專利名稱：用于腎臟細胞癌的治療的3，3’，4，4’-四羥基-2，2’-聯吡啶-n，n’-二氧化物的制作方法
技術領域：
本發明通常涉及癌癥治療。更具體地，本發明涉及3，3’，4，4’_四羥基-2，2’-聯吡啶-N，N' - 二氧化物，特別是3，3’，4，4’_四羥基-2，2’_ 二吡啶-N，N' -二氧化物(奧來毒素，Orellanine)用于腎臟癌癥、特別是來源于近端腎小管細胞的腎細胞癌的治療的用途。
背景技術：
癌癥以超過100種不同的形式出現，影響身體的幾乎每一個部分。在整個生命過程中，身體中的健康細胞以受控的方式分裂、生長和替換自身。當指示這種細胞分裂的基因功能失常以及細胞開始不受控制地增殖和生長時產生癌癥。這些異常細胞的團塊或簇集物被稱為腫瘤。不是所有腫瘤都是癌性的。良性腫瘤，例如，痣，停止生長，并且不波及身體的其他部分。然而，癌性或惡性腫瘤繼續生長和覆蓋健康細胞，干擾身體功能，從身體組織抽取營養。惡性腫瘤可以通過稱為轉移的過程擴散到身體的其他部分。來自“母體腫瘤”的細胞脫離，取決于腫瘤而經由血液或淋巴管、或是在胸部、腹部或骨盆內遷移，并且它們最終在身體其他部位形成新的腫瘤。腎臟的癌癥構成了所有實體腫瘤的約3%。約85%的腎臟腫瘤被分類為腎細胞癌 (RCC)。約80%診斷的RCC發源于腎臟的成尿管、腎小管的近端部分內襯的上皮細胞。取決于它在顯微鏡下的外觀，這種癌癥類型被稱為腎臟透明細胞癌(RCCC，65%)或腎臟乳頭狀細胞癌(RPCC，15% )0雖然RCCC和RPCC構成診斷的RCC的80%，RCCC和RPCC是接近 100%的來自腎細胞癌的死亡的原因。在預測預后中最重要的因子是期。期描述了癌癥的大小和它傳播超出腎臟的深度。美國癌癥聯合委員會(AJCC)的分期系統被稱為 Μ系統。跟隨有從1到3的數字的字母T描述了腫瘤的大小和對附近組織的波及。更高的T數字表明更大的腫瘤和/或對腎臟附近組織的更廣泛的波及。跟隨有從O到2的數字的字母N表明癌癥是否波及腎臟附近的淋巴結，以及如果波及，有多少淋巴結受到影響。跟隨有O或1的字母M表明癌癥是否波及遠端器官。腫瘤是7cm(約23/4英寸)或更小，并且限于腎臟。沒有對淋巴結或遠端器官的擴散。II期腫瘤大于7. Ocm但仍然限于腎臟。沒有對淋巴結或遠端器官的擴散。包括任何大小的腫瘤，有或者沒有對腎臟周圍脂肪組織的擴散，有或者沒有進入從腎臟到心臟的大靜脈的擴散，有對一個附近的淋巴結的擴散，但是沒有對遠端淋巴結或其他器官的擴散。III期還包括擴散到腎臟周圍的脂肪組織和/或擴散到從腎臟到心臟的大靜脈的腫瘤，其沒有擴散到任何淋巴結或其他器官。IU^這個期包括已經直接擴散環繞腎臟的整個脂肪組織和筋膜韌帶樣組織的任何癌癥。IV期還包括已經擴散超過一個靠近腎臟的淋巴結、不靠近腎臟的任何淋巴結，或已經擴散任何其他器官(例如，肺、骨骼或大腦)的任何癌癥。
腎腎臟細胞癌的T、N、M類別和期組群的詳細定義原發件腫瘤(T)TX 未能評估原發性腫瘤TO:無原發性腫瘤證據Tl 腫瘤7cm或更小，限于腎臟T2 腫瘤大于7cm，限于腎臟T3 腫瘤擴展到主要靜脈/腎上腺/腎周組織；不超過杰氏筋膜(Gerota’ s fasica)T3a 腫瘤侵入腎上腺/腎周的脂肪T3b 腫瘤擴展到腎靜脈或隔膜下的腔靜脈T3c 腫瘤擴展到隔膜上的腔靜脈T4 腫瘤侵入杰氏筋膜以外N-局部淋巴結NX:未能評估局部淋巴結NO 沒有局部淋巴結轉移Nl 單個局部淋巴結中的轉移N2 超過一個局部淋巴結的轉移M-遠距離轉移MX 未能評估遠距離轉移MO 沒有遠距離轉移Ml 遠距離轉移根據經驗，I或II期的癌癥通過受累腎臟的外科去除來治療并且預后恢復良好。 相比之下，III或IV期的腎臟癌癥與極低的存活率相關，并且國家癌癥研究所(National Cancer Institute)在其網站上聲稱“患有IV期腎臟細胞癌的患者幾乎沒有能被治愈的”國家癌癥學會估計在2009年美國診斷了 49，096例腎臟癌癥新病例(16/105居民)中有11，033例確定死亡(3.6/105居民)。歐盟的相應數字Oooe)是診斷65，051 個(7. 8/105 居民)和 27，326 例死亡(3· 3/105 居民)(European Cancer Observatory http://eu-cancer.iarc.fr/cancer-19-kidney.html，en)。在世界范圍內估計(2006)年是209，000例診斷的病例(3. 2/105居民)和102，000例死亡(1. 6/105居民)(Gupta et al. Cancer Treat. Rev. 34，193-205 ；2008)。在美國看來似乎表面上較更高的發生率取決于是由于NCI將一同報告腎盂的癌癥(其是相對容易治療的)與和腎細胞癌一起共同報告的事實。較低的全球發生率和死亡率可能(至少部分)取決于在第三世界的廣大區域中過低的診出。如上所述，常規技術的主要題是被診斷患有腎臟癌癥的任一患者的結果主要由診斷的時機來決定。如果疾病在腫瘤傳播到腎臟外部之前被診斷，存活的機會是良好的，不然大多數患者死于該疾病。它的主要原因是，對于使用抑制細胞和細胞毒素藥物的所有常規療法，腎細胞癌是難治的，所述藥物例如順鉬、卡鉬、多西他賽、紫杉醇、氟脲嘧啶、卡培他濱、吉西他濱、伊立替康、托泊替康、依托泊苷、絲裂霉素、吉非替尼、長春新堿、長春堿、阿霉素、環磷酰胺、塞來考昔、羅非考昔和/或伐地考昔。
現有技術中描述了各種方法。由于較低的有效性和大量的副作用，針對腎細胞癌的常規化學治療大部分是治療不當的。因而尋求可替代的治療形式，它們可以分成幾個類別1)抗血管生成。在這種方法中，通過對供應腫瘤組織所必需的血管的形成的抑制，切斷腫瘤的營養物和氧氣。這可以以幾種方式實現1a)通過針對這些生長因子的抗體治療，抑制循環生長因子，例如，VEGF、PDGF和PIGF，；lb)使用針對受體的抗體對目標細胞上血管生長因子受體的阻斷；和Ic)使用干擾受體功能的更小的分子治療，使得血管生長因子與它的受體的結合不能引發生理學的血管生成效果。幻免疫調節治療。這種方法試圖刺激內源的免疫系統來將腫瘤細胞識別為異源并開始對抗它們。作為針對腎臟癌癥的治療的免疫刺激采取兩種主要途徑2a)用白細胞介素2(IL_2)治療；和2b)干擾素α (IFNa)治療。上述所有可替代的治療策略顯著地延長了患有腎臟癌癥處于晚期的某些患者的生命期。然而，效果僅在幾個月的級別上，而且治療與許多嚴重的副作用相關。經常地，腫瘤適應了治療，然后治療不能繼續，之后腫瘤加速的生長。Garcia et al. (“ Recent progress in the management of advanced renal cell carcinoma. " CA Cancer. J. Clin.57 (2) 112-25 (2007))禾口 Atkins et al. ( " Innovations and challenges in renal cell carcinoma summary statement from the Second Cambridge Conference. " Clin. Cancer. Res. 13(2 Pt 2) :667s-670s (2007))綜述了腎臟癌癥治療的新近的方法。文獻的綜述表明，許多治療方法來源于或多或少特異性的癌癥標志物的識別，以及這些標志物對于引發對抗侵入性腫瘤組織的宿主免疫應答的用途。因而，US2006134708 公開了腎臟和尿路膀胱癌癥的幾種分子標志物，即用于診斷目的的IGFBP-3(胰島素樣生長因子結合蛋白幻、ANGPTL4(血管生成素樣4)和銅藍蛋白(cemloplasmin)，以及對抗所述標志物的單克隆抗體，用于診斷用途。描述了對抗所公開的標志物的反義化合物在肽和核酸水平上的應用。并且，軛合到細胞毒性試劑、對抗所述標志物的單克隆抗體的使用作為這樣的治療實施方式也是預期的，即與取決于抗體(也稱為“魔彈(magic bullet)”概念) 提供的靶向的較少的細胞毒性試劑的嚴重副作用聯系在一起。基于不同腫瘤相關抗原的類似方法在CN1359941中被采用。US6403373公開了與結腸、腎臟和胃癌相關的核酸分子，其肽產物引發了宿主中的抗體生成。所述肽在疫苗方法中的用途是預期的。EP0160250公開了用于腎癌的診斷的單克隆抗體，并且提及了將這些抗體軛合到各種細胞毒性試劑的可能性。W02007059082公開了在卵巢和腎臟癌癥中抗原TIM_1 (T細胞，免疫球蛋白或粘蛋白結構域1)的發現，其與細胞增殖相關。教導了針對TIM-I產生的抗體用于治療卵巢和腎臟癌癥的用途，也教導了作為腫瘤細胞的靶向殺傷方式的治療試劑(毒素、放射性同位素或化學治療試劑)與所述抗體的軛合。US6440663公開了由腎臟癌癥細胞來示性的許多基因，其產物引起宿主中的抗體生成。描述了引發或增加宿主中針對使所公開基因示性的組織的免疫反應的各種方法，包括細胞毒性T細胞的引發和用公開的基因或其片段對宿主細胞的轉染，隨后是所述細胞向宿主中的再導入。U US 2005261178公開了對抗在大部分腎臟癌癥上表達的抗原(碳酸酐酶IX)的單克隆抗體(G250)與細胞因子白細胞介素-2或干擾素-α的共同施用。以比僅用細胞因子治療時使用的更低的劑量施用細胞因子。達22周或更久的疾病穩定或“目標反應”在患有晚期腎臟癌癥的群體的約30%患者中實現。其他方法基于在新的治療方案中使用已知的治療物質。例如，W02007044015公開了根據新的施用方案的對在前已知的二甲烷磺酸酯化合物、特別是NSC481612的使用，以治療腎臟癌癥。當對裸鼠中的異種移植物測試時，NSC481612的施用在某些情況下導致了腫瘤塊的表面上完全的根除。JP200U88110公開了干擾素-α與聚乙二醇(PEG)的軛合物以試圖提高循環半衰期和降低最小治療有效劑量。RU2188026公開了使用長春新堿、亞德里亞霉素和cbpo-安宮黃體酮 (depo-provera)的多化療方法。聲稱這提高了無復發時間和減少了轉移形成。最后，在少數情況中，對新的原始物質建立了建議的療法。因而，W02004075887公開了 1-(2-氯乙烷)-1-亞硝基-3-(2-羥基乙基)脲(HECNU)用于許多癌癥類型、包括腎臟癌癥的治療的用途。HECNU的主要特征是與早先已知的相應的化合物二-(2-氯乙基)-1-亞硝基-脲(BCNU)相比改善的水溶性。EP1712234公開了 4_吡啶甲基-酞嗪衍生物作為VEGF受體抑制物在腎臟癌癥的治療中的用途，特別是用于轉移性生長的抑制。發現的是，4-吡啶甲基-酞嗪衍生物與多種常規的化學治療劑的任一種的共同施用具有協同效應，即使所述腫瘤細胞是單獨的化學治療難以治療的。進一步的，組合治療與顯著的更小的副作用相關聯。Suthpin et al. (〃 Targeting the Loss of the von Hippel-Lindau Tumor Suppressor Gene in Renal Carcinoma Cells"，Cancer. Res. 67(12),5896-5905(2007)) 研究了色霉素A3在腎臟癌癥對不表達VHL基因的選擇性效應(這種腫瘤抑制基因在所有腎臟透明細胞癌癥的約70%中是不存在的)。色霉素A3顯著地延遲了異種移植的裸鼠中的腫瘤生長，而不影響表達VHL基因的正常的腎臟組織。在此本發明利用的奧來毒素(式I)，其是在絲膜菌(Cortinarius)科的幾個真菌物種中以相對大量存在的選擇性的腎臟毒素。在混淆絲膜菌真菌與食用菌類之后奧來毒素的中毒經常地在歐洲、俄國和北美洲發生。在攝食含有奧來毒素的真菌之后，有幾天到3周沒有癥狀或僅輕微的、流感樣癥狀的時期。下一階段，當一般尋求醫學幫助時，特征是由于急性腎功能衰竭的尿毒癥。盡管在科學文獻中奧來毒素毒害有許多描述，除了僅提及腎臟的毒性之外，奧來毒素的其他效果沒有被報道(Danel VC, Saviuc PF, Garon D Main features of Cortinarius spp. poisoning -.a literature review. Toxicon 39, 1053-1060(2001).)。這種選擇性最可能歸于事實，奧來毒素由一種細胞類型特異性地接收，即，腎小管上皮細胞，特別是近端腎小管上皮細胞(Prast H, Pfaller W=Toxic properties of the mushroom Cortinarius orellanus(Fries)II. Impairment of renal function in rats. Arch Toxicol 62，89-96 (1988) ·)。奧來毒素的毒性機制沒有被闡明， 除了維持透析同時等待看腎臟是否恢復之外，沒有可用的治療。最后的結局主要取決于攝食的毒素的數量，根據經驗，一種真菌的攝食產生暫時的問題，兩種真菌導致部分腎臟功能的永久喪失，而三種或更多種真菌引起腎臟功能的完全喪失和需要終身的透析或腎臟替換治療。
申請人:近來公開了奧來毒素在健康大鼠作用方式的首次研究(Nilsson UA et
al. The fungal nephrotoxin Orellanine simultaneously increases oxidative stress and down-regulates cellular defenses. Free Rad. Biol. Med. 44 :1562-9 (2008) ·)。這項
研究顯示了在腎臟皮層組織中提高的氧化壓力伴隨幾種關鍵的抗氧化基因的顯著降低的表達。在這項工作期間，認識到奧來毒素對腎小管上皮細胞的看起來的絕對特異性，理論上可以延伸到涵蓋它們轉化成癌細胞之后的這些細胞。如果證明正確，這樣的假說將意味著奧來毒素是針對上皮來源的腎臟癌癥的強大的武器，具有甚至在癌癥進展的時期和在其他組織中轉移時有治愈的可能性。繼續這種假說，令人驚訝地發現奧來毒素實際上也在人類腎臟癌癥細胞中接受， 不論它們來自原發腫瘤還是來自轉移性腫瘤組織，以大的效力殺死它們。在對奧來毒素的短暫的暴露之后細胞死亡發展，表明毒素主動地被細胞接受和保持。
發明內容
本發明的最初目標是提供治療發源于上皮細胞的腎臟癌癥的方法，所述方法涉及向需要治療的哺乳動物施用至少一種根據式I的化合物。
權利要求
1. 一種治療患有腎細胞癌或對腎細胞癌敏感的患者的方法，包括向所述患者施用根據式I的化合物或其藥學上可接受的鹽其中
2.如權利要求1所述的方法，其中，R1^R2> R3和R4是氫。
3.如權利要求1或2所述的方法，其中，式I的化合物是藥學上可接受的鹽。
4.如權利要求1-3的任一項所述的方法，其中，所述化合物以lmg/kg到100mg/kg的單次劑量施用。
5.如權利要求1-3的任一項所述的方法，其中，在兩個或更多個劑量中施用所述化合物，其中每個劑量包含lmg/kg到20mg/kg之間的所述化合物。
6.如權利要求5所述的方法，其中，連續的劑量以兩到七天之間的間隔施用。
7.如權利要求4或5所述的方法，其中，每天施用所述化合物。
8.如權利要求1-7的任一項所述的方法，其中，在靜脈內地、皮下地或腹膜內地施用所述化合物。
9.一種根據式(I)的化合物其中
10.如權利要求9所述的化合物，其中，R1^ R2> R3和R4是氫。
11. 一種根據式(I)的化合物
12.如權利要求11所述的化合物，其中，R1R2R3和R4是氫。
13.一種藥物組合物，包含至少一種藥學上可接受的載體和50mg到約3，500mg的根據式⑴的化合物
14.如權利要求13所述的藥物組合物，其中，R1^R2> R3和R4是氫。
15.如權利要求13或14所述的藥物組合物，其中，所述化合物是藥學上可接受的鹽。
16.如權利要求13-15的任一項所述的藥物組合物，其中，所述組合物被配制用于向患者靜脈內、皮下或腹膜內施用。
17.一種用于治療患有腎細胞癌或對腎細胞癌敏感的患者的試劑盒，包含至少一種藥學上可接受的載體和50mg到3，500mg根據式I的化合物其中
18.如權利要求17所述的試劑盒，其中，組合所述根據式I的化合物或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的載體一起施用，從而所述根據式I的化合物或其藥學上可接受的鹽完全地或基本上溶于所述載體中。
全文摘要
本發明提供了通過利用特定的施用方案和給藥方式來施用某些3，3′，4，4′-四羥基-2，2′-聯吡啶-N，N′-二氧化物化合物，特別是3，3′，4，4′-四羥基-2，2′-聯吡啶-N，N′-二氧化物(奧來毒素)治療腎臟癌癥的方法，以及適用于所提供的治療方法的藥物組合物。
文檔編號A61P35/00GK102170881SQ200980139366
公開日2011年8月31日 申請日期2009年10月6日 優先權日2008年10月6日
發明者烏爾夫·尼爾松, 伯耶·哈拉爾德松, 燕妮·尼斯特倫, 莉薩·布瓦爾 申請人:烏爾夫·尼爾松, 伯耶·哈拉爾德松, 燕妮·尼斯特倫, 莉薩·布瓦爾