利用白蟻卵的揮發性召集信息素和蟻后信息素的驅除技術的制作方法

專利名稱：利用白蟻卵的揮發性召集信息素和蟻后信息素的驅除技術的制作方法
技術領域：
本發明提供用于驅除和防治害蟲、特別是白蟻的新手段及使用該手段的害蟲驅除和防治方法。詳細而言，本發明提供新型白蟻引誘劑、含有該引誘劑的白蟻模擬卵以及使用該白蟻引誘劑和白蟻模擬卵的白蟻驅除和防治方法。此外，本發明還提供新型白蟻生長抑制劑。需要說明的是，本申請針對2009年11月13日提出的日本專利申請第2009-259938號提出優先權要求，并通過參考將該專利申請的全部內容并入本申請中。
背景技術：
以往的害蟲驅除技術、尤其是白蟻驅除技術，基本上通過從受害的木材的外側大量投入藥劑來殺蟲，因而會導致病態建筑綜合征等健康損害和環境污染。另外，存在如下問題如果殘留一部分白蟻的集落，則會使蟲害擴大到其他場所。最嚴重的問題在于驅除需要花費的勞動成本過高。經常實施的是使用溴甲烷的熏蒸法，但溴甲烷是導致臭氧層破壞的物質，近年來限制其使用的趨勢增強。作為藥劑散布型處理方法的替代方法，有將緩效性的殺蟲有效成分混入誘餌中并使白蟻攝食從而驅除白蟻的誘餌法(例如，參考非專利文獻I)。作為與白蟻同樣組織群居生活的螞蟻的驅除方法，下述方法是有效的將螞蟻的喜好物混入毒物中并作為誘餌而提供，使螞蟻將誘餌帶回巢中從而捕殺整個種群。但是，由于白蟻會攝食用于筑巢的木材本身，因此，利用毒餌劑將藥劑從巢的外部運送到巢的內部的誘餌法未必一定有效。特別是對于散白蟻屬的白蟻而言，難以利用誘餌法根除其巢(參考非專利文獻2)。作為比誘餌法更有效地使活性成分被害蟲攝取的方法，開發了 “通過運送模擬卵驅除害蟲的方法”，其利用了作為害蟲的基本群居行為的卵運送本能(專利文獻I)。白蟻的卵識別信息素的主要成分是稱為溶菌酶的抗菌蛋白(專利文獻2)和￠-葡萄糖苷酶(專利文獻3)，已知它們單獨具有卵識別信息素活性。專利文獻I :日本專利第4151812號 專利文獻2 日本專利第4126379號專利文獻3 日本專利第4258785號非專利文獻I 口 i防治對策”(白蟻及防治對策)、社團法人日本白蟻對策協會、2000年、p. 219非專利文獻2 壬二夕'J >夕'' 7亍一 '> 3 >奩用P亡日本產地下'> 口 7丨J Q活性評價卜法C 3防治”(使用監控站的日本地下白蟻的活性評價及利用誘餌法的防治)、生存圈(二杉汁3昆蟲生態的* 二夕 ') >夕''技術^新展開(生活區中昆蟲生態的監控技術的新發展)、2006年、p. 48
發明內容
已經明確白蟻的卵識別信息素的主要成分是稱為溶菌酶的抗菌蛋白和作為白蟻的消化酶而已知的￠-葡萄糖苷酶，現有技術中，在培養皿內的ARENA檢驗(7 U —f f ^卜)即以白蟻接觸到模擬卵為前提的實驗中，利用人工信息素得到了可與由卵提取出的信息素相匹敵的運送率。即，卵識別信息素已經能夠實現足夠的活性。但是，在使從巢中出來的偵察工蟻將設置在白蟻巢外部的模擬卵帶回巢中的試驗中，模擬卵的運送率與真卵相比平均運送率低，并且，運送率存在波動。在使白蟻從設置在巢外的導入站運送模擬卵型驅除劑的情況下，需要用于提高運送率的追加技術。本發明人等鑒于上述問題進行了深入研究。為了改善將模擬卵從巢外運送到巢內的運送率，對出來到巢外的白蟻搜尋卵的行為進行了分析，結果發現，通過從卵釋放出的召集信息素(揮發性的召集物質)，工蟻能夠在遠離卵的場所感知到卵的存在。從該卵釋放出的揮發性信息素由存活卵大量釋放，而在因冷凍保存而死亡的卵中活性較低。因此可知，該信息素是為了使卵吸引工蟻而主動釋放的召集信息素。白蟻的卵識別信息素以不揮發性物質的溶菌酶和P-葡萄糖苷酶作為成分。這些信息素是用于在白蟻的感覺器與模擬卵接觸時識別出該物體為卵的物質，并不具有將位于遠處的工蟻弓I向卵所在的方向的作用。另外，即使在存在卵的召集信息素的情況下，不存在卵識別信息素的模擬卵也不會作為卵被運送。即可知，分別需要使工蟻向卵的位置定位的揮發性的召集信息素和接觸后用于識別卵的卵識別信息素。為了確定由該卵發出的對位于遠處的工蟻進行召集的化學物質，利用頂空GC-MS進行了揮發成分的分析。利用頂空GC-MS對由存活卵產生的揮發物質進行了分析，結果，得到清楚的兩個譜圖，進行譜庫檢索后，將第一峰評價為丁酸的正丁酯(丁酸丁酯)或丁酸的異丁酯(丁酸2-丁酯)。并且，將第二峰評價為2-甲基-I-丁醇。另外，與卵同樣地對蟻后釋放出的揮發性物質進行了分析，結果，得到與卵完全相同的兩個譜圖，進行譜庫檢索后，將第一峰評價為丁酸的正丁酯(丁酸丁酯)或丁酸的異丁酯(丁酸2-丁酯)。并且，將第二峰評價為2-甲基-I-丁醇。繼而還可知，丁醇衍生物具有召集工蟻的活性。此次還首次發現了在由白蟻卵和蟻后釋放出的揮發性成分的存在下，新蟻后的分化受到抑制，由此可知，由白蟻卵和蟻后釋放出的揮發性成分會抑制白蟻的生長。本發明基于上述上述發現而完成。本發明提供以下技術方案(I) 一種白蟻引誘劑，其含有選自由丁醇及其酯、酮、醚、羧酸及其鹽組成的組中的一種或多種有效成分。(2) 一種白蟻引誘劑，其含有選自由I-丁醇、2-丁醇、I-丁醇的丁酸酯、異丁醇的丁酸酯和2-甲基-I- 丁醇組成的組中的一種或多種有效成分。(3) 一種白蟻引誘劑，其含有選自由I-丁醇、2-丁醇或2-甲基-I-丁醇組成的組中的一種或多種有效成分。(4) 一種白蟻模擬卵，其在模擬了白蟻卵的基材中含有卵識別信息素和⑴ (3)中任一項所述的白蟻引誘劑。(5)如⑷所述的白蟻模擬卵，其中，卵識別信息素為葡萄糖苷酶和/或溶菌酶。(6) 一種白蟻模擬卵，其在模擬了白蟻卵的基材中含有作為卵識別信息素的、￠-葡萄糖苷酶、和(I) (3)中任一項所述的白蟻引誘劑。(7)如⑷ (6)中任一項所述的模擬卵，其還含有選自由殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分或昆蟲病原菌組成的組中的一種或多種成分。(8) 一種白蟻的驅除方法，其特征在于，向白蟻提供(7)所述的模擬卵，利用卵運送行為使白蟻將模擬卵運送到巢內。(9) 一種白蟻的驅除方法，其特征在于，在模擬卵的周圍設置⑴ (3)中任一項所述的白蟻引誘劑，利用卵運送行為使白蟻將模擬卵運送到巢內，所述模擬卵在模擬了白蟻卵的基材中含有卵識別信息素以及選自由殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分或昆蟲病原菌組成的組中的一種或多種成分。
(10) 一種白蟻的驅除方法，其特征在于，使用⑴ (3)中任一項所述的白蟻引誘劑引誘白蟻，然后，驅除被引誘的白蟻。(11) 一種白蟻行為擾亂方法，其特征在于，向白蟻提供⑴ (3)中任一項所述的白蟻引誘劑來擾亂白蟻的行為。(12) 一種白蟻生長抑制劑，其含有選自由丁醇及其酯、酮、醚、羧酸及其鹽組成的組中的一種或多種有效成分。(13) 一種白蟻生長抑制劑，其含有選自由I-丁醇、2-丁醇、I-丁醇的丁酸酯、異丁醇的丁酸酯和2-甲基-I- 丁醇組成的組中的一種或多種有效成分。(14) 一種白蟻生長抑制劑，其含有選自由丁酸丁酯和2-甲基-I-丁醇組成的組中的一種或多種有效成分。發明效果利用本發明的引誘劑，能夠有效地引誘白蟻。通過在白蟻模擬卵中含有本發明的引誘劑，能夠更有效地飛躍性地提高模擬卵的運送活性，從而能夠大幅提高通過模擬卵運送所致的白蟻的驅除或防治效率。即，根據本發明，使用卵的揮發性召集信息素作為引誘齊U，成功地對位于遠離卵的場所的工蟻進行了召集并誘發了強力的運送行為。由此，飛躍性地提高了模擬卵驅除劑的運送活性，從而能夠建立用于在野外實際將模擬卵從白蟻的巢外大量進行運送的技術。另外，卵的揮發性召集信息素包含與蟻后信息素相同的成分，利用該信息素能夠抑制新蟻后的分化，從而能夠防止因驅除后的殘留個體所致的集落的再生。


圖I的右側的照片是用于測定卵的揮發性召集信息素的活性的實驗裝置，左圖是該裝置的說明。將100個卵以由不銹鋼網包圍的狀態放置，使白蟻無法接觸到內部的卵。在其周圍設置有模擬卵。對照區的網內沒有卵。圖2是表示實驗開始起24小時以內被運送到巢內的模擬卵的比例。:與對照區相比在0.1%的顯著性水平下存在顯著差異(雙側T檢驗)。圖中的誤差棒表示標準誤。圖3是利用GC-MS分析得到的白蟻卵的揮發性召集信息素的色譜數據。橫軸為保持時間(分鐘)，縱軸為峰的相對強度。第一峰可以評價為正丁酯(丁酸丁酯)或丁酸的異丁酯(丁酸2-丁酯)。第二峰可以評價為2-甲基-I-丁醇。圖4是由白蟻卵的GC-MS分析得到的質譜推測出的第一峰的候選物質的譜庫檢索結果。橫軸為m/z，縱軸為峰的相對強度。
圖5是由白蟻卵的GC-MS分析得到的質譜推測出的第二峰的候選物質的譜庫檢索結果。橫軸為m/z，縱軸為峰的相對強度。圖6是表示實驗開始起24小時以內被運送到巢內的模擬卵的比例的圖。誤差棒表示標準誤。不同的字母間存在顯著差異(Tukey-Kramer HSD檢驗)。通過添加丁酸丁酯，與未添加時相比能夠提高模擬卵的運送活性，但未觀察到統計上的顯著差異。圖7是表示實驗開始起24小時以內被運送到巢內的模擬卵的比例的圖。誤差棒表示標準誤。不同的字母間存在顯著差異(Tukey-Kramer HSD檢驗)。通過添加1_ 丁醇，與未添加時相比能夠顯著提高模擬卵的運送活性。圖8是表示實驗開始起24小時以內被運送到巢內的模擬卵的比例的圖。誤差棒表示標準誤。不同的字母間存在顯著差異(Tukey-Kramer HSD檢驗)。通過添加丁酸2-丁酯，與未添加時相比能夠提高模擬卵的運送活性，但未觀察到統計上的顯著差異。圖9是表示實驗開始起24小時以內被運送到巢內的模擬卵的比例的圖。誤差棒 表示標準誤。不同的字母間存在顯著差異(Tukey-Kramer HSD檢驗)。通過添加2-丁醇，與未添加時相比能夠顯著提高模擬卵的運送活性。圖10是表示實驗開始起24小時以內被運送到巢內的模擬卵的比例的圖。誤差棒表示標準誤。不同的字母間存在顯著差異(Tukey-Kramer HSD檢驗)。通過添加2-甲基-I- 丁醇，與未添加時相比能夠顯著提高模擬卵的運送活性。圖11是表示實驗開始起24小時以內被運送到巢內的模擬卵的比例的圖。誤差棒表示標準誤。乙酸正丁酯不具有提高模擬卵的運送活性的效果。圖12是由GC-MS分析得到的蟻后的揮發性信息素的色譜數據。橫軸為保持時間(分鐘)，縱軸為峰的相對強度。第一峰可以評價為正丁酯(丁酸丁酯)或丁酸的異丁酯(丁酸2- 丁酯)。第二峰可以評價為2-甲基-I- 丁醇。圖13的右側的照片是用于測定蟻后的揮發性信息素的新蟻后分化抑制活性的實驗裝置，左側的圖是該裝置的說明。將7個裝有100個散白蟻的工蟻個體的小平皿放入大平皿中，在大平皿的中央設置含有揮發性信息素的直徑7_的素蛋餅。小平皿蓋上有孔，由素蛋餅揮發出的信息素會進入小平皿的內部。將以相同的頻率提供等量的蒸餾水或乙酸丁酯來代替信息素成分的實驗區作為對照區。圖14是表示實驗開始起25日以內在各小平皿內由工蟻分化成新蟻后的個體數的圖。誤差棒表示標準誤。不同的字母間存在顯著差異(Tukey-Kramer HSD檢驗)。在供給作為蟻后信息素的丁酸丁酯和2-甲基-I-丁醇的處理區中，與對照區相比能夠顯著地抑制由工蟻向新蟻后的分化。
具體實施例方式以下，列舉白蟻作為害蟲的例子來進行說明，但本發明對于識別丁醇衍生物的昆蟲、特別是害蟲均可使用。本發明的引誘劑和生長抑制劑對白蟻最有效。能夠應用本發明的白蟻可以是任何種類的白蟻，不僅是日本的白蟻，全世界的白蟻均可作為對象。作為利用本發明進行驅除的典型的白蟻，可以列舉散白蟻屬、家白蟻屬等白蟻，但并不限定于這些。需要說明的是，本說明書中，所說的害蟲的驅除也包括防治。本說明書中，害蟲是指對人類或家畜、農產品、財產等帶來有害作用的昆蟲。
作為迄今已知的白蟻的卵識別信息素的成分的溶菌酶和P -葡萄糖苷酶，是不揮
發的物質，雖然白蟻與模擬卵接觸后能夠識別這些物質，但并非用于從遠隔的場所感知到
卵存在的場所的物質。因此，本發明人反復進行了研究，獲知工蟻識別卵并進行運送為止
的過程其中存在兩個階段的識別，首先，通過卵的揮發性召集信息素，使工蟻感知位于遠隔
場所的卵并進行定位。接著，與卵接觸，通過卵表 面的卵識別信息素對卵進行識別，并進行 本發明人等此次鑒定出了白蟻卵的揮發性召集信息素。即，發現使用丁醇或其衍生物作為白蟻卵的揮發性召集信息素，能夠引誘白蟻。于是，通過使用上述物質，本發明人等成功地召集了位于遠離模擬卵的場所的工蟻并使其進行運送，并且成功地大幅提高了運送率。因此，本發明的一個方式中，提供一種白蟻引誘劑，其含有選自由丁醇及其衍生物組成的組中的一種或多種有效成分。此處，丁醇包括I-丁醇、2-丁醇、叔丁醇、異丁醇。作為能夠用作本發明的白蟻引誘劑的有效成分的丁醇的衍生物，可以列舉酯、酮、醚或者羧酸、或其鹽等。因此，本發明的另一方式中，提供一種白蟻引誘劑，其含有選自由丁醇及其酯、酮、醚、羧酸及其鹽組成的組中的一種或多種有效成分。上述衍生物的碳上的I個或多個氫可以被鹵素、羥基、巰基、氰基、氨基、硝基、羧基、碳原子數I 6個的烷基、-0-碳原子數I 6個的烷基等取代基取代。作為更優選的本發明的引誘劑的有效成分，可以列舉丁醇、或丁醇與Cl C6羧酸的酯。Cl C6羧酸是指碳原子數I 6個的烷基上結合有羧基而成的酸，包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸以及它們的幾何異構體。上述酯中，優選丁醇與丁酸的酯。本發明的引誘劑的更優選的有效成分為I-丁醇、2-丁醇、異丁醇、I-丁醇的丁酸酯、2-丁醇的丁酸酯和異丁醇的丁酸酯。因此，本發明提供一種白蟻引誘劑，其含有選自由I-丁醇、2-丁醇、異丁醇、I-丁醇的丁酸酯、2-丁醇的丁酸酯和異丁醇的丁酸酯組成的組中的一種或多種有效成分。上述有效成分中，特別優選I-丁醇、2-丁醇、I-丁醇的丁酸酯和異丁醇的丁酸酯。因此，本發明提供一種白蟻引誘劑，其含有選自由I-丁醇、2-丁醇、I-丁醇的丁酸酯和異丁醇的丁酸酯組成的組中的一種或多種有效成分。本發明的引誘劑的最優選的有效成分為
I-丁醇和2-丁醇。因此，本發明提供一種白蟻引誘劑，其含有選自由I-丁醇和2-丁醇組成的組中的一種或多種有效成分。本說明書中，所說的“白蟻引誘劑”或“引誘劑”含有一種或多種上述物質作為有效成分。本發明的引誘劑可以不僅僅包含上述物質，除了上述物質以外，還可以含有載體、賦形劑、溶劑、著色料、香料等。本發明的白蟻引誘劑中能夠使用的載體、賦形劑、溶劑、著色料、香料等只要不抑制有效成分的活性且不妨礙有效成分的揮發即可，沒有特別限定。另夕卜，本發明的引誘劑的劑型也沒有特別限定，可以根據用途、使用方法而適當選擇。例如，如下所述，本發明的引誘劑可以包含在模擬卵中，也可以為液劑、噴霧、膠囊、片劑、顆粒、粉末、糊劑等形態。通過在白蟻的模擬卵中含有本發明的引誘劑，能夠飛躍性地提高模擬卵的運送活性，從而能夠大幅提高利用模擬卵的運送來驅除或防治白蟻的效率。例如，通過在日本專利第4126379號或日本專利第4258785號中記載的、含有溶菌酶、^ -葡萄糖苷酶等白蟻的卵識別物質和殺蟲活性成分等的模擬卵中含有本發明的引誘劑來使用，能夠飛躍性地提高白蟻的驅除和防治效率。因此，本發明的又一方式中，提供一種白蟻模擬卵，其在模擬了白蟻卵的基材中含有卵識別信息素和本發明的白蟻引誘劑。優選的白蟻卵識別信息素為溶菌酶或￠-葡萄糖苷酶，溶菌酶和￠-葡萄糖苷酶可以單獨使用，也可以并用。本發明中使用的模擬卵必須是形狀、尺寸和性質與要驅除的害蟲的卵的形狀、尺寸和性質類似的模擬卵。在白蟻的情況下，模擬卵的形態可以為長卵形或球形。在長卵形的白蟻模擬卵的情況下，優選使其短徑等同 或稍大于要驅除的白蟻的卵的短徑。例如，具有約0. 25 約0. 45毫米的短徑的白蟻卵的長卵形模擬卵的短徑可以為約0. 25 約0. 6毫米，優選為約0. 4 約0. 55毫米，可以更優選為約0. 45毫米。另外，在球形的白蟻模擬卵的情況下，優選其直徑等同或稍大于要驅除的白蟻的卵的短徑。例如，具有約0. 25 約0. 45毫米的短徑的白蟻卵的球形模擬卵的直徑可以為約0. 25 約0. 6毫米，優選為約0. 4 約
0.6毫米，可以更優選為約0. 45 約0. 55毫米。從形成的容易度的觀點出發，優選球形的模擬卵。作為本發明的模擬卵的基材，只要能夠制成與害蟲的本來的卵的形狀和性質類似的模擬卵則可以是任何一種材料。本發明的模擬卵的制作中優選的基材材料，可以列舉例如聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚酯、聚氯乙烯、聚碳酸酯等熱塑性樹脂或脲樹脂、環氧樹月旨、酚醛樹脂、聚氨酯等熱固性樹脂、硅膠、沸石等多孔材料、陶瓷、玻璃等。本發明的模擬卵，不僅需要上述的形狀和尺寸以及重量、硬度等物理性質與害蟲的本來的卵相同或類似，而且需要化學性質、特別是卵識別信息素也與害蟲的本來的卵相同或類似。因此，在模擬卵的基材中含有溶菌酶和/或￠-葡萄糖苷酶作為卵識別信息素的情況下，需要使這些物質出現在基材表面上。本發明的模擬卵中能夠使用的溶菌酶，可以來源于任何生物種類，也可以利用基因重組法來制造。作為優選的溶菌酶，可以列舉雞蛋清來源的溶菌酶。雞蛋清來源的溶菌酶可以大量且廉價地獲得。本發明中使用的溶菌酶可以未進行純化，也可以進行過純化。可以使用溶菌酶鹽作為卵識別信息素。溶菌酶鹽可以是與有機酸的鹽、與無機酸的鹽、與有機堿的鹽、與無機堿的鹽等與能夠形成鹽的所有物質的鹽。可以使用溶菌酶的生物學片段作為卵識別信息素。溶菌酶的生物學片段是指具有溶菌酶的部分氨基酸序列的多肽或肽，其具有與溶菌酶同樣的卵識別活性。由于該片段為短鏈，因此，適合利用基因重組法進行大量生產。可以使用溶菌酶相關肽作為卵識別信息素。溶菌酶相關肽是指具有與溶菌酶同樣的卵識別活性的蛋白、多肽或肽，其不同于溶菌酶和溶菌酶的生物學片段。溶菌酶相關肽可以是天然來源，也可以是合成品。可以制作例如具有白蟻更喜好的氨基酸序列的溶菌酶、溶菌酶的生物學片段或溶菌酶相關肽來使用。另外，可以制作例如具有對特定種類白蟻的特異性高的氨基酸序列的溶菌酶、溶菌酶的生物學片段或溶菌酶相關肽來使用。溶菌酶的生物學片段或溶菌酶相關肽可以為鹽的形式。本發明的模擬卵中能夠使用的P -葡萄糖苷酶可以來源于任何生物種類，也可以利用基因重組法來制造。作為優選的￠-葡萄糖苷酶，可以列舉雞蛋清來源的￠-葡萄糖苷酶。雞蛋清來源的￠-葡萄糖苷酶可以大量且廉價地獲得。本發明中使用的￠-葡萄糖苷酶可以未進行純化，也可以進行過純化。可以使用￠-葡萄糖苷酶鹽作為卵識別信息素。^ -葡萄糖苷酶鹽可以是與有機酸的鹽、與無機酸的鹽、與有機堿的鹽、與無機堿的鹽等與能夠形成鹽的所有物質的鹽。可以使用￠-葡萄糖苷酶的生物學片段作為卵識別信息素。^-葡萄糖苷酶的生物學片段是指具有0-葡萄糖苷酶的部分氨基酸序列的多肽或肽，其具有與￠-葡萄糖苷酶同樣的卵識別活性。由于該片段為短鏈，因此，適合利用基因重組法進行大量生產。可以使用￠-葡萄糖苷酶相關肽作為卵識別信息素。￠-葡萄糖苷酶相關肽是指具有與￠-葡萄糖苷酶同樣的卵識別活性的蛋白、多肽或肽，其不同于￠-葡萄糖苷酶和￠-葡萄糖苷酶的生物學片段。￠-葡萄糖苷酶相關肽可以是天然來源，也可以是合成品。可以制作例如具有白蟻更喜好的氨基酸序列的￠-葡萄糖苷酶、￠-葡萄糖苷酶的生物學片段或￠-葡萄糖苷酶相關肽來使用。另外，可以制作例如具有對特定種類白蟻的特異性高的氨基酸序列的￠-葡萄糖苷酶、￠-葡萄糖苷酶的生物學片段或￠-葡萄糖苷酶相關肽來使用。￠-葡萄糖苷酶的生物學片段或￠-葡萄糖苷酶相關肽可以為鹽的形式。本說明書中，有時將溶菌酶、其鹽、其生物學片段或相關肽統稱為“溶菌酶”。
本說明書中，有時將￠-葡萄糖苷酶、其鹽、其生物學片段或￠-葡萄糖苷酶相關肽統稱為“ P -葡萄糖苷酶”。溶菌酶或P -葡萄糖苷酶等卵識別信息素在本發明的模擬卵的基材上的應用量，可以由本領域技術人員根據它們的種類(來源生物)、物理化學性質等、害蟲的種類、活性物質的種類和量、期望的效果的種類和程度等各種因素而容易地確定。通過在前面說明過的模擬卵中含有殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分或昆蟲病原菌等活性成分，能夠極其高效地驅除和防治害蟲。這些活性成分是本領域技術人員公知的。本發明的模擬卵中能夠使用的活性物質，只要能夠實現害蟲的驅除或防治即可。例如，活性物質可以擾亂害蟲的行為以致破壞其集落。作為適合害蟲的驅除或防治的活性物質，可以列舉殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分、昆蟲病原菌等。本發明的模擬卵和方法中能夠使用的活性物質的種類和量，可以根據活性物質的種類和害蟲的種類、以及期望的活性(要給害蟲造成的損傷)的種類和程度等各種因素來進行選擇。通常，以對期望的害蟲充分發揮期望的效果的方式來選擇活性物質的種類和量，但也要考慮以不損害害蟲的模擬卵運送率的方式、并且以不對使用本發明的模擬卵和驅除方法的人類和周圍的家畜以及益蟲帶來不良影響的方式進行選擇。本發明的模擬卵和驅除方法中使用的活性成分可以是一種，也可以是兩種以上。例如，可以使用擬除蟲菊酯化合物、有機磷化合物、氨基甲酸酯化合物、N-芳基二唑化合物、腙化合物、磺酰胺化合物、天然殺蟲成分等殺蟲活性成分。此外，可以使用殼多糖合成抑制齊U、保幼激素樣活性化合物、蛻皮激素樣活性化合物等昆蟲生長調控劑作為活性成分。本發明中能夠使用的活性成分當然不限定于上述化合物。模擬卵中的活性成分優選為緩效性活性成分。本發明中使用的活性成分，優選在模擬卵的運送時或剛被害蟲攝取后不發揮效果、或者僅發揮不影響模擬卵運送和交哺等行為的程度的效果，而在模擬卵被運送到巢內并在多個個體間進行交哺后才發揮效果。通過利用這樣的緩效性的活性成分，能夠高效地驅除靶集落中的多個個體，從而只需較少的活性成分的使用量即可。而且，對其他生態系統的影響也少。作為本發明的模擬卵中能夠使用的緩效性活性成分，可以列舉伏蟻腙等緩效性殺蟲成分以及緩效性孵化抑制成分、緩效性繁殖抑制成分、緩效性生育抑制成分等，但并不限定于這些。作為使基材中含有溶菌酶、^ -葡萄糖苷酶等卵識別信息素的方法，有各種本領域技術人員公知的方法。可以在基材的制造時混入上述物質，也可以在制成基材后使基材中含有上述物質。例如，可以在基材制造時混合或捏合上述物質，也可以在制成的基材上布撒、浸潰、涂布或噴霧上述物質。另外，在固體支撐體上固定蛋白、多肽或肽的方法是公知的，因此可以應用這些方法。該固定方法例如有吸附法、共價鍵法、離子鍵法、包埋法等。此夕卜，在基材中含有溶菌酶、￠-葡萄糖苷酶等卵識別信息素的方式也是公知的，作為優選的具體例，可以列舉表面涂布型、基材添加型、膠囊溶解型等。表面涂布型的例子是在基材表面上涂布活性成分,并在其上涂布溶菌酶、& -葡萄糖苷酶等。基材添加型的例子是在混合有活性成分的基材表面涂布溶菌酶、3 -葡萄糖苷酶等。膠囊溶解型的例子是將膜狀的基材制成膠囊狀，在其內部封入殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分、昆蟲病原菌等活性成分，并在基材表面涂布溶菌酶、3 -葡萄糖苷酶等。用于使模擬卵中含有殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分、昆蟲病原菌等活性成分的手段和方法，與前面說明過的使基材中含有溶菌酶、P -葡萄糖苷酶等卵識別信息素的手段和方法基本相同，本領域技術人員可以適當選擇該手段和方法來使用。
通過使前面說明過的模擬卵中含有本發明的引誘劑，能夠促進白蟻的卵運送行為和卵保護行為，從而能夠將模擬卵運送到巢內的卵塊中。不僅能夠使其將人工模擬卵運送到巢內的育室中，而且能夠誘發對表面進行舔舐等照料行為。優選本發明的引誘劑的有效成分為丁醇衍生物且具有揮發性。由于具有揮發性，因此能夠高效地使廣范圍內存在的白蟻朝向卵的場所進行定位。在模擬卵中含有本發明的引誘劑的手段和方法也同樣可以由本領域技術人員適當選擇來使用。但是，不優選妨礙本發明的引誘劑的有效成分的揮發的手段和方法、抑制溶菌酶或P -葡萄糖苷酶等卵識別信息素的作用的手段和方法、以及妨礙殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分、昆蟲病原菌等活性成分的作用的手段和方法。作為使模擬卵中含有本發明的引誘劑的具體手段和方法的例子，可以列舉在模擬卵表面布撒、浸潰、涂布或噴霧本發明的引誘劑或者將模擬卵浸潰到本發明的引誘劑的溶液中等手段和方法。也可以不在基材表面使用本發明的引誘劑，而在基材中使用，由此，使引誘劑的有效成分緩慢地釋放，從而延長其釋放時間。例如，可以在基材的制造時混入上述物質，也可以在制成基材后使基材中含有本發明的引誘劑。例如，可以在基材制造時混合、捏合或浸滲本發明的引誘劑。這樣，本發明的又一方式中，提供一種白蟻的驅除方法，其中，向白蟻提供含有卵識別信息素、上述活性成分和本發明的引誘劑的模擬卵，利用卵運送行為使白蟻將模擬卵運送到巢內。根據本發明的方法，白蟻的驅除效果得到飛躍性的提高。在另一實施方式中，通過在模擬卵的周圍設置本發明的引誘劑，也能夠提高模擬卵的運送活性。因此，本發明的另一方式中，提供一種白蟻的驅除方法，其特征在于，在模擬卵的周圍設置本發明的引誘劑，利用卵運送行為使白蟻將模擬卵運送到巢內，所述模擬卵在模擬了白蟻卵的基材中含有卵識別信息素以及選自由殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分或昆蟲病原菌組成的組中的一種或多種成分。本發明的引誘劑，除了可以用于利用模擬卵實施的驅除技術以外，其本身也可以作為白蟻的引誘劑使用。可以對由本發明的引誘劑引誘來的白蟻進行集中捕獲或者用殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分或昆蟲病原菌等進行處理來驅除白蟻。另外，本發明的引誘劑會擾亂白蟻的群居行為，因此，通過向白蟻提供該引誘劑本身，能夠作為行為擾亂劑來使用。如上所述，此次還首次發現了在由白蟻卵和蟻后釋放出的揮發性成分的存在下，新蟻后的分化受到抑制，由此可知，由白蟻卵和蟻后釋放出的揮發性成分會抑制白蟻的生長。這些成分與上述引誘成分相同。因此，本發明的又一方式中，提供一種白蟻生長抑制劑，其含有由白蟻卵和蟻后釋放出的揮發性成分作為有效成分。作為本發明的白蟻生長抑制劑的有效成分，可以列舉選自由丁醇及其酯、酮、醚、羧酸及其鹽組成的組中的一種或多種成分，優選為選自由I- 丁醇、2- 丁醇、I- 丁醇的丁酸酯、異丁醇的丁酸酯和2-甲基-I- 丁醇組成的組中的一種或多種成分，更優選為選自由丁酸丁酯和2-甲基-I-丁醇組成的組中的一種或多種成分。以下示出實施例具體且詳細地說明本發明，但實施例只不過是對本發明進行例示說明，實施例并不用于限定本發明。實施例I實施例I :模擬卵的制備和卵召集信息素活性的確認實驗中使用的模擬卵如下制作。將杏仁來源的￠-葡萄糖苷酶(產品編號G0395-5KU,批號047K4037，SIGMA-ALDRICH) I. Omg、和使用透析膜 SnakeSkin(7000MWC0，產品編號68700, PIERCE)脫鹽后的雞蛋清溶菌酶(產品編號L7651_10G，批號056K16901, SIGMA-ALDRICH) I. Omg溶解在10 y L的50%甘油水溶液中，制成人工卵識別信息素溶液。將2. 0 ii L人工卵識別信息素溶液添加到100個直徑0. 5mm的玻璃珠中并充分混合，在玻璃珠表面上包覆溶液。在實驗之前，為了使白蟻的巢固定在平皿內，進行如下的準備。如圖I所示，在直徑90mm的平皿內設置將赤松褐色枯朽材料粉末和纖維素粉末壓縮成型而成的直徑30mm、厚度7mm的白蟻培養基，向其中放入200個工蟻個體并靜置一周，在培養基內形成巢。如圖I所示，在平皿內的白蟻巢的相反側設置直徑Iem的不銹鋼金屬絲網的圓筒，向其中放入100個白蟻卵。在圓筒上部蓋上塑料制的蓋以使工蟻無法侵入絲網圓筒的內部。在金屬絲網圓筒的周緣鋪設寬度裁切為5_的100%木漿的無紡布，并用蒸餾水將其適度濕潤。但是，在金屬絲網的周緣部鋪設的濕潤的無紡布，不與金屬絲網內的卵接觸，卵表面的水溶性成分不會漏出到金屬絲網外。另外，白蟻無法從金屬絲網的外側與卵接觸。在該無紡布上，將20個按照上述步驟得到的模擬卵放置在金屬絲網的周緣部，在25°C下靜置，考察實驗開始起24小時后模擬卵向巢內的運送率。作為對照區，設置在金屬絲網圓筒中未放置卵的處理區。對照區中，除了未放置白蟻卵以外，進行均與存在卵的處理區相同的處理。對各處理區重復進行5次實驗。對運送率進行反正弦平方根轉換，并通過雙側T檢驗進行與對照區的統計比較。包覆有各試驗樣品的模擬卵在24小時后向卵塊中的運送率示于圖2中。通過使金屬絲網內存在卵，可極強地引誘偵察工蟻，并且，使工蟻的卵運送行為活化，從而使在金屬絲網的周緣部配置的模擬卵的運送率顯著提高(T = 3. 95、P < 0.01、雙側T檢驗)。、
實施例2實施例2 :卵的揮發性召集信息素的GC-MS分析取0.47g散白蟻卵至頂空管中并進行稱量。本分析中使用日本電子制造的GC-MS裝置JMS-700(加速電壓5kV、質量測定范圍m/zl0 300)。電離電壓設定為70eV，電離電流設定為100 A，電離室溫度設定為220°C。在如下的GC條件下進行色譜柱ZB-160m*0. 32mm*3 u m、進樣口模式分流(1/15)、不分流模式、He流量1. 5ml/分鐘、進樣口溫度:150°C、恒溫箱溫度40°C (5分鐘)_10°C /分鐘-250°C、進樣量:2ml。首先，以外周大氣作為空白試樣進行測定，然后，取Iml儲留在裝有0.47g卵的頂空管的空間部的氣體，在分流的條件下進行分析。將色譜進行比較時，可以確認存在兩種成分。由于該譜圖的s/n差，因此在無分流的條件下進行測定，結果得到清楚的譜圖。進行譜庫檢索的結果是，第一峰可以評價為丁酸的正丁酯(丁酸丁酯)或丁酸的異丁酯(丁酸
2-丁酯)。另外，第二峰可以評價為2-甲基-I-丁醇。為了再次確認而對0.64g試樣進行 了測定，結果得到同樣的譜圖。實施例3實施例3 :卵召集信息素的樣品試驗將2. Omg蛋清溶菌酶和I. Omg ^ -葡萄糖苷酶溶解于50%甘油水溶液中(蛋清溶菌酶與3-葡萄糖苷酶的混合物)。向該基準信息素溶液中添加下述各揮發性成分樣品的10%水溶液，對增強模擬卵的運送活性的效果進行試驗。添加的樣品為丁酸丁酯、I- 丁醇、丁酸2- 丁酯、2- 丁醇、2-甲基-I- 丁醇、乙酸正丁酯。由GC-MS分析顯示的揮發性召集信息素的成分為丁酸的酯，但通常在水分的存在下會水解而形成丁酸和醇(I- 丁醇或2- 丁醇)。因此，除了酯以外，對I-丁醇和2-丁醇也進行了試驗。但是，預實驗的結果是，丁酸不具有提高運送活性的效果。向100個直徑0.5mm的玻璃珠中等量地添加2. Oii L上述基準信息素溶液和
2.Oii L各試驗樣品溶液并充分混合，在玻璃珠表面包覆試驗樣品。將僅用50%甘油水溶液包覆的玻璃珠作為對照區。在直徑30mm的平皿上隨機地放置10個白蟻卵和20個按照上述步驟得到的模擬卵，向其中放入10個散白蟻的工蟻個體并在25°C的恒溫室內靜置，考察實驗開始起24小時后模擬卵向卵塊中的運送率(對各試驗樣品按照相同的步驟進行實驗)。對各處理區重復進行3次實驗。對運送率進行反正弦平方根轉換,通過方差分析和Tukey-Kramer HSD檢驗進行統計比較。工蟻將散在于平皿上的卵集中以形成卵塊，并顯示出保護行為。包覆有各試驗樣品的模擬卵在24小時后向卵塊中的運送率示于圖6至圖11中。通過分別添加I- 丁醇、2- 丁醇、2-甲基-I- 丁醇，卵識別活性顯著增強，與24小時后的僅添加有溶菌酶和3 -葡萄糖苷酶的處理區相比，添加有上述揮發性成分的處理區的卵識別活性顯著提高(參考圖7、圖9和圖10 :P < 0. 05、Tukey-Kramer HSD檢驗)。丁酸丁酯和丁酸2- 丁酯雖然在統計上沒有顯著差異，但觀察到使模擬卵的運送活性增強的傾向(圖6和圖8)。另一方面，乙酸正丁酯沒有使模擬卵的運送活性增強的效果(圖11)。實施例4實施例4 :蟻后的揮發性信息素的GC-MS分析取0.7克(相當于100只)散白蟻的蟻后至頂空管中并進行稱量。本分析與實施例2同樣地進行。首先，以外周大氣作為空白試樣進行測定，然后，取Iml儲留在裝有蟻后的頂空管的空間部的氣體，在無分流的條件下進行分析。將色譜進行比較時，可以確認存在兩種成分，得到清楚的譜圖。進行譜庫檢索的結果是，第一峰可以評價為丁酸的正丁酯(丁酸丁酯)或丁酸的異丁酯(丁酸2-丁酯)。另外，第二峰可以評價為2-甲基-I-丁醇。上述成分與實施例2的卵的揮發性召集信息素的成分完全一致(圖12)。實施例5實施例5 :蟻后的揮發性信息素的樣品的新蟻后分化抑制效果試驗在直徑30mm的塑料小平皿的底部鋪設100%木漿的無紡布，用蒸餾水適度濕潤，并放入100個散白蟻的工蟻個體。將7個各裝有100個工蟻個體的小平皿放入直徑14cm的大平皿中，在大平皿的中央設置含有揮發性信息素的直徑7_的素蛋餅。小平皿的蓋上開有直徑Imm的孔，以使由素蛋餅揮發出的信息素進入內部(圖13)。每天向素蛋餅中滴加5 U L 丁酸丁酯和2. 5 ii L的2-甲基-I- 丁醇，使其吸收并緩慢釋放出來。平皿在25度下靜置，在實驗開始起第25天回收全部個體，計數存活工蟻和由工蟻分化成的蟻后(工蟻型補 充生殖型雌蟻)的數量。對各處理區重復進行7次實驗。通過方差分析和Tukey-KramerHSD檢驗進行統計比較。但是，未觀察到因施用信息素成分而導致的生存率的顯著降低。將以相同的頻率提供等量的蒸餾水來代替信息素成分的實驗區作為對照區1，將提供L乙酸丁酯的實驗區作為對照區2。通過施用丁酸丁酯和2-甲基-I-丁醇的混合信息素，顯著地抑制了新蟻后的分化(參考圖14 :P < 0. 05、Tukey-Kramer HSD檢驗)。乙酸丁酯未觀察到抑制新蟻后分化的效果(圖14)。產業上的可利用性本發明提供有效的害蟲驅除和防治、特別是白蟻的有效的驅除和防治，能夠應用于殺蟲劑制造領域、害蟲驅除產業領域、建筑業領域、園藝業領域等。
權利要求
1.一種白蟻引誘劑，其含有選自由丁醇及其酯、酮、醚、羧酸及其鹽組成的組中的一種或多種有效成分。
2.一種白蟻引誘劑，其含有選自由I-丁醇、2-丁醇、I-丁醇的丁酸酯、異丁醇的丁酸酯和2-甲基-I- 丁醇組成的組中的一種或多種有效成分。
3.一種白蟻引誘劑，其含有選自由I-丁醇、2-丁醇或2-甲基-I-丁醇組成的組中的一種或多種有效成分。
4.一種白蟻模擬卵，其在模擬了白蟻卵的基材中含有卵識別信息素和權利要求I 3中任一項所述的白蟻引誘劑。
5.如權利要求4所述的白蟻模擬卵，其中，卵識別信息素為￠-葡萄糖苷酶和/或溶菌酶。
6.—種白蟻模擬卵，其在模擬了白蟻卵的基材中含有作為卵識別信息素的￠-葡萄糖苷酶和權利要求I 3中任一項所述的白蟻引誘劑。
7.如權利要求4 6中任一項所述的模擬卵，其還含有選自由殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分或昆蟲病原菌組成的組中的一種或多種成分。
8.一種白蟻的驅除方法，其特征在于，向白蟻提供權利要求7所述的模擬卵，利用卵運送行為使白蟻將模擬卵運送到巢內。
9.一種白蟻的驅除方法，其特征在于，在模擬卵的周圍設置權利要求I 3中任一項所述的白蟻引誘劑，利用卵運送行為使白蟻將模擬卵運送到巢內，所述模擬卵在模擬了白蟻卵的基材中含有卵識別信息素以及選自由殺蟲活性成分、孵化抑制物質、繁殖抑制物質、生長抑制活性成分或昆蟲病原菌組成的組中的一種或多種成分。
10.一種白蟻的驅除方法，其特征在于，使用權利要求I 3中任一項所述的白蟻引誘劑引誘白蟻，然后，驅除被引誘的白蟻。
11.一種白蟻行為擾亂方法，其特征在于，向白蟻提供權利要求I 3中任一項所述的白蟻引誘劑來擾亂白蟻的行為。
12.—種白蟻生長抑制劑，其含有選自由丁醇及其酯、酮、醚、羧酸及其鹽組成的組中的一種或多種有效成分。
13.—種白蟻生長抑制劑，其含有選自由I-丁醇、2-丁醇、I-丁醇的丁酸酯、異丁醇的丁酸酯和2-甲基-I- 丁醇組成的組中的一種或多種有效成分。
14.一種白蟻生長抑制劑，其含有選自由丁酸丁酯和2-甲基-I-丁醇組成的組中的一種或多種有效成分。
全文摘要
本發明提供含有1-丁醇、2-丁醇或它們的酯、酮、醚、羧酸或它們的鹽的白蟻引誘劑、含有該引誘劑的白蟻模擬卵以及使用該引誘劑或該模擬卵的白蟻驅除和防治方法。
文檔編號A01P19/00GK102740688SQ20108006097
公開日2012年10月17日 申請日期2010年11月12日 優先權日2009年11月13日
發明者日室千尋, 松浦健二, 橫井智之 申請人:國立大學法人岡山大學