專利名稱：治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，屬于對藥品進行質量控制的技術領域。
背景技術：
隨著人類社會的不斷進步，人們生活水平的不斷提高，焦慮癥的發病率呈逐年增長的趨勢，據不完全統計焦慮癥在我國的發病率每年有2600萬人以上，給人們生活工作帶來了極大的麻煩。隨著人們的工作和生活節奏加快，競爭加劇等諸多因素的影響，發病率還在上升。西醫對焦慮癥患者采用三環類抗抑郁劑、B-腎上腺受體阻滯劑、單胺氧化酶抑制劑。但這些藥物不能很快控制焦慮發作，且使用時間長才使效果穩定，但稍不留意即給病人留下藥物依賴的弊端，使很多患者難以接受。現代研究認為焦慮癥的發生發展與神經遞質、受體、神經內分泌系統、免疫系統、循環系統和基因表達調節等多方面均有關系，而且焦慮癥發病機理復雜，臨床癥侯多樣。現有西藥抗焦慮譜窄，且毒副作用大；中醫藥治療焦慮立足于整體調節，具有理法方藥的靈活性和藥效的安全性等特點。目前，中醫多根據病因病機和臨床經驗，對病人進行中西醫辯證分型，并在此基礎上加以中醫辨證施治，療效較好。但多用湯劑入藥，存在服用量大，難以迅速及時地服藥，影響藥效的發揮，患者服用、攜帶不方便，阻礙了對治療該病的深入研究和推廣。本申請人研究開發的治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑(申請號為200510003111.9)克服了上述不足，其療效確切，無藥物依賴，且貯藏、運輸、攜帶及服用方便。但如果沒有嚴格的質量控制標準，生產出來的產品質量可靠性不高、質量不穩定，從而會影響藥品的臨床療效。
發明內容
本發明的目的在于提供一種治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，本發明根據處方中各味藥材的含量、特性及其制備工藝，研究制定了具體可行的鑒別和含量測定方法，以全面有效地控制該中藥制劑的質量，從而保證該制劑的臨床療效。
本發明所述治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑是這樣構成的按照重量份計算，它由白芍600-900份、酸棗仁400-700份、牡蠣400-700份、柏子仁300-600份、珍珠母400-700份、刺五加300-600份、百合200-400份、五味子200-400份、熟地黃300-600份、茯苓300-600份、合歡花200-400份和菊花100-300份加入適當輔料制備而成。
治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的制備方法為取刺五加、五味子，粉碎成粗粉，用70％乙醇加熱回流提取兩次，每次2小時，合并醇提液，濾過，減壓回收乙醇，濃縮至相對密度約1.10(60℃)的清膏，備用；珍珠母、牡蠣，加水煎煮提取1小時，濾過，濾液另器收集；殘渣與白芍、酸棗仁、柏子仁、百合、熟地黃、茯苓、合歡花、菊花八味中藥合并，加水煎煮提取三次，每次1小時，合并煎液，濾過，與上述提取液合并，離心，離心藥液濃縮至相對密度約1.10(60℃)的清膏，加入上述清膏及適量的矯味劑，合并，混勻，取一部分藥液噴霧干燥，制得浸膏粉，再與剩余的藥液混合制粒，然后按常規方法制成不同的制劑。
本發明所述質量控制方法主要包括性狀、檢查、鑒別、含量測定項目中的部分或全部；其中性狀應符合各制劑項下的有關規定；鑒別是對白芍、刺五加、五味子和菊花的薄層鑒別；檢查應符合《中國藥典》2000年版一部附錄各制劑項下的有關規定；含量測定為對制劑中白芍的含量測定。
本制劑中白芍的鑒別方法是以芍藥苷對照品為對照，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開劑的薄層鑒別方法。
本制劑中刺五加的鑒別方法是以異秦皮啶對照品為對照，以環己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶5∶2為展開劑的薄層鑒別方法。
本制劑中五味子的鑒別方法是以五味子對照藥材為對照，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1為展開劑的薄層鑒別方法。
本制劑中菊花的鑒別方法是以綠原酸對照品為對照，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸∶水＝2∶30∶2∶2∶4的上層液為展開劑的薄層鑒別方法。
鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑1g，加乙醇20ml，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍紫色斑點；(2)取本制劑10g，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，用氯仿提取2次，每次5ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶5∶2為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑2.5g，加氯仿20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取本制劑3.5g，研細，加石油醚20ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，藥渣揮干，加稀鹽酸1ml與醋酸乙酯50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取綠原酸對照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2～5μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸∶水＝2∶30∶2∶2∶4的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
本制劑中白芍的含量測定方法是以芍藥苷對照品為對照，以乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相的高效液相色譜法。
具體的含量測定方法為照《中國藥典》2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相；檢測波長為230nm；柱溫25℃；理論板數按芍藥苷峰計算應不低于1300；對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取本制劑0.4g，研細，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理1小時，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑中每克含白芍以芍藥苷C23H28O11計，不得少于4mg。
本發明所述質量控制方法包括性狀藥物或其內容物顯黃褐色至棕褐色；氣微，味微酸甜；
鑒別(1)取本制劑1g，加乙醇20ml，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍紫色斑點；(2)取本制劑10g，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，用氯仿提取2次，每次5ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶5∶2為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑2.5g，加氯仿20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取本制劑3.5g，研細，加石油醚20ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，藥渣揮干，加稀鹽酸1ml與醋酸乙酯50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取綠原酸對照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2～5μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸∶水＝2∶30∶2∶2∶4的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合《中國藥典》2000年版一部附錄各制劑項下有關的各項規定；含量測定照《中國藥典》2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相；檢測波長為230nm；柱溫25℃；理論板數按芍藥苷峰計算應不低于1300；
對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取本制劑0.4g，研細，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理1小時，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑中每克含白芍以芍藥苷C23H28O11計，不得少于4mg。
本申請人進行了一系列的試驗研究，以確定最佳的質量控制方法，其結果如下一、鑒別本制劑由白芍、酸棗仁、五味子、刺五加等12味中藥的提取物及適量輔料制備而成，考慮到處方藥味較多，成分復雜，干擾因素多等，選用薄層色譜鑒別方法，主要針對方中君藥及具有鑒別特征的藥味進行研究。試驗結果證明，本發明標準所選用的鑒別方法簡便，重現性和專屬性良好。
(1)白芍的薄層鑒別白芍為方中主藥，含有芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、沒食子酰芍藥苷、胡蘿卜苷、苯甲酸、揮發油等。其中芍藥苷為其主要成分和特征成分，故選擇芍藥苷為對照品進行薄層色譜鑒別，同時選用缺芍藥苷樣品為陰性對照品。以《中國藥典》(2000年版一部)白芍項下的色譜條件進行鑒別，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開劑；同時，以氯仿-甲醇(8∶1)為驗證系統。分離效果以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)較理想。故白芍的薄層鑒別列入本發明內容。
(2)刺五加的薄層鑒別刺五加根部含有多種糖苷、還含白樺脂酸、木栓酮、異秦皮啶、苦杏仁苷、多糖類等。其中有效成分為糖苷、異秦皮啶及總黃酮。以《中國藥典》(2000年版一部)刺五加項下的色譜條件，選取異秦皮啶對照品進行薄層色譜鑒別，同時選用缺刺五加樣品為陰性對照品，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(9∶1)為展開劑，置紫外燈(365nm)下檢視，結果分離效果不理想。后參照三類新藥“五加生化膠囊”的薄層色譜條件，以環己烷-氯仿-乙酸乙酯-甲醇(10∶10∶5∶2)為展開劑，結果供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點，分離效果好，故選用此方法鑒別刺五加。
(3)五味子的薄層鑒別五味子的化學成分主要是多種木脂素、揮發油、有機酸等。其中主要特征性成分為五味子甲素。以《中國藥典》(2000年版一部)五味子項下的色譜條件，選取五味子對照藥材進行薄層色譜鑒別，同時選用缺五味子樣品為陰性對照品，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)為展開劑；同時，以甲苯-醋酸乙酯(9∶1)為驗證系統，置紫外燈(254nm)下檢視。結果供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點，分離效果理想。故五味子的薄層鑒別列入本發明內容。
(4)酸棗仁的薄層鑒別酸棗仁的主要成分為酸棗仁皂苷A、B和三萜類成分，并含多種酸棗仁生物堿，黃酮和氨基酸類。其中主要特征性成分為酸棗仁皂苷A、B。以《中國藥典》(2000年版一部)酸棗仁項下的色譜條件，選取酸棗仁皂苷A、B對照品進行薄層色譜鑒別，同時選用缺酸棗仁樣品為陰性對照品，分別點于同一硅膠G薄層板上，以水飽和的正丁醇為展開劑，結果分離效果不理想，樣品斑點微弱。后又查閱了皂苷的常用鑒別方法，結合本品性質，擬定了酸棗仁的TLC鑒別。實驗以氯仿-甲醇-水-乙酸(15∶35∶10∶0.4)為展開劑，噴以10％硫酸乙醇溶液，供試品色譜中，樣品與對照品色譜中相對應的斑點不清晰，故酸棗仁的薄層鑒別未列入本發明內容。
(5)菊花的薄層鑒別菊花的主要有效成分為揮發油和黃酮類。以《中國藥典》(2000年版一部)菊花項下的色譜條件，選取綠原酸對照品進行薄層色譜鑒別，同時選用缺菊花樣品為陰性對照品，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-冰醋酸-水(2∶30∶2∶2∶4)的上層液為展開劑，分別點于同一聚酰胺薄膜上，置紫外燈(365nm)下檢視。同時，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-水(4∶4∶2∶5)的上層液為驗證系統。結果供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點，分離效果理想。故菊花的薄層鑒別列入本發明內容。
(6)合歡花的薄層鑒別合歡花含15種氨基酸，其中以亮氨酸和谷氨酸含量最高；還含有豐富的微量元素、有機酸、蚯蚓解熱堿、蚯蚓素等成分。以《中國藥典》(2000年版一部)合歡花項下的色譜條件，選取合歡花對照藥材進行薄層色譜鑒別，同時選用缺合歡花樣品為陰性對照品，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯為展開劑，噴以5％硫酸香草醛溶液，結果分離效果不理想，樣品斑點微弱。后又查閱了相關文獻，結合本品性質和提取工藝，擬定了合歡花的TLC鑒別，以醋酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)為展開劑，噴以三氯化鋁試液，供試品色譜中，樣品與對照藥材色譜中相對應的斑點顏色一致，但陰性有干擾。故合歡花的薄層鑒別未列入本發明內容。
(7)熟地黃的薄層鑒別熟地黃的主要成分為5-羥甲基糠醛、環烯醚萜、單萜及其苷類等。其中主要特征性成分為5-羥甲基糠醛。以《中國藥典》(2000年版一部)熟地黃項下的色譜條件，選取5-羥甲基糠醛對照品進行薄層色譜鑒別，同時選用缺熟地黃樣品為陰性對照品，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(1∶1)為展開劑，置紫外光燈(254nm)下檢視，結果分離效果不理想，樣品在與對照品色譜中相對應的位置上無斑點。后又查閱了相關文獻，結合本品性質和提取工藝，因5-羥甲基糠醛類成分是脂溶性的，而本品在提取工藝中是水提取，因此選用5-羥甲基糠醛作定性指標不適宜，而熟地黃多糖類成分無相應的對照品，故熟地黃的薄層鑒別未列入本發明內容。
(8)百合的薄層鑒別百合的主要成分為甾體糖苷、生物堿，還含有5-羥甲基糠醛、環烯醚萜、單萜及其苷類等。以《中國藥典》(2000年版一部)百合項下的色譜條件，選取百合對照藥材進行薄層色譜鑒別，同時選用缺百合樣品為陰性對照品，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以氯仿-甲醇-醋酸乙酯(22∶5∶6)為展開劑，置紫外光燈(254nm)下檢視，結果分離效果不理想，樣品在與對照藥材色譜中相對應的位置上無斑點。后又查閱了相關文獻，結合本品性質和提取工藝，因薄層鑒別的成分是脂溶性的，而本品在提取工藝中是水提取，因此選用《中國藥典》(2000年版一部)百合項下的色譜條件作定性指標不適宜。又查閱了相關文獻，結合本品性質和提取工藝，分別點于同一用1％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇(7∶3∶1)為展開劑，置紫外光燈(365nm)下檢視，分離效果仍不理想。故百合的薄層鑒別未列入本發明內容。
(9)茯苓的薄層鑒別茯苓中主要含有β-茯苓聚糖、三帖類化合物、麥角甾醇等。多糖為茯苓的主要有效成分。選取茯苓對照藥材進行薄層色譜鑒別，同時選用缺茯苓樣品為陰性對照品，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚-乙醚(3∶2)為展開劑，置紫外光燈(365nm)下檢視，結果分離效果不理想，樣品在與對照藥材色譜中相對應的位置上無斑點。故茯苓的薄層鑒別未列入本發明內容。
因珍珠母、柏子仁、牡蠣無對照藥材和對照品，故未進行薄層鑒別研究。
二、檢查1.按《中國藥典》2000年版一部附錄IC顆粒劑通則規定檢查。
(1)粒度取三批樣品單劑量分裝的顆粒劑5袋，照粒度檢查法測定，結果不能通過一號篩和能通過四號篩的顆粒和粉末總和均未超過8.0％，見表1。
(2)水分三批樣品照水分測定第一法(烘干法)(附錄IXH)測定，結果均未過5.0％，符合規定要求，見表1。
(3)溶化性取三批樣品測定，結果全部溶化，符合規定要求，見表1。
(4)裝量差異取三批樣品各10袋測定，結果均未超過±5.0％，符合規定要求，見表1。
表1 三批樣品通則檢查結果
2.微生物限度按衛生部藥品衛生標準規定，口服固體制劑(不含部分生藥原粉)每克含細菌數不得超過1000個，霉菌數不得超過100個，不得檢出大腸桿菌及活螨。三批樣品經檢驗均符合規定，結果見表2。
表2 三批樣品微生物限度檢查結果
3.砷鹽按《中國藥典》2000年版一部附錄IXF砷鹽檢查法第二法，標準管溶液含砷5ug/ml，結果見表3。
表3 三批樣品砷鹽檢查結果
檢查三批樣品，結果砷鹽含量均小于百萬分之一，考慮到本制劑砷鹽含量很低，此項檢查未列入本發明質量標準。
4.重金屬 按《中國藥典》2000年版一部附錄IXE重金屬檢查法第二法，標準管溶液含鉛20ug/ml，檢查結果見表4。
表4 三批樣品重金屬檢查結果
檢查三批樣品，結果重金屬含量均小于百萬分之十，故此項檢查亦未列入本發明質量標準。
三、含量測定白芍為本處方君藥，對本制劑療效起重要作用，白芍的含量可作為控制本制劑內在質量的一項指標，為含量測定的首選對象。據文獻報道，芍藥苷含量測定采用高效液相色譜法，能有效地控制與反映質量。
經實驗研究，建立起高效液相色譜法測定芍藥苷含量。試驗對方法學(供試品的提取條件、檢測波長、色譜條件、缺芍藥苷陰性對照的考察、線性、精密度、重現性、穩定性、加樣回收率、樣品測定等)進行了系統考察。結果供試品加稀乙醇20ml，超聲處理1小時即可。用芍藥苷溶液作為對照，檢測波長230nm。精密度試驗供試品溶液連續測定5次，RSD為0.76％。穩定性試驗供試品溶液于制樣后8小時內進樣5次，每2小時進樣一次，RSD分別為0.77％。重現性試驗供試品平行試驗5次，RSD為1.18％。加樣回收率試驗三個梯度，每一梯度各平行試驗2次共6份，結果平均回收率為102.21％；RSD為1.4％。上述試驗結果均符合要求，因此列入本發明內容。
1.藥味的選擇白芍為方中君藥，故考慮測定其中芍藥苷含量來控制藥品質量，以有效控制產品質量。
2.儀器與試藥儀器HP-1100高效液相色譜儀(美國惠普)；惠普四元梯度泵；惠普自動進樣器；惠普柱溫箱；惠普二級管陣列檢測器；電子分析天平(十萬分之一，德國Satoriüs公司)；SB3200超聲波清洗器(50KHz)。
試劑乙腈為色譜純；其余試劑均為分析純；稀乙醇照《中國藥典》2000年版一部附錄102頁“稀乙醇”配置，含乙醇濃度為50％。
對照品芍藥苷(中國藥品生物制品檢定所，含量測定用)，批號(0736-9710)，采用峰面積歸一化法計算，芍藥苷對照品含量＞98％。
樣品本發明顆粒劑(批號011201，020301，020302，020303)。
3.色譜條件(1)色譜柱Hypersil-ODS C18(125mm×4mm，5μm)；(2)保護柱Hypersil-ODS(20mm×2.1mm，30μm)；(3)流動相乙腈-0.05％磷酸(15∶85)；(4)流速0.6ml/min；(5)檢測波長230nm；(6)柱溫25℃；(7)檢測器惠普二級管陣列檢測器。
取對照品溶液、供試品溶液、陰性溶液，分別進樣5μl，結果芍藥苷保留時間約7分鐘，可使芍藥苷完全分離，理論板數按芍藥苷峰計算，均不低于1500。陰性在芍藥苷對照品出峰時間無色譜峰。
4.溶液的制備(1)對照品溶液的制備精密稱取對照品適量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
(2)供試品溶液的制備申請人對供試品溶液的制備方法進行了考察。
①提取溶劑的選擇因芍藥苷溶于乙醇、甲醇等溶劑，因此在兩種極性溶劑中選擇。取樣品(批號011201)7份，每份約1g，研細，精密稱定，分別置25ml容量瓶中，加甲醇、50％甲醇、乙醇、70％乙醇、50％乙醇、30％乙醇各20ml，超聲處理0.5小時，放冷，加相同溶劑至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續濾液，精密量取續濾液5μl，注入液相色譜儀，測定，結果見表5。
表5 不同提取溶劑對測定結果的影響
由表5可見，用50％甲醇與50％乙醇作提取溶劑含量基本一致，故采用50％乙醇作提取溶劑。選擇50％乙醇(稀乙醇)作為提取溶媒。
②提取方法的選擇 《中國藥典》2000年版一部成方制劑“八珍丸”、“逍遙丸(水丸、大蜜丸)”、“猴頭健胃靈膠囊”等，幾乎所有HPLC法測定芍藥苷含量的固體制劑和藥材，均采用超聲提取法，因此選擇超聲提取法作為提取方法。
③提取時間的考察 取樣品(批號011201)5份，每份約0.8g，研細，精密稱定，分別置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理15、30、45、60、90分鐘，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續濾液，精密量取續濾液10μl，注入液相色譜儀，測定，結果見表6。
表6 提取時間對測定結果的影響
從表6可見，提取時間以60和90分鐘較好，選擇超聲提取60分鐘。
綜上所述，供試品溶液的制備方法如下取本制劑0.4g，研細，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理1小時，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，棄去粗濾液，取續濾液，即得。
(3)陰性供試品溶液的制備 按本制劑制備方法，處方中去白芍制成缺白芍陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性供試液。
5.方法學考察(1)陰性對照試驗按供試品溶液制備方法制備陰性供試液，進樣分析，結果表明，其他成分對芍藥苷測定無干擾。
(2)線性關系的考察精密吸取對照品溶液(0.105mg/ml)2、4、6、10、15μl進樣，測定結果見表7，繪制標準曲線。
表7 線性關系測定數據
結果表明在0.210～1.575μg范圍內線性關系良好。
(3)精密度試驗取本制劑(批號011201)1份照供試品溶液的制備方法制備供試液，用0.45μm濾膜濾過，精密量取續濾液5μl，注入液相色譜儀，重復進樣5次，記錄色譜圖，測定積分面積，結果見表8。
表8 方法精密度試驗結果
(4)重現性試驗 取同一批號樣品(批號011201)5份，各精密稱定，照供試品溶液的制備方法制備5份供試液，分別注入液相色譜儀，測定芍藥苷含量，結果見表9。
表9 重現性試驗(n＝5)
(5)穩定性考察 取樣品一份(批號011201)，照供試品溶液的制備方法制備供試液，8小時內進樣5次，每2小時進樣一次，記錄積分面積，見表10。說明供試品溶液在8小時內測定，對含量測定結果無影響。
表10 供試品溶液的穩定性考察結果
(6)加樣回收率精密稱取已知含量的供試品(批號011201)6份，精密加入對照品適量(三種不同水平，各二份)，按本發明芍藥苷含量測定方法進行含量測定，計算回收率，結果見表11。
表11 加樣回收試驗結果表(n＝6)
6.樣品的含量測定照本發明質量標準含量測定項下的方法，對三批樣品供試品進行含量測定，結果見表12。 表12 3批樣品的含量測定結果
由表12可見，三批樣品平均含量為4.869mg/g，按下浮20％計為3.895mg/g，因此將限度暫訂為本制劑含白芍以芍藥苷(C23H28O11)計不得少于4mg/g。
與現有技術相比，本發明質量控制方法精密度高、重現性好、穩定性好、回收率高、專屬性強，測量結果準確，能全面有效地控制治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量，從而保證了該制劑的臨床療效。
具體實施例方式本發明的實施例1性狀藥物或其內容物顯黃褐色至棕褐色；氣微，味微酸甜；鑒別(1)取本制劑1g，加乙醇20ml，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍紫色斑點；(2)取本制劑10g，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，用氯仿提取2次，每次5ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶5∶2為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑2.5g，加氯仿20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取本制劑3.5g，研細，加石油醚20ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，藥渣揮干，加稀鹽酸1ml與醋酸乙酯50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取綠原酸對照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸∶水＝2∶30∶2∶2∶4的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合《中國藥典》2000年版一部附錄各制劑項下有關的各項規定；含量測定照《中國藥典》2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相；檢測波長為230nm；柱溫25℃；理論板數按芍藥苷峰計算應不低于1300；對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本制劑0.4g，研細，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理1小時，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；
測定法 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑中每克含白芍以芍藥苷C23H28O11計，不得少于4mg。
本發明的實施例2性狀藥物或其內容物顯黃褐色至棕褐色；氣微，味微酸甜；鑒別(1)取本制劑1g，加乙醇20ml，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍紫色斑點；(2)取本制劑3.5g，研細，加石油醚20ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，藥渣揮干，加稀鹽酸1ml與醋酸乙酯50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取綠原酸對照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸∶水＝2∶30∶2∶2∶4的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合《中國藥典》2000年版一部附錄各制劑項下有關的各項規定；含量測定照《中國藥典》2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相；檢測波長為230nm；柱溫25℃；理論板數按芍藥苷峰計算應不低于1300；對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品適量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取本制劑0.4g，研細，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理1小時，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑中每克含白芍以芍藥苷C23H28O11計，不得少于4mg。
本發明的實施例3性狀藥物或其內容物顯黃褐色至棕褐色；氣微，味微酸甜；鑒別(1)取本制劑10g，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，用氯仿提取2次，每次5ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶5∶2為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(2)取本制劑2.5g，加氯仿20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定照《中國藥典》2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相；檢測波長為230nm；柱溫25℃；理論板數按芍藥苷峰計算應不低于1300；對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取本制劑0.4g，研細，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理1小時，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑中每克含白芍以芍藥苷C23H28O11計，不得少于4mg。
本發明的實施例4性狀藥物或其內容物顯黃褐色至棕褐色；氣微，味微酸甜；鑒別(1)取本制劑1g，加乙醇20ml，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各8μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍紫色斑點；(2)取本制劑2.5g，加氯仿20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各8μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑3.5g，研細，加石油醚20ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，藥渣揮干，加稀鹽酸1ml與醋酸乙酯50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取綠原酸對照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各3μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸∶水＝2∶30∶2∶2∶4的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合《中國藥典》2000年版一部附錄各制劑項下有關的各項規定。
本發明的實施例5性狀藥物或其內容物顯黃褐色至棕褐色；氣微，味微酸甜；鑒別取本制劑10g，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，用氯仿提取2次，每次5ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各8μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶5∶2為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合《中國藥典》2000年版一部附錄各制劑項下有關的各項規定；含量測定照《中國藥典》2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相；檢測波長為230nm；柱溫25℃；理論板數按芍藥苷峰計算應不低于1300；對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取本制劑0.4g，研細，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理1小時，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑中每克含白芍以芍藥苷C23H28O11計，不得少于4mg。
權利要求
1.一種治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，所述質量控制方法主要包括性狀、檢查、鑒別、含量測定項目中的部分或全部；其特征在于性狀應符合各制劑項下的有關規定；鑒別是對白芍、刺五加、五味子和菊花的薄層鑒別；檢查應符合中國藥典2000年版一部附錄各制劑項下的有關規定；含量測定為對制劑中白芍的含量測定。
2.按照權利要求1所述治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，其特征在于本制劑中白芍的鑒別方法是以芍藥苷對照品為對照，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開劑的薄層鑒別方法。
3.按照權利要求1所述治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，其特征在于本制劑中刺五加的鑒別方法是以異秦皮啶對照品為對照，以環己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶5∶2為展開劑的薄層鑒別方法。
4.按照權利要求1所述治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，其特征在于本制劑中五味子的鑒別方法是以五味子對照藥材為對照，以30～60℃石油醚甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1為展開劑的薄層鑒別方法。
5.按照權利要求1所述治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，其特征在于本制劑中菊花的鑒別方法是以綠原酸對照品為對照，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸∶水＝2∶30∶2∶2∶4的上層液為展開劑的薄層鑒別方法。
6.按照權利要求1、2、3、4或5所述治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，其特征在于鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑1g，加乙醇20ml，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍紫色斑點；(2)取本制劑10g，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，用氯仿提取2次，每次5ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶5∶2為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑2.5g，加氯仿20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取本制劑3.5g，研細，加石油醚20ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，藥渣揮干，加稀鹽酸1ml與醋酸乙酯50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取綠原酸對照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2～5μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸∶水＝2∶30∶2∶2∶4的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。
7.按照權利要求1所述治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，其特征在于本制劑中白芍的含量測定方法是以芍藥苷對照品為對照，以乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相的高效液相色譜法。
8.按照權利要求1或7所述治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，其特征在于具體的含量測定方法為照中國藥典2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相；檢測波長為230nm；柱溫25℃；理論板數按芍藥苷峰計算應不低于1300；對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取本制劑0.4g，研細，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理1小時，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑中每克含白芍以芍藥苷C23H28011計，不得少于4mg。
9.按照權利要求1所述治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法包括性狀藥物或其內容物顯黃褐色至棕褐色；氣微，味微酸甜；鑒別(1)取本制劑1g，加乙醇20ml，超聲10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶甲酸＝40∶5∶10∶0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同藍紫色斑點；(2)取本制劑10g，加75％乙醇50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，用氯仿提取2次，每次5ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取異秦皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環己烷∶氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇＝10∶10∶5∶2為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本制劑2.5g，加氯仿20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取五味子對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取本制劑3.5g，研細，加石油醚20ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，藥渣揮干，加稀鹽酸1ml與醋酸乙酯50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取綠原酸對照品，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2～5μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以甲苯∶醋酸乙酯∶甲醇∶冰醋酸∶水＝2∶30∶2∶2∶4的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點；檢查應符合中國藥典2000年版一部附錄各制劑項下有關的各項規定；含量測定照中國藥典2000年版一部附錄VID高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶0.05％磷酸溶液＝15∶85為流動相；檢測波長為230nm；柱溫25℃；理論板數按芍藥苷峰計算應不低于1300；對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取本制劑0.4g，研細，精密稱定，置25ml容量瓶中，加稀乙醇20ml，超聲處理1小時，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得；測定法 分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；本制劑中每克含白芍以芍藥苷C23H28O11計，不得少于4mg。
全文摘要
本發明提供了一種治療廣泛性焦慮癥的中藥制劑的質量控制方法，所述質量控制方法主要包括性狀、檢查、鑒別、含量測定項目中的部分或全部；其中性狀應符合各制劑項下的有關規定；鑒別是對白芍、刺五加、五味子和菊花的薄層鑒別；檢查應符合《中國藥典》2000年版一部附錄各制劑項下的有關規定；含量測定為對制劑中白芍的含量測定；與現有技術相比，本發明質量控制方法精密度高、重現性好、穩定性好、回收率高、專屬性強，測量結果準確，能全面有效地控制本發明制劑的質量，從而保證了該制劑的臨床療效。
文檔編號A61P25/22GK1843432SQ20061020005
公開日2006年10月11日 申請日期2006年1月20日 優先權日2006年1月20日
發明者王曉春 申請人:貴州同濟堂制藥有限公司