專利名稱：一株防治溫室刺吸式害蟲的高效菌株及其制劑的制作方法
技術領域：
本發明屬于害蟲生物防治技術領域，涉及一株蟲生真菌菌株一蠟蚧輪枝菌Kerti7/i' CA190404，CGMCC1126及其制劑，可用于防治溫室刺吸式害蟲一粉虱、蚜蟲、薊馬，可用于無公害蔬菜和 綠色食品蔬菜生產。
背景技術：
隨著社會的發展和人們生活水平的提高，人們對食品質量的要求越來越高。無公害食品和綠色食品 的生產已成為了目前農業生產的主要發展方向。我國目前有3000余萬畝的設施蔬菜，其中主要發生的害 蟲為粉虱(溫室白粉虱和煙粉虱)、蚜蟲(瓜蚜)、薊馬，常年危害產量損失在30%以上。目前防治害蟲 的主要手段是化學防治，如噴灑有機磷(樂果、毒死蜱等)和菊酯類化學農藥，這些農藥的大量使用， 造成了農產品農藥殘留嚴重超標和農田環境嚴重污染，迫切需要發展生物防治來替代和局部替代化學農 藥的使用。對于溫室刺吸式口器的小型害蟲(如粉虱、蚜蟲、薊馬)，它們繁殖力強，抗藥性強，更是需 要生物防治。本發明針對這一農業生產的客觀需求，研究發現一株高效生防菌，進而研究了該菌株的相 應制劑和應用技術。
發明內容
本發明從我國福建罹病的粉虱體中分離篩選得到一株對溫室粉虱高效寄生的真菌菌株；本發明提供 該菌株的鑒定特征和生物學特性；在明確菌株高效寄生作用的基礎上，還提供了該菌株相應制劑的配制 技術以及防治應用方法。本發明內容對農業無公害生產和綠色食品生產具有積極的促進作用。
本發明的技術方案如下
本發明所提供的菌株，其特征在于該菌株為蠟蚧輪枝菌Zertiw77i"/B 7ec朋j7 CA190404 ， 2004 年4月7日保存于"中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)"，其保藏號為CGMCC1126。菌株形態鑒定特征
菌株在麥芽糖瓊脂、燕麥瓊脂及馬鈴薯瓊脂培養基上培養7天后菌落白色至淡黃色，薄絮狀，背面 無色至淡黃色。分生孢子梗不發達，似營養菌絲，其上一般有3-4個輪生的瓶梗，瓶梗纖細，基部1. 4-1. 7 UM，長10-14UM，端尖，白色。分生孢子橢圓形，兩端圓，白色至淡黃色，單生，有黏液，在瓶梗頂 部聚集成頭狀，3-4.5X2, 5-3,5 uM。
菌株的生物學特征
菌株孢子萌發最佳溫度為24-25°C，濕度為85%-100%， pH值為7。菌絲生長最佳溫度為23-24'C， 最佳pH值為6-7，菌株生長最佳C/N比為20:1，最佳碳源濃度為lmol/L;菌株最佳碳源為蔗糖、可溶 性淀粉、麥芽糖、纖維二糖、海藻糖；最佳氮源為大豆蛋白胨、牛肉蛋白胨、酵母粉。菌株產孢最佳溫 度為24-25°C，谷氨酸、苯丙氨酸、鳥嘌呤對菌株產孢有顯著的促進作用。
菌株制劑及其對害蟲的防治作用
菌株的固體制劑，其組成含量比例(重量比)為蠟蚧輪枝菌(純孢粉，含孢子90%以上)8%，液
體石蠟4%、葡萄糖3%、木質素磺酸鈉4%，吐溫100號3%，淀粉10-12%,硅藻土 (68%-66%)加到100%, 混合均勻而成。田間應用時將該制劑加水800-1000稀釋，其懸浮液中孢子濃度為1(f-10'個/ml，均勻噴 灑在有害蟲(粉虱、蚜蟲、薊馬)的植物表面，在環境相對濕度85%以上中持續48小時后，對粉虱6-7 天的防治效果可達到85%以上，防治瓜蚜的效果可達到85%以上，防治薊馬的效果可達60%-75%，可以 有效控制害蟲的危害，可用于無公害蔬菜和綠色食品蔬菜的生產。
具體實施例方式
實施例l:菌株分生孢子的大量培養與提取
將長期保存的該菌株的試管菌種用馬鈴薯瓊脂培養基(在常規配方基礎上添加0.5%的酵母粉)轉接 活化3次，將固體平板上培養6-7天的分生孢子用無菌水打下，然后接到搖瓶上培養，接種量為5%， 180 轉/分，24。C搖床培養60小時，將其作為種子接到含水量75-80%的大米飯粒上(大米預先加水，泡6小 時，分裝到微波爐塑料袋中加熱，每500克大米1000W微波爐中熱7-8分鐘，制成七成熟)，24'C無菌 袋內培養4-5天，開袋培養1.5-2天。結束培養后，在30-35'C的烘房中烘干3-4天，然后將結團的烘干 物打碎，過篩(400目)，即可得到純孢粉(含孢子90%以上)。這種純孢粉可用于配制田間應用的制劑，用于防治害蟲。
實施例2:防治蔬菜溫室白粉虱(7^'a7ewi"oofes ra/ orarior咖)
將生產所得到的純孢粉，按蠟蚧輪枝菌(純孢粉，含孢子90%以上)8%,液體石蠟4%、葡萄糖 3%、木質素磺酸鈉4%，吐溫100號3%，淀粉10-12%,硅藻土68%-66%，混合均勻，即可為田間應用 制劑。制劑加水1000倍稀釋，噴霧防治溫室白粉虱，當室內溫度為23-27'C,相對濕度85%以上持續48 小時，6天的防治效果可達到85%-100%。
實施例3:防治大棚黃瓜上的煙粉虱(Be附iw'flta^c/)兼治蚜蟲、薊馬
以蠟蚧輪枝菌為有效成分，按蠟蚧輪枝菌(純孢粉,含孢子90%以上)8%，液體石蠟4%、葡萄糖 3%、木質素磺酸鈉4%，吐溫100號3%,淀粉10-12%,硅藻土68%-66%，配制田間應用制劑。制劑加 水800倍水稀釋，噴霧防治大棚黃瓜上的煙粉虱、瓜蚜、薊馬，當室內溫度為25-28°C，相對濕度85% 以上持續48小時后，6天防治煙粉虱的效果可達到90%以上，防治瓜蚜的效果可達到85%以上，兼治薊 馬的效果可達60-75%。
權利要求
1. 一種防治溫室刺吸式害蟲(粉虱、蚜蟲、薊馬)的菌株及其制劑，其菌株的特征在于它是蠟蚧輪枝菌Verticillium lecanii CA 190404，菌種保藏于“中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心”，菌株保藏號為CGMCC 1126。
2. 如權利1所述的菌株，其生物學特性為菌株孢子萌發最佳溫度為24-25°C，濕度為 85%-100%, pH值為7;菌絲生長最佳溫度為23-24。C，最佳pH值為6-7，菌株生長最佳 C/N比為20:l，最佳碳源濃度為lmol/L;菌株最佳碳源為蔗糖、可溶性淀粉、麥芽糖、纖 維二糖、海藻糖；最佳氮源為大豆蛋白胨、牛肉蛋白胨、酵母粉；菌株產孢最佳溫度為 24-25°C，谷氨酸、苯丙氨酸、鳥嘌呤對菌株產孢有顯著的促進作用。
3. 如權利1所述的制劑，其特征在于它是活孢子菌株固體制劑，活孢子采用接種蠟蚧輪枝菌 CGMCC1126菌株，液-固兩相發酵而制成，固相發酵溫度為23-24°C， pH為5-8;液相發酵 結果作為固相發酵的接種液，液相發酵60-72小時，發酵液中芽孢子濃度達到5X 1(T個/ml 至1()S個/ml數量級時終止，固相發酵6-7天，分生孢子成熟時終止。
4. 如權利l所述的制劑，其配方特征在于其組成含量比例(重量比)為蠟蚧輪枝菌(純孢 粉，含孢子90%以上)8%，液體石蠟4%、葡萄糖3%、木質素磺酸鈉4%，吐溫100號 3%，淀粉10-12%,硅藻土 (68%-66%)加到100%，混合均勻而成。
5. 如權利l所述的制劑，其可用于防治溫室粉虱、蚜蟲和薊馬。
全文摘要
本發明屬于害蟲生物防治技術領域，涉及一株生防菌株及其制劑。該菌株為蠟蚧輪枝菌Verticillium lecanii CA190404，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏號為CGMCC No.1126，可用于防治溫室刺吸式害蟲—粉虱(煙粉虱和白粉虱)、蚜蟲和薊馬，可用于無公害蔬菜和綠色食品蔬菜生產。
文檔編號A01P7/00GK101440349SQ200710187638
公開日2009年5月27日 申請日期2007年11月20日 優先權日2007年11月20日
發明者萬方浩, 周淑云, 扈新萍, 明 謝, 邱衛亮 申請人:中國農業科學院植物保護研究所