專利名稱：一種經濟綠藻育苗的方法
技術領域：
本發明涉及一種經濟綠藻培育方法，尤其是涉及一種經濟綠藻育苗的方法，主要用于培育經濟綠藻的種苗，作為海區養殖所需的苗種。
背景技術：
現有的經濟綠藻在我國還沒有進入規模化養殖的階段，我國自然分布經濟綠藻的種類，包括袋礁膜(Monostroma angecava Kjellm)、礁膜(M.nitidum)、石莼(Ulva lactuca)、孔石莼(U.pertusa)、條滸苔(Enteromorpha clathrete)、腸滸苔(E.intestinalis)管滸苔(E.tubulosa)等種類，它含有豐富的蛋白質及各種氨基酸，維生素，膳食纖維、微量元素，還具有抗高血壓，抗癌等多種疾病的作用，礁膜等經濟綠藻比海帶、紫菜更接近高等植物，沒有腥味，是很好的膳食纖維，深受日本及東南亞一些國家歡迎。但是由于自然資源受到破壞，收獲的野生的經濟綠藻的產量出現了萎縮。因此，如何通過人工的方法來培育海藻幼苗，保證有多種多樣的綠藻的栽培類型以彌補目前海藻栽培種類的單一和產量、面積的的不穩定現象已經是當務之急，目前一般采用的是生殖細胞進行育苗，而存在的主要問題是沒有適合于規模化生產的育苗方法，導致栽培的效益難以體現。
目前對紫菜育苗方法的研究已經有一定的進展，如申請號為85104059中國發明專利公開的“酶法解離紫菜營養細胞育苗方法”和申請號為96116039.X的中國發明專利“酶法解離紫菜葉狀體細胞育苗方法”及申請號為200410023922.0的中國發明專利“酶法解離紫菜的育苗工藝”等，在生產應用中均取得了良好的結果。但是由于紫菜和綠藻的細胞壁的組成有差異，在經濟綠藻的育苗過程中不能完全采用紫菜的方法。
發明內容
本實用新型所要解決的技術問題是針對上述現有技術現狀而提供一種經濟綠藻育苗的方法，可以滿足規模化生產的需要，提高栽培的效益。
本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為一種經濟綠藻育苗的方法，包括下列步驟(1)篩選綠藻種菜并清洗，用攪拌機把綠藻種菜打碎成0.1～5毫米，洗去破碎的細胞漿；(2)配制1～1.5mol/L的葡萄糖溶液，加入0.5～3％酶，配制成酶液，按1∶2～4的比例將酶液加入打碎的綠藻種菜中，在15～25℃的條件下，酶解處理1～3個小時；(3)將酶解的綠藻種菜用海水清洗，將洗出液加入海水沉淀，棄去上清液后將綠藻種菜細胞加入海水培養；(4)把干凈的網簾放入，采苗3～10分鐘，在育苗池中將已經采好苗的苗網培養3～10天，下海養成。
在步驟(1)中可以在篩選綠藻種菜并清洗后，在黑暗中保存24小時后再用攪拌機把綠藻種菜打碎。
在步驟(1)中用攪拌機把綠藻種菜打碎后，可以用篩絹包住綠藻種菜的碎片，在海水中洗去的破壞了的細胞組分。
所述的篩絹是60～200目的雙層篩絹。
酶解處理是在控制光照的條件下進行的，光的幅照度是在0～20μEM-2S-1。
步驟(3)的具體方法是將酶解處理的綠藻種菜完全包在80～150目的篩絹中，在海水中清洗3～5次，棄去殘渣，將洗出液在黑暗的條件下，加入到8～20倍的海水中，沉淀0.5～1個小時，將上清液倒去，就獲得綠藻種菜酶解后細胞，所述的酶可以是海螺酶、蝸牛酶、纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶中的至少一種或者數種的混合物。
所述的綠藻種菜是石莼、孔石莼、礁膜、條滸苔、滸苔、腸滸苔中的一種。
本發明的優點是不需要生殖細胞就可以育苗并將種菜培養至成熟，節約了大量的物力與時間，將育苗的時間從幾個月減少到數天，并且育苗不受季節的限制，可以在育苗廠里長年進行，本來一年只能進行一次育苗一次養成，現在可以進行任意多次；可以將不同的經濟綠藻種類經過搭配進行育苗和養成，避免了在海區進行的靠自然的現象，提高了經濟效益與海區的利用率，可以滿足規模化生產的需要，提高栽培的效益；控制酶解處理的溫度非常重要，超過25℃的處理條件，酶解后的細胞活力降低；低于15℃，不利于酶對細胞壁的分解，酶解的時間要延長，形成的單細胞或者細胞團活力低；在篩選綠藻種菜并清洗后，在黑暗中保存24小時后再用攪拌機把綠藻種菜打碎，可以減少細胞壁合成。
具體實施例方式
以下結合實施例對本發明作進一步詳細描述。
實施例一一種經濟綠藻育苗的方法，包括下列步驟(1)選擇健康的綠色鮮艷的孔石莼(U.pertusa)種菜，去除雜物，在海水中洗干凈，在黑暗中保存24小時后，用食物搗碎機把孔石莼種菜打碎2次，每次15秒，把孔石莼種菜打碎成5毫米左右，用60目的雙層篩絹篩絹包住孔石莼種菜的碎片，在海水中清洗2次，洗去破壞了的細胞組分；(2)配制1mol/L的葡萄糖溶液，加入0.5％海螺酶，配制成酶液，按1∶2的比例將酶液加入打碎的孔石莼種菜中，在溫度為15℃、光的幅照度為20μEM-2S-1的條件下，酶解處理1個小時；(3)將酶解處理的孔石莼種菜完全包在80目的篩絹中，在海水中清洗3次，棄去殘渣，將洗出液在黑暗的條件下，加入到8倍的海水中，浸泡10分鐘，沉淀1個小時，將上清液倒去，將獲得的孔石莼種菜酶解后細胞加入海水培養；(4)把干凈的網簾放入，采苗10分鐘，在育苗池中將已經采好苗的苗網培養10天，下海養成。
實施例二一種經濟綠藻育苗的方法，包括下列步驟(1)選擇健康的綠色鮮艷的袋礁膜(Monostroma angecava Kjellm)種菜，去除雜物，在海水中洗干凈，在黑暗中保存24小時后，用食物搗碎機把袋礁膜種菜打碎4次，每次30秒，把袋礁膜種菜打碎成0.1毫米左右，用200目的雙層篩絹篩絹包住袋礁膜種菜的碎片，在海水中清洗4次，洗去破壞了的細胞組分；(2)配制1.5mol/L的葡萄糖溶液，加入3％蝸牛酶和纖維素酶的混合物，配制成酶液，按1∶4的比例將酶液加入打碎的袋礁膜種菜中，在溫度為25℃、光的幅照度為10μEM-2S-1的條件下，酶解處理3個小時；(3)將酶解處理的袋礁膜種菜完全包在150目的篩絹中，在海水中清洗5次，棄去殘渣，將洗出液在黑暗的條件下，加入到20倍的海水中，浸泡3分鐘，沉淀0.5個小時，將上清液倒去，將獲得的袋礁膜種菜酶解后細胞加入海水培養；(4)把干凈的網簾放入，采苗3分鐘，在育苗池中將已經采好苗的苗網培養3天，下海養成。
實施例三一種經濟綠藻育苗的方法，包括下列步驟(1)選擇健康的綠色鮮艷的條滸苔(Enteromorpha clathrete)種菜，去除雜物，在海水中洗干凈，在黑暗中保存24小時后，用食物搗碎機把條滸苔種菜打碎3次，每次25秒，把條滸苔種菜打碎成2毫米左右，用130目的雙層篩絹篩絹包住條滸苔種菜的碎片，在海水中清洗3次，洗去破壞了的細胞組分；(2)配制1.3mol/L的葡萄糖溶液，加入2％纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶的混合物，配制成酶液，按1∶3的比例將酶液加入打碎的條滸苔種菜中，在溫度為20℃、光的幅照度為15μEM-2S-1的條件下，酶解處理2個小時；(3)將酶解處理的條滸苔種菜完全包在120目的篩絹中，在海水中清洗4次，棄去殘渣，將洗出液在黑暗的條件下，加入到8～20倍的海水中，浸泡3～10分鐘，沉淀0.8個小時，將上清液倒去，將獲得的條滸苔種菜酶解后細胞加入海水培養；(4)把干凈的網簾放入，采苗7分鐘，在育苗池中將已經采好苗的苗網培養7天，下海養成。
上述實施例中，酶可以是海螺酶、蝸牛酶、纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶中的至少一種或者數種的混合物。綠藻種菜是石莼(Ulva lactuca)、孔石莼(U.pertusa)、袋礁膜(Monostroma angecava Kjellm)、礁膜(M.nitidum)、條滸苔(Enteromorphaclathrete)、腸滸苔(E.intestinalis)、管滸苔(E.tubulosa)中的任意一種。種菜酶解后細胞可以直接采苗，或者在有光照的條件下培養，或者是在光生物反應器中培養，或者培育出游孢子再采苗。完成了把細胞附著在網簾的過程，或者涼干，或者直接培養。
權利要求
1.一種經濟綠藻育苗的方法，其特征在于它包括下列步驟(1)篩選綠藻種菜并清洗，用攪拌機把綠藻種菜打碎成0.1～5毫米，洗去破碎的細胞漿；(2)配制1～1.5mol/L的葡萄糖溶液，加入0.5～3％酶，配制成酶液，按1∶2～4的比例將酶液加入打碎的綠藻種菜中，在15～25℃的條件下，酶解處理1～3個小時；(3)將酶解的綠藻種菜用海水清洗，將洗出液加入海水沉淀，棄去上清液后將綠藻種菜細胞加入海水培養；(4)把干凈的網簾放入，采苗3～10分鐘，在育苗池中將已經采好苗的苗網培養3～10天，下海養成。
2.如權利要求1所述的一種經濟綠藻育苗的方法，其特征在于在步驟(1)中篩選綠藻種菜并清洗后，在黑暗中保存24小時后再用攪拌機把綠藻種菜打碎。
3.如權利要求1所述的一種經濟綠藻育苗的方法，其特征在于在步驟(1)中用攪拌機把綠藻種菜打碎后，用篩絹包住綠藻種菜的碎片，在海水中洗去的破壞了的細胞組分。
4.如權利要求3所述的一種經濟綠藻育苗的方法，其特征在于所述的篩絹是60～200目的雙層篩絹。
5.如權利要求1所述的一種經濟綠藻育苗的方法，其特征在于酶解處理是在控制光照的條件下進行的，光的幅照度是在0～20μEM-2S-1。
6.如權利要求1所述的一種經濟綠藻育苗的方法，其特征在于步驟(3)的具體方法是將酶解處理的綠藻種菜完全包在80～150目的篩絹中，在海水中清洗3～5次，將酶解的細胞洗出，棄去殘渣，將洗出液在黑暗的條件下，加入到8～20倍的海水中，沉淀0.5～1個小時，將上清液倒去，就獲得酶解后細胞。
7.如權利要求1所述的一種經濟綠藻育苗的方法，其特征在于所述的酶是海螺酶、蝸牛酶、纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶中的至少一種或者數種的混合物。
8.如權利要求1所述的一種經濟綠藻育苗的方法，其特征在于所述的綠藻種菜是石莼、孔石莼、礁膜、條滸苔、滸苔、腸滸苔中的一種。
全文摘要
本發明公開了一種經濟綠藻育苗的方法，包括下列步驟(1)篩選綠藻種菜并清洗，用攪拌機把綠藻種菜打碎成0.1～5毫米，洗去破碎的細胞漿；(2)配制1～1.5mol/L的葡萄糖溶液，加入0.5～3％酶，配制成酶液，按1∶2～4的比例將酶液加入打碎的綠藻種菜中，在15～25℃的條件下，酶解處理1～3個小時；(3)將酶解的綠藻種菜用海水清洗，將洗出液加入海水沉淀，棄去上清液后將綠藻種菜細胞加入海水培養；(4)把干凈的網簾放入，采苗3～10分鐘，在育苗池中將已經采好苗的苗網培養3～10天，下海養成，優點是不需要生殖細胞就可以育苗并將種菜培養至成熟，可以將育苗的時間從幾個月減少到數天，并且育苗不受季節的限制，可以滿足規模化生產的需要，提高栽培的效益。
文檔編號A01G33/00GK1726765SQ20051005082
公開日2006年2月1日 申請日期2005年7月22日 優先權日2005年7月22日
發明者駱其君, 嚴小軍, 劉必謙, 周成旭 申請人:寧波大學