吡咯并三嗪化合物的晶型的制作方法

專利名稱：：吡咯并三嗪化合物的晶型的制作方法吡咯并三。秦化合物的晶型發明領域本發明涉及吡咯并三嗪化合物[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯的晶型。本發明還通常涉及含有至少一種晶型的藥物組合物，以及使用這種晶型治療諸如癌癥等增殖性疾病和與受生長因子受體如HER1、HER2和HER4操控的信號傳導途徑相關的其它疾病的方法，并涉及獲得這種晶型的方法。發明概述本發明提供了吡咯并三嗪化合物[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三"秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯的N-2晶型。在第二個實施方式中，本發明提供了吡咯并三"秦化合物[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l，2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基曱基酯的H-l—水合物晶型。在第三個實施方式中，本發明提供了吡咯并三嗪化合物[4-[[l-(3-氟苯基)曱基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三溱-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯的鹽酸鹽的N-l晶型。在第四個實施方式中，本發明提供了藥物組合物，其含有吡咯并三漆化合物[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-曱基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯的N-2、H-l或N-1晶型中的至少一種和藥學上可接受的載體或稀釋劑。在第五個實施方式中，本發明提供了治療諸如癌癥等增殖性疾病的方法，所述方法包括對有此需要的溫血動物施用治療有效量的吡p各并三溱化合物[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,1-￡][1,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯的N-2、H-1或N-1晶型中的至少一種。本文用于表征特定形式如"N-1"等的名稱不能理解為對具有類似或相同物理和化學特性的任何其它物質構成了限制，而應理解為，這些命名僅僅是標識符，應根據本文中同時出現的特征信息進行解釋。附圖簡述圖1顯示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三。秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯N-2晶型的觀察到的和模擬的粉末X射線衍射圖(CuKaX=l.5418A，T=22°C)。圖2顯示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三溱-6-基]-氨基曱酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯H-l晶型的觀察到的和模擬的粉末X射線衍射圖(CuKaX=1.5418A，T=22°C)。圖3顯示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三n秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯N-l晶型的觀察到的和模擬的粉末X射線衍射圖(CuKaX=l.5418A,T=22°C)。圖4顯示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三"秦-6-基]-氨基曱酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯N-2晶型的示差量熱曲線(DSC)。圖5顯示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l，2,4]三。秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯的鹽酸鹽的H-l晶型的示差量熱曲線和熱解重量損失(TGA)。圖6顯示了[4-[[l-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三溱-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯的鹽酸鹽的N-l晶型的示差量熱曲線。發明詳述本發明涉及在文中描述并表征的化合物Ia的晶型。以下是用于本說明書的術語的定義。除非另有說明，在此提供給某一基團或術語的初始定義單獨地應用于整篇說明書中的該基團或術語，或作為其它基團的一部分。文中，"多晶型物"指含有相同化學組分但形成晶體的分子和/或離子有不同空間排列的晶型。文中，"溶劑化物"指還包含摻入晶格結構中的一種或多種溶劑分子的分在。溶劑化物可包含化學計量或非化學計量量的溶劑分子。例如，溶劑化物可損失部分溶劑從而形成含有非化學計量量溶劑分子的溶劑化物。溶劑分子可以以晶格結構中含有一個以上溶劑分子的二聚體或寡聚體出現。文中，"無定型"指分子和/或離子的非晶體的固體形式。無定型固體不呈現具有尖峰的確定的X射線衍射圖。文中，當用來描述晶型時"基本純的"表示以化合物的重量計，該化合物具有大于化合物的90重量％的純度，包括大于90、91、92、93、94、95、96、97、98和99重量％，且還包括等于約100重量％的純度。其余物質包括/或制備過程中形成的反應雜質和/或其加工雜質。例如，當化合物Ia的晶型的純度大于90重量％化合物Ia的晶型時，可認為是基本純的，其純度通過本領域現在已知的且通常被接受的方法測定，其中剩余不到10重量％的物質包括化合物Ia的其它形式和/或反應雜質和/或加工雜質。可通過本領域已知的分析技術如色譜法、核磁共振光譜、質譜或紅外光譜測定反應雜質和/或加工雜質的存在。文中，晶胞參數"分子/晶胞"指晶胞中化合物Ia的分子數。本發明至少部分地提供了化合物Ia、其鹽和其溶劑化物的晶型。化合物Ia是[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三溱-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯，其結構為在本發明的一個方面，提供了化合物Ia的晶型。該晶型是包含化合物Ia的純晶型，在本文稱為"N-2"型。在一個實施方式中，該N-2晶型可通過基本等于下述值的晶胞參數表征晶胞大小a=10.16Ab=10.46Ac=12.48人a=96.4度空間群PI分子/晶胞2體積1277.5A3密度(計算值)1.379g/cm3其中，在約25。C的溫度下測量所述晶型。在另一個實施方式中，該N-2晶型可表征為在溫度約22t時，粉末X射線衍射圖包含選自下組的4個或更多個，優選地5個或更多個26值(CuKaX=1.5418A):7.3、8.6、12.0、17.8、19.3、20.1和25.6。在本發明的另一個方面，提供了化合物Ia的不同晶型。該晶型是含有化合物Ia和水的一水合物晶體，在文中稱為"H-1"型。在一個實施方式中，該H-1晶型可通過基本等于下述值的晶胞參數表征晶胞大小a=8.78Ab=10.78人c=14.08Aa=99.6度卩=95.8度Y=93.3度空間群PI分子/晶胞2體積1303.9A3密度(計算值)1.397g/cm3其中，在約25t的溫度下測量所述晶型。在另一個實施方式中，該H-1晶型可表征為在溫度約22。C時，粉末X射線衍射圖包含選擇下組的4個或更多個、優選地5個或更多個26值(CuKaX=1.5418A):6.5、10.2、11.4、15.5、18.3、22.9、25.8和28.4。在本發明的另一個方面，提供了化合物Ia的鹽酸鹽的晶型。該晶型是在鹽酸和化合物Ia之間形成的鹽，在文中^皮稱為"N-l"型。在一個實施方式中，該N-1晶型可通過基本等于下述值的晶胞參數表征晶胞大小a=5.32Ab=10.92人c=22.95人a=90.0度P=94.9度Y=90.0度空間群P2i分子/晶胞2體積1327.6A3密度(計算值)1.418g/cm3其中，在約25。C的溫度下測量所述晶型。在另一個實施方式中，該N-1晶型可表征為在溫度約22。C時，粉末X射線衍射圖包含選自下組的4個或更多個、優選地5個或更多個26值(CuKaX=1.5418A):3.9、9.0、11.3、14.2、16.8、25.3和26.9。在本發明的一個實施方式中，以基本純的形式提供化合物Ia的晶型，例如N-l、N-2或H-l型。這種基本純形式的化合物Ia的晶型可用于藥物組合物，所述藥物組合物中可任選含有一種或多種例如選自下組的其它組分賦形劑、載體、以及一種其它活性藥物成分或具有不同分子結構的活性化學分子。優選地，該晶型具有基本純的相均一性，表現為在通過實驗測得的PXRD圖中少于10%、優選少于5%、更優選少于2%的總峰面積是由模擬PXRD圖中不存在的額外峰產生的。最優選的是，晶型具有基本純的相均一性，在通過實驗測得的PXRD圖中少于1%的總峰面積是由模擬PXRD圖中不存在的額外峰產生的。在一個實施方式中，提供了基本由化合物Ia的N-2晶型構成的組合物。以組合物中化合物Ia的重量計，該實施方式的組合物可含有至少90重量％的化合物Ia的N-2晶型。在另一個實施方式中，提供了基本由化合物Ia的H-l晶型構成的組合物。以組合物中化合物Ia的重量計，該實施方式的組合物可含有至少90重量％的化合物Ia的H-l晶型。在另一個實施方式中，提供了基本由化合物Ia的N-1晶型構成的組合物。以組合物中化合物Ia的重量計，該實施方式的組合物可含有至少90重量％的化合物Ia的N-1晶型。用途和效用式I的吡咯并三。秦化合物，如化合物Ia,能抑制HER受體家族成員的蛋白酪氨酸激酶活性。這些抑制劑可用于治療增殖性疾病，如那些依賴于這些受體中的一種或多種進行信號傳導的疾病。這種疾病包括銀屑病、類風濕性關節炎以及肺、頭和頸、乳腺、結腸、卵巢和前列腺的實體瘤。化合物可作為藥物組合物施用，該組合物含有式I的吡咯并三漆化合物或者其藥學上可接受的鹽或溶劑化物以及藥學上可接受的載體。該吡咯并三溱化合物可用于治療哺乳動物的超增殖性疾病。具體地說，預計該藥物組合物可抑制與HER1(EGF受體)和HER2相關的原發性和復發性實體瘤生長，尤其是那些明10顯依賴于HER1或HER2生長和擴散的腫瘤，包括例如膀胱癌、鱗狀細胞癌、頭癌、結腸直腸癌、食管癌、婦科癌癥(如卵巢癌)、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、外陰癌、皮月夫癌、腦癌、泌尿生殖道癌、淋巴系統的癌癥(如甲狀l泉癌)、胃癌、喉癌和肺癌。在另一實施方式中，式I的吡咯并三"秦化合物也可用于治療非癌性疾病，如銀屑病和類風濕性關節炎。優選的式I的吡咯并三溱化合物是式Ia的吡咯并三溱化合物。更優選地，式Ia的吡p各并三溱化合物以晶型N-2提供。因此，根據本發明的另一個方面，提供了式Ia的化合物或其藥學上可接受的鹽在制備用于在溫血動物如人類中產生抗增殖效應的藥物中的應用。優選地，該藥物包含式Ia的化合物的N-2、H-l或N-1(鹽酸鹽)晶型。更優選地，該藥物包含式Ia的化合物的N-2晶型。由于其抑制HER1、HER2和HER4激酶的能力，式I的吡咯并三嗪化合物可用于治療包括銀屑病和癌癥在內的增殖性疾病。已顯示HER1受體激酶在包括頭頸癌、前列腺癌、非小細胞肺癌、結腸直腸癌和乳腺癌在內的許多實體瘤中表達和激活。類似地，已顯示HER2受體激酶在乳腺癌、卵巢癌、肺癌和胃癌中過量表達。下調HER2受體豐度或抑制HER1受體信號傳導的單克隆抗體在臨床前和臨床研究中已顯示出抗肝瘤功效。因此，預計HER1和HER2激酶抑制劑在治療依賴于這兩種受體的任何一個進行信號傳導的肺瘤中將具有功效。此外，這些化合物在抑制依賴于HER受體雜二聚體信號傳導的腫瘤中將具有功效。預計這些化合物作為單一藥劑或與諸如紫杉醇、阿霉素和順鉑等其它化療劑組合(同時或依次施用)時具有功效。由于已顯示HER1和HER2信號傳導能調節血管生成因子如血管內皮生長因子(VEGF)和白介素8(IL8)的表達，因此預計這些化合物除抑制腫瘤細胞增殖和存活外還能抑制血管發生因此具有抗肺瘤功效。已顯示HER2受體參與類風濕性關節炎中滑液細胞的超增殖，并且可能促進該炎性疾病狀態的血管生成組分。因此，預計本發明所述的抑制劑具有治療類風濕性關節炎的功效。這些化合物抑制HER1的能力進一步促進了它們作為抗血管生成劑的用途。可參見在此引用的以下文獻和參考資料SchlessingerJ.,"Cellsignalingbyreceptortyrosinekinases",Cell103(2)，第2U-225頁(2000);Cobleigh，M.A.，Vogel,C.L.，Tripathy,D.，Robert,N.J.，Scholl，S.，Fehrenbacher，L.,Wolter，J.M.，Paton，V"Shak,S.，Lieberman,G.和Slamon,D.J.，"Multinationalstudyoftheefficacyandsafetyofhumanizedanti-HER2monoclonalantibodyinwomenwhohaveHER2隱overexpressingmetastaticbreastcancerthathasprogressedafterchemotherapyformetastaticdisease",J.ofClin.Oncol17(9)，第2639-2648頁(1999);Baselga，J.，Pfister，D.,Cooper,M.R.，Cohen,R.，Burtness，B.，Bos，M.，D'Andrea，G.,Seidman,A.，Norton,L.，Gunnett，K.，Falcey，J.,Anderson,V.,Waksal，H.和Mendelsohn,J.，"PhaseIstudiesofanti-epidermalgrowthfactorreceptorchimericantibodyC225aloneandincombinationwithcisplatin",J.Clin.Oncol.18(4)，第904-914頁(2000);Satoh，K.，Kikuchi，S.，Sekimata，M.，Kabuyama，Y.,Homma，M.K.禾口HommaY.，"InvolvementofErbB-2inrheumatoidsynovialcellgrowth",ArthritisRheum.44(2)，第260-265頁(2001)。本文之前定義的抗增殖治療可作為單一療法采用，或者除式I的吡咯并三嗪化合物外可涉及一種或多種其它物質和/或治療。這種聯合治療可通過同時、依次或單獨施用各治療組分而實現。式I的吡咯并三溱化合物也可與已知的4元癌劑和細胞毒劑以及包括放療在內的療法組合J吏用。如果^皮制成固定劑量，這種組合產品將采用下述劑量范圍內的式I的吡咯并三"秦化合物和批準劑量范圍內的其它藥物活性劑。當組合制劑不適用時，可先后使用式I的吡咯并三,化合物和已知的4元癌劑或細胞毒劑以及包括放療在內的療法。在醫學胂瘤學領域，使用不同治療形式的組合來治療各癌癥患者是常見的操作。在醫學胂瘤學中，除上面定義的抗增殖治療，這種聯合治療的其它內容有手術、放療或化療。如上所述，對式I的吡咯并三溱化合物的抗增殖功效感興趣。預計這種化合物可用于包括癌癥、銀屑病和類風濕性關節炎在內的廣泛的疾病狀態。更具體地說，式I的化合物可用于治療各種癌癥，其中包括但不限于以下這些-癌，包括膀胱癌、乳腺癌、結腸癌、腎癌、肝癌、包括小細胞肺癌在內的肺癌、食道癌、膽囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宮頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌、和包括鱗狀細胞癌在內的皮膚癌；-間質細胞來源的肝瘤，包括纖維肉瘤和4黃紋肌肉瘤；-中樞和外周神經系統的腫瘤，包括星形細胞瘤、成神經細胞瘤、膠質瘤和神經鞘瘤；和-其它肺瘤，包括黑色素瘤、精原細胞瘤、畸胎瘤和骨肉瘤。鑒于激酶在調節細胞增殖中的關鍵作用，抑制劑可作為可逆的細胞生長抑制劑，它可用于治療任何以細胞異常增殖為特征的疾病過程，例如良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病、神經纖維瘤病、肺纖維化、關節炎、銀屑病、腎小球腎炎、血管成形術或血管外科后的再狹窄、肥厚性瘢痕形成和炎性腸病。式I的吡咯并三溱化合物，包括式Ia的吡咯并三"秦化合物，尤其適用于治療具有酪氨酸激酶活性高發病率的胂瘤，如結腸、肺和胰腺腫瘤。通過施用含有式I的吡咯并三嗪化合物的組合物(或組合)可減緩哺乳動物宿主的肝瘤發展。式I的吡咯并三嗪化合物還可用于治療癌癥之外的與通過生長因子受體如HER1(EGF受體)、HER2或HER4進行的信號傳導途徑相關的疾病。含有活性成分的本發明的藥物組合物可采取適合口服的形式，如片劑、含片、錠劑、水性或油性懸劑、可分散的粉末或顆粒、乳劑、硬或軟膠囊、或者糖漿劑或酏劑。意在用于口服的組合物可按照藥物組合物制造領域已知的任何方法制造。所述藥物組合物可采取無菌可注射水性溶液的形式。可采用的可接受的載體和溶劑包括水、林格溶液(Ringer'ssolution)和等滲氯化鈉溶液。當將本發明的化合物施用至人類對象時，日劑量將通常由處方醫生決定，該劑量一般會根據隨患者的年齡、體重、性別和反應以及患者癥狀的嚴重性而改變。如果被制成固定劑量，這種組合產品將采用上述劑量范圍內的本發明的化合物和批準劑量范圍內的其它藥物活性劑。當組合制劑不適用時，可先后施用式I的化合物和已知的抗癌劑或細胞毒劑。本發明不限于施用順序；可在施用已知抗癌劑或細胞毒劑之前或之后施用式I的化合物。該化合物的劑量范圍約為0.05-200毫克/千克/天，優選地低于100毫克/千克/天，以單劑量或2-4次分份劑量施用。在一個實施方式中，提供了含有N-2、H-l或N-1(鹽酸鹽)晶型的化合物Ia以及藥學上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物。優選N-2晶型。含有N-2形式的藥物組合物可同時具有化學和/或物理穩定性，從而能被制備成具有可接受的均勻性和/或儲存穩定性的劑型。N-2形式不易于流失水分和轉化成其它形式。制備方法除非另有說明，所有溫度用攝氏度(t:)表示。制備型反相(RP)HPLC純化在C18反相(RP)柱YMCS5ODS柱上進行，用含0.1%TFA的90%甲醇水溶液作為緩沖液進行洗脫，并在220nm監測。進行分析型HPLC時采用0.2%磷酸代替TFA。所有合成化合物至少通過質子NMR和LC/MS表征。在反應期間，除非另有說明，用疏酸鎂(MgS04)干燥有機提取物。用以下縮寫來表示常用試劑。Et20:二乙醚、Na2S04:硫酸鈉HC1:鹽酸、NaOH:氫氧化鈉、NaCl:氯化鈉、Pd/C:碳載鈀、K2HP04:磷酸氫鉀、K2C03:碳酸鉀、NaHC03:碳酸氫鈉、MgS04:硫酸鎂、LiOH:氫氧化鋰、TMSC1:三甲基氯硅烷、H2S04:疏酸、RT:室溫、TFA:三氟醋酸、DMF:二甲基甲酰胺。其它縮寫有，h:小時、L:升、ml:毫升。可用各種方法制備晶型，例如其中包括從合適的溶劑結晶或重結晶、升華、從熔融物生長、從其它相固態轉化、從超臨界液體結晶、以及噴射噴霧(jetspraying)。使晶體形式從溶劑混合物中結晶或重結晶出來的技術包括，例如，蒸發溶劑、降低溶劑混合物的溫度、在分子和/或鹽的過飽和溶劑混合物中加入晶種、凍干溶劑混合物以及在溶劑混合物中加入抗溶劑(反萃溶劑)。可采用高通量結晶技術來制備包括多晶型物的晶型。藥物晶體(包括多晶型物)、制備方法以及藥物晶體的表征描述于Solid-stateChemistryofDrugs,S.R.Bym，R.R.Pfeiffer和J.G.Stowell，第二版，SSCI,WestLafayette,Indiana(1999)。就采用溶劑的結晶技術而言，一種或多種溶劑的選擇通常取決于一種或多種因素，如化合物的溶解度、結晶技術以及溶劑的蒸氣壓。可采用溶劑組合，例如，可將化合物溶于第一溶劑以提供溶液，然后加入抗溶劑以降低化合物在該溶液中的溶解度并使晶體形成。抗溶劑是化合物在其中具有低溶解度的溶劑。在一種制備晶體的方法中，將化合物懸浮于合適溶劑和/或在合適溶劑中攪拌以得到漿狀物，可加熱該漿狀物以促進溶解。術語"漿狀物"在文中表示化合物的飽和溶液，它可含有額外量的化合物以在給定溫度下提供化合物和溶劑的不均勻混合物。可在任何結晶混合物中加入晶種以促進晶體。可通過接種來控制特定多晶型物的生長或控制晶體產品的粒度分布。因此，所需晶種量的計算取決于可用晶種的大小以及所需平均產品粒度，如例如"ProgrammedCoolingofBatchCrystallizers"，J.W.Mullin和J.Nyvlt，ChemicalEngineeringScience，1971，26，369-377所述。通常，需要小尺寸的晶種來有效控制一批中晶體的生長。可通過篩選、研磨或微粉化大的晶體或通過溶液的微結晶來產生小尺寸的晶種。在研磨或微粉化晶體時需要小心以免所需晶型的結晶性發生任何改變(即變為無定型或其它多晶型物)。可在真空下過濾冷卻的結晶混合物，并可用合適的溶劑如冷的重結晶溶劑洗滌分離的固體，并可在氮氣吹掃下干燥以提供所需晶型。可通過諸如固態核磁共振、示差掃描量熱法、X射線粉末衍射等合適的光譜或分析技術分析分離的固體以確保形成優選的產物晶型。以最初用于結晶過程的化合物的重量計，所得晶型的量超過約70重量％的分離產物，優選超過90重量o/。的分離產物。需要的話可對產物進行共研磨或過篩以除去塊狀產物。可從制備化合物Ia的最終過程的反應介質中直接制備晶型。例如，這可通過在最終的工藝步驟中加入能使化合物Ia結晶的溶劑或溶劑混合物來實現。或者可通過蒸餾或溶劑添加技術來獲得晶型。用于此目的的合適溶劑包16溶劑和極性溶劑，包括質子極性溶劑如醇類和非質子極性溶劑如酮類。可通過諸如粉末X射線衍射(PXRD)或固態核磁共振波諳學的技術來確定樣品中是否存在一種以上的晶型和/或多晶型物。例如，在實驗測得的PXRD圖與模擬PXRD圖比較中存在額外的峰可能表明樣品中存在一種以上的晶型和/或多晶型物。可從單晶X射線數據計算模擬PXRD，參見Smith，D.K.，"AFORTRANProgramforCalculatingX-RayPowderDiffractionPatterns",Lawrence放射實驗室，Livermore,California,UCRL-7196(1963-4)。可采用各種技術表征本發明的化合物la的形式，其操作是本領域普通技術人員熟知的。可采用基于固定分析溫度下對某形式單個晶體晶胞測量的單晶X射線衍射表征和區分各種形式。關于晶胞的詳細描述提供于Stout和Jensen,X-RayStructureDetermination:APracticalGuide，Macmillan乂>司，NewYork(1968)，第3章，其內容通過引用納入本文。或者，可根據觀察到的原子份數坐標來表征原子在晶格內的空間關系的獨特排列。另一種表征晶體結構的方法是通過粉末X射線衍射分析，其中將衍射曲線與代表純粉末材料的模擬曲線進行比較，這兩種曲線都在相同分析溫度下獲得，且將待檢形式的測量值表征為一系列26值(通常為4個或更多)。可采用其它表征形式的方法，如固態核磁共振(NMR)、示差掃描量熱法、熱成像法以及大體檢測晶體或無定型形態學。這些參數也可組合應用以表征待檢形式。可通過在標準操作條件和溫度下進行的單晶X射線衍射測量來表征N-l、N-2和H-l晶型。可在例如25°C的樣品溫度下測量近似晶胞大小(單位埃(A))以及晶胞體積、空間群、分子/晶胞和晶體密度。可用下述一種或多種檢測方法分析各晶型。單晶X射線測量收集實施例1-3各自的單晶X射線數據。進行該分析時使用Bruker-NoniusCAD4系列衍射儀(BrukerAxs公司，MadisonWI);或采用CuKa輻射(人=1.5418A)的Bruker-NoniusKappaCCD2000系統。通過對實-險書亍射4義的25個大角度反射的設定進行的最小二乘分析獲得晶胞參數。采用恒溫CuKa輻射(X=1.5418A)和6-26變量掃描技術測量強度，且對其僅進行Lorentz極化因子校正。在掃描的半禾呈時間中在掃描的極端(extremes)收集背景計數(backgroundcounts)。用Collect程序套件(R.Hooft,NoniusB.V.(1998))中的HKL2000軟件包索引和處理測得的強度數據。當指示時，在數據采集時用Oxford低溫系統的令氣流^令卻晶4本。可通過直接方法解出結構并用具有最小局部修飾的SDP軟件包SDP(結構測定包，Enraf-Nonius，Bohemia,N.Y.)或結晶軟件包MAXUS(maXus解析和細4匕專欠j牛套裝S.Mackay,CJ.Gilmore，C.Edwards,M.Tremayne,N.Stewart和K.Shankland)基于觀察到的反射細化結構。maXus是一種從衍射數據解析和細化晶體結構的計算機程序。粉末X射線衍射用BrukerGADDS(通用面積檢測器衍射系統)手動x平臺測角儀獲得X射線粉末衍射(PXRD)數據。將粉末樣品置于直徑為1mm或更小的薄壁玻璃毛細管內；在數據收集期間旋轉該毛細管。樣品檢測器的間距為17cm。輻射為CuKa(X=1.5418A)。收集3<26<35°的數據，樣品曝光時間至少300秒。通過全矩陣最小二乘法細化衍生的原子參數(坐標和溫度因子)。細化中最小化的函數是2w(IF。HFcl)2。R被定義為2IIFHFII/2IF。1,而Rw=[Ew(IF。HFcl)2/Ew|F。|2]1/2，其中w是基于觀測強度誤差的適當加權函數。在細化的所有階段檢測差分圖。氫原子被引入具有各向同性溫度因子的理想位置，但沒有氫參數發生改變。融點通過熱臺顯微術測定晶體的融點。將晶體置于玻璃載玻片上，蓋上蓋玻片，并用固定在顯孩i鏡上的LinkhamLTS350熱臺(LinkhamScientificInstruments公司，Tadworth,英國)加熱。從室溫到300°C的加熱速率控制在1(TC/分。從視覺上觀察晶體以了解相轉變、雙折射變化、不透明度、融化和/或分解證據。示差掃描量熱法用TAInstrumentsQ1000型儀器對各晶型進行示差掃描量熱法(DSC)。每次分析時用100毫升/分鐘的超高純氮氣吹掃DSC小室/樣品室。用高純銦校準該儀器。從25-300。C的加熱速率為1(TC/分。將根據樣品重量標準化的熱流對測得的樣品溫度繪圖，該數據的單位為瓦特/克("W/g")。該圖中有指向下方的吸熱峰。評價外推的開始溫度的吸熱炫化峰(融點)。以下非限制性實施例例證了本發明。實施例1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>o，、、、、0，^[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯(Ia)A.制備2-,基氨基-3-鞋基-丙酸和2-二千基氨基-3-鞋基-丙酸在反應容器中加入固體鹽酸L-絲氨酸甲酯(l.OOO當量)。加入甲醇(2.85體積)并開始振蕩。歷時10分鐘加入三乙胺(l當量)同時維持溫度在約14-18°C。持續攪拌直到所有固體溶解。將混合物冷卻至10°C,歷時15分鐘加入苯甲醛(0.99當量)同時維持溫度在約11-15°C。反應在約8-12。C維持30分鐘。歷時2小時加入固傳L硼氫化鈉(4當量氫化物)同時維持溫度在約10-20°C。反應在約14-16。C維持30分鐘，然后通過HPLC分析。在另一燒瓶中加入甲醇(1.15體積)和7jc(1.72體積)。加入50重量％的氫氧化鈉水溶液(3.04當量)，并將所得溶液冷卻至15°C。歷時1小時在該混合物中加入Schiff堿，將內部溫度維持在16-22°C。反應在20°C維持30分鐘并通過HPLC分析甲基酯的消耗。加水(l.72體積)，然后加入12.2M的濃HC1水溶液(2.67當量)并將溫度維持在15-25°C以將pH調至9.5。將混合物過濾并用2份水(每份0.58體積)洗滌濾餅。將洗滌液與分液漏斗的濾液合并。合并的水性部分用乙酸乙酯洗滌兩次(每次5.75體積)。將該物質從分液漏斗轉移至燒瓶。將混合物從25。C冷卻至15°C，加入12.2M的濃HC1水溶液(0.89當量)直到混合物的pH達到6.5，同時將溫度維持在17-22°C。將混合物在5°C維持15-25小時，然后通過過濾漏斗收集固體。濾餅用兩份水(每份1.43體積)和兩份庚烷(每份1.43體積)洗滌。將濕的固體轉移到干燥盤中并于45。C干燥21小時，產率為61%。B.制備4-千基-5-氧代-嗎啉-3-羧酸在反應器中加入N-千基-L-絲氨酸(l.O當量)和THF(6.1體積)。將所得溶液冷卻至0土5。C并加入預冷的(0-5。C)碳酸鉀(3.0當量)的水(6.1體積)溶液。然后經加料漏斗加入氯乙酰氯(1.4當量)并維持內部溫度低于5°C。使該兩相反應混合物在0±5°C陳化約30分鐘。陳化后對混合物取樣進行HPLC分析。如果6%以上的面積存在剩余的N-千基-L-絲氨酸則再加入氯乙酰氯。一旦滿足反應完成的要求，加入50重量％氫氧化鈉并保持內部溫度為5-10。C直到pH保持>13.5不變。當HPLC分析顯示小于1%的面積(總和)為中間體時認為反應完成。將混合物加熱至25"C并加入庚烷(2.03體積)。將混合物迅速攪拌10分鐘，然后將各相分離。棄去上部有機相，再用庚烷(3.04體積)處理富含水的相。迅速攪拌10分鐘后使各相靜置并棄去上部的有機相。將富含水的部分冷卻至-5至0。C，加入37wt。/。鹽酸并維持物料溫度〈(TC直到pH<2。將所得漿狀物在-10至Ot保持至少4小時。用Whatman1號濾紙或等價物過濾該漿狀物并用預冷的(3-7。C)水(2x4.57體積)洗滌。將濕的濾餅在40-45t真空干燥。干燥后獲得1.475kg(84.9%，未校正)4-千基-5-氧代-嗎啉-3-羧酸。HPLC保留時間1.82分鐘(YMCS5ODS柱4.6x50mm,4分鐘含0.2%磷酸的10-90%甲醇水溶液梯度，4mL/分鐘，在220nm檢測)；手性HPLC保留時間7.94分鐘，e.e.100%,(ChiralcelOJ-R，150x4.6mm,5jiM，洗脫液MeOH:0.2%H3P04水溶液[50:50]，流速lmL/分鐘，210nm)。C.制備鹽酸[R-(4-千基-嗎啉-3-基)]-甲醇氮氣下在4-千基-5-氧代-嗎啉-3-羧酸(1當量)和無水THF(16體積)的混合物中邊攪拌邊加入三乙胺(1.19當量)。在此混合物中加入硼烷-甲基^6克醚復合物(7.45當量)，加入的速率維持反應混合物的溫度低于10°C。加料歷時1小時。使反應混合物在氮氣下溫和回流(65t)5.5小時。冷卻混合物并緩慢加入MeOH(1.39體積)(加料期間維持內部溫度低于25°C,加料歷時1小時)。在此所得混合物中加入水(4.18體積)并將混合物室溫攪拌過夜。將混合物真空濃縮并用2N氫氧化鈉水溶液(4.59當量)和水(1.74體積)稀釋。用乙酸乙酯(2x7體積)萃取該混合物。合并的乙酸乙酯萃取液用20%氯化鈉水溶液(4.18體積)洗滌。然后真空濃縮乙酸乙酯萃取液以得到粗制油狀物。用乙酸乙酯(10.2體積)和甲醇(0.52體積)稀釋該油狀物。在該溶液中逐滴加入三甲基氯硅烷(352mL，0.61體積)直到溶液的pH呈酸性。加入三甲基氯硅烷期間維持物料溫度低于20°C。在加料結束后歷時2小時將混合物冷卻至0。C，通過過濾收集沉淀，以92%的產率得到白色固體狀的鹽酸[R-(4-千基-嗎啉-3-基)]-甲醇(547g)。HPLC:樣品制備取20uL用1mL苛性堿處理15分鐘；6.19分鐘時AP=98%(YMCPackODS-A,3pm柱，6.0x150mm,20分鐘含0.2%磷酸的10-90%乙腈水溶液梯度，2mL/分鐘，在220nm和254mn監測)。LC/MS:M+H=208手性HPLC:RT=8.38min，e.e.100%，(ChiralcelOD-RH，150x4.6mm,洗脫液乙腈MeOH:20mm碳酸氫銨，pH7.8(15:15:70)，流速1mL/分鐘，210nM)D.制備3-((R)-鞋基甲基)-嗎啉-4-羧酸叔丁酯攪拌鹽酸[R-(4-千基-嗎啉-3-基)]-甲醇(1當量)，K3P04水溶液(4.6當量)和EtOAc的混合物直到觀察到澄清的兩相。分離EtOAc層并用新鮮的EtOAc萃取含水層。將合并的EtOAc層加入含20重量％Pd(OH)2/C(濕的，含50%水，以進料重量計為0.10當量)的燒瓶。加入二碳酸二叔丁酯(1.2摩爾)。將混合物在15psi下氫化4小時。通過HPLC發現氫化完全后通過硅藻土過濾混合物并將溶劑更換成環己烷。從環己烷(7-10體積)結晶產物得到白色固體狀的標題化合物(產率為82%)。^NMR(CDCl3)51.45(s,9H)，3.17(m,1H),3.47(dt，1H，J=3.1，11.4Hz)，3.56(dd,1H，J=3.5,11.9Hz)，3.7-4.0(m,6H);13CNMR(CDC13)S28.21，40.01，52.09，59.59，65.97，66.49，80.23，155.30;MS:218(M+H)+;doHwN04的計算值C,55.28;H，8.81;N,6.44。實測值C,55.45;H，8.87;N，6.34;Pd〈5ppm;HPLC保留時間5.28分鐘(YMCPackODS-A，3pm，4.6x50mm柱，10分鐘梯度，2.5mL/分鐘)；100%ee[手性HPLC保留時間13.6分鐘(ChiralcelOD-RH,5|im,4.6x150mm柱，20分鐘wasocratic法，lmL/分鐘)]。E.制備5-硝基-l-(3-氟千基)吲唑(16)在容器內裝入5-硝基吲唑(1當量)、碳酸銫(l.l當量)和DMF(5體積)。將混合物加熱至70-80°C并歷時75分鐘加入3-氟,基溴。通過HPLC檢測到反應完成(混合的異構體中的硝基"引唑〈2AP)，然后冷卻至20。C。將該鹽過濾并用DMF(2.7體積)洗滌濾餅。在15-21t:時通過加水(1.35-1.45體積)將產物結晶。將晶狀漿狀物放置4小時，濾出晶體并依次用2:1的DMF:水混合物(2.1體積)、水(2體積)和3:1的冷CAN:水混合物(1.5體積)洗滌。在低于45°C時干燥濕的濾餅直到L0D<1%，產率約為49%。力NMR(CDCl3)55.64(s，2H),6.87(d，1H，J=9.4Hz)，6.95(m,2H),7.30(m,1H)，7.42(d，1H,J=9.2Hz)，8.23(dd，1H,片10Hz和2Hz)，8.26(s，1H),8.72(d，1H，J=2Hz);MS:272(M+H)+;HPLC保留時間6.99分鐘(YMCODS-A3um,4.6><50mm柱，10分鐘梯度，2.5mL/分鐘)。化合物16F.制備l-(3-氟-千基)-lH-吲唑-5-基胺(化合物c)化合物C在氫化器中加入千基硝基吲唑(l當量)，加入THF(8體積)并在30-40°C下于15psi下氫化。將反應混合物放置約1小時(HPLC顯示s,m,3。/c0冷卻至25°C,濾出催化劑并用THF(0.9體積)洗滌混合物。將混合物轉移至另一容器，再用THF(0.4體積)沖洗，在常壓下蒸餾至所需體積(5.5體積)，并在47-60。C下歷時1小時加入庚烷(15體積)。歷時1.5小時將該漿狀物冷卻至18-23°C。將該漿狀物放置l小時，過濾，用THF/庚烷(1:4，10.4體積)洗滌并在低于45°C的烘箱內干燥(LOD<1%)，產率為84%。融點=130°C。HPLC保留時間9.09分鐘。G.制備4-[l-(3-氟-千基)-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][1,2,4]三嗪-6-羧酸乙酯(19)在三頸燒瓶內加入5-甲基-4-氧代-3,4-二氫-吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-羧酸乙酯(l.OO當量)和無水甲苯(15體積)。一次性加入POCl3(1.2當量)，然后緩慢加入DIEA(l.l當量)，其加入速率使溫度維持在低于30。C。歷時24小時將所得懸浮液加熱至111°C，懸浮液在80t時變得均勻。用2MMeNH2/THF(10pL反應混合物，20pLMeNH2/THF,溶于200pL乙腈)淬滅后通過HPLC監測反應。反應完成后將反應物冷卻至-2t并加入K2HP04(3.98當量)的水(15.6體積)溶液同時溫度維持在低于10°C。將溶液在-22t攪拌20分鐘。通過硅藻土墊過濾所得淺色懸浮液并分離各層。依次用23.5重量％K2HP04的H20(2.94體積)溶液和水(2.47體積)洗滌有機層。將溶液過濾并通過在22-58。C加熱來濃縮溶液；直到HPLC顯示曱苯相對4-氯-5-甲基吡咯并[2,l-f][1,2,4]三嗪-6-羧酸乙酯的比率為26-36%。將溶液從58°C冷卻至40-50°C。在所得懸浮液中加入l畫(3-氟畫千基)隱lH畫"引唑畫5-基胺(0.988當量)和DIEA(l.l當量)。將反應物加熱至70-80。C并維持在該溫度直到HPLC顯示反應完成。將溶液冷卻至55°C并加入異丙醇(15.5體積)。歷時1.8-2.2小時將混合物從55°C冷卻至22°C,然后過濾。用冷的異丙醇(2x5.5體積)洗滌濾餅并在5(TC以下真空干燥，得到乳白色晶體固體狀產物，產率為84%。^畫R(500MHz，CDC13)51.39(t,3H,J=7.15Hz),2.93(s，3H)，4.35(q，2H，J=7.15Hz),5.59(s,2H)，6.86(d，1H，J=9.34H),6.97(m，2H)，7.26(ddd,1H，J=6.04,8.24,14.29Hz),7.35(d,1H，J=8.80Hz)，7.42(brs，1H)，7.49(dd，1H,J=1.65，8.80Hz)，7.91(s，IH)，8.00(s，IH)，8.07(s，IH)，8.09(s，1H);MS:445(M+H)+;HPLC保留時間3.847分鐘(YMCS5ODS4.6x50mm柱，4分鐘梯度，3mL/分鐘)。H.制備4-[l-(3-氟-千基)-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][1,2,4]三溱-6-羧酸(20)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>在裝有機械攪拌器的燒瓶中加入4-[1-(3-氟-千基)-111-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-fj[l,2,4]三口秦-6-羧酸乙酯(19)(1當量)、THF(4體積)和MeOH(2.5^本積)。將懸浮液冷卻至5°(:并緩慢加入50%NaOH(5.3當量)同時維持溫度低于15°C。歷時4小時使所得溶液升溫至60°C，然后冷卻至25°C。在反應體系中加入THF(7體積)并緩慢加入濃HC1(9.95當量)至pH達到3同時維持溫度低于35。C。所得漿狀物在室溫下攪拌過夜，然后過濾。濾餅用H20(3x5體積)洗滌并在濾器上千燥1小時。濾餅用庚烷(lxl體積)洗滌并于5(TC真空干燥以得到灰白色固體狀產物，產率為88%。^NMR(500MHz5DMSO-J6)S2.86(s，3H),5.71(s，2H)，7.04(m,2H)，7.10(dd，m，J=1.65，8.80Hz)，7.17(d，1H，J=7.70Hz)，7.25(t,1H，J=7.70Hz)，7.37(dd，(1H，J=7.70，13.74Hz)，7.57(dd，1H，J=1.65，8.80Hz)，7.73(d,1H，J=8.80Hz),7.87(s，1H)，8.05(d,1H,J=8.35Hz)，8.16(s，1H)，8.83(s，1H)，12.47(s,1H);MS:417(M+H)+;HPLC保留時間3.350分鐘(YMCS5ODS4.6x50mm柱，4分鐘梯度，3mL/分鐘)。I.制備3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)曱基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2,l-f][l,2，4]三。秦-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基]-4-嗎啉羧酸，(3S)-l,l-二甲基乙基酯(21)200680028886.4說明書第25/31頁<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>在燒瓶中加入4-[1-(3-氟-芐基)-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三。秦-6-羧酸(20)(1當量)和甲苯(15體積)。通過共沸蒸餾除去殘余的水并分析上清液的水含量(KF:<200ppm7jc)。然后在約77°C時在燒瓶中加入3-鞋基甲基-嗎啉-4-羧酸叔丁酯(1.05當量)。在77-85。C之間加入三乙胺(1.2當量)和二苯基磷酰基疊氮化物(1.2當量)。在約87t加熱反應物直到通過HPLC發現反應完成。將反應物冷卻至25°C,用THF(15體積)稀釋并分別用10%K2CO3(10體積)、飽和NaCl(104本積)和水(10體積)洗滌。精致過濾(polishfilter)富含產物的有機層并在室壓下蒸餾直到坩鍋溫度HO(TC。加入甲苯將終體積調至15體積(如果必要的話)。將混合物冷卻至80°C，加水(l當量)并使產物結晶。歷時l小時將漿狀物冷卻至25t并保持17小時。通過過濾收集固體并用甲苯(2x2體積)沖洗濾餅。將固體空氣干燥過夜，然后在50。C真空干燥以得到產物，產率為82%。iHNMR(DMSO)S1.38(s,9H)，2.53(m，3H)，3.35-4.34(m，顧)，5.71(s，2H)，7.03-7.37(m，4H)，7.57(dd，1H，J=9Hz和1.7Hz)，7.70(d，1H，J=9Hz)，7.82(s,1H),8.08(d，1H，J=lHz),8.15(s，1H)，8.58(s，1H);MS:631(M+H)+;HPLC保留時間5.01分鐘(YMCODS-A3um，4.6x50mm柱，IO分鐘梯度，2.5mL/分鐘)。J.制備[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l，2,4]三。秦-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯(Ia)在燒瓶中加入3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)甲基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基]-4-嗎啉羧酸，(3S)-l,l-二甲基乙基酯(21)(1當量)，7體積水、1體積甲醇和濃HC1溶液(5.0當量)。將此漿狀物加熱至70。C并保持在該溫度直到通過HPLC發現反應完成。反應完成后在熱的反應混合物中加入水(3體積)，然后將混合物冷卻至45-55。C。將混合物過濾，然后用乙酸乙酯(2x6體積)萃取濾液。在分離的水相中加入乙酸乙酯(10體積)、甲醇(2-3體積)和BHA(2.7重量％)。用50%NaOH溶液將混合物的pH調至pH9-13。將各相分離。收集富含產物的有機層并歷時15-30分鐘在55-60。C的混合物中加入水(10體積)。加入水之后將混合物在55-60。C保持30分鐘，然后歷時1小時冷卻至19-25°C。將產物濾出并用乙酸乙酯(2x3體積)洗涂。加入乙酸乙酯(15體積)和BHA(2.7重量％)使濾餅重新形成漿狀物。在室壓下蒸餾所得漿狀物以除去水分。將混合物的體積調至8-10體積同時維持物料溫度在74-78°C。歷時1小時將混合物冷卻至19-25°C。通過過濾收集固體并用乙酸乙酯(2.2體積)洗滌濾餅。在45。C真空干燥固體以得到晶體固體(N-2形式)，產率為77%(HPLCAP99.2)。^NMR(DMSO)52.51(m，1H)，2.57(s，3H)，3.10-4.04(m，IOH)，4.35(m，2H)，5.71(s，2H)，7.03-7.13(m，3H)，7.37(m,1H)，7.59(m，1H)，7.71(m，1H)，7.83(s,2H)，8.07(s，1H)，8.15(s,1H)，8.61(s，1H)，9.47(s，1H)，9.87(s,1H);MS:531(M+H)+;HPLC保留時間4.55分鐘(YMCODS-A3um,4.6x50mm柱，10分鐘梯度，2.5mL/分鐘)。實施例2制備化合物Ia的一水合物晶型H-1在1升的燒瓶中加入3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)甲基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，l-f][l,2，4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]曱基]-4-嗎啉羧酸，(3S)-l，l-二甲基乙基酯(39.8g，63.2mmol)和甲醇(300mL)。歷時15分鐘在此懸浮液中加入濃HCl(26mL，316mmol)(最高溫度達到30°C)。將所得溶液在55t攪拌2小時。將反應物冷卻至25。C并用DM水(600mL)稀釋。所得溶液通過5號濾紙過濾以除去小顆粒。將溶液轉移至2升的分液漏斗。加入乙酸乙酯(500mL)并將分液漏斗的內容物攪拌5分鐘。使各相分離。收集富含產物的下層并如上所述再用乙酸乙酯(300mL)洗滌。將富含產物的下層加入2升的燒瓶。加入乙酸乙酯(30011110并攪拌(>11=1.3)。用50%NaOH溶液(約25mL)將混合物的pH調至pH10。將混合物轉移至2升的分液漏斗。使各相分離。收集富含產物的有機層。水層用乙酸乙酯(300mL)萃取。用MgS04干燥合并的富含產物的有機萃取液。過濾除去MgS04。將濾液真空濃縮成褐色固體，以得到31.8克化合物Ia。元素分析%計算值％C，59.17;%H，5.32;%N,20.45。%實測值％C，58.94;%H，5.31;%N，20.07。KF濕度3.18%(0.97摩爾)。制備化合物la的一水合物晶型H-l(另一種方法)在燒瓶中加入3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)曱基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2,l-f][l,2,4]三"秦-6-基]氨基]羰基]氧基]曱基]-4-嗎啉羧酸，(3S)-l,l-二甲基乙基酯(l當量)、7體積水、1體積甲醇以及濃HC1溶液(5.0當量)。將此漿狀物加熱至70。C并維持在該溫度直到通過HPLC顯示反應完成。反應完成后在熱的反應混合物中加入水(3體積)，將混合物冷卻至45-55t。將混合物過濾，然后用乙酸乙酯(2x6體積)萃取濾液。在分離的水相中加入乙酸乙酯(IO體積)和BHA(2.7重量％)。用25%NaOH溶液將混合物的pH調至pH9-13。將該混合物在19-25。C保持2小時。從混合物中濾出結晶產物，并依次用水(4體積)和乙酸乙酯(4體積)洗滌。將濕的濾餅空氣干燥后得到白色晶體固體狀的一水合物(HPLC99.2AP)。實施例3制備N-1晶型化合物Ib<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>化合物lb是化合物la的鹽酸鹽。在5升的燒瓶中加入3-[[[[[5-乙基-4-[[(l-(3-氟苯基)甲基)-lH-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基]-4-嗎啉羧酸，(3S)-l,l-二甲基乙基酯(330g，0.51mol)和甲醇(2.5L)。歷時15分鐘在此懸浮液中加入濃HCl(170mL，2.04mol)(最高溫度達到30°C)。所得溶液在55。C攪拌2小時。將反應物冷卻至25°C并用DM7jc(5L)稀釋。所得溶液通過5號濾紙過濾以除去小顆粒。將溶液轉移至10升的容器內。加入乙酸乙酯(5L)并攪拌5分鐘。使各相分離。收集富含產物的下層并如上所述再用乙酸乙酯(2L)洗滌。將富含產物的下層重新加入10升的反應器內。加入乙酸乙酯(2.5L)并攪拌(pH=1.3)。用50%NaOH溶液(約190mL)將混合物的pH調至pH9.5-10。使各相分離。收集富含產物的有機層。水層用乙酸乙酯(2.5L)萃取。過濾合并的富含產物的有機萃取液(通過5號濾紙)。將濾液真空濃縮成固體。潷去固體上的水。使用乙酸乙酯(2L)和甲醇(2L)將固體轉移至10升的反應器內。將所得懸浮液加熱至50°C以得到均勻溶液。歷時15分鐘緩慢加入濃HC1(41mL,0.49mol)。有固體從溶液中結晶出來并形成漿狀物。歷時l小時將該漿狀物冷卻至25°C。過濾收集該固體并用1:1乙酸乙酯甲醇(lx500mL)和乙酸乙酯(1x500mL)沖洗濾餅。將此結晶固體空氣干燥1小時，然后在45t真空干燥以得到204克化合物Ib，其為化合物Ia的鹽酸鹽。(HPLCAP99.6)。&NMR(DMSO)52.51(m,1H),2.57(s,3H),3.10-4.04(m，IOH)，4.35(m，2H),5.71(s，2H)，7.03-7.13(m，3H)，7.37(m,1H)，7.59(m，1H)，7.71(m，1H),7.83(s，2H)，8.07(s，1H)，8.15(s，1H),8.61(s，1H)，9.47(s，1H)，9.87(s,1H);MS:531(M+H)+;HPLC保留時間4.55分鐘(YMCODS畫A3um，4.6x50mm柱，10分4中梯度，2.5mL/分鐘)。實施例4[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-lH-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2,l-f][l,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯(Ia)的晶型通過X射線和其它技術表征實施例1-3中制備的晶型。將晶胞參數制成表2的表格。這些晶胞參數獲自單晶X射線結晶學分析。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>表3粉末X射線衍射圖的若干峰(26值)(CuKaX=1.5418A)<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>圖5顯示了化合物Ia的一水合物形式(H-l)的熱解重量損失。在溫度為115°C時H-1形式顯示出約3.4重量％的脫水重量損失。一水合物形式H-1脫水的理論重量損失為3.5重量％。權利要求1.化合物Ia的晶型其包含形式N-2。2.如權利要求1所述的晶型，其基本上由形式N-2形式組成。3.如權利要求2所述的晶型，其中所述N-2形式為基本純的形式。4.如權利要求l所述的晶型，其特征在于，其晶胞參數基本等于下述值:晶胞大小a=10.16Ab=10.46Ac=12.48Aa=96.4度(3=103.3度Y=93.7度空間群PI分子/晶胞2其中，在溫度約25°C時測量所述晶型。5.如權利要求l所述的晶型，其特征在于，在溫度約22t:時，粉末X射線衍射圖包含選擇下組的4個或更多個26值(CuKa^1.5418A):7.3、8.6、12.0、17.8、19.3、20.1和25.6。6.如權利要求l所述的晶型，其具有以下一個或多個特征a)基本等于下述值的晶胞參數晶胞大小a=10.16Ab=10.46Ac=12.48人a=96.4度(3=103.3度Y=93.7度空間群PI分子/晶胞2其中，在溫度約25°C時測量所述晶型；b)在溫度約22t時，粉末X射線衍射圖包含選擇下組的4個或更多個26值(CuKoa-1.5418A):7.3、8.6、12.0、17.8、19.3、20.1和25.6;和/或c)融點范圍為166-174°C。7.藥物組合物，其包含基本純的形式的如權利要求1所述的晶型，和藥學上可接受的載體或稀釋劑。8.治療增殖性疾病的方法，所述方法包括對有此需要的溫血動物施用治療有效量的如權利要求1所述的晶型。全文摘要本發明提供了吡咯并三嗪化合物[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯的晶型和含有至少一種晶型的藥物組合物，以及使用這種晶型治療增殖性疾病的方法和獲得這種晶型的方法。式(I)的化合物，包括[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-嗎啉基甲基酯，可用于抑制生長因子受體如HER1、HER2和HER4的酪氨酸激酶活性，從而可將它們用作抗增殖劑以治療癌癥和其它疾病。文檔編號A61P35/00GK101263143SQ200680028886公開日2008年9月10日申請日期2006年6月9日優先權日2005年6月10日發明者J·Z·古古塔斯,約翰·D·迪瑪科,貝瑞特·P·帕泰爾申請人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司