專利名稱：地黃車前方中有效組分群治療慢性腎小球腎炎發明的制作方法
技術領域：
本發明屬于中藥技術領域，特別是涉及一種以鮮地黃和車前草組成的方劑，經提取分離獲得有效組分群，這類成分可以治療慢性腎小球腎炎。
背景技術：
地黃為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch.的新鮮或干燥塊根。始載于《神農本草經》草部上品，為我國的“四大懷藥”之一。鮮地黃于每年秋季采挖，除去蘆頭、須根及泥沙，鮮用，其性寒，味甘、苦，歸心、肝、腎經，清熱生津，涼血止血。車前以種子和全草入藥，是我國古代最早、最廣泛使用的正品藥材之一，古時起它就在中國和日本用于利尿、抗炎、抗哮喘，全草有清熱解毒、利尿的功能，治療尿路感染、暑濕泄瀉、痰多咳嗽、熱毒癰腫等癥。鮮地黃主要活性成分為苯乙醇苷類(毛蕊花糖苷等)，環烯醚萜苷(梓醇等)，低聚糖(水蘇糖等)。車前以種子和全草入藥，是我國古代最早、最廣泛使用的正品藥材之一，古時起它就在中國和日本用于利尿、抗炎、抗哮喘。種子有利水通淋、清肝明目的功能。治療小便不利、水腫等。全草有清熱解毒、利尿的功能，治療尿路感染、暑濕泄瀉、痰多咳嗽、熱毒癰腫等癥。中華人民共和國藥典中功能主治標出的是清熱利尿，祛痰，涼血，解毒。用于水腫尿少， 熱淋澀痛，暑濕瀉痢，痰熱咳嗽，吐血血，癰腫瘡痛。車前草鮮地黃主要活性成分為苯乙醇苷類(車前苷等)，黃酮(木犀草素等)。
發明內容
鮮地黃和車前草組成的方劑，經提取分離獲得有效組分群，這類成分可以治療慢性腎小球腎炎，這一研究是由我研究所科研人員多年的試驗研究發現和發明。鮮地黃和車前草兩味藥材的比例為1 1。按提取分離工藝提取加工后，提取物的成分組成主要有苯乙醇苷類(毛蕊花糖苷、車前苷等)，低聚糖(水蘇糖等)。有效成分分(苯乙醇苷)治療慢性腎小球腎炎作用機理研究一、有效成分對兔IgG加速型大鼠腎毒血清腎炎的作用研究1、受試藥物有效組分由本所化學室提供，批號2、動物新西蘭兔，雄性，體重2. 0-2. 5kg ;SD大鼠，雄性，體重150_180g。3、試驗方法1、腎毒血清的制備健康SD大鼠，烏拉坦麻醉，在無菌條件下，腹主動脈灌流至腎臟無血色，無菌冰浴條件下，取大鼠腎皮質剪碎，研磨，過200目鋼絲網，1500rpm離心10分鐘，取沉淀物，加弗氏完全佐劑，充分碾磨混勻成含10 %腎組織的乳劑，用此乳劑兔疫兔， Im]/只，皮下多點注射，每周1次，共12次。第1次免疫要另加入卡介苗原漿，濃度為^ig/ ml乳劑。末次注射后5天，兔頸動脈放血，離心得血清，經56°C滅活補體及SD大鼠血球吸收Ih后再離心即得腎毒血清，置-20°C低溫冰柜保存備用。
2、大鼠腎炎造模與觀測每只大鼠先皮下多點注射兔IgG5mg (與Iml弗氏完全佐劑充分混勻)，6天后，尾靜脈注射腎毒血清0. 6ml/100g體重，注射后7天，測大鼠24h尿蛋白及血清中白蛋白、肌酐、尿素氮含量，按24h尿蛋白測定值均勻分為模型對照組、醋酸潑尼松7mg/kg組、有效組分40，20，10mg/kg組共6組，每組15 16只。另設正常對照組 10只。各組均灌胃給藥，對照組及模型組灌服等容量蒸餾水。連續給藥14天。在給藥后7 天，眼底靜脈叢取血測血清中白蛋自(ALb)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、白介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子(TNF-α )含量，取抗凝全血流式細胞儀測外周血中⑶3、⑶4、⑶8含量；給藥14 天測24h尿蛋白，眼底靜脈叢取抗凝全血測外周血中⑶3、⑶4、⑶8含量，腹主動脈取血測血清中白蛋自(ALb)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、白介素6 (IL-6)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、乳酸脫氫酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、GSH-PX、MDA含量，腹主動脈取血(預先加有抑肽酶EDTA2Na)測血槳中內皮素(ET)、降鈣素基因相關肽(CGRP)含量，腹主動脈取血(預先加有消炎痛EDTA 2Na)測血槳中血栓素B2、6_酮-前列腺素含量，取一側腎，一部分組織勻漿測定組織中ET、CGRP、血栓素B2、6酮-前列腺素、IL-6、TNF α、SOD、LDH、GSH-PX、MDA含量，另一部分-70°C放置，另一側腎做切片，免疫組化法測定TGF-β、纖連蛋白、膠原蛋白等的表達。4、部分試驗結果血清性腎炎大鼠給予有效組分20、40mg/kg連續2周后，可使24h尿蛋白顯著降低，10、20、40mg/kg劑量組的血肌酐明顯降低。表明有效組分對大鼠血清性腎炎有一定的治療作用。表1有效組分對大鼠24h尿蛋白的影響(X士 SD)
權利要求
1.地黃車前方有效組分群的來源為鮮地黃，車前草2味中藥組成。
2.地黃車前方有效組分群制備工藝，其特征在于使用鮮地黃，車前草2味中藥用稀醇回流。回收乙醇，上大孔吸附樹脂，水洗，乙醇洗。濃縮乙醇液，干燥后所得之提取物。
3.鮮地黃，車前草2味中藥配比使用，其比例為1 1，主要用于用于治療慢性腎小球腎炎。
4.按權利要求1所述的地黃車前方有效組分群的成分組成主要為苯乙醇苷類和低聚糖類成分。
5.按權利要求2所述的使用稀醇濃度為5%至95%。
6.按權利要求2所述的冷浸是指在攪拌的條件下浸1至12小時。
7.按權利要求2所述的樹脂主要是指聚苯乙烯型結構的樹脂。
8.按權利要求2所述的醇洗，其醇濃度為5%至95%。
9.按權利要求2所述的干燥包括真空干燥、噴霧干燥、冷凍干燥等干燥形式。
全文摘要
本發明屬于中藥技術領域，特別是涉及一種以鮮地黃和車前草組成的方劑，經提取分離獲得有效組分群，這類成分可以治療慢性腎小球腎炎。鮮地黃和車前草兩味藥材的比例為1∶1。按提取分離工藝提取加工后，提取物的成分組成主要有苯乙醇苷類(毛蕊花糖苷、車前苷等)，低聚糖(水蘇糖等)。
文檔編號A61P13/12GK102293857SQ20111018864
公開日2011年12月28日 申請日期2011年7月7日 優先權日2011年7月7日
發明者司南, 楊健, 王宏潔, 邊寶林 申請人:中國中醫科學院中藥研究所