克力托辛在制備增敏劑中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明提供克力托辛在制備逆轉腫瘤TRAIL耐藥性的增敏劑中的應用，該克力托辛分子式為C9H13N5O6，分子量287。所述藥物由clitocine與制劑允許的藥物賦形劑或載體組成。本發明提供的clitocine對多種人的以及小鼠的肝癌細胞、結腸癌和乳腺癌細胞都有較強的TRAIL增敏效果，能夠在較低劑量下有效增加腫瘤細胞對TRAIL的敏感性，并以協同作用的方式誘導腫瘤細胞凋亡，是一種廣譜的有效的TRAIL增敏劑，為TRAIL抗腫瘤藥物的安全、廣泛應用提供了保障。
【專利說明】克力托辛在制備增敏劑中的應用
【技術領域】
[0001]本發明屬制藥【技術領域】，涉及克力托辛在制備逆轉腫瘤細胞對TRAIL耐藥性的增敏劑中的應用。
【背景技術】
[0002]TRAIL (TNF-related apoptosis-1nducing ligand)是腫瘤壞死因子超家族的一個成員，由于能夠特異性地誘導腫瘤細胞凋亡，自被發現以來研究人員就將其作為一個選擇性抗腫瘤藥物進行著廣泛的研究。近期，以TRAIL為主體的腫瘤治療正在進行I期和II期臨床試驗(WWW.clinicaltrails.gov)。雖然TRAIL在臨床前試驗中表現了良好的選擇特異性和較低的細胞毒性，TRAIL在腫瘤臨床治療中的療效非常有限。究其原因，就是腫瘤細胞特別是轉移性腫瘤細胞對TRAIL產生了耐藥性。已有的研究表明，腫瘤細胞對TRAIL的耐藥性的分子機制非常復雜。
[0003]因此，尋找新型有效的TRAIL增敏劑與TRAIL協同作用以治療腫瘤具備了廣泛的應用前景。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是提供克力托辛(clitocine)在制備逆轉腫瘤TRAIL耐藥性的增敏劑中的應用，該clitoci ne是從高等真菌大白樁燕菌Ueucopeixillus giganteus)子實體中分離所得，分子式為C9H13N5O6,分子量287。所述藥物由clitocine與制劑允許的藥物賦形劑或載體組成。本發明所述的高等真菌大白樁燕菌屬白蘑科，夏秋季于草原上單生或群生，有時生于林中草地上。分布于河北、內蒙古、吉林、遼寧、山西、黑龍江、青海、新疆等地。所述腫瘤主要包括肝癌、結腸癌和乳腺癌。
[0005]本發明提供的藥物，其制劑形式主要包括液體制劑、顆粒劑、片劑、沖劑、軟膠丸、軟膠囊、滴丸劑或注射劑。
[0006]本發明提供的藥物，制劑的給藥形式主要包括口服給藥或注射給藥。
[0007]本發明提供的clitocine對多種人的以及小鼠的肝癌細胞、結腸癌和乳腺癌細胞都有較強的TRAIL增敏效果。表明clitocine是一廣譜的有效的TRAIL增敏劑。目前臨床上缺乏能有效逆轉腫瘤對TRAIL耐藥性的藥物，因此clitocine具有很好的應用前景。本發明Clitocine能夠在較低劑量下有效增加腫瘤細胞對TRAIL的敏感性，并以協同作用的方式誘導腫瘤細胞凋亡。因此clitocine具有很好的逆轉腫瘤細胞對TRAIL耐藥性的應用前景，為TRAIL抗腫瘤藥物的安全、廣泛應用提供了保障。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0008]圖1是clitocine的液相色譜分析。
[0009]圖2 (A、B)是clitocine與TRAIL協同作用有效抑制人肝癌細胞H印G2的體外生長。[0010]圖3 (A、B)是clitocine與TRAIL協同作用有效抑制人乳腺癌細胞MCF-7的體外生長。
[0011]圖4(A、B)是clitocine與TRAIL協同作用有效抑制人結腸癌細胞SW620的體外生長。
[0012]圖5(A、B)是clitocine與TRAIL協同作用有效抑制人結腸癌細胞LS411N的體外生長。
[0013]圖6(A、B)是clitocine與TRAIL協同作用有效抑制人結腸癌細胞HCT116的體外生長。
【具體實施方式】
[0014]以下將結合具體實施例與附圖詳細說明本發明，這些實例僅用于說明目的，而不用于限制本發明范圍。
[0015]實施例1:從新鮮大白樁菇菌子實體提取分離純化抗腫瘤活性化合物及其結構鑒定
1.提取和純化:將原料新鮮大白樁菇菌子實體(2.7kg)真空冷凍干燥，粉碎機粉碎，所得340g菌粉浸于1.5L 95%(v/v)酒精中，其間更換新鮮溶劑一次，合并兩次浸提液，減壓濃縮得酒精浸膏(25.7g)，浸膏經乙酸乙酯萃取，減壓濃縮得乙酸乙酯浸膏(15.7 g)。取15g乙酸乙酯浸膏上硅膠柱，CH2Cl2/MeOH (10:0- 0:10)梯度洗脫，收集細胞篩選有活性的洗脫峰(6.5g)，然后上反相株 RP-18 (0DS, 50 mm, Φ25X420 mm),Me0H/H20 (1:9)洗脫，細胞篩選有活性的部分再經過反相株`RP-C8制備[5 mm ；Φ20Χ250 mm ；Me0H/H20 (5:95) ；8 ml/min],得到目的化合物clitocine (815mg)。其液相色譜分析圖參見附圖1，在洗脫時間9.0分時出現單一峰即為clitocine。
[0016]2.結構鑒定:核磁共振儀(IN0VA-400),質譜儀(Bruker Esquire 3000 plus)
3.實驗結果:clitocine,分子式為C9H13N5O6, ES1-MS 287。其一維的二維的核磁數據列于表1。根據表1數據與文獻比較所得clitocine的化學結構:
【權利要求】
1.一種克力托辛在制備逆轉腫瘤TRAIL耐藥性的增敏劑中的應用，所述克力托辛的分子式為C9H13N5O6，分子量287，其特征在于，所述藥物由克力托辛與制劑允許的藥物賦形劑或載體制成，所述腫瘤為肝癌、結腸或乳腺癌。
2.根據權利要求1所述的一種克力托辛在制備逆轉腫瘤TRAIL耐藥性的增敏劑中的應用，其特征在于， 所述藥物的制劑形式選用液體制劑、固體制劑或膠囊劑。
【文檔編號】A61K31/7064GK103520195SQ201310230334
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年6月11日 優先權日:2013年6月11日
【發明者】孫建國, 劉非燕, 吳平 申請人:浙江大學