專利名稱：一種海水東方鲀屬種間人工雜交培育的方法
技術領域：
本發明屬于漁業資源技術領域。尤其涉及東方飩屬育種技術，更確切地說是一種應用雌性菊黃東方飩與雄性暗紋東方飩進行東方飩屬種間人工雜交培育的方法。
背景技術：
東方飩屬(Fugu)，俗稱河豚、浜魚、巴魚。由于東方飩生態環境惡化，加之酷漁濫捕，近年東方飩數量急劇下降，因此人們開展了暗紋東方飩和菊黃東方飩的人工繁育技術研究，形成了一套完善的人繁技術。近年來由于暗紋東方飩和菊黃東方飩人工繁殖技術的突破，河飩魚的養殖呈蓬勃發展的趨勢，在獲得顯著經濟效益的同時，由于其長期的人工繁殖和養殖，已出現了品種退化的現象。在人工繁殖過程中親本的質量無法得到保證，養殖過程中病害頻發，個體生長參差不齊，規格逐漸變小，這些現象嚴重影響了東方飩的養殖發展，為了保護東方飩這一珍貴的魚類資源，實現東方飩長期的人工繁殖和養殖，必須從品種改良和選育著手，利用現有的技術和手段，選育和培育出生長快、個體大、病害少的東方飩品種。
發明內容
本發明的目的是解決長期以來一直未能攻克的東方飩屬種間雜交的技術難題，為東方飩屬種間雜交育種提供一種可行的方法，河飩的人工繁殖和品種選育奠定基礎，可望由此培育出優良的飩類新品種，提高河飩養殖的經濟效益，促進我國東方飩水產養殖業健康、穩定、持續的發展。本發明為實現上述目的，采用如下技術方案
一種海水東方飩屬種間人工雜交培育的方法包括以下步驟
(1)挑選親本挑選出個體大而健壯、無病害、無傷殘、體表無寄生物、營養狀況良好、性腺發育正常菊黃東方飩作為母本，個體較大的暗紋東方飩為父本；
(2)親本培育將雌雄親魚個體放入室內水泥池中培育，培育密度1-10尾/m3，水泥池面積8-15m2，水深大于100cm，溶氧維持在5mg/L以上，光照600_800Lux，微流水，日換水1_2 次；親本培育期間以投喂動物性餌料為主，逐步向高蛋白配合餌料過渡，在配合飼料中添加 30-90ppm的魚用激素LH-RH-A、1%。的有淫羊霍、杜仲、當參或玄參、甘草、黃芪、枸杞子、益母草、黑大豆組成的中草藥、1 %的VE和1 %。的食用鹽，每天上午8 00-9 00、下午4 00-5 00 和晚上9 00-10 00各喂一次，每次投喂量為親魚總重的3-7%，每次投餌前先吸污并補充新鮮的曝氣水，維持水溫18士0. 50C ；
(3)人工授精在催產前30和60天，分別對親魚體直接注射外源性激素LRHA進行兩次預催熟，第一次親魚注射劑量為0. lPg/kg，第二次親魚注射劑量0. 2Pg/kg ；觀察親魚性腺發育狀況，發現親魚腹部外觀膨大，手感松軟而有彈性，生殖孔發紅且呈微張開狀態時， 進行人工催產；人工催產注時，根據性腺發育狀態，利用激素促進親魚性腺從IV期過渡至 V期，并使之排卵、排精；IV期注射激素LRH-A，用量為0. 4-0. 6Pg/kg，最后一次催產注射0. 5Pg/kg垂體激素，總計催產3-5次，激素時間效應36h ；待親魚性腺完全成熟后，進行濕法或干法人工授精。(4)孵化將人工授精的魚卵放在孵化桶中孵化，孵化時間4-6天；孵化器中水溫 22士 1°C，，溶氧維持在5mg/L以上，逐漸增加光照強度，孵化前期lOOOLux，后期增加到1500 Lux,鹽度小于1. 0%。，孵化桶直徑1. 0-1. 3m，高1. 2-1. 5m。(5)苗種培育魚苗孵化后先在孵化器中培育1-3天，然后將苗種移至40m2水泥池中培育；孵化3-6天內，用100目的篩絹篩選雞蛋蛋黃，投喂苗種，7-10天內投喂豐年蟲幼體或小的橈足類；培育時水溫22士 1°C，溶氧維持在5mg/L以上，光照強度大于1500Lux，鹽度小于1. 0%o ；待苗種長到0. 8-1. 5cm時，帶水將苗種移至室外土池池塘內進行馴養，馴養前池塘全池潑灑豆漿或施肥，進行發塘。本發明是東方飩屬種間人工雜交的首次突破，為河飩的人工繁殖和品種選育奠定了基礎。為東方飩屬種間的雜交育種提供了一條可行的途徑，可望由此培育出優良的飩類養殖新品種。本發明選用的母本為菊黃東方飩，父本為個體較大的暗紋東方飩，親本培育期間采用了強化培育和預催熟技術，促進了親魚性腺的發育，同時雜交的催產率達到了 95%， 受精率、孵化率和開口率都達到了 80%以上，苗種畸形率2.0%。以下。本發明解決了由于長期人工繁殖和養殖，河飩品種退化的現象，為河飩健康養殖提供苗種支撐，促進我國水產養殖業健康、穩定、持續的發展。
具體實施例方式一種海水東方飩屬種間人工雜交培育的方法包括以下步驟
(1)挑選親本挑選出個體大而健壯、無病害、無傷殘、體表無寄生物、營養狀況良好、性腺發育正常菊黃東方飩作為母本，個體較大的暗紋東方飩為父本；
(2)親本培育將雌雄親魚個體放入室內水泥池中培育，培育密度1-10尾/m3，水泥池面積8-15m2，水深大于100cm，溶氧維持在5mg/L以上，光照600_800Lux，微流水，日換水1_2 次；親本培育期間以投喂動物性餌料為主，逐步向高蛋白配合餌料過渡，在配合飼料中添加 30-90ppm的魚用激素LH-RH-A、1%。的有淫羊霍、杜仲、當參或玄參、甘草、黃芪、枸杞子、益母草、黑大豆組成的中草藥、1 %的VE和1 %。的食用鹽，每天上午8 00-9 00、下午4 00-5 00 和晚上9 00-10 00各喂一次，每次投喂量為親魚總重的3-7%，每次投餌前先吸污并補充新鮮的曝氣水，維持水溫18士0. 50C ；
(3)人工授精在催產前30和60天，分別對親魚體直接注射外源性激素LRHA進行兩次預催熟，第一次親魚注射劑量為0. lPg/kg，第二次親魚注射劑量0. 2Pg/kg ；觀察親魚性腺發育狀況，發現親魚腹部外觀膨大，手感松軟而有彈性，生殖孔發紅且呈微張開狀態時， 進行人工催產；人工催產注時，根據性腺發育狀態，利用激素促進親魚性腺從IV期過渡至V期，并使之排卵、排精；IV期注射激素LRHA，用量為0. 4-0. 6Pg/kg，最后一次催產注射 0. 5Pg/kg垂體激素，總計催產3-5次，激素時間效應36h ；待親魚性腺完全成熟后，進行濕法或干法人工授精。(4)孵化將人工授精的魚卵放在孵化桶中孵化，孵化時間4-6天；孵化器中水溫 22士 1°C，，溶氧維持在5mg/L以上，逐漸增加光照強度，孵化前期lOOOLux，后期增加到1500 Lux,鹽度小于1. 0%。，孵化桶直徑1. 0-1. 3m，高1. 2-1. 5m。
(5)苗種培育魚苗孵化后先在孵化器中培育1-3天，然后將苗種移至40m2水泥池中培育；孵化3-6天內，用100目的篩絹篩選雞蛋蛋黃，投喂苗種，7-10天內投喂豐年蟲幼體或小的橈足類；培育時水溫22士 1°C，溶氧維持在5mg/L以上，光照強度大于1500Lux，鹽度小于1. 0%o ；待苗種長到0. 8-1. 5cm時，帶水將苗種移至室外土池池塘內進行馴養，馴養前池塘全池潑灑豆漿或施肥，進行發塘。
權利要求
1.一種海水東方飩屬種間人工雜交培育的方法，包括以下步驟(1)挑選親本挑選出個體大而健壯、無病害、無傷殘、體表無寄生物、營養狀況良好、性腺發育正常菊黃東方飩作為母本，個體較大的暗紋東方飩為父本；(2)親本培育將雌雄親魚個體放入室內水泥池中培育，培育密度1-10尾/m3，水泥池面積8-15m2，水深大于100cm，溶氧維持在5mg/L以上，光照600_800Lux，微流水，日換水1_2 次；親本培育期間以投喂動物性餌料為主，逐步向高蛋白配合餌料過渡，在配合飼料中添加 30-90ppm的魚用激素LH-RH-A、1%。的有淫羊霍、杜仲、當參或玄參、甘草、黃芪、枸杞子、益母草、黑大豆組成的中草藥、1 %的VE和1 %。的食用鹽，每天上午8 00-9 00、下午4 00-5 00 和晚上9 00-10 00各喂一次，每次投喂量為親魚總重的3-7%，每次投餌前先吸污并補充新鮮的曝氣水，維持水溫18士0. 50C ；(3)人工授精在催產前30和60天，分別對親魚體直接注射外源性激素LRH-A進行兩次預催熟，第一次親魚注射劑量為0. lPg/kg，第二次親魚注射劑量0. 2Pg/kg ；觀察親魚性腺發育狀況，發現親魚腹部外觀膨大，手感松軟而有彈性，生殖孔發紅且呈微張開狀態時，進行人工催產；人工催產注時，根據性腺發育狀態，利用激素促進親魚性腺從IV期過渡至V期，并使之排卵、排精；IV期注射激素LRHA，用量為0. 4-0. 6Pg/kg，最后一次催產注射 0. 5Pg/kg垂體激素，總計催產3-5次，激素時間效應36h ；待親魚性腺完全成熟后，進行濕法或干法人工授精。
2.(4)孵化將人工授精的魚卵放在孵化桶中孵化，孵化時間4-6天；孵化器中水溫 22士 1°C，，溶氧維持在5mg/L以上，逐漸增加光照強度，孵化前期lOOOLux，后期增加到1500 Lux，鹽度小于1. 0%。，孵化桶直徑1. 0-1. 3m，高1. 2-1. 5m。
3.(5)苗種培育魚苗孵化后先在孵化器中培育1-3天，然后將苗種移至40m2水泥池中培育；孵化3-6天內，用100目的篩絹篩選雞蛋蛋黃，投喂苗種，7-10天內投喂豐年蟲幼體或小的橈足類；培育時水溫22士 1°C，溶氧維持在5mg/L以上，光照強度大于1500Lux，鹽度小于1. 0%o ；待苗種長到0. 8-1. 5cm時，帶水將苗種移至室外土池池塘內進行馴養，馴養前池塘全池潑灑豆漿或施肥，進行發塘。
全文摘要
本發明公布了一種海水東方鲀屬種間人工雜交培育的方法，包括親魚的篩選、培育、人工催產、孵化、苗種培育等過程，其特征是在充分掌握暗紋東方鲀和菊黃東方鲀繁殖生態環境和性腺生長發育規律的基礎上，用菊黃東方鲀為母本，用個體較大的暗紋東方鲀為父本模擬自然生態環境，利用激素調控，以實現親魚性腺的發育成熟與排卵，采用人工授精的方法，實現東方鲀屬種間的雜交。同時雜交過程加強生態管理，使雜交的催產率達到了95%，受精率、孵化率和開口率都達到了80%以上，苗種畸形率2.0‰以下。
文檔編號A01K61/00GK102187839SQ20111014659
公開日2011年9月21日 申請日期2011年6月2日 優先權日2011年6月2日
發明者周彥鋒, 尤洋 申請人:中國水產科學研究院淡水漁業研究中心