專利名稱：一種勁直黃芪多糖的提取分離方法
技術領域：
本發明涉及的是一種勁直黃芪多糖的提取分離方法。
背景技術：
勁直黃芪是豆科黃芪屬多年生的有毒草本植物，是黃芪屬危害最大的瘋草之一。勁直黃芪內含苦馬豆素0. 006% (苦馬豆素有抗腫瘤的作用，還具有免疫增強和抗輻射雙重作用)，家畜誤食一定量后，會導致中毒死亡，影響繁殖，妨礙畜種改良，嚴重威脅著草地畜牧業的發展，毒草的蔓延生長還破壞了草地生態，同時富含粗蛋白、粗脂肪、礦物元素和多種氨基酸，是一種潛在的牧草資源。西藏的瘋草覆蓋度約占45%，其中勁直黃芪占15%，因其獨特的生物學特性(抗旱、抗寒、抗病蟲害、耐風沙、耐貧瘠，惡劣環境中亦能旺盛生長)以及分布區域生態環境的特點，幾乎不可能徹底滅除。因此應當看作是特定草原生態 群落的重要組成部分，把研究重點轉移到開發利用上。近年來，隨著一些植物多糖在免疫調節、抗腫瘤、降血糖、抗輻射、抗病毒和抗衰老等方面獨特功效的研究開發，且多糖來源廣泛、無毒、無副作用，所以其在醫藥業、食品業、化工業方面的巨大開發前景，引起越來越多國內外科研工作者的興趣，并成為21世紀世界生命科學研究的熱點。但由于植物源多糖種類的多樣性、結構組成的復雜性以及多糖分子量大、極性大等特點，給植物多糖提取、分離帶來很大困難，所以選擇一種合適的提取分離方法對植物多糖的開發利用具有重大的意義。目前，常規的多糖提取分離采用水煮醇沉法，水煮溫度都在100°C，對多糖的選擇性不好，可把黃芪中的黃酮、皂甙等同時提取出來，在后續工藝中又不能把它們分離出來，并且浪費能源和資源，經濟效益低。
發明內容
本發明目的是為了優化勁直黃芪多糖的提取分離工藝，為勁直黃芪的進一步開發利用及生態防制提供理論支撐。為了實現本發明的目的，采用如下技術方案勁直黃芪多糖的提取分離方法，提取方法超聲時間lOmin、超聲溫度80°C、料液比I : 25(g ml)、超聲功率350W、提取次數2次、溶液pH為9，；分離方法用無水乙醇，沉淀3h，5倍體積的乙醇加入量。本發明運用超聲波法進行提取，操作簡便、節約溶劑、提取率高、對多糖結構破壞小等優點，是一種快速、高效的中藥提取新方法。利用正交實驗設計，通過少量有代表性的實驗，綜合考察多種因素對提取分離的影響，實驗結果的可靠性高。最終確定了勁直黃芪多糖的最佳提取分離工藝，這為分布于西藏自治區的毒草勁直黃芪的進一步開發利用及生態防制提供了理論依據。本發明可明顯提高勁直黃芪多糖的提取率，是傳統提取工藝的1.46倍。
具體實施方式
以下結合具體實施例，對本發明進行詳細說明。提取的步驟如下將勁直黃芪地上部分采集后，自然風干、粉碎，準確稱取0. 5g，置于離心管中，利用L16(44X 23)混合正交設計方案、超聲波法進行提取，過濾，濾液定容、搖勻，采用硫酸-苯酚法來測定勁直黃芪多糖的含量，計算粗多糖的提取率(提取率)=(勁直黃芪多糖提取液的濃度(mg/mL)) X定容體積(mL) X稀釋倍數X 10_3) /勁直黃芪粉末的質量(g) X100% )，見表I。分離步驟如下利用最優提取方案進行提取，將提取液抽濾，濃縮，加入3 %的三氯乙酸，3000r/min離心IOmin去除蛋白，按L9(34)正交實驗設計方案進行分離,所得沉淀3000r/min離心IOmin,再用無水乙醇、丙酮清洗,低溫干燥得粗多糖,準確稱重。用蒸懼水溶解粗多糖，定容、搖勻，計算粗多糖的提取率(表2)。
得出勁直黃芪多糖的最佳提取分離工藝超聲時間lOmin、超聲溫度80°C、料液比I : 25(g : ml)、超聲功率350W、提取次數2次、溶液pH為9，提取的勁直黃芪多糖收率最高，達8. 927%,是傳統水提法的I. 46倍；最佳分離組合是用無水乙醇，沉淀3h，5倍體積的乙醇加入量，提取率達到1.993%。驗證實驗稱取勁直黃芪粉末0. 5g3份，按照上述最優的提取工藝條件進行驗證試驗，結果勁直黃芪多糖的平均提取率為8. 900% ;利用最優的分離工藝進行驗證實驗，得出勁直黃芪多糖的提取率為I. 978 %。驗證實驗結果與最佳提取分離工藝一致，表明所用的提取分離工藝方法可行、穩定、重現性好。表I超聲波法提取勁直黃芪多糖的正交實驗L16 (44X 23)設計及結果
權利要求
1.一種勁直黃芪多糖的提取分離方法，其特征在于，提取方法超聲時間lOmin、超聲溫度80°C、料液比I : 25(g : ml)、超聲功率350W、提取次數2次、溶液pH為9 ;分離方法用無水乙醇,沉淀3h，5倍體積的乙醇加入量。
全文摘要
本發明公開了一種勁直黃芪多糖的提取分離方法，提取方法超聲時間10min、超聲溫度80℃、料液比1∶25(g∶ml)、超聲功率350W、提取次數2次、溶液pH為9；分離方法用無水乙醇，沉淀3h，5倍體積的乙醇加入量。本發明可明顯提高勁直黃芪多糖的提取率，是傳統提取工藝的1.46倍。
文檔編號C08B37/00GK102746411SQ20121020102
公開日2012年10月24日 申請日期2012年6月18日 優先權日2012年6月18日
發明者呼天明, 肖天昊, 胡遠彬, 陳俊 申請人:西北農林科技大學