專利名稱：：苦參堿丹參酚酸b復鹽和苦參素丹參酚酸b復鹽及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
：本發明涉及用于肝病和心腦血管疾病治療的藥物化合物，具體是苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，及其單鈉復鹽"苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽"和"苦參素丹參酚酸B鈉復鹽"。
背景技術：
：丹參酚酸B，是丹參、新疆鼠尾草等鼠尾草屬植物的主要有效成分之一，分子中有兩個含有羧基的丹參素片斷。研究表明丹參酚酸B在抗缺氧、抗心腦缺血、治療冠心病、肝損傷、肝纖維化等方面有很好的藥理作用，目前，作為中藥2類新藥(重慶藥友，主要含有丹參酚酸B的丹參酚酸)臨床在治療治療肝纖維化方面有廣泛的應用。但是丹參酚酸B分子由于親水性較強，不易通過腸道上皮細胞脂質膜，因此不易經過跨上皮細胞途徑吸收，加之其分子量較大，不易隨水分通過細胞旁路吸收，導致生物利用度比較低。同時，由于分子中具有多個鄰二酚羥基和羧基共軛，使得化合物很不穩定，容易發生氧化和聚合反應。苦參堿和苦參素是來源于苦參和苦豆子等豆科植物的單體化合物，苦參素即氧化苦參堿，苦豆子種子中含有大于0.8%的苦參堿和大于0.8%的氧化苦參堿，苦豆子莖葉中含有大于0.2%的苦參堿和大于0.2%的氧化苦參堿，是最合適的提取制備苦參堿的原料，并且由于使用的材料為地上部位，大面積的推廣種植還可維系新疆沙漠地區的生態平衡。苦參堿和苦參素均具有抗炎、抗病毒、免疫抑制、抗腫瘤、心腦血管性疾病等生物活性，現代藥理學研究表明，苦參堿和苦參素對于病毒性肝炎具有明確的療效，能抑制肝炎病毒的復制，同時還具有抗肝纖維化的作用。但兩個化合物的物理性質很不穩定，具有很強的吸濕性，同時苦參堿具有易氧化性。本發明用丹參酚酸B與苦參堿和苦參素反應，制備工藝簡單，獲得了質量可控的新化合物苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，解決了分子的溶解性和穩定性。同時，通過制成鈉復鹽，使得化合物具有較好的油水分配比，解決了水溶性和生物吸收的問題。本發明同時公開了復鹽中"苦參堿丹參酚酸B"或"苦參素丹參酚酸B"的摩爾比，并發現形成復鹽后，即可改善丹參酚酸B、苦參堿和苦參堿的穩定性，又可改善苦參素的吸濕性，從而得到穩定的化合物。本發明通過研究，同時公開了苦參堿丹參酚酸B復鹽苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，以及它們的鈉復鹽的結構特征，明確標示了成鹽位點，發現丹參酚酸B兩個羧基的酸性相似，在基本上每一個羧基都可以在另一個未解離的情況下，很容易解離；而且，由于兩個羧基的酸性都很強，可以同時解離。同時，苦參堿有兩個N原子都可作為成鹽位點，但酰基N的堿性明顯較弱，所以，在不同比例的復鹽中，成鹽位點不同。苦參素有兩個N原子中，因其中一個N原子形成N氧化物難以成鹽，所以，一般只有酰基N為成鹽位點。本發明通過研究，同時公開了含有以上化合物的藥用組合物，其特征在于為口服制劑或注射制劑。研究過程中，充分考查了以上化合物的物理化學性質，并利用復鹽的這些特殊物理化學性質，創造性地解決了其口服制劑的有效吸收和注射制劑的水溶性問題。本發明藥理學研究發現形成復鹽后，苦參堿或苦參素與丹參酚酸B具有協同增效作用，用藥劑量明顯減少，發現苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，以及它們的鈉復鹽，對四氯化碳(CCU)、D-半乳糖胺(D-GalN)、硫代乙酰胺(Thioacetamide,TAA)所致的化學性肝損傷和慢性酒精性肝損傷具有顯著的保護作用。同時發現，苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，以及它們的鈉復鹽具有顯著的改善腦缺血和心肌缺血的作用。
發明內容本發明的目的是提供一種化合物，所述化合物是苦參堿丹參酚酸B復鹽或苦參素丹參酚酸B復鹽，或它們的單鈉鹽。本發明的另一個目的是提供含有上述化合物的藥物組合物。本發明的再一個目的是提供制備上述化合物的方法。本發明還包括本發明的化合物在制備治療肝病和心腦血管疾病藥物中的應用。本發明提供如下的化學結構的化合物1、苦參堿丹參酚酸B復鹽，化學名稱為4-{2-[1-羧基-2-(3,4-二羥基苯基)-乙氧羧基]-乙烯基}-2-(3，4-二羥基苯基)-7-羥基-2,3-二羥基-苯并呋喃-3-羧酸1-羧基-2-(3,4-二羥基苯基)-乙基酯苦參堿鹽，結構式為,NH+n=l,2苦參素丹參酚酸B復鹽，化學名稱為4-{2-[1-羧基-2-(3,4-二羥基苯基)-乙氧羧基]-乙烯基}-2-(3，4-二羥基苯基)-7-羥基-2,3-二羥基-苯并呋喃-3-羧酸1-羧基-2-(3,4-二羥基苯基)-乙基酯苦參素(或氧化苦參堿)鹽，結構式為(6)nn=l,2苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽，化學名稱為4-{2-[1-羧基-2-(3,4-二羥基苯萄-乙氧羧基]-乙烯基}-2-(3,4-二羥基苯基)-7-羥基-2,3-二羥基-苯并呋喃-3-羧酸1-羧基-2-(3,4-二羥基苯基)-乙基酯苦參堿鈉復鹽，結構式為HO.Na+苦參素丹參酚酸B鈉復鹽，化學名稱為4-{2-[1-羧基-2-(3,4-二羥基苯基)-乙氧羧基]-乙烯基}-2-(3,4-二羥基苯基)-7-羥基-2，3-二羥基-苯并呋喃-3-羧酸1-羧基-2-(3,4-二羥基苯基)-乙基酯苦參素(或氧化苦參堿)鈉復鹽，結構式為.Na+2、上述1和2所述的化合物，其特征在于"苦參堿丹參酚酸B"或丹參酚酸B"摩爾比為1:1或2:1。結構式為1)苦參堿丹參酚酸B復鹽(2:1)2X2)苦參堿丹參酚酸B復鹽(1:1)大量的A結構和少量的B結構4)苦參素丹參酚酸B復鹽(1:1)8結構A:OH3)苦參素丹參酚酸B復鹽(2:1)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>以上化合物的制備方法如下1、將苦參堿、苦參素，或它們的混合物溶解在水或有機溶劑中，丹參酚酸B溶解在有機溶劑中。按二者摩爾比l:l比例混合、攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的丙酮或乙醇中，析出結晶性粉末，即為苦參堿丹參酚酸B復鹽、苦參素丹參酚酸B復鹽，或它們的混合物。也可進一步經水-乙醇或丙酮重結晶精制。如以上所述的制備方法，有機溶劑選自乙醇、丙酮、乙酸乙酯、或甲醇，以及它們的任意濃度的水溶液等，既能溶解丹參酚酸B又能溶解苦參堿或苦參素的有機溶劑中的一種或其混合物。2、將苦參堿、苦參素，或它們的混合物溶解在水或有機溶劑中，丹參酚酸B溶解在有機溶劑中。按"苦參堿丹參酚酸B"或"苦參素丹參酚酸B"摩爾比2:1比例混合、攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的丙酮或乙醇中，析出結晶性粉末，即為苦參堿丹參酚酸B復鹽、苦參素丹參酚酸B復鹽，或它們的混合物。可進一步經水-乙醇或丙酮重結晶精制。如以上所述的制備方法有機溶劑選自乙醇、丙酮、乙酸乙酯、或甲醇，以及它們的任意濃度的水溶液等，既能溶解丹參酚酸B又能溶解苦參堿或苦參素的有機溶劑中的一種或其混合物。3、將苦參堿、苦參素，或它們的混合物溶解在水或稀有機溶劑中，按二者摩爾比l:l比例，邊攪拌邊加入丹參酚酸B粉末，攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的丙酮或乙醇中，析出結晶性粉末，即為苦參堿丹參酚酸B復鹽、苦參素丹參酚酸B復鹽，或它們的混合物。可進一步經水-乙醇或水-丙酮重結晶精制。如以上所述的制備方法，有機溶劑選自乙醇、丙酮、乙酸乙酯、或甲醇，以及它們的任意濃度的水溶液等，既能溶解丹參酚酸B又能溶解苦參堿或苦參素的有機溶劑中的一種或其混合物。4、將苦參堿、苦參素，或它們的混合物溶解在水或稀有機溶劑中，按"苦參堿丹參酚酸B"或"苦參素丹參酚酸B"摩爾比2:1比例，邊攪拌邊加入丹參酚酸B粉末，攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的丙酮或乙醇中，析出結晶性粉末，即為苦參堿丹參酚酸B復鹽、苦參素丹參酚酸B復鹽，或它們的混合物。可進一步經水-乙醇或水-丙酮重結晶精制。如以上所述的制備方法，有機溶劑選自乙醇、丙酮、乙酸乙酯、或甲醇，以及它們的任意濃度的水溶液等，既能溶解丹參酚酸B又能溶解苦參堿或苦參素的有機溶劑中的一種或其混合物。5、將如上述制備方法1所述方法制備的摩爾比1:1的苦參堿丹參酚酸B復鹽、苦參素丹參酚酸B復鹽，或它們的混合物，溶解于水或稀有機溶劑中，加入等摩爾比的碳酸氫鈉或1/2摩爾比的碳酸鈉，或用NaOH調節pH值大于5，攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的丙酮或乙醇中，析出結晶性粉末，即為苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽、苦參素丹參酚酸B鈉復鹽，或它們的混合物。可進一步經水-乙醇或水-丙酮重結晶精制。如以上所述的制備方法，有機溶劑選自乙醇、丙酮、乙酸乙酯、或甲醇，以及它們的任意濃度的水溶液等，既能溶解丹參酚酸B又能溶解苦參堿或苦參素的有機溶劑中的一種或其混合物。本發明同時明確了復鹽中"苦參堿丹參酚酸B"或"苦參素丹參酚酸B"的摩爾比，并發現形成復鹽后，即可改善丹參酚酸B、苦參堿和苦參堿的穩定性，又可改善苦參素的吸濕性，從而得到穩定的化合物。且由于所成苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，以及它們的鈉復鹽，具有唯一的、確定的結構，易于作為藥品控制其質量。本發明還提供以苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，以及它們的鈉復鹽作為藥物活性成分的藥物組合物。優選苦參堿丹參酚酸B復鹽、苦參素丹參酚酸B復鹽及其混合物作為藥物活性成分的藥物組合物。此活性成分及其組合物可以根據公知技術制成任何一種藥劑學上所說劑型如片劑、膠囊劑、口服液、合劑、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、溶液劑、注射劑、粉針劑、凍干粉針劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、氣霧劑、滴劑或貼劑。注射劑型包括大容量注射液、水針劑或粉針劑。本發明提供的丹參酚酸B與苦參堿或苦參素的成鹽產物，具有合理的成鹽比例和位點，適宜制備治療肝病的藥物。特別是經過優選的苦參堿丹參酚酸B復鹽、苦參素丹參酚酸B復鹽及其混合物具有更好的療效。藥效學研究同時發現，苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，以及它們的鈉復鹽具有顯著的改善腦缺血和心肌缺血的作用。本發明發現，使用單一的苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，以及它們的鈉復鹽，可以得到比單獨使用丹參酚酸B、苦參堿或苦參素更為優良的治療作用，用藥劑量明顯減少，這可能與成鹽后兩者產生的協同增效治療作用有關。結果發現苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，以及它們的鈉復鹽，對四氯化碳(CC14)、D-半乳糖胺(D-GalN)、硫代乙酰胺(Thioacetamide，TAA)所致的化學性肝損傷和慢性酒精性肝損傷具有顯著的保護作用。并且由于成鹽，降低了丹參酚酸B、苦參堿或苦參素在單獨使用時的副作用。將其用于制備治療肝病的藥物，具有更好的治療作用、方便性和順應性。以下通過實驗數據說明本發明的有益效果一、對小鼠化學性肝損傷的保護作用結果發現苦參堿丹參酚酸B復鹽(2:1)(K-I)、苦參素丹參酚酸B復鹽(2:1)(K-n)、苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽(K-III)、苦參素丹參酚酸B鈉復鹽(K-IV)，連續灌胃7天(20jumol/kg)，均能抑制CCU和D-GalN引起小鼠急性肝損傷所致的血清丙氨酸氨基轉移酶(alanineaminotransferaseALT)和谷氨酸氨基轉移酶(aspartateaminotransferaseAST)的升高，而同樣劑量的丹參酚酸B(K-V)、苦參堿(K-VI)或苦參素(K-VII)(20/miol/kg)均表現不出保護肝損傷活性。表l對CCU所致小鼠化學性肝損傷ALT、AST的影響SiUi動物數(只)給藥七天后(/miol/kg)ALT(讓ol/L)AST(mmol/L)正常對照組—一2065.82±25.10108.94±29.51模型對照組—20288.96±25.63##258.57土21.28，K-I2020198.80士9.62"176.82士32.8廣K-n2020215.57土19.38"198.45土20.53"K-m2020219.64士29.52"184.51士25.35"K-IV2020224.01土26.89"210.29士26.38"K-V4020225.70±20.25**220.14土19.48"K-V2020246.87±34.21*234.85土17.89"1K-VI4020241.20±14.47**219.66土21.6(TK-VI2020266.87士20.25'230.56±27.89*K-VII4020232,54±15.75**211.24土25.47"K-VII2020253,卯±24.38*268.01±18,94陽性藥160(mg/kg)20216.58土11.52"200.51土9.9(T與正常對照組比較，8、<0.01;與模型對照組比較》〈0.05,"p〈0.01可以得出結論使用單一的苦參堿丹參鼢酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽，以及它們的鈉復鹽，可以得到比單獨使用丹參酚酸B(K-V)、苦參堿(K-VI)或苦參素(K-VII)更為優良的治療作用，使得用藥劑量明顯減少，這可能與成鹽后兩者產生的協同增效治療作用有關。二、苦參堿丹參酚酸B復鹽對CCU所致大鼠急性肝損傷的保護作用表2對CCl4所致大鼠化學性肝損傷ALT、AST的影響組別劑量動物數給藥七天后(/miol/kg)(只)ALT(mmol/L)AST(mmol/L)臟器系數(％)正常對照組—隱2056.20±9.3867.78士13.654.69±0.33模型對照組—20203.71士46.32^116.56±8,26**5.31士0.67'苦參堿丹參8020106.32土40.69"94.52±13.27**5.19±1.21酚酸B復鹽4020119.50土51.3廣108.68±21.516.58士0.87'(K-I)2020103,63土45,68"107.10±45,686.25土0.45'陽性藥160(mg/kg)20106.42士19.6(T109.80士9.56'5.78±0.63與正常對照組比較，SV<0.01;與模型對照組比較>〈0.05,P<0.01實驗結果(見表2)發現模型對照組與正常對照組比較ALT、AST值顯著升高且郎p〈0.01，提示造模成功。苦參堿丹參酚酸B復鹽各給藥組與模型組比較，ALT值皆顯著降低(**p〈0.01)，AST值也有所降低，其中高劑量組與模型組比較林p〈0.01。由此可推斷，苦參堿丹參酚酸B復鹽對CC14所致大鼠化學性肝損傷有一定的保護作用。病理形態學結果空白對照組肝小葉結構正常，肝細胞索內未見水腫，肝細胞核及胞漿均未見異常；模型對照組肝小葉結構正常，肝細胞體積增大，胞漿染色淡呈水樣變性，亦可見圓形空泡變性；苦參堿丹參酚酸B復鹽高劑量組肝小葉結構正常，肝細胞胞漿內偶見圓形空泡；中、低劑量組肝細胞水樣變性或空泡變性，呈量效關系。陽性對照組肝小葉結構正常，肝細胞亦可見水樣變性。三、苦參堿丹參酚酸B復鹽對CCU所致小鼠化學性肝損傷的保護作用結果發現苦參堿丹參酚酸B復鹽連續灌胃7天(80mg/kg、40mg/kg、20mg/kg)，能抑制CCU和D-GalN引起小鼠急性肝損傷所致的血清丙氨酸氨基轉移酶(alanineaminotransferaseALT)禾n谷氨酸氨基轉移酶(aspartateaminotransferaseAST)的升高。表3對CCU所致小鼠化學性肝損傷ALT、AST的影響組別劑量(/xmol/kg)動物數(只)給藥七天后ALT(mmol/L)AST(mmol/L)正常對照組——2081.87±20.85146.21±24,50模型對照組—20308.99±12.03##265.17±10.38##苦參堿丹參酚8020232.61±23.35**198.43±18.03**酸B復鹽4020254.25±18,92**219.67±17.66"(K隱I)2020263.61±10.15"226息19.47**陽性藥160(mg/kg)20238.19±16.98**211.47±12.27**與正常對照組比較，SS/K0.01;與模型對照組比較**/7<0.01四、苦參堿丹參酚酸B復鹽對D-GalN所致小鼠化學性肝損傷的保護作用表4對D-GalN所致小鼠化學性肝損傷ALT、AST的影響組別劑量(pmol/kg)動物數(只)給藥七天后ALT(證ol/L)AST(mmol/L)正常對照組—2061.79±11.4797.29±19.62模型對照組—20189.50i25.36**249.08i24.98**苦參堿丹參酚酸802078.64±26.71"151.53±37.46"B復鹽402095.21±17.74**175.49±19.36**(K-I)2020142.38±13.82**191.76土30.1廣陽性藥160(mg/kg)2083.74±22.67**165.39±19.83**與正常對照組比較，"》〈0.01;與模型對照組比較'》<0.01結果(見表4)發現與空白對照組比較，D-GalN模型對照組小鼠ALT、AST含量顯著升高(/XO.01)，證明D-GalN小鼠急性肝損傷模型造模成功。FYG高、中、低劑量組均可顯著降低D-GalN急性肝損傷小鼠ALT、AST含量，與模型對照組比較差異顯著(PO.Ol)。五、苦參堿丹參酚酸B復鹽對TTA所致大鼠化學性肝損傷的保護作用由實驗結果(見表5、6)發現模型對照組與正常對照組比較ALT值顯著升高(;X0.01)，TP、Alb顯著降低(;XO.05)，肝組織中MDA顯著升高(p<0.001)，肝指數升高，提示造模成功。苦參堿丹參酚酸B復鹽各給藥組與模型組比較，ALT值顯著降低(/X0.01)，TP、Alb顯著升高(;XO.01);肝組織中MDA降低，其中高、中劑量有統計學意義；肝指數也有下降趨勢，但無統計學意義。由此可推斷，苦參堿丹參酚酸B復鹽對TAA所致大鼠化學性肝損傷有一定的保護作用。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>與正常對照組比較，SB/X0.01;與模型對照組比較4p<0.05六、苦參堿丹參酚酸B復鹽對小鼠慢性酒精性肝損傷的保護作用實驗結果(見表6、7):與空白對照組比較，模型對照組小鼠血清ALT、AST、TG含量顯著升高(p<0.05)，肝組織中TG、MDA含量顯著升高；苦參堿丹參酚酸B復鹽高、中、低劑量組可顯著降低小鼠血清ALT、AST、TG含量和肝組織中TG、MDA含量，呈劑量依賴性。表6對酒精所致小鼠慢性肝損傷血清TG、ALT、AST的影響劑量動物數給藥30天后(拜ol/kg)(只)TG(匪ol/L)ALT(mmol/L)AST(匪ol/L)正常對照組-墨陽201.19±0.1137.38±9.2786.51±28.13模型對照組陽-墨201,46±0,18#52.21±12.56#127.66±51.78#苦參堿丹參酚80201.16±0.32*30.85土10.36'85.74土25.18'酸B復鹽40201.35±0.7734.22±11.80*92.32±28.60*(K-I)20201.41±0.8044.19±19.2190.57±25.13*陽性藥160,20(mg/kg)1.20±0.27*30.57±9.48*79.90士12.74'與正常對照組比較，V<0.05;與模型對照組比較、<0.05表7對酒精所致小鼠慢性肝損傷肝組織TG、MDA的影響組別劑量(/tmol/kg)動物數(只)給藥30天后TG(腿ol/L)MDA(nmol/g)正常對照組——200.22±0.0847.39±10.72模型對照組—匿200,42±0.20#64,51±21.54#苦參堿丹參酚80200.18土0.07'36.02土17.75'酸B復鹽40200.22土0.04'41.87±9.28*(K-I)20200.26±0.0842.10±13.664陽性藥160(mg/kg)200.21±0.10*49.39±21.32*與正常對照組比較，V<0.05;與模型對照組比較》<0.05七、對腦缺血的保護作用利用大鼠局灶性腦缺血模型(MCAO)，各組腦梗死指數的比較情況(見表8)，發現模型組與假手術組在此指標上差異明顯，說明模型成功；各給藥[苦參堿丹參酚酸B復鹽(2:1)(K-I)、苦參素丹參酚酸B復鹽(2:1)(K-II)、苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽(K-m)、苦參素丹參酚酸B鈉復鹽(K-IV)]組腦梗死指數均低于模型組，說明藥物有效；而各給藥組中，四個化合物給藥組與模型組比較均有統計學意義；其中K-I給藥組的效果最好。表8各組腦梗死指數比較(5±s)組別給藥劑量n腦梗死指數(％)模型組0.5ml/kg1221.65±8.24*假手術組0.5ml/kg120K-I組30/miol/kg910.12±6.19AAK-II組30]umol/kg1112.53±8.14A銀杏葉提取物組30;timol/kg30拜ol/kg20mg/kg991213.80士5.86'11.26±7.29。15.72士8.97'注與假手術組比較，'p<0.001與模型組比較，Ap<0.05,Aap<0.01八、對心肌梗塞的保護作用取家兔30只，體重2.3-3.6kg，雌雄各半，隨機分為五組，每組6只。1.5%戊巴比妥鈉30mg/kg靜脈注射麻醉，胸部正中切口，切開皮膚，沿胸骨正中向左純性分離肌肉，暴露第3、4肋骨，帖胸骨左緣切斷，以小開胸器拉開切口使心臟暴露良好，用小鑷子輕輕提起心包，并小心剪開，用止血鉗提起心耳，找出冠脈前降支，用手術圓針將0000號絲線穿于冠脈前降支，雙重結扎冠脈，此時可見心肌收縮力減弱，閉塞冠脈所支配的區域，心臟顏色變得暗紫，膨出，此以造成心肌梗塞，然后縫合關閉胸腔，肌注80萬U青霉素，預防感染，動物在結扎冠脈前灌胃苦參堿丹參酚酸B復鹽(2:1)(K-I)、苦參素丹參酚酸B復鹽(2:1)(K-II)、苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽(K-III)、苦參素丹參酚酸B鈉復鹽(K-IV)各30/miol/kg和陽性對照藥復方丹參滴丸2.5mg/kg，連續灌胃11天，第12天開始結扎冠脈，結扎冠脈后24h從兔耳靜脈采血，測量CPK、LDH等，48小時再取血重復測定心肌酶的變化，然后處死家兔開胸取出心臟，生理鹽水沖洗心臟，沿冠狀溝剪去心房及各大血管，扭力天平上稱心室重量，然后將心室切約0.4-0.6cm的心室片，放到NBT染色液中，37'C恒溫染色15分鐘，正常心肌染為藍色，梗塞心肌不著色，計算每片心肌所占心室的重量，最后算出梗塞區所占心室重量的百分率，用統計學比較生理鹽水組與給藥組差異的顯著性。心梗面積霍鷥梗塞面積或重量％=心室總面積霍焉X100%結果見表^表9對兔心肌梗塞面積(重量)的影響組別藥物劑量動物數(只)心肌梗塞面積(重量)(%)生理鹽水_1015.52±1.71復方丹參滴丸2.5mg/kg105.12±0.54***K-I組20ptmol/kg105.28±0.48***k-ii組20/miol/kg105.57士0.69辦K-m組20/rniol/kg106.79士0.49,K-IV組20/rniol/kg107.13±0.43**注**與生理鹽水組比較P<0.01*sH*與生理鹽水組比較P<0.001具體實施例以下實施例是對本發明的舉例說明，并非對本發明的限制。實施例l苦參堿丹參酚酸B復鹽取苦參堿24.8g加入適量無水乙醇中，室溫一下攪拌溶解，邊攪拌邊加入丹參酚酸B71.8g(摩爾比l:1)，加完繼續攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的3000ml丙酮中，析出大量白色結晶性粉末，過濾，于6(TC真空干燥，得白色結晶性粉末81.3g，即為苦參堿丹參酚酸B復鹽(1:1)，收率為84.2%。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>實施例3苦參素丹參酚酸B復鹽取苦參素26.4g、丹參酚酸B71.8g(摩爾比l:1)加入適量無水甲醇中，室溫一下攪拌溶解，繼續攪拌數分鐘后緩慢加入劇烈攪拌的3000ml丙酮中，析出大量白色結晶性粉末，過濾，于60。C真空干燥，得白色結晶性粉末90.1g，即為苦參素丹參酚酸B復鹽(1:1)，收率為91.8%。<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>H5.595.54N2.812.85實施例4苦參素丹參酚酸B復鹽取苦參素52.8g加入適量20n/。甲醇水中，室溫一下攪拌溶解，邊攪拌邊加入丹參酚酸B71.8g(摩爾比2:1)，加完繼續攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的3000ml無水乙醇中，析出大量白色結晶性粉末，過濾，于6(TC真空干燥，得白色結晶性粉末118.4g，即為苦參素丹參酚酸B復鹽(1:1)，收率為95.0%。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>實施例5苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽取實施例1所得的苦參堿丹參酚酸B復鹽(1:1)48.3g(0.05mol)，加入適量50%乙醇水中，室溫一下攪拌溶解，加入等摩爾比的碳酸氫鈉4.2g(0.05mol)，攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的2000ml丙酮中，析出大量白色結晶性粉末，過濾，于6(TC真空干燥，得白色結晶性粉末47.6g，即為苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽，收率為96.4%。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>實施例6苦參素丹參酚酸B鈉復鹽取實施例3所得的苦參素丹參酚酸B復鹽(1:1)49.1g(0.05mol)，加入適量15%乙醇水中，室溫一下攪拌溶解，加入1/2摩爾比的碳酸鈉2.65g(0.025mol)，攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的2000ml無水乙醇中，析出大量白色結晶性粉末，過濾，于6(TC真空干燥，得白色結晶性粉末46.3g，即為苦參素丹參酚酸B鈉復鹽，收率為92.2%。元素分析測定值(％)計算值(％)C60.9160.95H5.365.32N2.842.79實施例7苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽混合物的制備取苦參堿24.8g苦參素26.4g和丹參酚酸Bg(摩爾比1:1:l)加入適量20%甲醇中，室溫一下攪拌溶解，繼續攪拌數分鐘后緩慢加入劇烈攪拌的3000ml丙酮中，析出大量白色結晶性粉末，過濾，于6(TC真空干燥，得白色結晶性粉末104.9g，即為苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽混合物，收率為85.3%。實施例8苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽和苦參素丹參酚酸B鈉復鹽混合物的制備取實施例6所得的苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽混合物61.5g(0.05mol)，加入適量50%乙醇水中，室溫一下攪拌溶解，加入氫氧化鈉(NaOH)調節pH值至6.0，攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的2000ml無水乙醇中，析出大量白色結晶性粉末，過濾，于6(TC真空干燥，得白色結晶性粉末52.7g，即為苦參素丹參酚酸B鈉復鹽，收率為84.2%。權利要求1.一種如下結構的化合物其中n＝1，2。2、一種如下結構的化合物coo.其中n=l,2。3、一種如下結構的化合物「Cr4、一種如下結構的化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>5、一種藥物組合物，其特征在于，含有權利要求l、2、3、4任何一項的化合物或它們的混合物。6、權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，為任何可藥用的制劑形式。7、權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，所述可藥用的制劑形式選自片劑、膠囊劑、口服液、合劑、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、溶液劑、注射劑、粉針劑、凍干粉針劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜劑、噴霧劑、氣霧劑、滴劑或貼劑。8、權利要求1-2任何一項化合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟將苦參堿、苦參素，或它們的混合物溶解在水或有機溶劑中，將丹參酚酸B粉末或溶解在有機溶劑中的丹參酚酸B，二者以摩爾比1:1或2:1比例混合、攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的丙酮或乙醇中，析出結晶性粉末，即為苦參堿丹參酚酸B復鹽、苦參素丹參酚酸B復鹽，或它們的混合物，其中的有機溶劑選自乙醇、丙酮、乙酸乙酯、或甲醇，以及它們的水溶液。9、權利要求3-4任何一項化合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟將苦參堿丹參酚酸B復鹽、苦參素丹參酚酸B復鹽，或它們的混合物，溶解于水或稀有機溶劑中，加入等摩爾的碳酸氫鈉或1/2摩爾的碳酸鈉，或用NaOH調節pH值大于5，攪拌數分鐘后，緩慢加入劇烈攪拌的丙酮或乙醇中，析出結晶性粉末，即為苦參堿丹參酚酸B鈉復鹽、苦參素丹參酚酸B鈉復鹽，或它們的混合物；其中的有機溶劑選自乙醇、丙酮、乙酸乙酯、或甲醇，以及它們的水溶液。10、權利要求l-4所述的化合物以及它們的組合物在制備治療肝病和(、腦血管疾病的藥物中的應用。全文摘要本發明公開了苦參堿丹參酚酸B復鹽和苦參素丹參酚酸B復鹽及其制備方法和用途，這些化合物可用于制備治療肝病和心腦血管疾病的藥物。文檔編號A61P9/00GK101367799SQ20081022365公開日2009年2月18日申請日期2008年10月6日優先權日2008年10月6日發明者李國玉申請人:李國玉