痰瘀阻型)后遺癥等疾病的病人臨床觀察資料中的統計。
該組5％病例為觀察治療的病人。其中男子43例，女16例，年齡40-50歲10例，51-60歲30例，61歲以上19例，其中治療方法是隨機將患者分為兩組，治療組39例，使用本發明的中藥鼻腔給藥，一次1粒，一日3次，60天為一療程。對照組20例，服其它藥，60天為一療程，給藥前停服其它藥物，治療前后均做檢查，結果表明服用本發明的中藥的治療組有效率為98％，而對照組沒有明顯的效果。
權利要求
1.一種中風速溶栓，其特征在于該中藥由下述重量配比的原料制成三七400--500份、川芎400--500份、水蛭130--170份、冰片0.5-1.5份。
2.如權利要求1所述的中風速溶栓，其特征在于其生產工藝是取三七加5.5、4、4倍量65％的乙醇加熱回流提取三次，每次1小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮150g。川芎加80％的乙醇加熱回流提取二次，加醇量為8倍、6倍，提取時間為2小時、1.5小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮至60g。水蛭加8倍量水煎煮二次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至450g，加1倍量乙醇，靜置12小時，濾取上清液。回收乙醇，濃縮至80g。另取CMC及β環糊精適量，與上述提取物攪勻，加熱溶化，加入甘油明膠基質，置水浴熔化，攪拌，冰片加適量乙醇溶解，混勻，注模，制得1000粒，即得。
全文摘要
一種中風速溶栓，該中藥由下述重量配比的原料制成三七400－500份、川芎400－500份、水蛭130－170份、冰片0.5－1.5份，本發明的中風速溶栓以醒神開竅，活血通絡立方，辛散溫通，既能活血，又能行氣，舒經通絡；本發明的中藥以栓狀的形式采用鼻腔給藥，用藥十分方便，可廣泛用于治療腦動脈硬化、腦萎縮、腦梗塞所致之中風(風痰瘀阻型)后遺癥，神志不清、半身不遂、口角流涎、舌強語蹇、頭痛眩暈、健忘食嗆、步履蹣跚、強哭強笑等疾病。
文檔編號A61K35/56GK1726942SQ20041004374
公開日2006年2月1日 申請日期2004年7月27日 優先權日2004年7月27日
發明者蘆天罡 申請人:黑龍江省濟仁藥業有限公司