專利名稱：藏茵陳有效成分的提取方法
背景技術：
藏茵陳為藏醫用于治療各種肝炎、膽囊炎、肝損傷、肝纖維化、脂肪肝等疾病的習用藥材，屬龍膽科獐牙菜屬(Swertia)植物，具有清熱解毒，舒肝利膽、退黃的作用。研究資料表明，藏茵陳含有多種化學成分，主要有效成分為齊墩果酸，以及以獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龍膽苦苷為主的苦苷類、以當藥黃素為主的黃酮類、以芒果苷為主的黃酮苷類(楊慧玲、劉健全，9種“藏茵陳”原植物中的7種有效化學成分研究，中草藥，2005，36(8)，1233-1237)，上述成分具有治療肝中毒、清熱、消炎、保肝、降低轉氨酶、抗氧化、抗菌等多種活性，是藏茵陳治療肝膽系統疾病的主要藥效成分。藏茵陳單方或復方制劑的口服固體制劑、注射劑有的已經形成工業化產品，其療效已經被大量臨床證實。但不論針劑和片劑，均是對藏茵陳進行初步提取、分離，有效成分含量低。有的針劑采用水提醇沉或醇提水沉，除蛋白、纖維困難，久置發生沉淀(趙新先，中藥注射劑，1998，146-148)；有的針劑水醇提取后離心超濾，可以除掉顆粒雜質及大分子物質，但不能去掉小分子雜質，而中藥注射液要求有效部位需要達到70％以上，其應用受到限制；片劑則是用乙醇提取后不經分離，直接濃縮壓片，有效成分含量更低，每次需要服用的劑量較大。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種提取工藝簡單、有效成分含量高的藏茵陳有效成分的提取方法。
本發明解決上述技術問題采用的技術方案是藏茵陳有效成分的提取方法，其特征在于該提取方法如下第一步提取取藏茵陳切成段、或粉碎成粉末、或用全草，加水或乙醇提取，合并提取液；最佳提取溶劑為50％-80％乙醇；提取過程中溶劑用量為生藥量的3-15倍，最佳用量為生藥量的5-10倍；提取過程可采用加熱煎煮或回流提取，提取時間為30分鐘至5小時/次，提取次數為2-5次，最佳提取時間為1-2小時，提取次數為2-3次；也可采用超聲提取，可加水或乙醇提取，最佳提取溶劑為50％-80％乙醇；溶劑用量為生藥量的3-15倍，提取次數為1-5次，提取時間為5分鐘至4小時/次，最佳溶劑用量為生藥量的5-10倍，提取次數為2-3次，提取時間為15分鐘至2小時/次，超聲頻率為20-200kHz；第二步除雜提取液經放置、過濾或離心后取濾液或上清液備用；提取液可經放置12小時以上取上清液、或不經放置直接取提取液經加有濾布、濾紙或綢布、電力紡的板框壓濾，也可經1000-20000rpm/min離心，離心過程可加紙漿、硅藻土作為離心濾層，或采用高速離心機直接離心；第三步濃縮提取液濃縮0.5g-3g/ml；濃縮可采用減壓濃縮罐、三效或雙效濃縮器、升膜減壓濃縮，水提取液可直接濃縮到0.5g-3g/ml，乙醇提取液需要濃縮到無醇味再加水至0.5g-3g/ml，最佳濃度為1-2g/ml；第四步初步分離冷藏或室溫放置或離心、過濾，取清液備用；濃縮液放置12小時以上使其自然沉淀澄清，取上清液；可加澄清劑如果汁101澄清劑、ZTC澄清劑、甲殼素、明膠、硅藻土的其中一種，用量為0.5-10％，放置后經1000-20000rpm/min離心或過濾；第五步吸附分離取上清液，加到已經處理好的大孔吸附樹脂柱上，用水及30％-80％乙醇洗脫，分別收集洗脫液，大孔吸附樹脂柱可采用D101、D201、AB8、LK002的其中一種或幾種合用，上樣，經水充分洗滌后，用30％-80％乙醇洗脫；第六步濃縮、干燥、粉碎洗脫液經減壓濃縮或常壓濃縮成清膏，密度50℃熱測1.20-1.36，減壓干燥或微波減壓干燥，粉碎；或濃縮至密度為50℃熱測1.05-1.20的濃縮液，噴霧干燥；本提取物可作為最終產品，含黃酮、苦苷類物質30％-50％；第七步進一步精制，得含黃酮、苦苷類物質60％-95％的提取物；提取物粉末按重量/體積比的3-10倍加熱水溶解，趁熱過濾，濾液濃縮至濃漿狀，放至室溫，加體積比2-5倍的丙酮沉淀，過濾，沉淀用丙酮洗滌，抽干，常壓干燥或減壓干燥，粉碎；也可按以下方法精制提取物粉末按重量/體積比的3-10倍加熱水溶解，趁熱過濾，濾液濃縮至濃漿狀，放至室溫，加體積2-5倍的乙酸乙酯萃取4-5次，合并乙酸乙酯層，蒸去乙酸乙酯，常壓干燥或減壓干燥，粉碎；還可按以下方法精制提取物粉末按重量/體積比的3-10倍加乙醇-乙酸乙酯[1∶(0.5-2)]溶解，過濾，濾液濃縮至濃漿狀，放至室溫，過濾，沉淀用乙醇-乙酸乙酯[1∶(0.5-2)]洗滌，抽干，常壓干燥或減壓干燥，粉碎。
本發明取得的技術進步是本發明提取方法采用提取溶劑水、乙醇提取，乙醇可回收利用，不污染環境；超聲輔助提取可縮短提取時間，提高提取效率，減少能源消耗；采用離心、大孔樹脂吸附等處理可以保留有效成分，最大限度除去雜質，將中藥作精、作細，減少服用劑量，可以方便的處理成多種劑型，包括注射劑(含靜脈給藥)、口服劑、外用制劑、軟膠囊制劑等，也可以作為復方制劑的原料。由于純度高，單個制劑可以容納更多的生藥，提高服用生藥量，發揮最好的治療效果。同時由于除雜比較徹底，也可以減少副作用，降低不良反應發生率。
具體實施例方式
實施例1取藏茵陳10kg切成段，加70％乙醇回流提取三次，每次1.5小時，每次加70％乙醇60L。合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至無醇味，加水至10L，攪拌均勻，放置15小時，取上清液，加到大孔吸附樹脂D101柱(15cm×100cm)上，用水60L洗滌，再經30％乙醇洗滌，然后用70％乙醇40L洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，真空70℃干燥，粉碎，即得成品。
實施例2取藏茵陳10kg粉碎，加30％乙醇超聲，每次0.5小時，每次加30％乙醇100L。超聲頻率為33kHz，功率為350W。合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至無醇味，加水至5L，攪拌均勻，攪拌下加5％101果汁澄清劑1000ml，放置3小時，經5000rpm/min離心30分鐘，上清液再經15000rpm/min離心，取上清液加到大孔吸附樹脂D201柱(15cm×100cm)上，用水15L洗滌，再經40％乙醇洗滌，然后用80％乙醇10L洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，真空70℃干燥，粉碎，即得成品。
實施例3取藏茵陳10kg，加水浸泡30分鐘，煎煮提取3次，每次2小時，每次分別加水100L、80L、80L。合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至無醇味，加水至10L，攪拌均勻，取濾紙漿，使之均勻鋪在離心過濾機濾布上，取藥液過濾，取濾清液加到大孔吸附樹脂Lk002柱(30cm×100cm)上，用水200L洗滌，再經70％乙醇50L洗脫，收集洗脫液，用雙效濃縮器濃縮，真空60℃干燥，粉碎，即得成品。
實施例4取藏茵陳10kg，加50％乙醇回流提取4次，每次1小時，每次分別加50％乙醇80L。合并提取液，過濾，濾液減壓濃縮至無醇味，加水至8L，攪拌均勻，放置24小時，取上清液加到大孔吸附樹脂AB-8柱(25cm×80cm)上，用水50L洗滌，再經70％乙醇20L洗脫，收集洗脫液，用雙效濃縮器濃縮，真空60℃干燥，粉碎。取提取物粉末加8倍乙醇-乙酸乙酯[1∶0.5]溶解，過濾，濾液濃縮至濃漿狀，低溫10℃放置10小時，過濾，沉淀用乙醇-乙酸乙酯[1∶0.5]洗滌，抽干，減壓70℃干燥，粉碎，即得成品。
實施例5取藏茵陳10kg，粉碎，加60％乙醇超聲提取4次，每次20分鐘，每次分別加60％乙醇60L。超聲頻率為20kHz，超聲功率為300w。合并提取液，放置18小時，取上清液減壓濃縮至無醇味，加水至6L，攪拌均勻，加5％甲殼素1600ml，攪勻，放置6小時，取上清液經9000rpm/min離心25分鐘，取上清液加到大孔吸附樹脂D101柱(20cm×80cm)上，用水100L洗滌，再經80％乙醇20L洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，真空60℃干燥，粉碎。取提取物粉末加熱水4倍量溶解，趁熱過濾，濾液濃縮至濃漿狀，放至室溫，加4倍丙酮沉淀，過濾，沉淀用丙酮洗滌，抽干，減壓60℃干燥，粉碎，即得成品。
權利要求
1.藏茵陳有效成分的提取方法，其特征在于該提取方法如下第一步提取取藏茵陳切成段、或粉碎成粉末、或用全草，加水或乙醇提取，合并提取液；最佳提取溶劑為50％-80％乙醇；提取過程中溶劑用量為生藥量的3-15倍，最佳用量為生藥量的5-10倍；提取過程可采用加熱煎煮或回流提取，提取時間為30分鐘至5小時/次，提取次數為2-5次，最佳提取時間為1-2小時，提取次數為2-3次；也可采用超聲提取，可加水或乙醇提取，最佳提取溶劑為50％-80％乙醇；溶劑用量為生藥量的3-15倍，提取次數為1-5次，提取時間為5分鐘至4小時/次，最佳溶劑用量為生藥量的5-10倍，提取次數為2-3次，提取時間為15分鐘至2小時/次，超聲頻率為20-200kHz；第二步除雜提取液經放置、過濾或離心后取濾液或上清液備用；提取液可經放置12小時以上取上清液、或不經放置直接取提取液經加有濾布、濾紙或綢布、電力紡的板框壓濾，也可經1000-20000rpm/min離心，離心過程可加紙漿、硅藻土作為離心濾層，或采用高速離心機直接離心；第三步濃縮提取液濃縮0.5g-3g/ml；濃縮可采用減壓濃縮罐、三效或雙效濃縮器、升膜減壓濃縮，水提取液可直接濃縮到0.5g-3g/ml，乙醇提取液需要濃縮到無醇味再加水至0.5g-3g/ml，最佳濃度為1-2g/ml；第四步初步分離冷藏或室溫放置或離心、過濾，取清液備用；濃縮液放置12小時以上使其自然沉淀澄清，取上清液；可加澄清劑如果汁101澄清劑、ZTC澄清劑、甲殼素、明膠、硅藻土的其中一種，用量為0.5-10％，放置后經1000-20000rpm/min離心或過濾；第五步吸附分離取上清液，加到已經處理好的大孔吸附樹脂柱上，用水及30％-80％乙醇洗脫，分別收集洗脫液，大孔吸附樹脂柱可采用D101、D201、AB8、LK002的其中一種或幾種合用，上樣，經水充分洗滌后，用30％-80％乙醇洗脫；第六步濃縮、干燥、粉碎洗脫液經減壓濃縮或常壓濃縮成清膏，密度50℃熱測1.20-1.36，減壓干燥或微波減壓干燥，粉碎；或濃縮至密度為50℃熱測1.05-1.20的濃縮液，噴霧干燥；本提取物可作為最終產品，含黃酮、苦苷類物質30％-50％；第七步進一步精制，得含黃酮、苦苷類物質60％-95％的提取物；提取物粉末按重量/體積比的3-10倍加熱水溶解，趁熱過濾，濾液濃縮至濃漿狀，放至室溫，加體積比2-5倍的丙酮沉淀，過濾，沉淀用丙酮洗滌，抽干，常壓干燥或減壓干燥，粉碎；也可按以下方法精制提取物粉末按重量/體積比的3-10倍加熱水溶解，趁熱過濾，濾液濃縮至濃漿狀，放至室溫，加體積2-5倍的乙酸乙酯萃取4-5次，合并乙酸乙酯層，蒸去乙酸乙酯，常壓干燥或減壓干燥，粉碎；還可按以下方法精制提取物粉末按重量/體積比的3-10倍加乙醇-乙酸乙酯[1∶(0.5-2)]溶解，過濾，濾液濃縮至濃漿狀，放至室溫，過濾，沉淀用乙醇-乙酸乙酯[1∶(0.5-2)]洗滌，抽干，常壓干燥或減壓干燥，粉碎。
全文摘要
本發明公開了一種藏茵陳有效成分的提取方法，它由提取、除雜、濃縮、初步分離、吸附分離、濃縮、干燥、粉碎、進一步精制等工藝制備而成，本提取方法采用提取溶劑水、乙醇提取，乙醇可回收利用，不污染環境；超聲輔助提取可縮短提取時間，提高提取效率，減少能源消耗；采用離心、大孔樹脂吸附等處理可以保留有效成分，最大限度除去雜質，將中藥作精、作細，減少服用劑量，可以方便的處理成多種劑型，包括注射劑(含靜脈給藥)、口服劑、外用制劑等，也可以作為復方制劑的原料。由于純度高，單個制劑可以容納更多的生藥，提高服用生藥量，發揮最好的治療效果。同時由于除雜比較徹底，也可以減少副作用，降低不良反應發生率。
文檔編號A61P1/00GK101053589SQ20071006183
公開日2007年10月17日 申請日期2007年4月30日 優先權日2007年4月30日
發明者王智森 申請人:王智森