食蟹猴b超引導下肝臟活體穿刺的方法
【專利摘要】本發明公開了一種食蟹猴B超引導下肝臟活體穿刺的方法，包括：1）鎮靜狀態下的食蟹猴準備；2）穿刺針準備；3）B超準備；4）經B超引導，進行食蟹猴肝臟活體穿刺采樣。本發明能提高單次肝臟樣品采樣量，同時提高單只動物的肝臟樣品采集總量，以及提高實驗動物的存活率。
【專利說明】食蟹猴B超引導下肝臟活體穿刺的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種肝臟活體穿刺的方法，特別是涉及一種食蟹猴B超引導下肝臟活體穿刺的方法。
【背景技術】
[0002]食蟹猴(M.fascicularis)因其基因與人類高度近似，隨著醫學研究的發展，食蟹猴已作為一種國際上公認的實驗動物，被廣泛的應用于醫藥研發試驗。
[0003]肝穿刺活組織檢查(肝穿刺)是一種能直接了解組織的病理變化，做出較精確診斷檢查方法，也是肝臟疾病分類的重要依據，因而肝活檢極其重要。肝組織活檢的穿刺方法有多種，如一般肝穿刺術、套管針穿刺術、分葉針切取術、快速肝穿刺術等。經肝穿刺，可以有利于多種肝病的鑒別診斷，了解肝臟病變的程度和活動性，提供各型病毒性肝炎的病原學診斷，發現早期、靜止或尚在代償期的肝硬化肝硬化，有利于藥物的選擇和藥物的療效判斷，鑒別黃疸的性質和原因，作為慢性肝炎病情、預后的評判指標，可以進行診斷性治療等。
[0004]然而，在食蟹猴實驗過程中，經常遇到使用穿刺方法重復采集肝臟樣品。目前國內尚沒有關于食蟹猴肝臟穿刺方法的相關報道。然而，國外雖然有食蟹猴肝臟穿刺術的相關報道，但該方法采用穿刺針經皮直接穿刺采集肝臟樣品，該方法單次采集樣品量少，多次采集易造成食蟹猴肝臟嚴重損傷，易傷及大血管、膽囊或者其他臟器，動物存活率較低，影響試驗的準確性。
[0005]因此，需開發出一種有效提高單次肝臟樣品采集量，并且能提高動物的存活率的食蟹猴肝臟活體穿刺的 方法。
【發明內容】
[0006]本發明要解決的技術問題是提供一種食蟹猴B超引導下肝臟活體穿刺的方法。該方法能提高單次肝臟樣品采樣量，同時提高單只動物的肝臟樣品采集總量，以及提高實驗動物的存活率。
[0007]為解決上述技術問題，本發明的食蟹猴B超引導下肝臟活體穿刺的方法，包括步驟:
[0008]I)鎮靜狀態下的食蟹猴準備；
[0009]2)穿刺針準備；
[0010]3) B 超準備；
[0011]4)經B超引導，進行食蟹猴肝臟活體穿刺采樣。
[0012]所述步驟I)中，采用氯胺酮鎮靜食蟹猴，其具體步驟包括:按照5-10mg/kg的劑量，肌肉注射氯胺酮，對食蟹猴進行鎮靜；鎮靜后，將食蟹猴采取仰臥位，保定，剃去鎖骨以下臍孔以上胸腹部的被毛，并使用碘伏消毒，然后用75%消毒酒精脫碘。
[0013]所述步驟2)中，穿刺針為18G的肝臟穿刺針或半自動的穿刺針。當使用半自動的穿刺針時，采樣過程中可以通過連續兩次按穿刺針尾部的扳機按鈕，快速進針，方便快捷的采集到肝臟樣品。
[0014]所述步驟4)中，采樣的步驟包括:在食蟹猴肋骨邊緣位置涂上B超耦合劑，選擇合適的角度，探明肝臟及各肝小葉的具體位置，同時注意膽囊及血管(如大血管)的具體位置；將參照B超屏幕上的超聲圖像，沿肋骨邊緣下針，穿透皮膚，將穿刺針抵到肝臟表面，按一次穿刺針尾部的扳機按鈕，針頭迅速穿入肝臟約2-3厘米，再次按穿刺針的扳機按鈕，穿刺針的套管順著針頭迅速打出，肝臟樣品便采集到針頭的凹槽中，然后拔出穿刺針，用干棉球按住皮膚上采樣位置進行止血，至少3分鐘。
[0015]步驟4)中，采樣時，避開在同一個肝葉的同一個采樣位點，單個動物能連續或者間斷采集6次肝臟樣品。
[0016]上述方法，還包括:5)采樣后的樣品保存。如將采樣后的樣品保存至超低溫冰箱(_70°C)或者液氮中。
[0017]本發明的有益效果如下；
[0018]1、采用B超引導，可以明確肝臟的位置及下針的位置和角度，可以有效提高單次肝臟樣品采集量，單次肝臟樣品采集量可提高至20mg以上；
[0019]2、在B超引導下，減小動物損傷，可以增加單只動物的采樣次數，單個動物肝臟活體采集的次數可提高至6次，極大的提高了個體動物的樣品采集量；
[0020]3、可以有效避開大的血管、膽囊和其他臟器，防止導致動物出現大出血或者損傷到其他臟器，極大提高了動物的存活率。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0021]下面結合附圖與具體實`施方式對本發明作進一步詳細的說明:
[0022]圖1是食蟹猴B超引導下肝臟活體穿刺的示意圖。
【具體實施方式】
[0023]本發明的食蟹猴B超引導下肝臟活體穿刺的方法，包括步驟:
[0024]I)鎮靜狀態下的食蟹猴準備
[0025]選擇一只食蟹猴，使用氯胺酮，按照5-10mg/kg的劑量，肌肉注射，對食蟹猴進行鎮靜；
[0026]待食蟹猴安靜(鎮靜)后，從籠中取出食蟹猴，放在臺面上，采取仰臥位，助手保定食蟹猴，剃去食蟹猴鎖骨以下臍孔以上胸腹部的被毛，并使用碘伏消毒，然后用75%消毒酒精脫鵬。
[0027]2)穿刺針準備
[0028]選擇規格為18G的肝臟穿刺針(ACECUT AUTOMATIC BIOPSY SYSTEM)，打開包裝，按照說明調整至采樣狀態。
[0029]3) B 超準備；
[0030]開啟B超儀設備，并使用合適的消毒劑(如75%乙醇)消毒B超探頭。
[0031]4)經B超引導，進行食蟹猴肝臟活體穿刺采樣
[0032]在食蟹猴肋骨邊緣位置涂上B超耦合劑，選擇合適的角度，探明肝臟及各肝小葉的具體位置，同時注意膽囊及大血管的具體位置；[0033]參照B超屏幕上的超聲圖像(參照B超儀屏幕上顯示的肝臟位置)，讓穿刺針沿肋骨邊緣垂直于皮膚進針(如圖1所示)，然后沿著肝葉大概15度角的方向進針，將穿刺針抵到肝臟表面，按一次穿刺針尾部的扳機按鈕，針頭迅速穿入肝臟約2-3厘米，再次按穿刺針尾部的扳機按鈕，穿刺針的套管順著針頭迅速打出，肝臟樣品便采集到針頭的凹槽中。然后拔出穿刺針，用干棉球按住穿刺孔止血約10分鐘，即可完成單次采樣。
[0034]該步驟中，可以重復采樣，避開在同一個肝葉的同一個采樣位點，單只動物能連續或者間斷采集6次肝臟樣品。
[0035]5)采樣后的樣品保存
[0036]參照穿刺針說明書，調整穿刺針的套管調整按鈕，暴露凹槽及其中的樣品，用準備好的干凈針頭撥下肝臟樣品至指定的容器中，然后轉移至超低溫冰箱(_70°C)或者液氮中保存。
[0037]本發明通過動物在鎮靜狀態下，并經B超引導下，實施活體肝臟采集，可有效提高單次肝臟樣品采集量，增加單只動物采樣次數，有效提高單只動物的樣品總量；同時操作時，可以有效避開大的血管、膽囊和其他器官，準確下針，可以有效提高動物的存活率。因此，本發明的方法可以廣泛 應用于醫藥研發試驗，加快研發流程。
【權利要求】
1.一種食蟹猴B超引導下肝臟活體穿刺的方法，其特征在于，包括步驟: 1)鎮靜狀態下的食蟹猴準備； 2)穿刺針準備； 3)B超準備； 4)經B超引導，進行食蟹猴肝臟活體穿刺采樣。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于:所述步驟I)中，采用氯胺酮鎮靜食蟹猴。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于:所述采用氯胺酮鎮靜食蟹猴，其步驟包括: 按照5-10mg/kg的劑量，肌肉注射氯胺酮，對食蟹猴進行鎮靜； 鎮靜后，將食蟹猴采取仰臥位，保定，剃去鎖骨以下臍孔以上胸腹部的被毛，并使用碘伏消毒，然后用75%消毒酒精脫碘。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于:所述步驟2)中，穿刺針為18G的肝臟穿刺針或半自動的穿刺針。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于:所述步驟4)中，采樣的步驟包括: 在食蟹猴肋骨邊緣位置涂上B超耦合劑，探明肝臟及各肝小葉的具體位置，同時注意膽囊及血管的具體位置； 參照B超屏幕上的超聲圖像，沿肋骨邊緣下針，將穿刺針抵到肝臟表面，按穿刺針尾部的扳機按鈕，針頭穿入肝臟2-`3厘米，再次按穿刺針的扳機按鈕，穿刺針的套管順著針頭打出，肝臟樣品便采集到針頭的凹槽中，然后拔出穿刺針，用干棉球按住皮膚上采樣位置進行止血,至少3分鐘。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于:所述步驟4)中，采樣時，避開在同一個肝葉的同一個采樣位點，單個動物能連續或者間斷采集6次肝臟樣品。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法，還包括:5)采樣后的樣品保存。
8.如權利要求7所述的方法，其特征在于:所述采樣后的樣品，保存至_70°C超低溫冰箱或者液氮中。
【文檔編號】A61B10/02GK103445811SQ201210181650
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2012年6月4日 優先權日:2012年6月4日
【發明者】苗曉青, 宗亞峰, 王海洋, 閆予希, 楊仲文, 李金燕, 王琪, 孔慶學, 王未艾, 孫利平 申請人:蘇州藥明康德新藥開發有限公司, 上海藥明康德新藥開發有限公司