專利名稱:抗黃瓜脈黃化病毒(cvyv)黃瓜植物(cucumis sativus l.)的制作方法
技術領域:
本發明涉及ー種抗黃瓜脈黃化病毒(CVYV)黃瓜植物(⑶CUMIS SATIVUS L.),提供抗黃瓜脈黃化病毒(CVYV)黃瓜植物(⑶CUMIS SATIVUS L.)的方法,分子標記在該方法中的用途,和植物,植物部位,組織,細胞和/或衍生自或來自本發明抗黃瓜脈黃化病毒(CVYV)的黃瓜植物(CUCUMIS SATIVUSL.)的種子。
背景技術:
黃瓜植物,即Cucumis sativus種的植株,屬于葫蘆科的瓜,葫蘆科也包括像甜瓜和筍瓜(squashes)這樣的家族成員。該植物可食用果實通常被稱為黃瓜。黃瓜通常是圓柱形、綠皮果實,其包括大約96%的水。黃瓜植物很早就被種植了,也命名為Cucumis sativus L.,是ー種世界上重要的園藝作物。黃瓜一般在未成熟的時期即被收獲,且被用在腌菜行業或新鮮市場中。黃瓜脈黃化病毒(Cucumber Vein Yellowing Virus)縮寫為CVYV,屬于馬鈴薯Y病毒(Potyviridae)科甘薯病毒(Ipomovirus)屬。它是桿形且是ー種相當不穩定的顆粒,通常是740-800nm長、15_18nm寬。據報道CVYV的病毒核酸由雙鏈核糖核酸組成。該病毒的宿主范圍窄,宿主主要限定在葫蘆科的植物。該科包括重要的經濟作物如,黃瓜,筍瓜(包括南瓜),甜瓜和西瓜。盡管通常CVYV感染是黃瓜產量的主要問題,但筍瓜,福祿瓜(zucchini),西瓜和甜瓜產量也會受影響。CVYV通常是通過煙粉虱(Bremisia tabaci)傳播。CVYV感染的植物一般出現葉脈黃化或脈明病(vein clearing)及具有明顯的產量下降的發育障礙。CVYV感染也能引起植物死亡。因此,CVYV對已經感染的作物能有災難性的影響。預防感染通常是昂貴和/或不利于環境,所述預防感染通過例如在無粉虱的環境下培育幼苗,或者例如用殺蟲劑處理。此夕卜,這些方法不總是達到滿意的效果。黃瓜綠斑點花葉病毒(CucumberGreen Mottle Mosaic Virus),也縮寫為 CGMMV,是ー種引起葫蘆科嚴重疾病的煙草花葉病毒屬的RNA病毒。CGMMV株系最先由英國和歐洲報道。該病毒出現在所有組織中,并且該病毒迅速在工人手中、服裝、刀和其他設備上傳播,且加上病毒是種子帶菌的。種子的熱處理通常用來控制病毒污染。CGMMV還能夠通過地表水傳播。葉片變黃、長斑、向下卷曲的癥狀已被報導,但也許最重要的是減輕重度的果實長斑和變形的報道。果實的這種長斑和變形能夠迅速使受感染的作物滯銷。黃瓜綠斑點花葉病毒也許是感染黃瓜作物最廣泛和最有名的煙草花葉病毒。在黃瓜生產區域如荷蘭、西班牙、希臘和印度,CGMMV是ー個全球性的問題。產量損失可能為15%。黃瓜果實斑點花葉病毒(CucumberFruit Mottle Mosaic Virus),縮寫 CFMMV,是煙草花葉病毒組能引起黃瓜植物重要經濟損失的另ー個家庭成員。黃瓜果實斑點花葉病毒(CFMMV)感染的癥狀,通常最先發現在相對增進生長階段的果實和葉尖。葉子的癥狀包括嚴重的花斑,脈結病和黃斑。有時,完全發育的植物會出現嚴重的萎蔫致使植物虛弱。溫室內病毒快速傳播可導致顯著的產量降低。
發明內容
考慮黃瓜植物(Cucumis sativus L.)中因黃瓜脈黃化病毒(CVYV)引起的經濟損失,在其它目的中,本發明的目的是提供抗黃瓜脈黃化病毒(CVYV)的黃瓜植物(Cucumissativus L.)。繼而,在其它目的中,本發明的目的提供用于提供抗黃瓜脈黃化病毒(CVYV)的黃 瓜植物(Cucumis sativus L.)的方法和途徑。上述目的,在其它目的中,通過本發明附加的權利要求I中所述方法實現。尤其是,上述目的,在其它目的中,通過本發明用于提供黃瓜脈黃化病毒(或CVYV)抗性黃瓜植物,或者黃瓜(Cucumis sativus L.)的方法來實現,該方法包含b)選擇第一黃瓜植物(Cucumis sativus L.),其中所述選擇包括通過以下確定賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分的存在以所述第一黃瓜植物(Cucumissativus L.)的基因組為模板,在分子擴增片段長度多態性(AFLP)分析中,利用分子擴增片段長度多態性(AFLP)引物SEQ ID No :1和SEQ ID No :2,檢測245至247堿基對核酸擴增片段,優選246堿基對核酸擴增片段;c)轉移鑒定的賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分到第二黃瓜植物(Cucumis sativus L.)中,由此賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性到所述第二黃瓜植物(Cucumis sativusL.),其中所述轉移包括,以所述第二黃瓜植物(Cucumis sativusL.)的基因組為模板,在分子擴增片段長度多態性(AFLP)分析中,使用分子擴增片段長度多態性(AFLP)引物SEQ ID No :1和SEQ ID No :2,檢測245至247堿基對核酸擴增片段,優選246堿基對核酸擴增片段。
具體實施例方式根據本發明,引物SEQ ID NO 1包括核酸序列5' -GAC TGC GTA CCA ATT CGT-3'和引物SEQ ID No 2包括核酸序列5' -GAT GAG TCC TGA GTA ACA C-3'顯示存在賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分的本發明的核酸擴增片段,在本領域中通常被指定作為擴增片段長度多態性(AFLP)標記(所述標記遺傳地連接到本發明的賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分上),及在本文中可互換地指定為含245到247堿基對核酸,優選246堿基對核酸的標記E22/M48-F-246。本發明245至247堿基對的核酸擴增片段,優選246堿基對的核酸擴增片段,及由此本發明的賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分,可利用任何適合植物基因組材料的擴增技術,如PCR,來鑒定或檢測。在ー個具體的優選實施例中,本發明245至247堿基對的核酸擴增片段,優選246堿基對的核酸擴增片段,及由此本發明的賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分,可利用本領域指定的核酸擴增技術如分子擴增片段長度多態性來鑒定或檢測(ALFP,Vos,P.,Hogers, R,Bleeker,M.,等人,1995. AFLP anew technique for DNA fingerprinting.Nucleic Acids Research23 (21) :4407-4414 ;Zabeau, M 和 P.Vos. 1993。Selectiverestriction fragment amplification a general method for DNA fingerprinting,歐洲專利局,歐洲公開0 534 858A1)。擴增片段長度多態性(AmplifiedFragment Length Polymorphism,AFLP)是一種以聚合酶鏈反應(PCR)為基礎的基因指紋技術,其早在二十世紀90年代初由荷蘭Keygene開發。簡言之,AFLP用限制性內切酶來消化基因組DNA,然后將互補的雙鏈銜接子連接到限制片段末端。然后限制片段的子集利用互補到銜接子和限制位點片段上的兩個引物來擴増。通過放射自顯影或熒光方法在變性聚丙烯酰胺凝膠上可觀測到片段。這樣通常使得看見許多不同尺寸的核酸擴增片段。通過對比由例如敏感性植物和抗性植物獲得的核酸擴增片段,鑒定有差別的核酸擴增片段,又被指定為兩種顯型間的標記。
在本發明中,遺傳地連接到本發明抗性基因座上井能夠鑒定本發明抗性基因座的ー個特定的AFLP標記(指定作為AFLP標記E22/M48-F-246),能夠通過245_247bp,優選246bp的核酸擴增片段的存在來鑒定。在大量未差別化的其他AFLP擴增片段中,該標記僅出現在抗性個體中但不在敏感性個體中出現。應該注意的是,為了鑒定在第一黃瓜植物(Cucumis sativusL.)中本發明的賦予黃瓜脈黃化病毒抗性的基因成分,利用AFLP引物SEQ ID No :1和2的黃瓜植物(CucumissativusL.) AFLP分析,能夠產生與本發明AFLP標記E22/M48-F-246有小尺寸差別的第二核酸擴增片段。根據本發明,這個大的核酸擴增片段不能遺傳地連接到井能夠鑒定本發明的賦予黃瓜脈黃化病毒花葉病毒抗性的基因成分。換言之,當利用AFLP和AFLP引物SEQ ID No :1和2分析時,本發明第一黃瓜植物(Cucumis sativus L.) 一定能產生指定尺寸的本發明AFLP E22/M48-F-246標記,但另外也能產生大尺寸的第二核酸擴增片段,即,248到250bp核酸擴增片段,如248堿基對核酸擴增片段。依照本發明第一黃瓜植物(Cucumis sativus L.),可以為具有黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性表型的任ー種黃瓜植株(Cucumis sativus L.)植物,所述第一黃瓜植株植物通過本發明的賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分來賦予并用上述的核酸擴增片段來鑒定。本發明第一代黃瓜植物(Cucumis sativus L.)的選擇,固有地包括利用分子生物技術在該植物中檢測本發明的賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分。在鑒定,確定,或檢測了第一黃瓜植物(Cucumis sativus L.)中本發明的賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分后,該遺傳成分轉移到第二黃瓜植物(Cucumissativus L.)中,從而賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性到所述第二黃瓜植物(Cucumissativus L.)。優選的,轉移賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分包括,傳統的育種方法,如把第一黃瓜植物(Cucumis sativus L.)與第二黃瓜植物(Cucumis sativus L.)的常規雜交,隨后與第二黃瓜植物(Cucumis sativus L.)回交。然而,該傳統育種方法優選與分子生物學技術協作,以便在第二黃瓜植物(Cucumis sativus L.)中確定本發明抗性基因座的保持。在優選的實施方案中,第二黃瓜植物(Cucumis sativus L.)是黃瓜脈黃化病毒(CVYV)敏感的商業化品種。通過轉移本發明的黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性基因座至該植物中,同時保持其他經濟價值高品質的基因型和顯型特征,從而提供出有更高經濟價值的黃瓜植物(Cucumis sativus L.)。在最優選的實施方案中,本發明方法提供了具有第二黃瓜植物(Cucumis sativusL.)表型的黃瓜植物(Cucumis sativus L.),該第二黃瓜植物還具有第一黃瓜植物(Cucumis sativus L.)的黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性基因座。在本發明方法優選的實施方案中,本發明方法包括步驟(C),該步驟(C)包括暴露所述第二黃瓜植物(Cucumis sativus L.)至黃瓜脈黃化病毒(CVYV)從而建立對病毒的抗 性。考慮到包括SEQ ID Nos. I和2的引物鑒定本發明黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性基因座的能力,本發明一方面涉及SEQ IDNo :1和/或SEQ ID No :2用于確定在黃瓜植物(Cucumis sativusL.)中賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分存在的用途。通過本發明方法獲得的植物,對黃瓜脈黃化病毒(CVYV)有抗性,并由此具有相對于黃瓜脈黃化病毒(CVYV)敏感植物的經濟優勢,如增加產量。因此,根據本發明的另一方面,涉及含賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分的抗黃瓜脈黃化病毒(CVYV)黃瓜植物(Cucumis sativus L.),其中所述黃瓜植物(Cucumis sativus L.)中存在所述賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分的特征在于,使用所述黃瓜(Cucumis sativus L.)的基因組作為核酸擴增的模板,在分子擴增片段長度多態性分析中,利用分子擴增片段長度多態性(AFLP)引物SEQ ID No :1和SEQ ID No:2,245至247堿基對的核酸擴增片段、優選246堿基對的核酸擴增片段。在本發明這方面優選的實施方案中,植物是其種子保藏在NCIBM登錄號為NCIBM41635 的黃瓜植物(Cucumis sativusL.)。根據更優選的實施方案,本發明涉及抗黃瓜脈黃化病毒(CVYV)的黃瓜植物(Cucumis sativus L.),其中該植物是其種子保藏在NCIBM登錄號為NCIBM 41635的黃瓜植物(Cucumis sativus L.)。應該理解為,本發明不限于如上植物,還涉及衍生自本發明植物的植物,植物部分,組織,細胞和/或種子,及其用于提供抗黃瓜脈黃化病毒(CVYV)的其他黃瓜植物(Cucumis sativusL.)的用途。根據上述應用的優選方面,除了提供或表現黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性之外,本發明的植物,或獲得的或由此產生的植物或部分,也提供黃瓜綠斑點花葉病毒(CGMMV)抗性,優選黃瓜綠斑點花葉病毒(CGMMV)和黃瓜果實斑點花葉病毒(CFMMV)抗性。實施例實施例I :賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分說明在該實施例中,由荷蘭瓦赫寧恩Keygene N. V完成,在抗性黃瓜植物(Cucumissativus L.)中利用大批量QTL分析(BulkQTL Analysis, B QA),來鑒定遺傳地連接到賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分的數量性狀基因座(Qualitative Trait Locus,QTL)。選擇用于黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的標記研發的種群。在含顯示‘極端表型’的個體的兩個庫篩選出總共96個AFLP引物組合。隨后,在有抵抗力的和敏感樣品上驗證了5個候選標記。標記鑒定和駘證獲得植物的葉子原料ー個系11366X 0K561種群提供用于檢測的種群,供方親本系11366和種群親本系的自交系。分離DNA,并生成EcoRI/Msel模板。利用引物組合E14/M59,生成植物的測試指紋。個體的BSA和駘證通過在含十個“極端抗性”エ體的庫和含十個“極端敏感性”個體的庫上篩選出總共96個引物組合來進行BQA。該篩選產生下述候選標記的鑒定 E14/M58 F 169 P2 ;和 E22/M48 F 248/246 (雙等位基因)接著驗證這些標記。基于該驗證,鑒定的候選標記被證實連接有煙草花葉病毒抗性。在種群卜.駘證候詵標記在篩選96個引物組合和接著證實標記后,可鑒定ー個推定的QTL。為了確定鑒定的QTL是否的確是分離的QTL,進行連鎖分析。對來自種群的46個額外個體篩選出標記(E14/M58 F 169P2和雙等位基因標記E22/M48 F 248/246)。生成標記數據集,并與驗證的標記數據集合井。以該分析為基礎,能判斷這4個標記的確連接到ー個QTL。用WinQTL制圖講行標記分析為了確定顯型和基因型之間的相關性,用WinQTL制圖軟件包分析標記數據集。對于單個標記分析(Single Marker Analysis, SMA),計算出LOD值為12。對于區間映射(IM),通過在顯型數據上進行1000次置換,計算95%的可信閾值,確定LOD值為0. 9。解釋差異的LOD值和解釋方差百分數,可用于計算該QTL (LOD 9 ;Exp. Var. :49. 5)。結論為了鑒定黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的QTL,進行BQA。在ー批有十個“極端抗性”個體和一批有十個“極端敏感性”個體上,篩選出總共96個引物組合。在’極端抗性’和’極端敏感性’個體、以及該種群的其它個體上,驗證其中其中一個是雙等位基因的候選標記。通過使用BQA方法鑒定了 QTL區域。基于TestPC ( 5個標記),在抗性供體親本系11366的30個自交系里,鑒定無異質。實施例2輔助有鑒定黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的抵抗性黃瓜(Cucumissativus L.)的分子標記分子分析用標準的實驗設計從敏感和抗性的黃瓜植物(Cucumis sativus L.)中分離基因組原料,敏感即顯示一個或更多病毒感染的癥狀。接下來,用合適的限制性內切酶(EcoRI/Msel)消化該基因原料,在銜接子結扎后,用引物對 5-GAC TGC GTA CCA ATTCGT-3'和 5' -GAT GAG TCC TGA GTA ACA C-3',或引物對5' -GAC TGC GTA CCA ATT CAT-3'和5-GAT GAG TCC TGAGTA ACG T_3',進行AFLP核酸擴增。所得擴增產物通過分子測定用凝膠電泳來分解。檢測個體黃瓜植物(Cucumissativus L.)基因組中AFLP標記的存在為不存在(_)或存在(+)。具體來說,當出現AFLP標記E14/M58-F-169(不包含在本發明中,引物對5' -GACTGC GTA CCA ATT CAT-3'和 5-GATGAG TCC TGA GTA ACG T-3')時,可觀察到約 169bp的帶;當出現AFLP標記E22/M48-F-248(不包含在本發明中,引物5-GAC TGC GTA CCA ATTCGT-3'和 5' -GAT GAG TCC TGAGTA ACA C-3')時,可觀察到約 248bp 的帶。AFLP 標記E14/M48-F-246(包含在本發明中,引物 5-GAC TGC GTA CCAATT CGT-3'和 5' -GAT GAGTCC TGA GTA ACA C-3/ )具有估計約246bp大小,其基因地與抗性顯型相關。下表I為總結的結果。
表I :AFLP 標記 E14/M58 F 169 ;E22/M48 F 246 3PE22/M48 F 248 與黃瓜脈黃化 病毒(CVYV)抗性表型之間的相關性
個體黃瓜植物身E14/M58- E22/M48-F E22/M48-
(Cucumis sativus L.)F-169-246F-248
TLCG04 4816 10 敏感性+-+
TLCG04 4816 18 敏感性+-+
TLCG04 4816 13 敏感性+-+
TLCG04 4816 23 敏感性+-+
TLCG04 4816 24 敏感性+-+
TLCG04 4816 31 敏感性+-+
TLCG04 4816 43 敏感性+-+
TLCG04 4816 56 敏感性+-+
TLCG04 4816 57 敏感性+-+
TLCG04 4816 61 敏感性+-+
TLCG04 4816 64 敏感性+-+
TLCG04 4816 66 敏感性+-+
T33168 4抗性_ - _+_- _
T33168 5抗性-+-
T33169 9抗性-+-
T33168 2抗性-+-
T33168 6抗性-+-
T33168 7抗性-+-
T33168 8抗性-+-
T33168 9抗性-+-
T33169 2抗性-+-
T33169 3抗性-+-
T33169 5抗性-+-
T33169 6抗性-+-
NCIMB 41635 ] 抗性-〔+ f
表I清楚地表明,在所有測試的黃瓜植物(Cucumis sativusL.)中黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的表型,被基因地連接有分子AFLP標記E22/M48-F-246的存在。因此,該標記的檢測顯示存在黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性遺傳成分或QTL。實施例3標記22/M48-F-246 (其顯示賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分的存在)另外表明存在賦予黃瓜綠斑點花葉病毒(CGMMV)抗性的遺傳成分和/或賦予黃瓜果實斑點花葉病毒(CFMMV)抗性的遺傳成分。檢測黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性植物對黃瓜綠斑點花葉病毒(CGMMV)的抗性和黃瓜果實斑點花葉病毒(CFMMV)的抗性。意外的是,在下表2所示的0K561x系11366分離的DH種群中,全部被檢測的CVYV抗性植物,出現對黃瓜脈黃化病毒(CVYV),黃瓜綠斑點花葉病毒(CGMMV)和黃瓜果實斑點花葉病毒(CFMMV)的絕對多效抗性。所有的抗性(用R表示)植物對標記E22/M48-F-246為陽性,并對標記E14/M58-F-169和E22/M48-F-248為陰 性。反之亦然,所有的敏感(用S表示)植物對標記E22/M48-F-246為陰性,并對標記E14/M58-F-169 和 E22/M48-F-248 為陽性。表20K561x系11366分離的DH種群
權利要求
1.ー種提供抗黃瓜脈黃化病毒的黃瓜植物(Cucumis sativus L.)的方法,其包括 a)選擇第一黃瓜植物(Cucumissativus L.),其中所述選擇包括通過以下確定賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分的存在以所述第一黃瓜植物(Cucumis sativusL.)的基因組為模板,在分子擴增片段長度多態性(AFLP)分析中,利用分子擴增片段長度多態性(AFLP)引物SEQ ID No :1和SEQ IDNo :2,檢測245至247堿基對核酸擴增片段,優選246堿基對核酸擴增片段; b)轉移鑒定的賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分到第二黃瓜植物(Cucumissativus L.)中,由此賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性到所述第二黃瓜植物(CucumissativusL.),其中所述轉移包括,以所述第二黃瓜植物(Cucumis sativus L.)的基因組為模板,在分子擴增片段長度多態性(AFLP)分析中,使用分子擴增片段長度多態性(AFLP)引物SEQID No :1和SEQ ID No :2,檢測245至247堿基對核酸擴增片段,優選246堿基對核酸擴增片段。
2.根據權利要求I所述的方法,其中所述方法包括步驟(c),所述步驟(c)包括暴露所述第二黃瓜植物(Cucumis sativus L.)至黃瓜脈黃化病毒(CVYV)。
3.根據權利要求I或2所述的方法,其中所述核酸擴增片段為246bp。
4.ー種SEQ ID No :1和/或SEQ ID No :2的用途,所述用途為用于證實在黃瓜植物(Cucumis sativus L.)中存在賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分的用途。
5.ー種黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性黃瓜植物(Cucumis sativus L.),其包含賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分,其中所述黃瓜植物(Cucumis sativus L.)中存在所述賦予黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性的遺傳成分的特征在于,用所述黃瓜植物(Cucumissativus L.)的基因組作為核酸擴增的模板,在分子擴增片段長度多態性分析中,利用分子擴增片段長度多態性(AFLP)引物SEQ ID No :1和SEQ ID No :2,有245至247堿基對的核酸擴增片段。
6.根據權利要求5所述的植物,其中所述核酸擴增片段為246堿基對。
7.根據權利要求5或6所述的植物,其中所述植物為保藏在NCIBM登錄號為NCIBM41635 的黃瓜植物(Cucumis sativus L.)。
8.ー種黃瓜脈黃化病毒(CVYV)抗性黃瓜植物(Cucumis sativus L.),其中所述植物為保藏在NCIBM登錄號為NCIBM41635的黃瓜植物(Cucumis sativus L.)。
9.ー種植物,植物部分,組織,細胞,和/或種子,所述植物,植物部分,組織,細胞,和/或種子衍生自根據權利要求5-8任ー權利要求所述的植物。
10.ー種根據權利要求5-9任ー權利要求所述的植物,植物部分,組織,細胞,和/或種子的用途,所述用途為對黃瓜植物(Cucumis sativus L.)提供黃瓜葉脈黃化病毒(CVYV)抗性的用途。
11.根據權利要求10的用途,其中所述抗性是黃瓜葉脈黃化病毒(CVYV)抗性和黃瓜綠斑點花葉病毒(CGMMV)抗性。
12.根據權利要求10的用途,其中所述抗性是黃瓜葉脈黃化病毒(CVYV)抗性,黃瓜綠斑點花葉病毒(CGMMV)抗性和黃瓜果實色斑花葉病毒抗性(CFMMV)。
全文摘要
本發明涉及分子標記,其遺傳地連接至黃瓜植物(Cucumis sativus L.)中的基因座,并能鑒定該基因座,該基因組賦予對煙草花葉病毒一般抗性,特別是對兩個在商業上重要的致病煙草花葉病毒(即,黃瓜綠斑點花葉病毒(CGMMV)和黃瓜果實斑點花葉病毒(CFMMV))的抗性。本發明還涉及用于向黃瓜植物(Cucumis sativus L.)、植物、植物部分和果實提供對煙草花葉病毒,尤其是對兩個商業上重要的致病煙草花葉病毒,即黃瓜綠斑點花葉病毒(CGMMV)和黃瓜果實斑點花葉病毒(CFMMV)的抗性的方法。
文檔編號A01H1/04GK102770018SQ200980160393
公開日2012年11月7日 申請日期2009年7月7日 優先權日2009年7月7日
發明者亞普·馬澤利烏, 南內·法貝爾, 布萊特·凡·坎彭, 羅納爾多·威爾特丁克 申請人:安莎種子公司