用于細紋治療的真皮填充劑組合物的制作方法

用于細紋治療的真皮填充劑組合物的制作方法【專利摘要】本發明提供了高度可注射、長效的基于透明質酸的水凝膠真皮填充劑組合物，其對臉部細紋的修正特別有利。【專利說明】用于細紋治療的真皮填充劑組合物[0001]相關申請案[0002]本申請要求2011年9月14日提交的美國臨時專利申請No.61/534,780的優先權和利益，并且是2012年8月23日提交的美國專利申請序列號13/593,313的部分繼續申請，后者是2012年6月1日提交的美國專利申請序列號13/486,754的部分繼續申請，其要求了2011年6月3日提交的美國臨時專利申請No.61/493,309的優先權和利益，這些申請案中每一個的全部公開內容通過這種特定引用整體并入本文。[0003]背景[0004]本發明通常涉及真皮填充劑組合物，并且更具體地涉及對治療皮膚上的細紋有效的可注射真皮填充劑組合物。[0005]皮膚老化是一個漸進現象，隨著時間推移而發生并且受生活方式因素影響，例如飲酒、吸煙和日照。可用萎縮、松弛和肥胖表征面部皮膚的老化。萎縮對應于皮膚組織厚度的大大減小。皮下組織松弛導致皮膚過多和下垂并且導致出現臉頰和眼瞼下垂。肥胖指因為面部和頸部底部腫脹而增加多余重量。這些變化通常與干燥、失去彈性和肌理粗糙相關。[0006]透明質酸（HA)，也稱為透明質烷，是廣泛分布于整個人體的結締、上皮和神經組織的非硫酸化糖胺聚糖。透明質酸在不同皮膚層中都很豐富，其中透明質酸具有多種功能，例如確保良好的水合作用，幫助細胞外基質的構成，起填充材料的作用和參與組織修復機制。然而，透明質酸、膠原蛋白、彈性蛋白和皮膚中存在的其它母體聚合物的量隨年齡減少。例如，反復暴露于（例如）來自太陽的紫外光引起真皮細胞減少其透明質烷的生成以及增加了透明質烷的降解速率。這種材料損失導致各種皮膚狀況，例如起皺紋、凹窩、水分流失和有助于老化出現的其它不良狀況。[0007]可注射真皮填充劑已經成功用于治療老化皮膚。填充劑可代替失去的內源母體聚合物，或增強/促進現有母體聚合物的功能，以便治療這些皮膚狀況。基于透明質酸的真皮填充劑已經變得越來越流行，因為透明質酸是在整個人體自然存在的物質。這些填充劑通常耐受良好、非永久性，并且是對多種皮膚狀況的相當低風險的治療。[0008]廷德爾效應（Tyndalleffect)是在施用了基于透明質酸（HA)的真皮填充劑的一些患者中出現的不良事件。廷德爾效應特征在于，在已經注射了真皮填充劑的皮膚部位出現藍色變色，這表示通過半透明表皮看到可見透明質酸。臨床報道表明，填充劑施用技術和皮膚性質可影響這種不良事件的表現。高硬度和高彈性的填充劑成功用于修正面部上如鼻唇溝、臉頰和下巴等區域，無需對面部變色有任何擔心，因為材料注射在中部和深部真皮區中。然而，當使用這些填充材料修正淺表、細小皺紋，例如淚溝、眉間紋、眼角紋、笑紋或前額，或在真皮上部區域中太淺表地錯誤應用時，常常觀察到皮膚的淺藍色變色。這種現象，被認為是廷德爾效應的結果，引起應用部位半永久性變色，并且有時候只有在施用了降解填充材料的透明質酸酶后消失。因此，廷德爾效應在治療淺表細小皺紋的患者中更常見。只要凝膠維持在皮膚中，廷德爾效應表現延長，通常幾個月，是患者中主要關注點的一個原因。[0009]已經特別配制了基于HA的真皮填充凝膠以治療淚溝、前額、眼角紋、眉間紋等周圍發現的"細小皺紋"。市場上可買到的HA"細紋"凝膠包括JuWdermRefine(G'?67Pa;6"/6，?0.59，擬濃度1811^/1111)、861(^61'〇5〇打（6，?28?3;6"/6，?1.1，擬濃度2〇11^/ml)、EmervelTouch(G，?56Pa;G"/G，?0·64,HA濃度20mg/ml)、StylageS(G，?192Pa;6，，/6，?0.20，擬濃度1611^/1111)、丁6〇87&1?化8七1^1168(6'59?&;6，，/6，?0.53，擬濃度2〇11^/1111)、1^8七7131161'〇11(311(6'?489?3;6"/6'?0.24，碰濃度1811^/1111)。雖然（例如）通過使線性HA鏈與少量交聯劑輕微交聯和/或減小這些凝膠的最終HA濃度，將這些凝膠配制成具有低彈性模量，但是大部分市場上可買到的"細紋"凝膠在一些患者中仍顯示出廷德爾效應，特別是在淺表注射時，例如在小于約1_的深度。[0010]在淺表皺紋的治療中可采用基于膠原蛋白的凝膠并且似乎不會引起廷德爾效應。基于膠原蛋白的凝膠未受到高度青睞，因為它們在皮膚中的持續時間相對較差并且需要在個體中預先測試。RadiesseK(羥基磷灰石鈣）是皮下、可注射植入物，其主要組分是合成羥基磷灰石鈣，而非透明質酸。與基于透明質酸的真皮填充劑不同，羥基磷灰石鈣不透明，因此避免了廷德爾效應的并發癥。然而，如果放置太淺，這種填充劑可被視為直接位于皮膚下的白色物質。此外，與基于透明質酸的填充劑相比，Radiessex需要較長針頭來注射并且通常不推薦用于眼部區域。[0011]將需要提供不會表現出歸因于廷德爾效應的淺藍色變色的基于透明質酸的可注射真皮填充劑。[0012]概述[0013]本發明描述了制備可在上部真皮中施用，不產生皮膚的任何淺藍色變色，或至少不顯著或不明顯的淺藍色變色的基于HA的真皮填充劑的組合物和配制方法。進一步地，已經發現目前描述的許多本發明的填充凝膠在體內持續時間明顯比當前市場上可買到的凝膠更長。在本發明的一些方面，提供了對增強皮膚外觀有用的光學透明的真皮填充劑，其增加了體積和豐滿度，并且減少了甚至細小皺紋的出現，沒有"廷德爾效應"。本組合物可引入皮膚的細紋，甚至薄皮區域中并且相當淺表，不會引起與許多常規光學透明的真皮填充劑相關的負面藍色變色。[0014]更具體地，在本發明的一個方面，提供了長效治療性真皮填充劑組合物，其通常包含生物相容性聚合物，例如交聯透明質酸組分和與透明質酸組分合并的添加劑。[0015]在一個實施方案中，聚合物為多糖，例如透明質酸。透明質酸包括交聯組分并且可進一步包括非交聯組分。添加劑可包括維生素，例如維生素C(例如，穩定形式的維生素C)或維生素C衍生物（例如，L-抗壞血酸2-葡萄糖苷（AA2G)、抗壞血酸3-氨丙基磷酸酯（維生食物（Vitagen))或抗壞血酸磷酸鈉（AA2P))。[0016]在本發明的一個方面，添加劑是維生素衍生物，其通過適合反應過程，例如醚化、酰胺化或酯化與聚合物共價結合。[0017]在本發明的一個廣泛方面，提供了真皮填充劑組合物，所述組合物包含與交聯組分交聯的透明質酸組分和除所述交聯組分以外的添加劑。透明質酸組分可與添加劑化學結合。進一步地，當施用到患者的真皮區內時，相對于除沒有所述添加劑外，大體上相同的組合物，所述組合物表現出廷德爾效應減小。所述組合物可進一步包含其它添加劑，例如麻醉劑（例如利多卡因）。在一個實施方案中，添加劑是維生素C衍生物，例如AA2G。在另一實施方案中，添加劑是維生食物。[0018]在一個實施方案中，透明質酸組分與添加劑化學結合，結合度介于約3mol%和約40mol之間，例如介于約3Π1011%和約lOmol%之間。[0019]所述組合物可能大體上光學透明。所述組合物的G'值通常介于約40Pa和約lOOPa之間，例如不大于約lOOPa，例如不小于約40Pa。[0020]在本發明的另一方面，提供了治療患者皮膚上的細紋的方法。在一個實施方案中，所述方法包括向患者的皮膚中引入包含透明質酸組分、交聯所述透明質酸的交聯組分和除所述交聯組分以外的添加劑的混合物的組合物的步驟，所述組合物大體上光學透明，并且其中相對于除沒有所述添加劑外，大體上相同的組合物，所述組合物表現出廷德爾效應減小。[0021]在本發明的另一方面，提供了改善面部美觀的方法，所述方法通常包括下列步驟：向患者的真皮區施用大體上光學透明的沒有表現出或表現出不明顯的廷德爾效應的真皮填充劑組合物。所述組合物通過下列步驟制成：提供透明質酸，使交聯劑與維生素C衍生物反應，將已反應的交聯劑與維生素C衍生物添加到所述透明質酸中以形成包括共價結合的維生素C的交聯透明質酸組合物；并且勻化并中和所述交聯透明質酸組合物以獲得可注射的真皮填充劑組合物。在一些實施方案中，維生素C衍生物是AA2G。在其它實施方案中，維生素C衍生物是維生食物。[0022]在本發明的又一方面，提供了減少患者薄皮區中細紋出現的方法，其中所述方法通常包括在不大于約1_的深度，向所述患者施用真皮填充劑組合物，一種大體上光學透明的基于透明質酸的真皮填充劑組合物，其包括維生素C或維生素C衍生物。在一些實施方案中，在不大于0.8mm、不大于0.6mm或不大于0.4mm的深度注射所述組合物。[0023]在本發明的又一方面，提供了一種真皮填充劑組合物，其大體上光學透明并且通常包含與交聯組分交聯的透明質酸組分和與透明質酸組分共價結合的維生素C衍生物。在一個示例性實施方案中，所述組合物的G'值介于約40Pa和約lOOPa之間。進一步地，所述組合物的透明質酸濃度可能介于約18mg/g和約30mg/g之間。在治療皮膚，例如，甚至非常薄的皮膚，例如厚度不大于約1_的皮膚上的細紋或淺表皺褶中，這些組合物可能特別有用且有效。在一些實施方案中，本發明的組合物在引入皮膚后持續至少3個月，至少6個月或長達一年。[0024]參考下列附圖和詳細描述可能更容易理解和認識本發明的這些和其它方面及優點。[0025]附圖簡述[0026]圖1是L-抗壞血酸2-葡萄糖苷（AA2G)的結構示意圖。[0027]圖2是抗壞血酸3-氨丙基磷酸酯（維生食物）的結構示意圖。[0028]圖3是抗壞血酸磷酸鈉（AA2P)的結構示意圖。[0029]圖4是1，4-丁二醇二縮水甘油醚（BDDE)的結構示意圖。[0030]圖5是季戊四醇縮水甘油醚（Star-PEG環氧化物）的結構示意圖。[0031]圖6是季戊四醇（3-氨丙基）醚（Star-PEG胺）的結構示意圖。[0032]圖7是示出了根據本發明所述的各種真皮填充劑組合物的結合度和G'值的表。[0033]圖8是示出了根據本發明所述的HA-AA2G(BDDE)真皮填充劑組合物的結合度、HA濃度和G'值的表。[0034]圖9是對4種不同α-葡萄糖苷酶濃度而言，在時間方面（按分鐘計），觀察到的來自AA2G在PBS中的溶液的AsA釋放的百分比的圖形示意圖。[0035]圖10示出了來自根據本發明所述的結合真皮填充劑的游離AsA的釋放曲線示意圖（持續釋放）（與反應時間相比的AA2G轉化mol%)。[0036]圖11A和11B示出了根據本發明所述的各種真皮填充劑的附加釋放數據。[0037]圖12示出了在淺表注射本發明基于HA的真皮填充凝膠和一些市場上可買到的供細紋應用的凝膠后，皮膚的圖像。[0038]圖13示出了本發明基于HA的真皮填充凝膠和某些市場上可買到的供細紋應用的凝膠的視覺廷德爾得分。[0039]圖14示出了本發明基于HA的真皮填充凝膠和一些市場上可買到的供細紋應用的凝膠從皮膚出射的藍光％。[0040]圖15示出了植入本發明基于HA的真皮填充凝膠和一些市場上可買到的供細紋應用的凝膠1周后，剩余凝膠的總％。[0041]圖16示出了在植入本發明基于HA的真皮填充凝膠和一些市場上可買到的供細紋應用的凝膠第〇周、第12周、第24周和第40周，剩余凝膠的總％。[0042]詳述[0043]在本發明的一個方面，提供了真皮填充劑組合物，所述組合物通常包含生物相容性聚合物，例如多糖（例如交聯透明質酸）和與所述聚合物共價結合的維生素C衍生物。所述組合物提供了持續釋放供皮膚膠原蛋白增生的維生素C以及其它治療或美容利益。當引入皮膚時，例如皮內，所述組合物與體內的內源性酶反應，并且隨時間推移，經酶裂解在體內生成生物活性維生素C。因為在幾周或幾個月內維生素C從所述組合物釋放，使得隨之而來的利益對身體可用。[0044]所述聚合物可選自蛋白質、肽和多肽、聚賴氨酸、膠原蛋白、前膠原蛋白、彈性蛋白和層粘連蛋白。[0045]所述聚合物可選自具有羥基、胺和羧基官能團的合成聚合物：聚（乙烯醇）、聚乙二醇、聚乙烯胺、聚烯丙胺、去乙酰基聚丙烯酰胺、聚丙烯酸和聚甲基丙烯酸。所述聚合物可選自樹枝狀或支化聚合物，包括樹枝狀多元醇和樹枝狀聚胺。所述聚合物可選自具有羥基、胺和羧基官能團的固體表面。[0046]所述聚合物可為多糖，例如選自下列組的多糖，包括淀粉及其衍生物；葡聚糖及其衍生物；纖維素及其衍生物；幾丁質、殼聚糖和藻酸鹽及其衍生物。[0047]在本發明的一個示例性實施方案中，所述聚合物為糖胺聚糖。本文公開的水凝膠組合物可進一步包含兩種或更多種不同的糖胺聚糖聚合物。如本文所使用，術語"糖胺聚糖"與"GAG"和"粘多糖"同義并且指重復二糖單元組成的長直鏈多糖。重復單元由與己糖胺（含氮的六碳糖）及其藥學上可接受的鹽連接的己糖（六碳糖）或己糖醛酸組成。GAG家族成員在其所含的己糖胺、己糖或己糖醛酸單元的類型上不同，例如葡萄糖醛酸、艾杜糖醛酸、半乳糖、半乳糖胺、葡萄糖胺并且在配糖鍵的幾何形態上也可能不同。任何糖胺聚糖聚合物在本文公開的水凝膠組合物中均有用，條件是糖胺聚糖聚合物改善皮膚狀況。糖胺聚糖的非限制性實例包括硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸角質素、透明質烷。糖胺聚糖可接受的鹽的非限制性實例包括鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鈣鹽及其組合。例如，在Piron和Tholin，PolysaccharideCrosslinking,HydrogelPreparation,ResultingPolysaccharides(s)andHydrogel(s)，usesThereof，美國專利公布2003/0148995;Lebreton，Cross-LinkingofLowandHighMolecularWeightPolysaccharidesPreparationofInjectableMonophaseHydrogels；Lebreton,ViscoelasticSolutionsContainingSodiumHyaluronateandHydroxypropylMethylCellulose,PreparationandUses，美國專利公布2008/0089918;Lebreton，HyaluronicAcid-BasedGelsIncludingLidocaine，美國專利公布2010/0028438;和PolysaccharidesandHydrogelsthusObtained，美國專利公布2006/0194758;和DiNapoli，CompositionandMethodforIntradermalSoftTissueAugmentation，國際專利公布W02004/073759中描述了在本文公開的水凝膠組合物和方法中有用的糖胺聚糖及其所得聚合物，其各自據此通過引用整體并入。在本文公開的水凝膠組合物和方法中有用的GAG在市場上可買到，例如基于透明質烷的真皮填充劑JUVEDERMK、JUVEDERMU30、JUVEDERMKUltra、JUVEDERM'"1UltraPlus、JUVEDERM?UltraXC和JUVEDER1VTUltraPlusXC(AllerganInc，Irvine，California)。表1列出了代表性GAG。[0048]【權利要求】1.一種真皮填充劑組合物，包含：與交聯組分交聯的透明質酸組分；除所述交聯組分以外的添加劑；所述組合物大體上光學透明；并且當施用到患者的真皮區內時，相對于除沒有所述添加劑外，大體上相同的組合物，所述組合物表現出廷德爾效應減小。2.根據權利要求1所述的組合物，其中所述添加劑是維生素C衍生物。3.根據權利要求1所述的組合物，其中所述添加劑是AA2G。4.根據權利要求1所述的組合物，其中所述添加劑是維生食物。5.根據權利要求1所述的組合物，其中所述透明質酸組分與所述添加劑化學結合。6.根據權利要求1所述的組合物，其中所述透明質酸組分與所述添加劑化學結合，結合度介于約3mol%和約40mol%之間。7.根據權利要求1所述的組合物，其中所述透明質酸組分與所述添加劑化學結合，結合度介于約3mol%和約lOmol%之間。8.根據權利要求1所述的組合物，其中所述交聯組分為BDDE。9.根據權利要求1所述的組合物，進一步包含麻醉劑。10.根據權利要求1所述的組合物，進一步包含利多卡因。11.根據權利要求1所述的組合物，其G'值介于約40Pa和約lOOPa之間。12.根據權利要求1所述的組合物，其G'值不大于約lOOPa。13.根據權利要求1所述的組合物，其G'值不小于約40Pa。14.一種治療患者皮膚上的細紋的方法，所述方法包括：向患者的皮膚中引入包含透明質酸組分、交聯所述透明質酸組分的交聯組分和除所述交聯組分以外的添加劑的混合物的組合物；所述組合物大體上光學透明；并且其中相對于除沒有所述添加劑外，大體上相同的組合物，所述真皮填充劑組合物表現出廷德爾效應減小。15.根據權利要求14所述的方法，其中所述添加劑是維生素C衍生物。16.根據權利要求14所述的方法，其中所述添加劑是AA2G。17.根據權利要求14所述的方法，其中所述添加劑是維生食物。18.根據權利要求14所述的方法，其中所述透明質酸組分與所述添加劑化學結合。19.根據權利要求14所述的方法，其中所述透明質酸組分與所述添加劑化學結合，結合度介于約3mol%和約lOmol%之間。20.根據權利要求14所述的方法，其中所述透明質酸組分與所述添加劑化學結合，結合度介于約3mol%和約40mol%之間。21.-種改善面部美觀的方法，所述方法包括下列步驟：向患者的真皮區施用大體上光學透明的沒有表現出或表現出不明顯的廷德爾效應的真皮填充劑組合物，所述組合物通過下列步驟制成：提供透明質酸；使交聯劑與維生素C衍生物反應；將已反應的交聯劑與維生素C衍生物添加到所述透明質酸中以形成包括共價結合的維生素C的交聯透明質酸組合物；并且勻化并中和所述交聯透明質酸組合物以獲得可注射的真皮填充劑組合物。22.根據權利要求21所述的方法，其中所述添加劑是維生素C衍生物。23.根據權利要求21所述的方法，其中所述添加劑是AA2G。24.根據權利要求21所述的方法，其中所述添加劑是維生食物。25.根據權利要求21所述的方法，其中所述透明質酸組分與所述添加劑化學結合。26.根據權利要求21所述的方法，其中所述透明質酸組分與所述添加劑化學結合，結合度介于約3mol%和約40mol%之間。27.根據權利要求21所述的方法，其中所述透明質酸組分與所述添加劑化學結合，結合度介于約3mol%和約lOmol%之間。28.-種減少患者薄皮區中細紋出現的方法，所述方法包括：在不大于約1mm的深度，向所述患者施用真皮填充劑組合物，一種大體上光學透明的基于透明質酸的真皮填充劑組合物，其包括維生素C或維生素C衍生物。29.根據權利要求28所述的方法，其中在不大于約0.8mm的深度注射所述組合物。30.根據權利要求28所述的方法，其中在不大于約0.6mm的深度注射所述組合物。31.根據權利要求28所述的方法，其中在不大于約0.4mm的深度注射所述組合物。32.-種真皮填充劑組合物，包含：與交聯組分交聯的透明質酸組分；和以至少約3mol%的結合度與所述透明質酸組分共價結合的維生素C或維生素C衍生物；所述組合物大體上光學透明并且G'值介于約40Pa和約lOOPa之間。33.根據權利要求32所述的組合物，其透明質酸濃度介于約18mg/g和約30mg/g之間。34.根據權利要求32所述的組合物，其透明質酸濃度介于約12mg/g和約30mg/g之間。35.根據權利要求32所述的組合物，其中所述結合度為約lOmol%。36.根據權利要求32所述的組合物，其中所述透明質酸至少90%為低分子量HA。37.根據權利要求32所述的組合物，其中所述透明質酸大體上完全為低分子量HA。38.-種用于減少面部細紋出現的可注射組合物，所述組合物包含：1，4-丁二醇二縮水甘油醚（BDDE)交聯的低分子量透明質酸（HA)，所述HA的平均分子量介于約300KD和約900KD之間；和與所述透明質酸共價結合的維生素C衍生物，結合度為約10mol%;所述組合物的G'值為約60Pa至約80Pa。39.根據權利要求38所述的組合物，其中所述HA的平均分子量介于約300KD和約500KD之間。40.根據權利要求39所述的組合物，其中所述組合物的G'值為約80Pa。41.根據權利要求38所述的組合物，其光學透明。42.根據權利要求38所述的組合物，其HA濃度為約25mg/g。【文檔編號】A61K8/67GK104105474SQ201280055657【公開日】2014年10月15日申請日期:2012年9月13日優先權日:2011年9月14日【發明者】G·N·恩吉康,俞小杰,劉福田,薩米特·包利華,N·J·馬內西斯申請人:阿勒根公司