一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發油的方法
【專利摘要】本發明公開了一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發油的方法，其包括如下步驟：將藁本藥材粉碎至20～40目，干燥，投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度40～60℃、萃取壓力15～25Mpa、CO2流量20～30kg/h，時間為0.5～2小時，收集藁本揮發油。本發明的方法提高了從藁本藥材中萃取藁本內酯的回收率，同時也提高了藁本內酯在總提物中的含量，故而其可以為藁本內酯的工業制備提供高質量的原料。
【專利說明】一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發油的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于天然藥物領域，特別是涉及一種采用超臨界二氧化碳從藁本中提取揮發油的方法。
【背景技術】
[0002]藁本(Ligusticum sinense Oliv.)為傘形科藁本屬植物,其藥用部位為根莖。藁本為我國傳統中藥，具有活血行氣，祛風止痛的功效，是風濕痹痛與偏頭痛的常用中藥。
[0003]藁本內酯(Ligustilide)為藁本油中的主要成分，據文獻報道，其對心腦血管、循環系統、免疫功能等均有較好的藥理作用。
[0004]目前藁本油的提取采用常壓水蒸汽蒸餾提取法、有機溶劑提取法和超臨界萃取。常壓水蒸氣蒸餾提取法的缺點是得率低(藁本內酯在高溫下不穩定)，且需要長時間的浸泡，耗時過長。有機溶劑提取法很容易將藁本中非活性物質如糖、氨基酸等小分子有機物提取出來，給后來的藁本內酯的分離提純帶來了很大的困難。而且有機試劑很難完全去除。
【發明內容】
[0005]本發明的目的旨在提供一種采用超臨界二氧化碳從藁本中提取藁本揮發油的方法。
[0006]具體地說，本發明的 第一方面是提供了一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發油的方法，所述方法包括如下步驟:
[0007]將藁本藥材粉碎至20~40目，干燥，投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度40~60°C、萃取壓力15~25Mpa、C02流量20~30kg/h，時間為0.5~2小時，收集藁本揮發油。
[0008]在一優選例中，所述干燥步驟包括將粉碎后的藁本藥材在35~50°C下干燥6~10h。
[0009]在另一優選例中，所述方法包括如下步驟:將藁本藥材粉碎至40目，在50°C下干燥6h，投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度55°C、萃取壓力20Mpa、CO2流量25kg/h，時間為1.5小時，收集藁本揮發油。
[0010]本發明各個方面的細節將在隨后的章節中得以詳盡描述。通過下文以及權利要求的描述，本發明的特點、目的和優勢將更為明顯。
【具體實施方式】
[0011]本發明人基于其多年以來使用超臨界萃取藁本藥材的經驗，對現有技術中采用超臨界二氧化碳從藁本中提取藁本揮發油的方法做了進一步的優化和改進。
[0012]具體地說，本發明提供了一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發油的方法，所述方法包括如下步驟:
[0013]將藁本藥材粉碎至20~40目，干燥，投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度40~60°C、萃取壓力15~25Mpa、C02流量20~30kg/h，時間為0.5~2小時，收集藁本揮發油。[0014]較優選地，所述干燥步驟包括將粉碎后的藁本藥材在35~50°C下干燥6~10h。
[0015]更優選地，所述方法包括如下步驟:將藁本藥材粉碎至40目，在50°C下干燥6h，投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度55°C、萃取壓力20Mpa、C02流量25kg/h，時間為1.5小時，收集藁本揮發油。
[0016]藁本藥材及其揮發油中的藁本內酯的含量及其轉移率可用液相色譜法測得，具體操作步驟如:取500mg藁本藥材或其揮發油置于100ml的棕色瓶中，加入25ml甲醇，密閉、稱重、超聲90ml后取出，稱重,補足失重,搖勻,靜置后取上清液過濾后,取5ul進液相。
[0017]測定藁本內酯的液相條件如下:Agilent Zorbax C18柱(4.6mmX250mm);流動相:乙腈-水(60:40);檢測波長:350nm ;流速1.0mL.min—1 ;柱溫:20°C ;進樣量:2uL。
[0018]標準品配制:精密稱取蒿苯內酯對照品約IOmg,置IOmL棕色量瓶容量瓶中，加無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得約1.0mg/mL的對照品溶液母液。取其中2.5mL溶液置IOmL棕色量瓶容量瓶中，加無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得約0.25mg/mL的對照品溶液，作為常用的含量測定用的標定液。
[0019]供試品配制:密稱取藁本藥材樣品(20目)約0.5g，置60mL具塞棕色瓶中，精密加入甲醇25mL，密閉，稱重。超聲提取90min，取出稱重，補足失重。搖勻，靜置，取上清液經微孔濾過濾，作為供試品溶液。
[0020]本發明的方法與現有技術相比，其具有如下優點:
[0021]I)本發明的方法在低溫下操作，使藁本內酯不易轉化；
[0022]2)本發明的方法優化了超臨界萃取藁本的條件，使得藁本內酯能較完全地被提取出來，同時保證了藁本內酯在總提物(藁本揮發油)中的含量；
[0023]3)本發明的方法操作簡便(不加改性劑)，耗時短(最少僅需0.5小時)，重復性好。
[0024]本發明的方法提高了從藁本藥材中萃取藁本內酯的回收率(80%以上)，同時也提高了藁本內酯在總提物中的含量(15~25%)，故而可以為藁本內酯的工業制備提供高質量的原料。
[0025]下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分數、比率、比例、或份數按
重量計。
[0026]除非另行定義，文中所使用的所有專業與科學用語與本領域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內容相似或均等的方法及材料皆可應用于本發明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。
[0027]本發明提到的上述特征，或實施例提到的特征可以任意組合。本專利說明書所揭示的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特征的一般性例子。
[0028]實施例1藁本揮發油的超臨界提取(最佳例)
[0029]藁本飲片1kg，粉碎成40目粉末，50°C下干燥6h，將上述干燥后的藁本樣品投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度55°C、萃取壓力20Mpa、C02流量25kg/h，時間為1.5h，直接在萃取釜出口用棕色廣口瓶收集藁本揮發油。最終得藁本揮發油21.7g，揮發油得率為2.17%，經液相檢測(步驟及條件如下)，其中藁本內酯含量為24.5%，藁本內酯的轉移率為
95.4%。
[0030]測定藁本內酯的步驟如下:取500mg藁本藥材或其揮發油置于100ml的棕色瓶中，加入25ml甲醇,密閉、稱重、超聲90ml后取出，稱重,補足失重,搖勻,靜置后取上清液過濾后，取5ul進液相。
[0031]測定藁本內酯的液相條件如下:Agilent Zorbax C18柱(4.6mmX250mm);流動相:乙腈-水(60:40);檢測波長:350nm ;流速1.0mL.min—1 ;柱溫:20°C ;進樣量:2uL。
[0032]標準品配制:精密稱取蒿苯內酯對照品約IOmg,置IOmL棕色量瓶容量瓶中，加無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得約1.0mg/mL的對照品溶液母液。取其中2.5mL溶液置IOmL棕色量瓶容量瓶中，加無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得約0.25mg/mL的對照品溶液，作為常用的含量測定用的標定液。
[0033]供試品配制:密稱取樣品(20目)約0.5g，置60mL具塞棕色瓶中，精密加入甲醇25mL,密閉,稱重。超聲提取90min,取出稱重,補足失重。搖勻,靜置,取上清液經微孔濾過濾，作為供試品溶液。
[0034]實施例2藁本揮發油的超臨界提取
[0035]藁本飲片1kg，粉碎成20目粉末，35°C下干燥10h，將上述干燥后的藁本樣品投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度40°C、萃取壓力15Mpa、CO2流量30kg/h，時間為0.5小時，直接在萃取釜出口用棕色廣口瓶收集藁本揮發油。最終得藁本揮發油19.3g，得率為
1.93%，經液相檢測(步驟和條件同實施例1)，其中藁本內酯含量為23.9%，藁本內酯的轉移率為82.8%ο
`[0036]實施例3藁本揮發油的超臨界提取
[0037]藁本飲片1kg，去除雜質后粉碎成40目粉末，45°C下干燥7h，上述干燥后的藁本樣品投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度60°C、萃取壓力25Mpa、CO2流量20kg/h，時間為2小時，直接在萃取釜出口用棕色廣口瓶收集藁本揮發油。最終得藁本揮發油29.6g，得率為
2.96%，經液相檢測(步驟和條件同實施例1)，其中藁本內酯含量為16.5%，藁本內酯的轉移率為87.6%ο
[0038]實施例4藁本揮發油的超臨界提取
[0039]藁本飲片1kg，去除雜質后粉碎成30目粉末，40°C下干燥8h，上述干燥后的藁本樣品投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度50°C、萃取壓力20Mpa、CO2流量25kg/h，時間為I小時，直接在萃取釜出口用棕色廣口瓶收集藁本揮發油。最終得藁本揮發油25.6g，得率為
2.56%，經液相檢測(步驟和條件同實施例1)，其中藁本內酯含量為17.8%，藁本內酯的轉移率為81.7%。
[0040]本發明所涉及的多個方面已做如上闡述。然而，應理解的是，在不偏離本發明精神之前提下，本領域專業人員可對其進行等同改變和修飾，所述改變和修飾同樣落入本申請所附權利要求的覆蓋范圍。
【權利要求】
1.一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發油的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟:將藁本藥材粉碎至20~40目，干燥，投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度40~60°C、萃取壓力15~25Mpa、C02流量20~30kg/h，時間為0.5~2小時，收集藁本揮發油。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述干燥步驟包括將粉碎后的藁本藥材在35~50°C下干燥6~10h。
3.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，它包括如下步驟: 將藁本藥材粉碎至40目，在50°C下干燥6h，投入超臨界萃取裝置中，調節萃取溫度55°C、萃取壓力20Mpa、C(V流量25kg/h，時間為1.5小時，收集藁本揮發油。
【文檔編號】C11B9/02GK103484253SQ201310429044
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月18日 優先權日:2013年9月18日
【發明者】胡佳亮, 鄭向煒, 梁爽, 馮怡 申請人:上海中醫藥大學