專利名稱：一種富含sod北蟲草的培育方法
技術領域：
本發明涉及一種富含SOD北蟲草的培育方法。
背景技術：
超氧化物歧化酶(SOD)是一種存在于生物體內專一清除超氧陰離子自由基的金屬酶，SOD在防御氧中毒，抗輻射損傷及預防衰老等方面起著十分重要的作用。人體內的自由基能殺死侵入體內的病菌、微生物，有保護身體的作用。但這種自由基過多時，它就象攻擊細菌一樣攻擊體內的正常細胞，使細胞受到損傷而被破壞，損傷細胞中的遺傳因子DNA， 從而引起過早衰老和一系列疾病。體內的SOD可以清除過多的自由基，但人到中年后體內產生的SOD逐漸減少，SOD活力下降，機體衰老。外源補充SOD對于預防疾病、延緩衰老具有顯著的功效。冬蟲草是我國特有的中藥瑰寶，為麥角菌科，蟲草屬。較有名的有兩個種，一種是生長在青藏高原山地上的冬蟲夏草，另一種是生長在東北地區的北蟲草。兩個種的化學成分及氨基酸、微量元素基本相同，都含有蟲草特有的腺苷、蟲草酸、蟲草素、蟲草多糖及超氧化物歧化酶(SOD)等多種不同類型的活性物，使蟲草具有廣泛而明顯的食療補益功效和多種藥理作用。臨床醫學研究證明，冬蟲草對支氣管平滑肌有明顯的擴張作用，能增進腎上腺素的作用，用于治療慢性支氣管炎阻塞性肺氣腫，肺結核等，冬蟲草能提高機體免疫功能， 延緩衰老，抑制腫瘤細胞，并能改善化療引起的不良反應。用于治療神經衰弱等多種疑難疾病的綜合治療，用于手術后恢復體能更可表現出卓越的功效。北蟲草在野外生長過程吸收培養基中的銅、鋅元素轉化合成超氧化物歧化酶Cu， &1-S0D。而人工培育北蟲草的培養基中Cu，ai元素含量甚微，現有培育北蟲草的技術都沒有在培養基中添加轉化合成SOD必需的銅、鋅鹽類，培育出的北蟲草子實體中的SOD比活不超過 20u/mg。
發明內容
本發明的目的旨在提供一種富含SOD北蟲草的培育方法，該方法是采用在培養基中添加甘氨酸銅和甘氨酸鋅，提供轉化合成Cu，&1-S0D必要的物質基礎來實現，使培育出的北蟲草子實體SOD比活達到50u/mg以上。本發明包括如下步驟(1)甘氨酸銅鋅溶液的制備稱取甘氨酸銅1克、甘氨酸鋅1克溶解在1000毫升水中，備用；(2)營養液的制備稱取葡萄糖10-30克，蛋白胨10-20克，磷酸二氫鉀1_3克，甘氨酸銅、鋅溶液2_10 毫升，加入到適量熱水中，攪拌溶解后補加熱水至1000亳升；(3)培養基的制備用600毫升規格大口玻璃瓶作培育瓶，加入大米50克，營養液80亳升，用聚丙烯塑料膜封瓶口，移入高壓滅菌鍋，在126°C溫度下滅菌30-60分鐘，待氣壓降至常壓時開鍋， 取出培養基自然冷卻至室溫；(4)接種將培養基移至超凈操作臺上，打開封瓶口塑料膜，迅速用接種噴槍噴入北蟲草液體菌種3-5毫升，封好瓶口 ；(5)培育接種后的培養基移入發菌室，在黑暗中保持溫度18_22°C，濕度50-65%發菌5_7 天；經5-7天發菌后培養基表面長成一層白色菌絲，移到有散射光照的培育架上，在散射光照下3-5天，白色菌絲漸漸轉成桔黃至桔紅色。控制溫度20-22°C濕度70-85%，7-10天后呈現米粒狀的子實體原基，北蟲草的培育即進入“出草”階段；再經過30-40天培育，北蟲草子實體長到6-12厘米高，出現桔紅色孢子粉時子實體已成熟即可采收；采收后及時干燥， 用塑料袋密封，放入20°C以下的干燥室內保存。本發明在培養基的營養液中加入北蟲草生長過程中轉化SOD必需的銅、鋅元素， 為生物轉化合成SOD提拱了物質基礎，使培育出的北蟲草子實體SOD比活可媲美野生北蟲草，達到50u/mg以上。
具體實施例方式實施例1(1)氨酸銅、鋅液的制備稱取甘氨酸銅1克，甘氨酸鋅1克，溶解在1000毫升水中，備用；(2)營養液的制備稱取葡萄糖10克，蛋白胨10克，磷酸二氫鉀1克，甘氨酸銅鋅液4亳升，加入到適量熱水中，攪拌溶解后加熱水補足1000毫升；(3)營養基的制備取大米50克，營養液80毫升放入600毫升規格大口玻璃瓶中，用聚丙烯塑料膜封好瓶口放入高壓滅菌鍋內，在溫度下滅菌40分鐘，待氣壓降至常壓時開鍋取出，自然冷卻至室溫；(4)接種將培育瓶移至超凈臺上，打開封瓶塑料膜，迅速用接種槍噴入北蟲草液體菌種4 毫升，立即封好瓶口。(5)培育①接種后的培育瓶移入暗室，在黑暗中保持溫度18-20C濕度60-65%發菌5_7 天；②經5-7天發菌后培養基表面長成一層白色菌絲，移到有散射光照的培育架上， 在散射光照下3-5天，白色菌絲漸漸轉為桔黃至桔紅色；控制溫度20-22°C，濕度70-85%， 7-8天后培養基表面呈現出米粒狀子實體原基；再經過30-40天培育，控制溫度22-24°C，濕度85-90%，北蟲草子實體長到6-12厘米，出現桔紅色孢子粉時，子實體已成熟，即可采收； 采收后用50-60°C熱風干燥用塑料袋密封，放陰涼干燥的室內保存。在培養基營養液中添加甘氨酸銅、甘氨酸鋅，培育出的北蟲草SOD比活達到507mg。每瓶可得北蟲草(鮮草)40-50克，轉化率達80-90%。
權利要求
1. 一種富含SOD北蟲草的培育方法，其特征是包括如下步驟(1)氨酸銅鋅溶液的制備稱取甘氨酸銅1克、甘氨酸鋅1克溶解在1000毫升水中；(2)培養基營養液的制備葡萄糖10-30克，蛋白胨10-20克、磷酸二氫鉀1-3克、甘氨酸銅鋅溶液2-10毫升，加入到適量熱水中，攪拌溶解后補加熱水至1000毫升；(3)培養基的制備用600毫升規格大口玻璃瓶作培育瓶，加入大米50克、營養液80毫升、用聚丙烯塑料膜封瓶口，在高壓滅菌鍋內溫度下滅菌30-60分鐘；(4)接種將培養基移至超凈操作臺上，打開封瓶口塑料膜，迅速用接種噴槍噴入北蟲草液體菌種3-5毫升，封好瓶口 ；(5)培育接種后的培養基移入發菌室，在黑暗中保持溫度18-22°C，濕度50-65%發菌5-7天；經 5-7天發菌后培養基表面長成一層白色菌絲，移到有散射光照的培育架上，在散射光照下 3-5天，白色菌絲漸漸轉成桔黃至桔紅色；控制溫度20-22°C濕度70-85%，7-10天后呈現米粒狀的子實體原基，北蟲草的培育即進入“出草”階段；再經過30-40天培育，北蟲草子實體長到6-12厘米高，出現桔紅色孢子粉時子實體已成熟即可采收；采收后及時干燥，用塑料袋密封，放入20°C以下的干燥室內保存。
全文摘要
一種富含SOD北蟲草的培育方法，它是以在培養基營養液中添加甘氨酸銅、甘氨酸鋅，為北蟲草提供了在生長過程中轉化合成SOD必需的物質基礎，使培育出的北蟲草子實體SOD比活可媲美野生北蟲草，達到50u/mg以上。
文檔編號A01G1/04GK102177817SQ20111004803
公開日2011年9月14日 申請日期2011年2月24日 優先權日2011年2月24日
發明者徐景輝 申請人:湖北圣峰藥業有限公司