專利名稱：：百里香酚殺螨微乳劑及其制備方法
技術領域：
：本發明涉及一種百里香酚殺螨微乳劑及其制備方法。
背景技術：
：百里香酚(Thymol)，又稱百里酚，麝香草酚，化學名稱為2-異丙基-5-甲基苯酚，結構式是百里香酚常溫下為白色晶體或無色半透明晶體，熔點51.5r，沸點233235。C，有百里香油似的辛香和草香香氣。極易溶于乙醇、乙醚、醋酸、氯仿和苯。主要存在于唇形科植物百里香7Ty;m^化w〃wwL.草，麝香草r.vw/gan^L.全草，牛至(9Wgawwwvw/gfl7-eL.全草，香青蘭ZVacocep/a/wmwo/c/av/cwmL.全草和傘形科植物粗果芽7Vac/y^/ermwmaww/(L.)Sprague種子中。百里酚除用作香料、食品添加劑外，還可作為醫療藥品，用于口腔殺菌，也可用來處理傷口，貯存解剖標本；由于它具有酚類的氣味，也常用作驅蟲劑，此外，百里酚還可作為抗氧劑。近年來，對百里香酚的研究多集中于其醫用殺菌活性。樊明濤等(2001)以百里香水和酒精提取物及百里香芳香油作為抑菌劑進行抑菌試驗，結果表明，所用抑物對供試菌金黃色葡萄球菌，枯草芽孢桿菌和大腸桿菌均有不同程序的抑制作用，可望將其用于食品工業作為防腐和抑菌劑。廖芳等(2005)的研究表明，百里香酚是牛至的主要有效抗菌成分，體外對痢疾桿菌和腸炎常見菌均具有較強的抑菌和殺菌作用(廖芳,楊振德,黃慶華,等.麝香草酚和香荊芥酚對痢疾桿菌和腸炎常見菌的體外抗菌效應.醫藥導報,2005,24(10):868-870)。胡瑛等(2003)對殼聚糖一百里香酚復合物及其單體對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、棒狀桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌的抑菌作用進行了研究，結果表明，殼聚糖百里香酚復合物對6種菌都有明顯的抑制作用，比單體的抑菌范圍變寬了、并且抑菌時間比單體有不同程度的延長(胡瑛,杜予民,劉慧.殼聚糖-百里香酚復合物的抑菌活性研究[J].武漢大學學報理學版,2003,49(2):261-265)。閉興明等(2009)探索了百里香酚對致病白色念珠菌的抑菌作用，發現百里香酚對紅色毛癬BMU01672株、釀酒酵母標準株和24株臨床分離耐氟康唑(FLC)白色念珠菌有較好的抗真菌活性，THY與氟康唑和兩性霉素B聯合應用具有協同抗真菌作用，這為麝香草酚抗真菌活性的進一步研究和開發打下了基礎(閉興明，孟日增,郭紙等.麝香草酚體外抗真菌活性研究.中國農學通報2009,25(01):21-24)。P.C.Braga等(2007)發現，丁子香酚和麝香草酚能改變白念珠菌包膜的形態，且后者的作用強于前者；兩者合用增強其對白念珠菌在腸道積聚和感染的抑制(P.C.Bmga,M.DalSasso,M,Culici,M.Alfieri.Eugenolandthymol,aloneorincombination,inducemorphologicalalterationsintheenvelopeofOw^/aa/6/ca";y.Fitoterapia.2007,78(6):396-400)。迄今為止，國內外未發現有以百里香酚為原料，制造植物性殺螨劑的報道。百里香酚是植物源活性成分，目前多用于制作香料、防腐劑、醫用殺菌劑和驅蟲劑，安全性高。該物質易于獲得，化學性質穩定，毒性低，在環境中易降解，這些特性符合生物農藥的發展要求，作為生物農藥開發具有廣闊的應用前景。將百里香酚加工成微乳劑后，可以在很大程度上降低制劑成本，提高藥效，降低有機溶劑的使用量和對環境的污染，從而提高農產品質量。因此，"高效、低毒、安全、經濟"的百里香酚微乳劑的成功研制和應用將具有極大的社會效益和經濟效益。
發明內容為了解決上述
背景技術：
中的缺陷或不足，本發明的目的在于提供一種百里香酚殺螨微乳劑及其制備方法。本發明所提供的百里香酚殺螨微乳劑，由下述重量百分含量的組分組成百里香酚525%，溶劑1020%，乳化劑1020%，穩定劑0.53%，抗凍劑15%，余量為水。所述百里香酚的重量百分含量優選為5-20%。所述溶劑為二甲亞砜、吡咯烷酮，乙二醇、環已酮、二甲基甲酰胺、二甲苯、甲醇和乙醇中的一種或兩種以上任意混合。所述乳化劑為垸基苯磺酸鹽、蓖麻油環氧乙垸醚、苯酚衍生物聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚和烷基酚聚氧乙烯醚中的一種或兩種以上任意混合。所述烷基苯磺酸鹽優選為十二垸基苯磺酸鈣(DBS-Ca)，苯酚衍生物聚氧乙烯醚優選為601#、602#、603#、1601#、1602#、700#。所選穩定劑為3-氯-l,2-環氧丙烷，丁基縮水甘油醚，苯基縮水甘油醚，甲苯基縮水甘油醚和聚乙烯基乙二醇二縮水甘油醚中的一種或兩種以上任意混合。所述抗凍劑是乙二醇、丙二醇、丙三醇和聚乙二醇400中的一種或兩種以上任意混合。所述水為自來水、蒸餾水或去離子水。所述溶劑優選為乙醇、環己酮、二甲亞砜和甲醇中的一種或兩種以上任意混合；所述乳化劑優選為壬基酚聚氧乙烯醚、苯酚衍生物聚氧乙烯醚和垸基苯磺酸鹽中的一種或兩種以上任意混合；所述穩定劑優選為3-氯-l，2-環氧丙垸和/或丁基縮水甘油醚；所述抗凍劑優選為丙三醇和/或丙二醇。所述百里香酚殺螨微乳劑，優選由下述重量百分含量的組分組成百里香酚5-10%，溶劑16-20%，乳化劑14-15%，穩定劑1.5-2%,抗凍劑2.5-3.5%,余量為水。所述百里香酚殺螨微乳劑，優選由下述l)-3)中任一項所述重量百分含量的組分組成1)百里香酚5%，溶劑20%,乳化劑15%，穩定劑1.5%，抗凍劑2.5%，余量為水；2)百里香酚7.5%，溶劑16%，乳化劑14%，穩定劑2%，抗凍劑3%，余量為水。3)百里香酚10%，溶劑18%，乳化劑16%，穩定劑2%，抗凍劑3.5%，余量為水。本發明所提供的百里香酚殺螨微乳劑的制備方法，是將百里香酚原藥用助溶劑完全溶解，依次加入乳化劑、抗凍劑、穩定劑和分散劑，攪拌均勻，在室溫高速攪拌情況下在所得制劑中加入水，恒溫攪勻，使之形成自由分散、均一、透明、穩定的液體，即為百里香酚殺螨微乳劑。發明人測定了百里香酚對多種害螨的殺螨活性，發現百里香酚對山楂葉螨、朱砂葉螨、皮氏葉螨、比哈小爪螨等農業害螨均表現出很好的毒殺作用，值得進一步開發。因此本發明以百里香酚為原料，將其和溶劑、農藥助劑、水合理配制，獲得殺螨活性顯著、低毒低殘留，害蟲不易對其產生抗藥性的新型植物源殺螨微乳劑。該微乳劑具有以下特點1.高效。將百里香酚制成微乳劑后，由于在制劑中加入適量的表面活性劑，使百里香酚制劑可更好地與害螨接觸，提高了殺螨效力。該殺螨劑殺螨譜廣，可有效防治朱砂葉螨、皮氏葉螨、比哈小爪螨等多種農業害螨。2.安全。本發明所研制的制劑以水為主要基質，節省了大量的有機溶劑，對環境污染小，施用后無殘留。3.低毒。本發明以百里香酚為有效成分，該化合物存在于多種植物的精油中，并可作為調味品，因此對人和高等動物相對安全。此外，本發明為一種水基化制劑，制劑中所用到的溶劑、乳化劑、抗凍劑和穩定劑均是目前農藥領域使用較為廣泛的常用助劑，對人和高等動物十分安全。與現有技術相比，本發明將百里香酚與這些助劑合理配比所研制的百里香酚微乳劑，其制劑形態的環境相容性好，對害螨高效，對環境影響小。4.方便。本發明生產工藝簡單，便于制備，成本低廉。具體實施例方式下述實施例中，如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中，所述百分含量如無特殊說明，均為質量百分含量。本發明的發明人從唇形科百里香屬植物地椒中采用活性追蹤法所得到一殺螨活性成分百里香酚，經活性測試發現，百里香酚對山楂葉螨等農業害螨有著很高的觸殺活性，其中，對山楂葉螨12h和24h的觸殺LCso值分別為0.103和0.048mg/mL，經百里香酚處理的山楂葉螨，高濃度下成螨一般在處理后20min內即表現出中毒癥狀，中毒的螨附肢活動緩慢，用昆蟲針輕觸其附肢，僅表現出微弱的顫動，有的短時間內即死亡，也有的持續24h仍不死亡，但其螨體顏色變暗，附肢縮在一起。為了提高百里香酚用于殺螨的實際應用性能，發明人通過篩選用其制備了殺螨微乳劑。為了更清楚的理解本發明以及本發明藥劑的藥效，以下通過發明人給出的依本發明技術方案所完成的如下實施例對本發明作進一步的詳細描述，但這些僅是本發明較好的實施例，該領域的技術熟練人員可以根據本發明的內容對本發明作出一些非本質的改進和調整。實施例1、5%百里香酚殺螨微乳劑的制備5%百里香酚殺螨微乳劑由下述重量百分含量的物質組成-百里香酚5%，溶劑20%,乳化劑15%，穩定劑1.5%，抗凍劑2.5%，余量為水。其中，百里香酚的純度為97%，溶劑為乙醇和環己酮的混合物，乙醇和環己酮的質量比為4:1，乳化劑為壬基酚聚氧乙烯醚，穩定劑為3-氯-l,2-環氧丙烷，抗凍劑為丙三醇。上述5%百里香酚殺螨微乳劑的制備方法如下所述稱取97%(質量含量)百里香酚5.2公斤，溶于16公斤乙醇和4公斤環已酮的混合溶液中，依次加入15公斤壬基酚聚氧乙烯醚，2.5公斤丙三醇和1.5公斤3-氯-1,2-環氧丙烷，室溫下攪拌均勻，然后將以上溶液在勻質機中高速攪拌下滴加自來水補充至100公斤；滴加完畢，再攪拌lh，冷卻，即得5%百里香酚殺螨微乳劑。實施例2、7.5%百里香酚殺螨微乳劑的制備7.5%百里香酚殺螨微乳劑由下述重量百分含量的物質組成百里香酚7.5%，溶劑16%，乳化劑14%，穩定劑2%，抗凍劑3%，余量為水。其中，百里香酚的純度為97%，溶劑為環已酮和二甲亞砜的混合物，環已酮和二甲亞砜的質量比為15:1，乳化劑為苯酚衍生物聚氧乙烯醚和垸基苯磺酸鹽(苯酚衍生物聚氧乙烯醚和垸基苯磺酸鹽的質量比為9:5)，穩定劑為丁基縮水甘油醚，抗凍劑為丙二醇。上述7.5%百里香酚殺螨微乳劑的制備方法如下所述將7.7公斤97%的百里香酚溶于15公斤的環已酮和1公斤的二甲亞砜的混合溶液中，待其溶解完全后依次加入9公斤苯酚衍生物聚氧乙烯醚(602#，遼寧奧克化學股份有限公司)和5公斤十二烷基苯磺酸鈣(DBS-Ca)，混合均勻后在保持攪拌的情況下加入2公斤丁基縮水甘油醚和3公斤丙二醇，混合均勻后在高速攪拌下加入自來水配補充至100公斤，在室溫下攪拌lh后即得7.5。/。百里香酚殺螨微乳劑。實施例3、10%百里香酚殺螨微乳劑的制備10%百里香酚殺螨微乳劑由下述重量百分含量的物質組成百里香酚10%，溶劑18%，乳化劑16%，穩定劑2%，抗凍劑3.5%，余量為水。其中，百里香酚的純度為97%，溶劑為甲醇和環己酮的混合物，甲醇和環己酮的質量比為15:3，乳化劑為苯酚衍生物聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚和垸基苯磺酸鹽(苯酚衍生物聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚和烷基苯磺酸鹽的質量比為8:5:3),穩定劑為丁基縮水甘油醚，抗凍劑為丙二醇。上述10°/。百里香酚殺螨微乳劑的制備方法如下所述稱取97%百里香酚10.3公斤，溶于15公斤甲醇和3公斤環已酮后，依次加入8公斤苯酚衍生物聚氧乙烯醚(602#，遼寧奧克化學股份有限公司)、5公斤壬基酚聚氧乙烯醚和3公斤十二烷基苯磺酸鈣(DBS-Ca),混合均勻，在攪拌的情況下加入2公斤丁基縮水甘油醚和3.5公斤丙二醇，混合均勻后在攪拌下加入自來水補充至100公斤，在室溫下攪拌1h后即得10%百里香酚殺螨微乳劑。實施例4、微乳劑理化性質及穩定性的檢測將實施例1-3中制備的5%百里香酚殺螨微乳劑、7.5%百里香酚殺螨微乳劑和10%百里香酚殺螨微乳劑進行如下檢測1、外觀觀察將實施例1-3中制備的5%百里香酚殺螨微乳劑、7.5%百里香酚殺螨微乳劑和10%百里香酚殺螨微乳劑的外觀，表明它們均稱淡黃色透明液體，無可見懸浮物及沉淀。2、乳液穩定性試驗分別取1mL上述制備的5%百里香酚微乳劑、7.5%百里香酚微乳劑和10%百里香酚微乳劑，加入200mL342mg/L標準硬水中，搖勻，在3(TC下靜置30分鐘。結果表明上述制備的5%百里香酚微乳劑、7.5%百里香酚微乳劑和10%百里香酚微乳劑仍然保持淡藍色透明，無油狀物懸浮或固體沉淀，并能與水以任意比例混合。3、冷貯穩定性試驗分別取7mL實施例1制備的5%百里香酚微乳劑、實施例2制備的7.5%百里香酚微乳劑和實施例3制備的10%百里香酚微乳劑，裝入安瓿瓶中密封，置于0±1'C冰箱中冷凍，14d后取出置于室溫下觀察。結果表明，上述制劑均保持透明，無沉淀和結晶析出，無分層，流動性和乳化性能均無變化。4、熱貯穩定性試驗分別取7mL實施例1制備的5%百里香酚微乳劑、實施例2制備的7.5%百里香酚微乳劑和實施例3制備的10%百里香酚微乳劑，裝入安瓿瓶中密封，置于54士2'C條件下jt存2周，取出冷卻后稱量，對貯存前后制劑質量保持不變的樣品，檢測其有效成分含量，計算分解率。有效成分分析方法如下所述采用高效液相色譜法分析制劑中有效成分百里香酚的含量。色譜條件為色譜柱SymmetryC18(4.6mmX250mm，5拜)；檢測波長274nm;流動相乙腈-水(v:v=65:35);流速lmL/min;進樣體積10)iL;定量方法外標法。分解率=(百里香酚原始含量-熱貯后百里香酚含量)/百里香酚原始含量X100%檢測結果如下5%百里香酚微乳劑平均分解率為3.40%，7.5%百里香酚微乳劑平均分解率為2.21%，10%百里香酚微乳劑平均分解率為2.40%。制劑外觀保持均相透明。試驗結果證明，本發明所制得的微乳劑制劑熱貯穩定性合格。實施例5、本發明百里香酚微乳劑的室內殺螨效果在室內條件下，測定了百里香酚微乳劑對皮氏葉螨的殺螨活性，實驗方法和實驗結果如下1、供試螨類皮氏葉螨(7Wmwj;c;msp/en:e/)采自未施藥的香蕉地，在室內飼養多代，選擇其大小一致、健康活潑的成螨供試。2、供試藥劑實施例1制備的5%百里香酚微乳劑、實施例2制備的7.8百里香酚微乳劑和實施例3制備的10%百里香酚微乳劑。3、試驗方法將上述制劑采用FAO所推薦的玻片浸漬法對供試害螨進行殺螨活性測定，每種藥劑設200倍和800倍2個供試濃度，每濃度重復3次，每重復不少于60頭供試害螨。將供試雌成螨挑于玻片雙面膠帶上，背部向下，在溫度26士rC、60%-80%RH的環境下放置2h后，在雙目解剖鏡下剔除死亡或受傷個體，記錄活螨數。將帶有活螨的玻片在預先備好的藥液中浸5s后取出，用濾紙迅速吸干供試螨周圍多余的藥液。在同等詞養條件下培養，處理后24h檢查死亡情況，并計算死亡率和校正死亡率，用毛筆輕觸螨體，以附肢不動者為死亡。死亡率死螨數/供試螨數X100%校正死亡率氣處理死亡率-對照死亡率)/(ioo-對照死亡率)xiooyo表i百里香酚微乳劑對皮氏葉螨的殺螨活性<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例6、本發明百里香酚微乳劑的田間藥效試驗1、供試藥劑實施例1制備的5%百里香酚微乳劑、實施例2制備的7.5%百里香酚微乳劑和實施例3制備的10%百里香酚微乳劑，6%克螨凈乳油(有效成分高滲噠螨靈)，湖南天澤農藥化工有限公司生產。2、供試作物與防治對象香蕉，皮氏葉螨。3、試驗方法參照農業部農藥檢定所生測室制定的農藥田間藥效試驗準則進行。試驗地設在海南省儋州市寶島新村中國熱帶農業科學院試驗基地香蕉園，該香蕉園皮氏葉螨發生較為嚴重，選擇螨口密度較高的香蕉進行試驗。設分別5%百里香酚微乳劑、7.5%百里香酚微乳劑和10%百里香酚微乳劑500倍稀釋液，共3個濃度，6%克螨凈乳油3000倍，清水為對照，共5個處理。每處理設4個重復，共20個小區。小區面積20m2，隨機區組排列，小區間設保護行。將藥劑稀釋到所需濃度，然后以工農一16型背負式手動噴霧器進行常量噴霧，畝噴液量60kg/畝，均勻噴布于葉片正反兩面，以噴濕葉片為度。采用定點、定株、定葉持牌法檢査，持牌葉片基部涂抹凡士林以防止葉螨逃跑。分別檢査藥前基數、藥后ld、3d和7d存活螨數，結果見表2。按如下公式計算防治效果，用鄧肯氏新復極差法(袁志發.周靜芋(主編).試驗設計與分析.北京高等教育出版社，2000)比較處理間差異顯著性。試驗期間天氣晴好，溫度20-33°C，無降雨，風力2-3級。螨口減退率=(藥前活螨數-藥后存活螨數)/藥前活螨數X100%防治效果=(處理區螨口減退率±對照區螨口減退率)/(1±對照區螨口減退率)x訓o/0表2百里香酚微乳劑防治皮氏葉螨試驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>由表2可以看出，百里香酚微乳劑對皮氏葉螨表現出很好的防治效果，其中，以10%百里香酚微乳劑防治效果最好，其500倍稀釋液在處理后3d和7d的防治效果分別為82.25%和75.41%。權利要求1、一種百里香酚殺螨微乳劑，由下述重量百分含量的組分組成百里香酚5～25％，溶劑10～20％，乳化劑10～20％，穩定劑0.5～3％，抗凍劑1～5％，余量為水。2、根據權利要求1所述的百里香酚殺螨微乳劑，其特征在于所述百里香酚的重量百分含量為5-20%。3、根據權利要求1或2所述的百里香酚殺螨微乳劑，其特征在于所述溶劑為二甲亞砜、吡咯烷酮，乙二醇、環已酮、二甲基甲酰胺、二甲苯、甲醇和乙醇中的一種或兩種以上任意混合；所述乳化劑為烷基苯磺酸鹽、蓖麻油環氧乙垸醚、苯酚衍生物聚氧乙烯醚、苯酚衍生物聚氧丙烯基醚、壬基酚聚氧乙烯醚和院基酚聚氧乙烯醚中的一種或兩種以上任意混合；所選穩定劑為3-氯-l,2-環氧丙垸，丁基縮水甘油醚，苯基縮水甘油醚，甲苯基縮水甘油醚和聚乙烯基乙二醇二縮水甘油醚中的一種或兩種以上任意混合；所述抗凍劑是乙二醇、丙二醇、丙三醇和聚乙二醇400中的一種或兩種以上任意混合。4、根據權利要求1-3中任意一項所述的百里香酚殺螨微乳劑，其特征在于所述水為自來水、蒸餾水或去離子水。5、根據權利要求3或4所述的百里香酚殺螨微乳劑，其特征在于所述溶劑為乙醇、環己酮、二甲亞砜和甲醇中的一種或兩種以上任意混合；所述乳化劑為壬基酚聚氧乙烯醚、苯酚衍生物聚氧乙烯醚和烷基苯磺酸鹽中的一種或兩種以上任意混合；所述穩定劑為3-氯-1,2-環氧丙烷和/或丁基縮水甘油醚；所述抗凍劑為丙三醇和/或丙二醇。6、根據權利要求1-5中任意一項所述的百里香酚殺螨微乳劑，其特征在于所述百里香酚殺螨微乳劑，由下述重量百分含量的組分組成百里香酚5-10%，溶劑16-20%，乳化劑14-15%，穩定劑1.5-2%，抗凍劑2.5-3.5%，余量為水。7、根據權利要求6所述的百里香酚殺螨微乳劑，其特征在于所述百里香酚殺螨微乳劑，由下述l)-3)中任一項所述重量百分含量的組分組成1)百里香酚5%，溶劑20%，乳化劑15%，穩定劑1.5%，抗凍劑2.5%，余量為水；2)百里香酚7.5%，溶劑16%，乳化劑14%，穩定劑2%，抗凍劑3%，余量為水。3)百里香酚10%，溶劑18%，乳化劑16%，穩定劑2%，抗凍劑3.5%，余量為水。8、百里香酚殺螨微乳劑的制備方法，是將百里香酚原藥用助溶劑完全溶解，依次加入乳化劑、抗凍劑、穩定劑和分散劑，攪拌均勻，在室溫高速攪拌情況下在所得制劑中加入水，恒溫攪勻，即得百里香酚殺螨微乳劑；所述溶劑為二甲亞砜、吡咯垸酮，乙二醇、環已酮、二甲基甲酰胺、二甲苯、甲醇和乙醇中的一種或兩種以上任意混合；所述乳化劑為垸基苯磺酸鹽、蓖麻油環氧乙烷醚、苯酚衍生物聚氧乙烯醚、苯酚衍生物聚氧丙烯基醚、壬基酚聚氧乙烯醚和烷基酚聚氧乙烯醚中的一種或兩種以上任意混合；所選穩定劑為3-氯-l,2-環氧丙烷，丁基縮水甘油醚，苯基縮水甘油醚，甲苯基縮水甘油醚和聚乙烯基乙二醇二縮水甘油醚中的一種或兩種以上任意混合；所述抗凍劑是乙二醇、丙二醇、丙三醇和聚乙二醇400中的一種或兩種以上任意混合。9、權利要求1-7中任意所述的百里香酚殺螨微乳劑在殺螨中的應用。全文摘要本發明公開了一種百里香酚殺螨微乳劑及其制備方法。該微乳劑，由下述重量百分含量的組分組成百里香酚5～25％，溶劑10～20％，乳化劑10～20％，穩定劑0.5～3％，抗凍劑1～5％，余量為水。該微乳劑殺螨譜廣，可有效防治朱砂葉螨、皮氏葉螨、比哈小爪螨等多種農業害螨，并且安全、低毒。該微乳劑生產工藝簡單，便于制備，成本低廉。文檔編號A01N25/04GK101601382SQ200910088809公開日2009年12月16日申請日期2009年7月20日優先權日2009年7月20日發明者侯華民,崗馮,孫世偉,靜張,曉曲,杜曉峰,勇林,茍亞峰,袁旭超申請人:中國熱帶農業科學院環境與植物保護研究所