專利名稱：多聚路易斯x糖類及其制備方法
技術領域：
本發明涉及多聚路易斯X糖類及其新的有效的制備方法。本發明尤其涉及二聚至八聚路易斯X衍生物。
糖結合物尤其是糖脂和鞘糖脂在腫瘤診斷和腫瘤治療領域作為腫瘤相關抗原的生物重要性(如Hakomori(1985)Cancer Res.45，2405)已在化學合成中引起極大興趣(以上所有物質均為低聚糖)。低聚糖抗原決定簇可用為半抗原，并誘導產生可用于治療或診斷癌癥或癌轉移或刺激抗腫瘤細胞之內源性防御的抗體(如Castronovo et al.(1989)，J.Natl.Cancer Inst.81(3)，212)。
一種已知的腫瘤相關抗原是路易斯抗原X(Lex)，其低聚糖成份由Galβ(1→4)〔Fuca→3)〕GlcNAc組成。已知路易斯抗原X是以單體、二聚體和三聚體形式存在的(如Holmes et al.(1987)，J.Biol.Chem.262，11331和15649)。
以前合成Lex抗原已集中在各種合成方案，使用不同的合成單位和使用不同的保護基上。因此，其一個例子是使4－0－未保護的葡糖胺受體與半乳糖基供體反應，并在除去3－0保護后將產物連接到巖藻糖殘基上(如參見Nicolaou et al.(1990)，J.Am.Chem.Soc.112，3693；Nicolaos et al.(1992)，J.Am.Chem.Soc.114，3126;Sato et al.(1988)，Tetrahedron Lett.29，5297;Sato et al.(1987)，Carbohydr.Res.167，197;Hindsgaul et al.(1982)，Carbohydr.Res.109，109;Lonn(1985)，Carbohydr.Res.139，115;and Classon et al.(1989)，J.Carbohydr.Chem.8，543)。另外可通過隨后的巖藻糖基化使相應的乳糖胺衍生物發生鏈增長(如參見Nillson et al.(1987)，Glycokonjugate J.4，219，and Nillson et al.(1988).Carbohydr Res.183，183)，或者已發展了一種基于疊氮乳糖的合成方案(如參見Bommer et al.(1990)，Liebigs Ann.Chem.425)。利用“反向程序”(如Schmidt et al.(1991)，Tetrahedren Lett.32，3353)用巖藻糖供體進行α-巖藻糖基化，或利用“腈作用”(如Schmidt et al.(1990)，Synlett 694;和Vankar et al.(1991)，Tetrahedron Lett.47，9985)借助2-疊氮糖基供體進行β-糖苷鍵合而作出進一步改進。該方法還可獲得很高的立體選擇性，尤其是在糖基化步驟中。而這對于維持預期生物活性是必需的。
盡管存在上述最佳化方法，但仍發現，在合成已知四聚、六聚和八聚糖過程中，隨著鏈長增加產率往往明顯下降。因此，當將已知方法應用于合成具有與前述相似應用目的的高聚合度低聚糖時，其產率將會更低，效益更差。
總之，當利用已知方法生產三聚、四聚、六聚甚至八聚路易斯X衍生物(即由11、14、20或26個單糖單元組成的低聚糖)時，將不能獲得令人滿意的產率。
因此，本發明的目的是要對已被證明適用于低級Lex單元的方法進行改進并實現最佳化，以使八糖以上的衍生物也能以可行的合成方法得到。
現已發現，可利用相應的供體和受體單元，通過任何所需的自Lex六糖開始的鏈增長，制備出多聚路易斯X糖，可作為供體單元的是三氯乙酰亞胺酯(TCAI)，可使用的受體單元是帶有大空間保護基的糖，尤其是具有多個Lex三糖成分的O-叔丁基二甲基甲硅烷基化合物(OTBS)，根據需要還可另外使用有受體的二糖。
根據本發明，所述受體化合物的不同在于存在亞芳基尤其是4，6-O-亞芐基，保護基，特別是在末端半乳糖吡喃糖環上的保護基，從而可易于選擇性地進入特定的3-O位置，該位置即決定了糖基受體的性質。
而且發現，可利用得自易于得到的叔丁基二甲基甲硅烷基2-疊氮-4，6-O-亞共基-吡喃葡糖苷或在其它位置被甲硅烷基化和/或亞芳基化的相應2-疊氮吡喃葡糖苷的相應三糖，有效地制備出Lex六糖，這些糖苷同樣具有上述方式的保護基，帶有提供供體和受體功能的相應性質。
在每種情況下以一次鏈增長循環計，如此制得的多聚Lex衍生物所具有的立體選擇率為90-100%，較好為95-99%，產率為65.85%，優選70-80%。令人驚奇的是，當鏈長增加，例如由二聚體通過四聚體增長為本發明的八聚路易斯X衍生物時，產率并未下降。即使在鏈增長更大的情況下(n＞7，式Ⅰ，Ⅳ)，也能得到類似結果，并可得出這樣的結論即利用本發明的方法能夠得到更高聚合度的路易斯X糖。
因此，本發明涉及一種由六糖單元開始制備式Ⅰ多聚路易斯X糖的方法
其中X為OC(＝NH)CCl3(TCAI)、Z或S，Z為OCH2CH(NHCOCuH2u+1CH(OH)CH＝CHCvH2v+1，S為(CH2)qCOOR″，R為OH或Rsg，Rsg為OAC、OBn或OBz，R′為OH，OAC或OPiv，R″為C1-C4烷基，Ac為乙酰基，Bn為芐基，Bz為苯甲酰基，Piv為新戊酰基，n為整數0-7，q為整數4-12，u為整數13-23，v為整數11-17，
其特征在于進行以下各步驟反應(a)將選自式Ⅱ化合物之一且在1-0位置被活化的供體糖單位(Ⅱ〔TCAI/(X)〕)
式Ⅱ中Y為OC(NH)CCl3(TCAI)或W，W為O-叔丁基二甲基甲硅烷基(OTBS)、O-thexyl二甲基甲硅烷基(OTDS)或O-叔丁基二苯基甲硅烷基(OTDPS)，R的定義同前，R1為R，Ar為芳基，Me為甲基，K和l為整數0-6，且其中當Y為TCAI時，R1為OAc、OBn或OBz，當Y為W時，R1為OH，用式(V)的受體糖單位(V〔(Y)〕)糖苷化
式Ⅴ中R，Ar，Me和W的定義同前，且m為0-5的整數，以得到具有較高鏈長的式Ⅱ糖(Ⅱ〔W(X+Y〕)，其中X為6、9、12、15、18或21，Y為3、6、9、12、15或18，它們代表了所研究的多糖中單糖成分的數目，且X+Y不大于24;
(b)用相應保護基取代游離OH基，并用TCAI殘基取代W殘基，轉化得到相應的具有更高鏈長的式Ⅱ供體糖(Ⅱ〔TCAI/(X+Y)〕);
(c)用作為受體的下列式Ⅲ的二糖-其中R和R′的定義同前-使得自(b)的其1-0位已被活化的供體糖糖苷化，
得到式Ⅳ糖〔(X+Y+2)〕，
其中R、R1、Ar、Me和n的定義同前;并(d)將化合物Ⅳ的疊氮基還原為乙酰氨基，裂解掉亞芳基和芐基，并使R和R′殘基過乙酰化，用OH基取代配糖乙酰基并反應得到相應的式Ⅰ三氯乙酰亞氨酯(X＝TCAI)，必要時可對殘基X-Z或S進行修飾并除去保護基(R，R′＝OH)。
本發明還涉及制備式Ⅱ路易斯X六糖(Ⅱ〔TCAI/W/(X)〕，k＝0，l＝1，x＝6)的方法，其特征在于使帶有大空間甲硅烷基保護基的亞芳基-2-疊氮-吡喃葡糖苷，尤其是叔丁基二甲基甲硅烷基2-疊氮-4，6-O-亞芐基-吡喃葡糖苷與相應單糖的三氯乙酰亞氨酯反應，得到式Ⅱ三糖(Ⅱ〔W/(x)〕，k＝0，l＝0，x＝3)，并使由此制備出的式(Ⅱ)供體三糖(Ⅱ〔TCAI/(x)，x＝3)與式V受體三糖(V〔(y)〕，m＝0，y＝3)相互反應，得到相應的六糖。
利用本發明的方法也可合成新的多聚路易斯X糖，尤其是四聚、六聚和八聚路易斯X抗原。
因此，本發明也涉及具有如上定義的式Ⅰ多聚路易斯X糖，但其中n為整數2-7，條件是當n為2時x可不是其中u＝15、v＝13的Z，且R和R′可能不是OH。這些糖具體的是
式Ⅰ的四聚路易斯X抗原(n＝3)，式Ⅰ的六聚路易斯X抗原(n＝5)和式Ⅰ的八聚路易斯X抗原(n＝7)。
本發明還涉及具有如上定義的式Ⅱ的多聚路易斯X糖，但其中k為1且1為整數1-5，和具有如上定義的式Ⅳ的多聚路易斯X糖，但其中n為整數2-7，以及具有如上定義的式V多聚路易斯X糖，但其中m為整數1-5。
權利要求7至11所述的式Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ化合物適用于腫瘤診斷及制備用來治療腫瘤的抗體。這里所說的腫瘤是其表面攜帶相應的多聚路易斯X抗原的腫瘤。這類腫瘤的例子包括胃腸道腫瘤、乳腺癌、卵巢癌、肝癌以及胃或胰腺癌。這些抗體是按文獻中所述的已知的慣用方法制備的(如參見Harlow，LaneAntibodies，A Laboratory Manual;Cold Spring Harbor 1988)。
因此，本發明最后還涉及將權利要求7-11所述的式Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ化合物用于制備治療和診斷腫瘤的抗體。
本上下文中所用縮寫的意義如下TCAI 三氯乙酰亞氨OTBS O-叔丁基二甲基甲硅烷基.
TBAF 四丁基氟化銨TMSOTf 三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯DBU 1，8-二氮雜二環〔5.4.0〕十一-7-烯OTDS O-thexyl 二甲基甲硅烷基OTDPS O-叔丁基二苯基甲硅烷基S為間隔基(CH2)qCOOR″，其中R″為C1-C4烷基，且q可設定為所提到的值。這里的烷基可以是直鏈或支鏈烷基，具體為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基。優選的R″為甲基或乙基。q較好為6-10，尤其是8。特別優選的間隔基是-(CH2)8COOEt。
Z的定義同上，但優選OCH2CH(NHCOC15H31)CH(OH)CH＝CHC13H27(N-脂酰基)。u可假定為數值13-23，優選為15-20，尤其是15。且v可假定為數值11-17，任為13-15，尤其是13。W為大空間甲硅烷基保護基，如OTBS、OTDS或OTDPS。特別優選的是OTBS。Ar為被取代或未被取代的芳基或雜芳基，更好是苯基。因此在特定吡喃半乳糖苷環上的優選保護基是亞芐基。雖然有限制，但除了本發明的亞芳基保護基外，也可使用異亞丙基。
Rsg為保護基團，且為O-乙酰基、O-芐基或O-苯甲酰基。
圖1(1.1-1.5)代表了本發明方法中最重要的化合物，其編號與在實施例中的編號相對應。
下面對本發明的方法進行一般性敘述，對與碳水化合物化學中的普通方法相對應的方法步驟，如保護基的引入和脫去不作詳細解釋，可參看這一方面的標準文獻(如T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，1981，John Wiley & Sons;Methods in Carbohydrate Chemistry，Vol.Ⅰ-Ⅷ，Academic Press)。
較好利用上下文中所提到的保護基(OAc、OBn、OBz、N3、OPiv)來完成本發明的方法;但也可利用足以適當引入和脫去的其它已知保護基。在上面所提到的文獻中對三氯乙酰亞氨一般方法和所限定之低聚糖的合成進行了足夠的描述。
本發明之合成方法所需的起始化合物是式(Ⅱ)化合物的糖，由它們可制備出本發明的供體和受體單位(式Ⅴ)，且可在重復合成循環中由它們構建聚合鏈。式Ⅱ疊氮三糖(k＝0，l＝0)為最小單位。按照本身已知的方法由相應的單糖單位可制備出這些包括吡喃半乳糖、吡喃巖藻糖和吡喃葡糖環在內的中央基本單元，其中較好使用易于獲得的叔丁基二甲基甲硅烷基2-疊氮-4，6-O-亞芐基-吡喃葡糖苷作為起始物。但是，在其它處被相應保護的2-疊氮基-吡喃葡糖苷也是適用的。其詳細內容可參見實施例1-8。表Ⅰ(A，B)以舉例方式對式Ⅱ和Ⅴ的化合物進行了分類。
表Ⅰ(A)Ⅱ〔Y/(X)〕型化合物。Y＝TCAI或OTBS;X＝單糖單元數;Z＝三糖單元數;A＝被合成之化合物的編號(實施例編號);Rsg、k和l的定義同前。
Type x/z R1k l AII [OTBS] 3/1 - 0 0 8II [TCAI] 3/1 - 0 0 10II [OTBS] 6/2 OH 0 1 13II [TCAI] 6/2 Rsg0 1 16II [OTBS]1)9/3 OH 1 1 38II [TCAI]1)9/3 Rsg1 1 41II [OTBS]1)12/4 OH 1 2 52II [TCAI]1)12/4 Rsg1 2 55II [OTBS]1)15/5 OH 1 3 -II [OTBS]1)18/6 OH 1 4 -II [OTBS]1)21/7 OH 1 5 -II [OTBS]1)24/8 OH 1 6 -II [OTBS]2)24/8 OH 6 1 -II [OTBS]3)24/8 OH 3 3 -
標記1)的化合物類型涉及的是可由六糖供體和相應受體單位制得的化合物。
如表Ⅰ所示，具有較長鏈長的供體與相應較短鏈長的受體糖的結合也是可能的(例如2)在此情況下，21-糖供體與三糖受體相連接;3)兩個十二糖相連接。
表Ⅰ(B)V〔(Y)〕型化合物。Y＝單糖單元數;Z＝三糖單元數;A＝合成之化合物的編號(實施例編號)，m的定義同前。
Type y/z m AV [OTBS] 3/1 0 12V [OTBS] 6/2 1 51V [OTBS] 9/3 2 -V [OTBS] 12/4 3 -V [OTBS] 15/5 4 -V [OTBS] 18/6 5 -表Ⅱ舉例顯示了各種式Ⅱ化合物(Ⅱ〔TCAI/OTBS(x)〕)與式V化合物(V〔OTBS(Y)〕)的反應，其中W為OTBS。
括號中的數值表示具體化合物中的單糖單位數;A合成之化合物的編號(實施例編號);B反應條件(表Ⅲ);C預期的產率(%)(±5%);X的定義如前(式Ⅰ)。
起始化合物 產物 A B CII[OTBS(3)] II[TCAI(3)] 10 a 95II[OTBS(3)] V[OTBS(3)] 12 b 90II[TCAI(3)]+V[OTBS(3)] II[OTBS(6)] 13 c 80II[OTBS(6)] II[TCAI(6)] 16 d 95II[TCAI(6)]+III(2) IV(8) 26 c 75IV(8) I[X(8)] 27-37 e-k 75II[TCAI(6)]+V[OTBS(3)] II[OTBS(9)] 38 c 75II[OTBS(9)] II[TCAI(9)] 41 d 90II[TCAI(9)]+III(2) IV(11) 42 c 70IV(11) I[X(11)] 42-49 e-k 75II[OTBS(6)] V[OTBS(6)] 51 b 85II[TCAI(6)+V[OTBS(6)] II[OTBS(12)] 52 c 80II[OTBS(12)] II[TCAI(12)] 55 d 95II[TCAI(12)]+III(2) IV(14) 56 c 75IV(14) I[X(14)] 57-63 e-k 75II[OTBS(9)] V[OTBS(9)] - b 85II[TCAI(9)]+V[OTBS(9)] II[OTBS(18)] - c 80II[OTBS(18)] II[TCAI(18)] - d 90II[TCAI(18)]+III(2) IV(20) - c 80IV(20) I[X(20)] - e-k 75
起始化合物 產物 A B CII[OTBS(12)] V[OTBS(12)] - b 85II[TCAI(12)]+V[OTBS(12)] II[OTBS(24)] - c 75II[OTBS(24)] II[TCAI(24)] - d 90II[TCAI(24)]+III(2) IV(26) - c 70IV(26) I[X(26)] - e-k 75II[OTBS(9)] V[OTBS(9)] - b 85II[OTBS(15)] V[OTBS(15)] - b 80II[OTBS(18)] V[OTBS(18)] - b 80II[OTBS(15)] II[OTBS(15)] - d 95II[OTBS(21)] II[OTBS(21)] - d -II[TCAI(9)]+V[OTBS(3)] II[OTBS(12)] - c 85II[TCAI(6)]+V[OTBS(9)] II[OTBS(15)] - c 85II[TCAI(9)]+V[OTBS(6)] II[OTBS(15)] - c 80II[TCAI(12)]+V[OTBS(3)] II[OTBS(15)] - c 85II[TCAI(6)]+V[OTBS(12)] II[OTBS(18)] - c 80II[TCAI(12)]+V[OTBS(6)] II[OTBS(18)] - c 80II[TCAI(15)]+V[OTBS(3)] II[OTBS(18)] - c 85II[TCAI(6)]+V[OTBS(15)] II[OTBS(21)] - c -II[TCAI(9)]+V[OTBS(12)] II[OTBS(21)] - c -II[TCAI(12)]+V[OTBS(9)] II[OTBS(21)] - c -II[TCAI(15)]+V[OTBS(6)] II[OTBS(21)] - c -II[TCAI(18)]+V[OTBS(3)] II[OTBS(21)] - c -II[TCAI(6)]+V[OTBS(18)] II[OTBS(24)] - c 60II[TCAI(9)]+V[OTBS(15)] II[OTBS(24)] - c 80II[TCAI(15)]+V[OTBS(9)] II[OTBS(24)] - c 80II[TCAI(18)]+V[OTBS(6)] II[OTBS(24)] - c 80II[TCAI(15)]+III(2) IV(17) - c 75II[TCAI(21)]+III(2) IV(23) - c -IV(17) I[X(17)] - e-k 75IV(23) I[X(23)] - e-k 70
表Ⅲ具體列出了表Ⅱ所示的反應條件。除非另有說明，所列出的試劑，尤其是滲劑、催化劑和還原劑均可被碳水化合物化學中是常用的。其它相應的等價物所代替。當使用其中W不為OTBS，Z不為N-酯酰基的式Ⅱ和Ⅴ化合物(u＝15，v＝13)時，也可應用這些條件。
最好按表中所具體指出的條件并使用實施例中詳細敘述的方法完成各個反應步驟。
表Ⅲ反應步驟 試劑/條件a引入TCAI(1) 1)TBAF,2)CCl3CN,DBUb亞芳基化 1)NaOCH3/CH3OH;
2)ArCH(OCH3)2,P-TsOHc糖苷化 CH3CN,TMSOTf(-40℃)d引入TCAI(2) 1)AC2O/吡啶;
2)TBAF,THF;
3)CCl3CN,DBueN3→HNAC轉化 1)H2S,吡啶,H2O2)AC2O/吡啶f過乙酰化 1)Pd/C;H2,ACOH/CH3OH二噁烷2)AC2O/吡啶g糖苷OH N2H4×ACOHh引入TCAI(式I) 同a
i引入Z,S S:S-OH,TMSOTf,CH2Cl2Z:(N-酯酰基):
1)2-疊氮-3-苯甲酰氧基-4-十八碳烯-1-醇,CH2Cl2,TMSOTf;
2)H2S,吡啶,H2O;
(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亞胺,C15H31COOHk除去保護基 NaOCH3,CH3OH。
在一優選實施方案中，糖苷化反應(反應C)在腈類溶劑(如乙腈)中進行，這意味著不必再將供體單位制成正位異構純形式，這通常導致三氯乙酰亞氨的定量合成。反應物料中可便利地加入催化劑。如三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯(TMSOTf)，反應溫度為-30至-80℃，優選-40℃。
制備具體三氯乙酰亞氨(反應a、d)僅需要極少量的堿(如DBu，0.1-1%)，因此不會發生三氯乙酰亞氨的顯著異構化作用。
可按照Sato等人的方法(1988，Tetrahedron Lett.29，4097)很容易地合成式Ⅲ的二糖化合物，尤其是化合物25。
可利用所述方法制得結晶形式的六糖13(實施例13)，因此特別適于作為易于分離的定量純中間體以組建多聚糖鏈。
可根據需要按本身已知的方法用所述間隔基S或路易斯X抗原殘基Z取代式Ⅰ化合物的三氯乙酰亞氨殘基(反應i，k)。間隔基S最好在催化劑如TMSOTf作用和室溫條件下以S-OH形式引入，產率可達75-90%。殘基Z最好分兩步引入，尤其是當其為N-酯酰基時可通過化合物(2S，3R，4E)-2-疊氮基-3-苯甲酰氧基-4-十八烯-1-醇、棕櫚酸和N-(3-二氨基丙基)-N′-乙基-碳化二亞胺(鹽酸鹽)完成。在完全除去特定多糖部位的保護基后，得到式Ⅰ的相應二聚至八聚路易斯X抗原(n＝1-7)。
以下實施例旨在詳細說明本發明。
實施例1叔丁基二甲基甲硅烷基2-疊氮基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(1)按Kinzy和Schmidt的方法(Liebigs Ann.Chem.1985，1537-1545)制備化合物1。
實施例2叔丁基二甲基甲硅烷基2-疊氮基-4，6-O-亞芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(2)將苯甲醛二甲基乙縮醛(10.3g，67.5mmol)和對甲苯磺酸(80mg)加到化合物1(14.37g，45mmol)的無水乙腈溶液(350ml)中。于室溫下反應1小時后加入無水碳酸鉀(2g)，并將混合物振蕩30分鐘。過濾并真空濃縮。殘余物經閃蒸色譜純化〔石油醚/乙酸甲酯(5∶1)〕后得到無色漿狀化合物2(17.06g，93%)，薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(5∶1)〕Rf＝0.34。
實施例32，3，4-三-O-芐基-α/β-L-吡喃巖藻糖(3)按照Dejter-Juszynski和Flowers的方法(Carbohydr.Res.18(1971)219-226)制備化合物3。
實施例40-(2，3，4-三-O-芐基-α/β-吡喃巖藻糖基)-三氯乙酰亞胺(4)將三氯乙腈(10g)和DBU(7滴)加到化合物3(10.0g.23.0mmol)的無水二氯甲烷溶液(50ml)中。30分鐘后，真空濃縮淺黃色溶液，并利用短硅膠柱〔石油醚/乙酸甲酯(3∶1)+1%三乙胺〕純化殘余物，以α∶β＝1∶4的比例得到無色油狀化合物4(11.85g，89%)，該化合物逐步固化;薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(3∶1)+1%三乙胺〕，α-三氯乙酰亞胺的Rf＝0.76，β-三氯乙酰亞胺的Rf＝0.50。以下數值都是使用β-三氯乙酰亞胺測得的〔α〕20＝-16.0(C＝1，CHCl3)。
實施例5叔丁基二甲基甲硅烷基O-(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)-2-疊氮基-4，6-O-亞芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(5)于氬氣環境下將化合物2(2.93g，7.19mmol)溶于盡可能少的無水乙醚中，并加入0.1M三甲基甲硅烷基三氟甲基磺酸酯溶液(1ml)。在攪拌下緩慢滴加化合物4(6.5g，11.25mmol)在無水乙醚中制成的濃溶液。加完三氯乙酰亞胺后5分鐘，用碳酸氫鈉(約0.5g)中和混合物，過濾并真空濃縮。經色譜法(用石油醚/乙酸甲酯(7∶1)作為流動相)純化后得到無色泡沫狀的化合物5(5.35g，85%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(5∶1)〕Rf＝0.54，〔α〕20＝-76.0(C＝1，CHCl3)。
實施例6叔丁基二甲基甲硅烷基O-(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(6)用分子篩(4 )攪拌化合物5(10g，12.13mmol)和氰基氫硼化鈉(7.6g，121mmol)于無水四氫呋喃(250ml)中制成的溶液，向其中滴加氯化氫的乙醚飽和溶液，直至混合物呈酸性。為進行處理，將固體碳酸氫鈉、乙醚(400ml)和飽和碳酸氫鈉溶液(100ml)加到反應容器中，并在玻璃棉上過濾該混合物。分離出有機相，真空濃縮并用閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(6∶1→5.5∶1)〕純化，得到無色泡沫狀化合物6(6.72g，67%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(4∶1)〕Rf＝0.48，〔α〕20＝-30.0(C＝2，CHCl3)。
實施例7O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃半乳糖基)-三氯乙酰亞胺(7)按Schmidt、Michel和Roos的方法(Liebigs Ann.Chem.1984，1343-1357)制備化合物7。
實施例8叔丁基二甲基甲硅烷基0-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(8)將受體6(9.0g，10.89mmol)和三氯乙酰亞胺7(10.72g，21.78mmol)溶于最小量乙醚中。攪拌下滴加三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯(0.15ml)的乙醚溶液(4ml)。加完催化劑后20分鐘用碳酸氫鈉(約2g)中和混合物，過濾并真空濃縮之。經閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮(16∶1→15∶1→14∶1)〕純化后得到化合物8(8.94g，71%)薄層色譜分析〔甲苯/丙酮(10∶1)〕Rf＝0.47，〔α〕20＝-19.0(C＝1，CHCl3)。
實施例92，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-α/β-D-吡喃葡糖(9)于-45℃攪拌下將冰醋酸(0.25ml，4.32mmol)加到化合物8(5.0g，4.32mmol)于無水四氫呋喃(50ml)中制成的溶液內，然后向其中滴加1M四丁基氟化銨的四氫呋喃(5ml)溶液。將混合物加溫到0℃，并用乙醚(500ml)稀釋，然后用飽和氯化鈉溶液(3×80ml)洗有機相，經真空濃縮和閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(5∶4)〕后得到無色泡沫狀的化合物9(4.32g，95%);薄層色譜〔石油醚/乙酸甲酯(5∶4)〕Rf＝0.36，〔α〕20＝-7.5(C＝1，CHCl3)。
實施例10O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-α/β-D-吡喃葡糖基-三氯乙酰亞胺(10)將三氯乙腈(10g)和DBU(3滴)加到化合物9(2.19g，2.08mmol)的無水二氯甲烷溶液(100ml)中。15分鐘后，真空濃縮混合物，并在硅膠柱上洗脫殘余物(以石油醚/乙酸甲酯(3∶2)+1%三乙胺作為流動相)，得到α∶β＝4∶5的無色泡沫狀化合物10(2.47g，100%);對于α-端基異構體，Rf＝0.36，〔α〕20＝+27.0(C＝1，CHCl3);對于β-端基異構體，Rf＝0.26，〔α〕20＝-24.0(C＝1，CHCl3)。
實施例11叔丁基二甲基甲硅烷基O-β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-〔2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(11)將化合物8(4.2g，3.63mmol)溶于無水甲醇(約200ml)中，并加入2M甲醇鈉溶液(0.5ml)。將該溶液放置過夜并于第二天用Amberlite RIR 120(Rohm and Haas)中和之。通過離子交換過濾，真空濃縮溶液，并將殘余物與甲苯共蒸發兩次。定量得到未經進一步純化即為分析純的化合物11(3.22g)。薄層色譜分析〔甲苯/丙酮(1∶1)測得Rf＝0.6，〔α〕20＝-47.0(C＝1，CHCl3)。
實施例12叔丁基二甲基甲硅烷基O-(4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(12)將苯甲醛二甲基乙縮醛(1.1g，7mmol)和對甲苯磺酸(200mg)加到化合物11(3.5g，3.5mmol)的無水乙腈(150ml)溶液中，室溫下1小時后加入無水碳酸鉀(約2g)，并將混合物振蕩30分鐘。過濾及真空濃縮后，在硅膠柱上洗脫殘余物，利用石油醚/乙酸甲酯(7∶4→7∶5→7∶6→1∶1)作為流動相。得到無色泡沫狀化合物12(3.22g，88%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(1∶1)〕Rf＝0.46，〔α〕20＝-96.0(C＝1，CHCl3)。
實施例13叔丁基二甲基甲硅烷基0-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(13)于-40℃將0.05M三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯溶液(0.8ml)滴加到化合物10(4.75g，4.0mmol)和化合物12(4.84g，4.5mmol)的無水乙腈(60ml)溶液中。10分鐘后向溶液中加入碳酸氫鈉(約0.5g)，并將混合物加溫至室溫。過濾及真空濃縮后，將殘余物在一短硅膠柱上以色譜法(利用石油醚/乙酸甲酯(3∶2)作為流動相)純化。將濃縮后形成的泡沫溶于乙醚(60ml)中并用石油醚(20ml)結晶得到無色結晶產物(6，72g，80%);薄層色譜分析〔甲苯/乙酸甲酯(4∶1)〕Rf＝0.38〔α〕20＝-56.5(C＝1，CHCl3)，m.p.＝195℃。
實施例14叔丁基二甲基甲硅烷基0-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(14)將化合物13(6.20g，2.95mmol)溶于吡啶/乙酸酐(1∶1，30ml)中并將所得溶液放置過夜。第二天上午進行真空濃縮，并將殘余物與甲苯共蒸發兩次。經閃蒸色譜〔石油醚/乙酸甲酯(5∶3)純化后得到化合物14(6.13g，97%)，薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(2∶1)〕測到Rf＝0.22，〔α〕20＝-70.5(C＝1，CHCl3)。
實施例15O-(2，3，4，4-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-α/β-D-吡喃葡糖(15)按制備化合物9所述使化合物14(5.83g，2.72mmol)的無水四氫呋喃(50ml)溶液與冰醋酸(0.16ml，2.72mmol)和四丁基氟化銨于四氫呋喃(3.4ml)中的1M溶液反應。借助以石油醚/乙酸甲酯(1∶1→4∶5)為流動相的短硅膠柱進行純化后得到無色泡沫狀化合物15(5.41g，98%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(1∶1)〕Rf＝0.30，〔α〕20＝-55.5(C＝1，CHCl3)。
實施例16O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-α/β-D-吡喃葡糖基-三氯乙酰亞胺(16)
將三氯乙腈(20g)和DBU(5滴)加到化合物15(5.41g，2.67mmol)的無水二氯甲烷(150ml)溶液中。30分鐘后，真空濃縮混合物，并以閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(1∶1)+1%三乙胺〕純化殘余物，以α∶β＝1∶2的比例得到無色泡沫狀化合物16(5.8g，100%)。薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(1∶1)〕α-三氯乙酰亞胺的Rf＝0.56，β-三氯乙酰亞胺的Rf＝0.62，α-三氯乙酰亞胺的〔α〕20＝-46.0(C＝1，CHCl3)，β-三氯乙酰亞胺的〔α〕20＝62.0(C＝1，CHCl3)。
實施例17芐基O-(2，4，6-三-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-芐基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖苷(25)按Sato等人的方法(Tetrahedron Lett.29(1988)4097-4100)合成化合物25。
實施例18芐基0-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-芐基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖苷(26)于-40℃將0.05M三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯溶液(0.3ml)滴加到作為α/β混合物的化合物16(1.35g，623mmol)和受體25(1.21g，1.25mmol)的乙腈(5ml)溶液中。當溶液溫度變為室溫時過濾掉碳酸氫鈉。利用石油醚/乙酸甲酯(2∶1→3∶2)作為流動相通過閃蒸色譜法純化，得到無色泡沫狀化合物26(1.37g，74%);經薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(3∶2)〕Rf＝0.42，〔α〕20＝-71.0(C＝1，CHCl3)。
實施例19芐基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-芐基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖苷(27)使疊氮化合物26(1.37g，416μmol)與硫化氫于吡啶/水混合物(約100ml)中制成的溶液反應30分鐘，并將混合物于室溫下放置數天。隨后在吡啶/乙酸酐(1∶1)中進行N-乙酰基化，再經閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮(4∶1→3∶1)〕純化后得到無色泡沫(1.23g，88%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮(5∶2)〕Rf＝0.43，〔α〕20＝-44.0(C＝1，CHCl3)。
實施例20乙酰基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-α/β-D-吡喃葡糖苷(28)于4巴壓力的氫氣環境下在乙酸、甲醇和二噁烷的1∶1∶1混合物中用鈀-活性碳催化劑氫化化合物27(1.34g，406μmol)48小時。從鈀-活性碳中傾除掉溶液。用硅藻土過濾，將鈀-活性碳于甲醇中懸浮幾次，再次傾除掉溶液并過濾。接著在吡啶/乙酸酐(1∶1)中反應，經用甲苯/丙酮/甲醇(11∶6∶0.3→10∶6∶0.3)進行閃蒸色譜純化后得到白色粉末(769mg，80%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.45，〔α〕20＝-35.0(C＝1，CHCl3)。
實施例212，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-α/β-D-吡喃葡糖(29)將過乙酰化化合物28(758mg，320μmol)溶于無水二甲基甲酰胺(20ml)中，并于50℃下加入肼醋酸酯(59mg，640μmol)。30分鐘后，用乙酸乙酯(150ml)稀釋混合物，并用飽和氯化鈉溶液(30ml)洗。水相用乙酸乙酯(2×60ml)萃取。真空濃縮合并的有機萃取物，再經閃蒸色譜法〔甲苯/甲醇(10∶1→9∶1)〕純化即得到白色粉末狀化合物29(670mg，90%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(6∶6∶0.3)〕Rf＝0.47，〔α〕20＝-37.0(C＝1，CHCl3)。
實施例22O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-α-D-吡喃葡糖基-三氯乙酰亞胺(30)將化合物29(658mg，283μmol)溶于無水二氯甲烷(20ml)，并加入三氯乙腈(1ml)和DBU(1滴)。30分鐘后，真空濃縮混合物，殘余物在短硅膠柱上純化(利用甲苯/甲醇(10∶1)作為流動相)，得到白色粉末(608mg，87%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.48，〔α〕20＝-25.5(C＝1，CHCl3)。
實施例238-乙氧羰基-辛-1-醇(31)按照Gerlach等人的方法(1978，Heov.Chim.Acta，61(4)，(1978)1226)由油酸甲酯合成化合物31。
實施例248-乙氧羰基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖苷(32)將三氯乙酰亞胺30(233mg，94.5μmol)和用作間隔基的實施例23化合物(51滴，約0.23mmol)溶于無水二氯甲烷(2ml)中并用分子篩(4
)將溶液攪拌3小時。滴加0.01M三甲基甲硅烷基三氟甲基磺酸酯溶液(0.5ml)。30分鐘后，用碳酸氫鈉中和混合物，過濾并真空濃縮。經閃蒸色譜法〔甲苯/甲醇(12∶1→10∶1→9∶1)〕純化得到化合物32(175mg，75%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.47，〔α〕20＝-48.0(C＝1，CHCl3)。
實施例258-乙氧羰基辛基O-(β-D-吡喃半乳糖基-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-β-D-吡喃葡糖苷(33)將化合物32(168mg，68.2μmol)溶于無水甲醇(40ml)中，加入1M甲醇鈉溶液(0.5ml)并將混合物于45℃攪拌24小時。用Amberlite RIR120中和后，過濾混合物并真空濃縮。用無水乙醇(100ml)重新溶解殘余物，加入0.5M甲醇鈉溶液(1ml)并將混合物于45℃下攪拌24小時。用AmberliteRIR120中和后，過濾并真空濃縮后得到一種幾乎無色的化合物。可利用填有RP18硅膠的短閃蒸柱分離掉〔以甲醇/水(1∶1)作為流動相〕少量雜質，得到乙氧羰基辛-1-基-二聚路易斯X(105mg，90%);薄層色譜分析〔乙酸甲酯/異丙醇/水(3∶3∶2)〕測得Rf＝0.43，RP8薄層色譜分析〔甲醇/水(1∶1)〕Rf＝0.37，〔α〕20＝-57.0(C＝1，MeOH)。
實施例26(2S，3R，4E)-2-疊氮基-3-甲酰氧基-4-十八烷-1-醇(34)按照Zimmermann的方法(Tetrahedron Lett.27(1986)481;Angew.Chem.98(1986)722)合成化合物34。
實施例27O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-(3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→1)-(2S，3R，4E)-2-疊氮基-3-O-苯甲酰基-4-十八碳烯-1，3-二醇(35)將0.01M三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯溶液(0.3ml)加到三氯乙酰亞胺30(137mg，55.5μmol)和受體34(48mg，111μmol)的無水二氯甲烷溶液(1ml)中，經閃蒸色譜法〔甲苯/甲醇(13∶1→11∶1)〕純化后得到化合物35(114mg，75%)的白色粉末;薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.55，〔α〕20＝-44.0(C＝1，CHCl3)。
實施例28O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-(3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→1)-(2S，3R，4E)-3-O-苯甲酰基-2-十六烷氨基-4-十八碳烯-1，3-二醇(36)使硫化氫通過化合物34(114mg，41.6μmol)在吡啶(10ml)和水(2ml)中制成的溶液。3天后，于20℃高真空條件下濃縮混合物。直接將所得固體殘余物溶解于無水二氯甲烷(5ml)中并與棕櫚酸(25mg，100μmol)和N-(3-二-甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(E.Merck，Darmstadt，FRG)(29mg，150μmol)反應。18小時后，用二氯甲烷(50ml)稀釋混合物，并用水(20ml)洗。真空濃縮有機相。用閃蒸色譜法(甲苯/甲醇(12∶1→11∶1)〕純化后得到化合物36(105mg，85%)的白色粉末;薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.55，(α〕20＝-35.0(C＝1，CHCl3)。
實施例29O-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-(β-D-吡喃葡糖基)-(1→1)-(2S，3R，4E)-2-十六烷氨基-4-十八碳烯-1，3-二醇(37)將1M甲醇鈉溶液(0.5ml)加到化合物36(100mg，33.7μmol)的無水甲醇(30ml)溶液中，并將混合物于45℃下攪拌24小時。用Amberlite IR120中和，過濾并真空濃縮。將殘余物加到RP18硅膠柱上，并用甲醇/水(12∶1→14∶1→16∶1)洗脫。將脫去保護基的鞘糖脂(62mg，90%)溶于水中并冷凍干燥;薄層色譜分析〔正酸甲酯/異丙醇/水(7∶6∶4)〕Rf＝0.5，RP8薄層色譜分析〔甲醇/水(9∶1)〕Rf＝0.33，〔α〕20＝-46.0(C＝1，MeOH)。
實施例30叔丁基二甲基甲硅烷基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(38)于-40℃下將0.05M三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯溶液(0.6ml)滴加到三氯乙酰亞胺16(1.72g，790μmol)(實施例16)和受體12(1.13g，1.05mmol)(實施例12)的無水乙腈(20)溶液中。按常規方法處理混合物，用閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮(5∶1→4∶1)〕純化后得到化合物38(1.73g，71%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(4∶3)〕Rf＝0.35，〔α〕20＝-83.0(C＝1，CHCl)。
實施例31叔丁基二甲基甲硅烷基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(39)用吡啶/乙酸酐(1∶1，10ml)處理化合物38(1.70g，551μmol)24小時。真空濃縮溶液后，將殘余物與甲苯共蒸發。經用閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(4∶3)〕純化后得到化合物39(1.62g，94%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(4∶3)〕Rf＝0.35，〔α〕20＝-84.0(C＝1，CHCl3)。
實施例32O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-α/β-D-吡喃葡糖(40)
如實施例9所述，使化合物39(1.40g，448μmol)的無水四氫呋喃(20ml)溶液與冰醋酸(26μl，448μmol)和1M四丁基氟化銨(1ml)溶液反應。用閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(4∶5)〕純化后得到化合物40(1.23g，91%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(1∶1)〕Rf＝0.23，〔α〕20＝-73.0(C＝1，CHCl3)。
實施例33O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-α/β-D-吡喃葡糖(41)將三氯乙腈(3.0ml)和DBU(1滴)加到化合物40(980mg，325μmol)的無水二氯甲烷(30ml)溶液中。30分鐘后真空濃縮混合物，用閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮(5∶1)+1%的三乙胺〕純化后得到α∶β約為1∶2的三氯乙酰亞胺41(943mg，92%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮(5∶1)〕對于α-三氯乙酰亞胺，Rf＝0.22，〔α〕20＝-62.0(C＝1，CHCl3);對于β-三氯乙酰亞胺，Rf＝0.29，〔α〕20＝-73.5(C＝1，CHCl3)。
實施例34芐基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-芐基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖苷(42)如實施例18所述，于-40℃將三氯乙酰亞胺41(662mg，210μmol)和受體25(305mg，315μmol)在乙腈(3ml)中反應。經閃蒸色譜〔甲苯/丙酮(8∶1→7∶1)〕得到化合物42(598mg，72%);經薄層色譜分析〔甲苯/丙酮(6∶1)〕Rf＝0.34，〔α〕20＝-84.0(C＝1，CHCl)。
實施例35芐基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-芐基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖苷(43)如實施例19所述，使硫化氫通過化合物42(591mg，149μmol)于吡啶(40ml)和水(14.5ml)中制成的溶液。然后在吡啶/乙酸酐(1∶1)中進行N-乙酰基化反應，再經用閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(6∶7→5∶6→4∶5)〕，純化后得到化合物43(520mg，86%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(4∶5)〕Rf＝0.52，〔α〕20＝-84.0(C＝1，CHCl3)。
實施例36
乙酰基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-α/β-D-吡喃葡糖苷(44)如實施例20所述，于4巴壓力的氫氣環境下在乙酸/甲醇/二噁烷(1∶1∶1，30ml)中用鈀-活性碳(10%Pd，200mg)催化劑氫化化合物43(346mg，85.5μmol)。經用吡啶/乙酸酐(1∶1)處理并用閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮/甲醇(9∶6∶0.3→8∶6∶0.3)〕純化后得到白色粉狀化合物44(214mg，78%)，薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.31，〔α〕20＝-45.0(C＝1，CHCl3)。
實施例372，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-α/β-D-吡喃葡糖(45)按實施例21所述，使化合物44(145mg，45.1μmol)與肼乙酸酯(9.2mg，100μmol)在無水二甲基甲酰胺(5ml)中反應，按常規方法處理。經用閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮/甲醇(8.5∶6∶0.3→7.5∶6∶0.3)〕純化后得到化合物45(125mg，87%);薄層色譜分析〔CH2Cl2/MeOH(20∶1)〕Rf＝0.10，〔α〕20＝-48.0(C＝1，CHCl3)。
實施例38O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-α/β-D-吡喃葡糖基-三氯乙酰亞胺(46)將三氯乙腈(1ml)和DBU(1滴)加到化合物45(114mg，35.8μmol)的無水二氯甲烷(5ml)溶液中。30分鐘后，真空濃縮混合物，再經閃蒸色譜法〔CH2Cl2/MeOH(20∶1→17.5∶1→15∶1)〕處理得到化合物46;薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.31，〔α〕20＝-29.5(C＝1，CHCl3)。
實施例39O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→1)-(2S，3R，4E)-2-疊氮基-3-O-苯甲酰基-4-十八碳烯-1，3-二醇(47)用分子篩(4A)攪拌三氯乙酰亞胺46(60.4mg，17.7μmol)和受體34(15mg，35.4μmol)的無水二氯甲烷(1ml)溶液。4小時后，滴加5mM三甲基甲硅烷基三氟甲基磺酸酯溶液(0.35ml)。按實施例24進行處理，經用閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮/甲醇(10.5∶6∶0.4)〕純化后得到化合物47(46.5mg，73%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.40，〔α〕20＝-53.0(C＝1，CHCl3)。
實施例40O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→1)-(2S，3R，4E)-3-O-苯甲酰基-2-十六烷氨基-4-十八碳烯-1，3-二醇(48)使硫化氫通過化合物47(27.6mg，7.63μmol)在吡啶(10ml)和水(2ml)中制成的溶液。3天后于20℃高真空下濃縮混合物。將殘余物溶于無水二氯甲烷(2ml)中，并與棕櫚酸(5mg，20μmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(5mg，30μmol)反應。按實施例28所述方法處理。經用閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮/甲醇(10.5∶6∶0.3)〕純化后得到化合物48(24.2mg，84%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.40，〔α〕20＝-45.0(C＝1，CHCl3)。
實施例41O-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-α/β-D-吡喃葡糖基-三氯乙酰亞胺(55)將三氯乙腈(10ml)和DBU(1滴)加到化合物54(525mg，131μmol)的無水二氯甲烷(20ml)溶液中。30分鐘后，真空濃縮該混合物。經用閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮(5∶1→4∶1)+1%三乙胺〕純化后得到作為α∶β≈1∶2之α/β混合物的化合物55(495mg，91%);Rf＝0.47(兩種端基異構體)。
實施例48芐基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-芐基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖苷(56)如實施例18所述，使三氯乙酰亞胺55(389mg，93.9μmol)與受體25(136mg，141μmol)在乙腈(2ml)中于-40℃下反應。經用閃蒸色譜法〔甲苯/丙酮(9∶1→7∶1→6∶1)〕純化后得到化合物56(358mg，77%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮(5∶1)〕Rf＝0.37，〔α〕20＝-92.5(C＝1，CHCl3)。
實施例49芐基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(52)于-40℃下將0.05M三甲基甲硅烷基三氟甲基磺酸酯溶液(0.15ml)滴加到三氯乙酰亞胺16(626mg，288μmol)和受體51(727mg，360μmol)(實施例43)的無水乙腈(12ml)溶液中。經常規處理并用閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(3∶2→5∶4)〕純化后，得到化合物52(859mg，77%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(1∶1)〕Rf＝0.63，〔α〕20＝-101.0(C＝1，CHCl3)。
實施例45叔丁基二甲基甲硅烷基-O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-(β-D-吡喃葡糖基)-(1→1)-(2S，3R，4E)-2-十六烷氨基-4-十八碳烯-1，3-二醇(49)將0.2M甲醇鈉溶液(0.25ml)加到化合物48(20.6mg，5.45μmol)的無水甲醇(6ml)溶液中，并將混合物于45℃下攪拌24小時。用Amberlite IR 120中和、過濾并真空濃縮。使用RP18硅膠和甲醇/水(9∶1→11∶1→12.5∶1)以色譜法純化殘余物，得到三聚Lex抗原(12.3mg，88%);薄層色譜分析〔乙酸甲酯/異丙醇/水(7∶6∶4)〕Rf＝0.23，RP8薄層色譜〔甲醇/水(10∶1)〕Rf＝0.42，〔α〕20＝-55.0(C＝1，MeOH)。
實施例42叔丁基二甲基甲硅烷基O-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(50)將化合物13(819mg，390μmol)(實例13)懸浮于無水甲醇(100ml)中。于45℃下滴加1.5M甲醇鈉溶液(10滴)。2小時后，用Amberlite IR120處理該澄清溶液并過濾。真空濃縮后得到化合物50(764mg，100%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮(5∶3)〕Rf＝0.37，〔α〕20＝-82.0(C＝1，CHCl3)。
實施例43叔丁基二甲基甲硅烷基O-(4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(51)如實施例12所述，使化合物50(758mg，387μmol)的無水乙腈(SOml)溶液與苯甲醛二甲基乙縮醛(147mg，968μmol)和對-甲苯磺酸(30mg)反應。按常規方法處理所得混合物。用閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(3∶2→5∶4→1∶1)〕純化后得到化合物51(627mg，86%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(1∶1)〕Rf＝0.36〔α〕20＝-112.0(C＝1，CHCl3)。
實施例44叔丁基二甲基甲硅烷基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷(53)用吡啶/乙酸酐(1∶1，6ml)處理化合物52(579mg，144μmol)24小時。真空濃縮混合物并將殘余物與甲苯共蒸發。經用閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(3∶2→5∶4)〕純化后得到化合物53(594mg，100%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(5∶4)〕Rf＝0.40，〔α〕20＝-97.0(C＝1，CHCl3)。
實施例46O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-α/β-D-吡喃葡糖(54)如實施例9所述，使化合物53(582mg，141μmol)的無水四氫呋喃(10ml)溶液與冰醋酸(8μl，141μmol)和1M四丁基氟化銨(0.3ml)反應。經用閃蒸色譜法(石油醚/乙酸甲酯(1∶1→5∶6→4∶5)純化后得到化合物54(531mg，94%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(4∶5)〕Rf＝0.58，〔α〕20＝-91.0(C＝1，CHCl3)實施例47O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-疊氮基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2-O-乙酰基-4，6-O-亞芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-2-疊氮基-6-O-芐基-2--〔(2，3，4-三-O-芐基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-芐基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-芐基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-芐基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖苷(57)按實施例19所述，使硫化氫通過化合物56(349mg，70.6μmol)在吡啶(40ml)和水(15ml)中制成的溶液。在吡啶/乙酸酐(1∶1)中進行N-乙酰基化反應并用閃蒸色譜法〔石油醚/乙酸甲酯(4∶5→3∶4→2∶3)〕純化后得到化合物57(305mg，85%);薄層色譜分析〔石油醚/乙酸甲酯(3∶4)〕Rf＝0.26，〔α〕20＝-55.0(C＝1，CHCl3)。
實施例50乙酰基O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-α/β-吡喃葡糖苷(58)如實施例20所述，于4巴壓力的氫氣環境下在乙酸/甲醇/二噁烷(1∶1∶1，30ml)中用鈀-活性碳(10%Pd，150mg)催化氫化化合物57(300mg，59.0μmol)。經用吡啶/乙酸酐(1∶1)處理并用閃蒸色譜法〔二氯甲烷/甲醇(97∶3→96∶4→95∶5→94∶6)〕純化后得到化合物58(193mg，81%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(6∶6∶0.3)〕Rf＝0.41，〔α〕20＝-48.0(C＝1，CHCl3)。
實施例512，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-α/β-D-吡喃葡糖(59)按實例21所述，使化合物58(186mg，46.0μmol)與肼乙酸酯(9.2mg，100μmol)在無水二甲基甲酰胺(6ml)中反應。按常規方式處理該混合物。經用閃蒸色譜法〔二氯甲烷/甲醇(25∶1→20∶1→15∶1)〕純化后得到化合物59(163mg，88%);薄層色譜分析(CH2Cl2/MeOH(19∶1)〕Rf＝0.12，〔α〕20＝-53.5(C＝1，CHCl3)。
實施例52O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-α/β-D-吡喃葡糖基-三氯乙酰亞胺(60)將三氯乙腈(1ml)和DBU(1滴)加到化合物59(156mg，38.8μmol)的無水二氯甲烷(6ml)溶液中。30分鐘后，真空濃縮該混合物，其殘余物用閃蒸色譜法〔二氯甲烷/甲醇(20∶1→17.5∶1→15∶1)〕，純化后得到作為α∶β＝3∶1之α/β混合物的化合物60(141mg，89%);薄層色譜分析〔二氯甲烷/甲醇(16∶1)〕Rf＝0.31(兩種端基異構體)。
實施例53O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-(3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→1)-(2S，3R，4E)-2-疊氮基-3-O-苯甲酰-4-十八碳烯-1，3-二醇(61)用分子篩(4
)攪拌三氯乙酰亞胺60(134mg，32.8μmol)和受體34(28.2mg，65.6μmol)的無水二氯甲烷(2ml)溶液。6小時后，滴加0.01M三甲基甲硅烷基三氟甲基磺酸酯溶液(0.33ml)。按實施例24所述方法處理之。經用閃蒸色譜法〔二氯甲烷/甲醇(25∶1→22.5∶1→20∶1)〕純化得到化合物61(110mg，76%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(7∶6∶0.3)〕Rf＝0.45，〔α〕20＝-54.0(C＝1，CHCl3)。
實施例54O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(2，3，4-三-O-乙酰基-α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-6-O-乙酰基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(2，4，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-(3，6-二-O-乙酰基-2-O-新戊酰基-β-D-吡喃葡糖基)-(1→1)-(2S，3R，4E)-3-O-苯甲酰-2-十六烷氨基-4-十八碳烯-1，3-二醇(62)使硫化氫通過化合物61(104mg，23.7μmol)的吡啶(10ml)和水(2ml)中制成的溶液。3天后，于20℃高真空下濃縮該混合物。將殘余物直接溶解于無水二氯甲烷(5ml)中并與棕櫚酸(20mg，80μmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(23mg，120μmol)反應。按實例28所述方法處理并經用閃蒸色譜法〔二氯甲烷/甲醇(25∶1→23∶1→20∶1)〕純化后得到化合物62(92.3mg，85%);薄層色譜分析〔甲苯/丙酮/甲醇(6∶7∶0.3)〕Rf＝0.64，〔α〕20＝-47.0(C＝1，CHCl3)。
實施例55O-(β-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-〔(α-L-吡喃巖藻糖基)-(1→3)〕-(2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃半乳糖基)-(1→3)-(β-D-吡喃半乳糖基)-(1→4)-(β-D-吡喃葡糖基)-(1→1)-(2S，3R，4E)-2-十六烷氨基-4-十八碳烯-1，3-二醇(63)將1M甲醇鈉溶液(0.25ml)加到化合物62(87.5mg，19.1μmol)的無水甲醇(30ml)溶液中，并將混合物于45℃攪拌24小時。用Amberlite
IR中和，過濾并真空濃縮之。利用RP18硅膠和甲醇/水(8∶1→12∶1)→甲醇以色譜法純化殘余物，得到四聚LeX抗原(54.2mg，91%);薄層色譜分析〔二氯甲烷/甲醇/水(7∶7∶2)〕Rf＝0.35;RP8薄層色譜分析〔甲醇/水(9∶1)〕Rf＝0.32，〔α〕20＝-57.5(C＝1，MeOH)。
權利要求
1.一種利用六糖單位制備式Ⅰ之多聚路易斯X糖的方法
其中X為OC(=NH)CCl3(TCAI)、Z或S，Z為OCH2CH(NHCOCuH2u+1)CH(OH)CH=CHCvH2v+1，S為(CH2)qCOOR11，R為OH或Rsg，Rsg為OAc，OBn或OBz，R1為OH、OAc或OPivR11為C1-C4烷基，Ac為乙酰基，Bn為芐基，Bz為苯甲酰基，Piv為新戊酰基，n為整數0-7，q為整數4-12，u為整數13-23，v為整數11-17，其特征在于進行以下各步驟反應(a)將選自式Ⅱ化合物之一的其1-O-位被活化的供體糖單位(Ⅱ[TCAI/(X)])，
式Ⅱ中Y為OC(=NH)CCl3(TCAI)或W，W為O-叔丁基二甲基甲硅烷基(OTBS)，O-thexyl二甲基甲硅烷基(OTDS)或O-叔丁基二苯基甲硅烷(OTDPS)，R的定義同前，R1為R，Ar為芳基Me為甲基且k和l為整數0-6，且其中Y為TCAI時，R1為OAc、OBn或OBz，Y為W時，R1為OH，用式V的受體糖單位糖基化
式V中R、Ar、Me和W的定義同前，且m為整數0-5，以得到具有更高鏈長的式Ⅱ糖(Ⅱ[W(X+Y)])，其中X為6、9、12、15、18或21，且Y為3、6、9、12、15或18，它們代表多糖中的單糖單元數，且X+Y可能不超過24；(b)用相應保護基取代游離OH基且用TCAI殘基取代W，使(a)中得到的糖轉化為具有更高鏈長的式Ⅱ的相應供體糖(Ⅱ[TCAI/(X+Y)])；(c)利用式Ⅲ的二糖-其中R和R1的定義同前一作為受體，使得自(b)的1-O-位已被活化的供體糖糖苷化，
得到式Ⅳ[(X+Y+2)]的糖，
其中R、R1、Ar、Me和n的定義同前；和(d)將化合物Ⅳ的疊氮基還原為乙酰氨基，裂解掉亞芳基和芐基并使殘基R和R1過乙酰基化，用OH取代糖苷乙酰基并反應得到相應的式Ⅰ三氯乙酰亞胺(X=TCAI)，必要時可對殘基X-Z或S進行修飾，并除去保護基(R、R1=OH)。
2.根據權利要求1的方法，其特征在于所使用的式Ⅱ化合物中的末端吡喃半乳糖環被乙酰基化。
3.根據權利要求1或2的方法，其特征在于使用新戊酰基化的式Ⅱ化合物(R′＝OPiv)。
4.根據權利要求1－3中任一項的方法，其特征在于糖苷化在腈類溶劑中進行。
5.根據權利要求1－4中任一項的方法，其特征在于利用化合物13(圖1(1.1))作為六糖單位。
6.根據權利要求1－5中任一項的方法，其特征在于所使用的相應化合物中W為O一叔丁基二甲基甲硅烷基(OTBS)，Ar為苯基，u＝15且v＝13。
7.式Ⅰ的多聚路易斯X糖，其定義如權利要求1，但其中n為整數2－7，條件是當n為2時，X可以不是Z，R和R′可以不是OH。
8.式Ⅰ的四聚路易斯X抗原(n＝3)；式Ⅰ的六聚路易斯X抗原(n＝5)；式Ⅰ的八聚路易斯X抗原(n＝7)。
9.式Ⅱ的多聚路易斯X糖，其定義同權利要求1，但其中k為1，1為整數1－5。
10.式Ⅳ的多聚路易斯X糖，其定義同權利要求1，但其中n為整數2－7。
11.式Ⅴ的多聚路易斯X糖，其定義同權利要求1，但其中m為整數1－5。
12.制備式Ⅱ六聚路易斯X糖(Ⅱ(TCAI／W／(X)〕，k＝0，l＝1，X＝6)的方法，其特征在于將帶有大空間甲硅烷基保護基的2一疊氮基一亞芳基一吡喃葡糖苷與相應單糖的三氯乙酰亞胺反應，得到式Ⅱ的三糖(Ⅱ〔W／(X)〕，k＝0，l＝0，X＝3)，然后將由之制得的式Ⅱ(Ⅱ〔TCAI／(X)〕，X＝3)供體三糖與式Ⅴ(Ⅴ〔(Y)〕，m＝0，y＝3)的受體三糖反應，以得到相應的六糖。
13.根據權利要求12的方法，其特征在于其中使用了叔丁基二甲基甲硅烷基2一疊氮基一4，6－O－亞芐基一吡喃葡糖苷。
14.制備式Ⅳ路易斯X糖的方法，其特征在于使式Ⅱ(Ⅱ〔TCAI／(X)〕的供體糖按權利要求1步驟(c)進行反應。
15.制備式Ⅴ之路易斯X糖的方法，其特征在于脫去式Ⅱ(Ⅱ〔W／(X)〕，k＝0,l＝0)化合物之末端吡喃半乳糖環上的保護基，并使之在4位和6位上亞芳基化，且更好是亞芐基化。
16.根據權利要求1－6中之任一項或權利要求14或15的制備式Ⅰ、Ⅳ和Ⅴ之路易斯X糖的方法，其特征在于所使用的式Ⅱ的六糖是按權利要求12所述方法制得的。
17.用根據權利要求7－11中之任一項所述的式Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ的化合物制備可用于治療腫瘤和診斷腫瘤的抗體。
全文摘要
本發明涉及制備有下列結構式之多聚路易斯X糖的方法和制備其相應中間產物的方法，以及新的多聚合路易斯X糖。特別是涉及四聚至八聚路易斯X抗原。可以高產率立體選擇性地合成該多聚糖。
文檔編號C07H15/04GK1082055SQ93107648
公開日1994年2月16日 申請日期1993年6月30日 優先權日1992年6月30日
發明者R·施米特, A·托普福, W·津澤, J·霍姆伯格 申請人:默克專利股份有限公司