專利名稱：海膽四倍體苗種的誘導和培育方法
技術領域：
本發明涉及一種海膽四倍體的誘導和培育方法。
背景技術：
海膽的生殖腺營養豐富，除蛋白質和氨基酸等營養成分含量高外，還含有 高度不飽和脂肪酸等一些特殊的生理活性物質，具有預防和治療心血管疾病及 抗癌功效等，如今，日本的海膽種苗生產和資源增殖業已成為其"栽培漁業" 的重要產業之一，法國也開始大力發展海膽養殖業，并培育出優良養殖種類。 我國自我院引進蝦夷馬糞海膽之后，海膽的人工育苗與增養殖業迅速發展，現 已成為北方沿海水產增養殖業中的一個新興產業。
因海膽的食用部分為生殖腺，生殖腺受生殖季節的影響比較大，其可食用的 時期比較短，僅限于繁殖季節前后，導致現有的海膽每年可加工上市的時間較 短，因此現有的不論是野生的還是養殖的海膽季節差價很大。開展海膽四倍體 育種技術研究，生產海膽四倍體，從而再利用四倍體與正常海膽的二倍體雜交， 生產全三倍體苗種，可提高海膽的生長速度和品質，延長海膽上市消費的時間， 提高海膽價格和養殖企業的經濟效益，這也是保證海膽養殖產業持續、健康、 穩定的發展的前提和保障。
發明內容
本發明的目的是提供一種海膽四倍體苗種的誘導和培育方法，而四倍體是 生產可延長海膽生殖腺上市期的三倍體海膽的關鍵，三倍體不繁殖，因此常年 具有可食用的性腺，這樣可以延長海膽的加工上市時間，彌補目前海膽繁殖季 節以外時期海膽性腺退化導致海膽品質差、不能加工和鮮活上市的不足，增加
其營養價值和經濟效益。
本發明的海膽四倍體苗種的誘導和培育方法，包括如下步驟
a、 將種膽從水槽中取出陰干0 40分鐘，用注射器從海膽圍口膜注入0. 5 l.Oml的0.5mol/L KC1溶液，等待產卵和排精，并分別收集膽卵和膽精，分別 混勻后待用；
b、 將a步驟收集的膽卵和膽精混合受精，受精后不停攪動，并采用水浴，
受精卵的發育溫度控制在17 18X:之間；
c、 受精后55 65分鐘用篩絹網濃縮和收集受精卵，裝入封閉袋，置于靜 水壓力設備的壓力容器中，環境溫度確定為17 18t:之間；
d、 在受精后的60 70分鐘開始加壓處理，壓力容器內的壓力控制在70 80MPa之間，處理時間控制在6 8分鐘；
e、 然后將受精卵置于桶內進行孵化，并攪動，孵化溫度控制在17 18'C之 間，胚胎上浮后選優，并適量充氣，幼體培育期間投喂餌料，每天換水1 3次， 每次換水量為1 / 3 2/3，每3天倒池1次，待幼蟲變態為稚海膽后正常管理。
本發明的海膽四倍體苗種的誘導和培育方法，其中所述的將種膽從水槽中 取出陰干時間為30分鐘；所述的0.5mol/L KCl溶液的用量為0.75ml;所述的
發育溫度控制為17. 5°C;所述的用篩絹網濃縮和收集受精卵在受精后60分鐘時 行；所述的環境溫度控制為17.5°C;在受精后65分鐘加壓處理，靜水壓力為 75Mpa,處理時間為7分鐘；所述的孵化溫度控制為17°C;所述的餌料為角毛藻； 孵化時每天換水2次，每次換水量1/2。
本發明的海膽四倍體苗種的誘導和培育方法，由于利用了靜水壓力設備對 受精卵進行了處理，這種靜水壓力的誘導方式不存在藥物殘留和藥物污染等問 題，而且誘導效果好，其實質是采用靜水壓抑制中間球海膽受精卵的第一次卵 裂，從而改變受精卵原有的遺傳和發育基礎，形成四倍體海膽苗種，四倍體海 膽是生產三倍體海膽最快速簡捷的方法，三倍體海膽性腺組織仍能發育，但其 不育性和低育性使其不能正常排放精卵，延長了海膽生殖腺上市期，這可以延 長可鮮活上市或加工供應的時間，從而彌補繁殖季節以外時期的海膽市場供應， 提高海膽的養殖價值。
具體實施例方式
本發明的海膽四倍體苗種的誘導和培育方法，包括如下步驟
a、 將種膽從水槽中取出陰干0 40分鐘，用注射器從海膽圍口膜注入 0.5ml lml的0.5mol/L KC1溶液，等待產卵和排精，并分別收集膽卵和膽精， 分別混勻后待用；
b、 將a步驟收集的膽卵和膽精混合受精，受精后不停攪動，并采用水浴， 受精卵的發育溫度控制在17 18'C之間；
c、 受精后5 5 6 5分鐘用篩絹網濃縮和收集受精卵，裝入封閉袋，置于 靜水壓力設備的壓力容器中，環境溫度確定為17 18°C;
d、 在受精后的6 0 7 O分鐘開始加壓處理，壓力容器內的壓力控制在 70 80MPa，處理時間控制在6 8分鐘；
e、 然后將受精卵置于桶內進行孵化，并攪動，孵化溫度控制在16 18。C， 胚胎上浮后選優，并適量充氣，幼體培育期間投喂角毛藻，每天換水1 3次， 每次換水量為1 / 3 2/3，每3天倒池1次，待幼蟲變態為稚海膽后正常管理。 在實施過程中，對上述所說的數值范圍，只要在其中取值均可。
所述的靜水壓力設備結構是有一個圓筒狀的不銹鋼壓力罐，該壓力罐由罐 體和罐蓋及罐體和罐蓋之間的密封件組成，罐體內腔通過管路和閥門與水泵相 連，在壓力罐上安裝有壓力顯示表，水泵接水槽，可向罐內泵入海水，使其內 腔海水壓力增高，達到設定的壓力時停止運行并保壓。
權利要求
1、一種海膽四倍體苗種的誘導和培育方法，其特征在于包括如下步驟a、將種膽從水槽中取出陰干0～40分鐘，用注射器從海膽圍口膜注入0.5～1.0ml的0.5mol/L KCl溶液，等待產卵和排精，并分別收集膽卵和膽精，分別混勻后待用；b、將a步驟收集的膽卵和膽精混合受精，受精后不停攪動，并采用水浴，受精卵的發育溫度控制在17～18℃之間；c、受精后55～65分鐘用篩絹網濃縮和收集受精卵，裝入封閉袋，置于靜水壓力設備的壓力容器中，靜水壓力容器內水環境溫度確定為17～18℃之間；d、在受精后的60～70分鐘開始加壓處理，壓力容器內的壓力控制在70～80MPa之間，處理時間控制在6～8分鐘；e、然后將受精卵置于桶內進行孵化，并攪動，孵化溫度控制在16～18℃之間，胚胎上浮后選優，并適量充氣，幼體培育期間投喂餌料，每天換水1～3次，每次換水量為1/3～2/3，每3天倒池1次，待幼蟲變態為稚海膽后正常管理。
2、 根據權利要求1所述的海膽四倍體苗種的誘導和培育方法，其特征在于 所述的將種膽從水槽中取出陰干時間為30分鐘；所述的0.5mol/L KC1溶液的 用量為0.75ml;所述的發育溫度控制為17.5°C;所述的用篩絹網濃縮和收集受 精卵在受精后60分鐘進行；所述的環境溫度控制為17. 5°C;在受精后65分鐘 加壓處理，壓力為75MPa，處理時間為7分鐘；所述的孵化溫度控制為17°C;所 述的餌料為角毛藻；孵化時每天換水2次，每次換水量1/2。
全文摘要
海膽四倍體苗種的培育方法。步驟為將種膽陰干0～40分鐘，自海膽圍口膜注入0.5～2.0ml的0.5mol/L KCl溶液，等待產卵和排精，收集膽卵和膽精待用；混合受精，受精卵的發育溫度控制在17～18℃之間；受精后55～65分鐘用篩絹網濃縮和收集受精卵，裝入封閉袋，置于靜水壓力設備的壓力容器中，環境溫度確定為17～18℃之間；在受精后的60～70分鐘開始加壓處理，壓力控制在70～80MPa之間，處理時間控制在6～8分鐘；然后將受精卵置于桶內進行孵化，并攪動，孵化溫度控制在16～18℃之間，胚胎上浮后選優，并適量充氣，幼體培育期間投喂餌料，每天換水1～3次，每次換水量為1/3～2/3，每3天倒池1次。本方法培育的四倍體苗種可生產三倍體苗種，延長了加工上市時間。
文檔編號A61D19/00GK101103707SQ20071001247
公開日2008年1月16日 申請日期2007年8月16日 優先權日2007年8月16日
發明者君 丁, 于明治, 常亞青, 曹學彬, 楊小剛, 王永華 申請人:大連水產學院