專利名稱：酵母β-葡聚糖作為羔羊早期斷奶飼料添加劑的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及酵母￠-葡聚糖的用途，尤其涉及酵母￠-葡聚糖作為羔羊早期斷奶飼料添加劑的用途。
背景技術：
有研究表明酵母P -葡聚糖能調節胃腸道微生態平衡，激發動物的免疫功能進而來改善動物免疫力和動物健康狀況，以此增加動物對外界的應激和不良刺激的適應性，從而提高其生產性能和增加經濟效益，成為一種很有發展前景的飼料添加劑和具有益生素作用的免疫促進劑，并越來越受到學術界和養殖業的重視。羔羊早期斷奶作為縮短飼養周期、提高母羊繁殖效率和開展肥羔生產的先決條件，已得到業界的普遍認可與重視。然而，實施羔羊早期斷奶面臨著許多技術問題。羔羊從接受母乳中乳蛋白、乳脂肪和乳糖等動物源性營養成份為主向采食具有不同抗原特性的植物性蛋白質、分子結構迥異的植物性多糖、植 物脂肪等一系列轉變過程中，羔羊斷奶特別是羔羊早期斷奶往往出現采食量下降、生長停滯、腹瀉、甚至死亡等斷奶應激性癥狀，致使羔羊的培育效率和效益降低，嚴重影響著羔羊早期斷奶技術的普及推廣。因此開發羔羊早期斷奶的飼料添加劑產品，減少羔羊斷奶應激，提高免疫力，促進羔羊消化道結構和功能的發育尤為重要。酵母￠-葡聚糖促進免疫系統功能、調節胃腸道內環境、提高應激能力、促進消化道發育的生物學功能非常適合用于改善羔羊早期斷奶所面臨的問題。利用酵母￠-葡聚糖開發羔羊早期斷奶飼料添加劑，以促進羔羊早期斷奶的健康實施，提高早期斷奶羔羊生產性能對于養羊業生產有重要意義。I、酵母葡聚糖的來源及結構葡聚糖(Glucan)是酵母細胞壁最重要的結構成分之一,其大部分是由D-葡萄糖通過P-D-(I —3)鍵的方式相結合的聚合物，也有小部分以高度分支的P-D-(I —6)鍵結合的聚糖，一般分為3種類型堿性葡聚糖(約占細胞壁的20% )、酸性葡聚糖(約占細胞壁的6% )和中性葡聚糖(約占細胞壁的34% )。酵母細胞壁葡聚糖的生物活性與它的分子大小密切相關，高分子的￠-(1,3)-葡聚糖具有較強的免疫及抗腫瘤活性，￠-(1, 3)-葡聚糖的七聚體是競爭嗜中性粒細胞葡聚糖受體的最小分子，這表明免疫應答對單糖的化學結構是非特異的，而主要由連接方式、分子大小和構象所決定，高分子的￠-(1, 3)-葡聚糖具有獨特的分子結構，它通常以三股螺旋的構象存在，這種三股螺旋結構對調節其免疫活性是至關重要的。P -(1，3)_葡聚糖的三股螺旋結構通常是靠氫鍵和分支來穩定的，因此，多聚糖分子主鏈上側鏈的性質和分布對生物活性也有很大影響。2、酵母P -葡聚糖的生物學功能①促生長作用幼齡動物出生后都是由免疫球蛋白對致病菌作用從而起到對自身保護的作用，但在出生后不久動物自身的免疫球蛋白就會衰減。而在早期免疫系統尚未完善時通過刺激免疫系統以增強自身免疫能力從而提高對外界的各種應激，此外增強先天免疫能力對早期斷奶也是很有作用的。￠-葡聚糖是從酵母細胞壁、真菌和谷物中提取出來的一種免疫調節齊U，具有顯著的抗癌和抗菌的能力，能夠引起特異性免疫反應和增加非特異性免疫和抗原的免疫反應，從而能夠增強動物自身免疫從而抵抗細菌、原蟲及其一些病毒的入侵和抗應激能力，進而提聞動物的生長性能。②增強免疫功能有研究表明，P -葡聚糖作為免疫反應的基質，在動物免疫上的作用如下1)刺激動物體內淋巴細胞的增殖；2)活化動物體內的巨噬細胞，因為噬細胞可以通過吞噬作用吸收和清除動物體內受損、衰竭和死亡的自身細胞和侵入體內的病原微生物；3)增加動物體產生自然殺傷細胞的能力；4)誘使動物對念珠菌癥產生非特異性免疫，提高存活率。當機體處于正常生理狀態時，3-葡聚糖可以通過提高機體非特異性免疫機能來增強對侵襲病原菌的抵抗力，當動物處于應激狀態時，體內糖皮質激素和 皮質留等激素水平急劇上升，由此引起血液中淋巴細胞、巨噬細胞及嗜中性粒細胞和溶菌酶的活性下降，動物的免疫機能受到抑制，此時機體極易受到環境中機會病原體的侵襲。摘自朱春森，徐春厚.酵母細胞壁多糖的研究進展[J].江西飼料，2007，04 :15-17.有研究表明，￠-葡聚糖不僅可以影響巨噬細胞的形態，同時可以對細胞因子TNF-a、IL-6和IL-I的釋放，NO的釋放，以及溶菌酶的泌量，過氧化氫的釋放，花生四烯酸的代謝進行調節；此外，酵母3-葡聚糖也影響補體激活的替代途徑和抗體水平的產生。斷奶仔豬日糧中添加P -1,3/1,6-葡聚糖14天后，顯著提高了外周血T，B淋巴細胞轉化率和21天試驗組豬瘟疫苗免疫的抗體水平；認為低劑量酵母￠-1,3/1,6-葡聚糖能適度提高機體細胞和體液免疫機能，增強機體的抗病力，高劑量可能會影響機體免疫系統的正常狀態。摘自王忠，民于明，袁建敏，等.酵母￠-1,3/1,6-葡聚糖對斷奶仔豬細胞免疫和體液免疫機能的影響[J].畜牧獸醫學報，2007，38 (12) :1316-1322.^ -葡聚糖也是一種重要的消化道粘膜免疫增強劑，機體的免疫系統，無論在抵御外來侵害方面還是在組織修復方面，都發揮著重要的調節和指導作用，其中嗜中性粒細胞是主要的抗感染細胞，巨噬細胞是主要的組織修復指導細胞，而這兩類細胞均是￠-葡聚糖的效應細胞，其細胞表面均含有￠-(1,3)葡聚糖受體。￠-葡聚糖一方面可以活化胃腸組織中的嗜中性粒細胞和巨噬細胞，增強其抗感染、抗應激和細胞適應性保護能力，另一方面還可以增強巨噬細胞指導修復作用，加速潰瘍的修復進程，提高修復質量。在大腸桿菌攻毒條件下蛋用仔雞飼糧中添加酵母多糖發現對小腸絨毛變形、微絨毛脫落方面有顯著作用，表明酵母多糖能促使小腸絨毛和微絨毛正常發育。摘自孔維華.￠-1, 3-葡聚糖抗實驗性胃潰瘍作用研究[J].山東大學學報(自然科學版)，2001,36(1) :107-112此外在水產動物上也有研究表明，￠-1,3/1,6葡聚糖可促進魚蝦生長，提高魚蝦體內的抗體含量。酵母葡聚糖能提高魚類的溶菌酶產量和巨噬細胞的殺菌活性；P _1，3葡聚糖可增強魚類溶菌酶和補體活性、吞噬細胞的呼吸爆炸作用及過氧化物產量。有研究表明葡聚糖可增強虹鱒抵抗傳染性造血器官壞死病病毒的能力；同脂多糖一樣，￠-葡聚糖也能刺激對蝦防御細胞的噬菌作用、黑素沉著、包裹和凝結作用等，這種刺激作用同樣可被血漿識別蛋白所增強。酵母細胞壁多糖作為免疫調節劑在水產中使用具有高效、低毒、無殘留等優點，因此，對于水產養殖業的發展具有重要價值與深遠意義。③對腸道微生態環境的調控和促進胃腸道發育的作用
酵母￠-葡聚糖對動物腸道微生態環境也具有一定的調控作用，主要表現在I)具有吸附病原菌的能力，它可以降低動物腸道病原微生物數量如沙門氏菌和大腸桿菌的數量；2)通過對機體的免疫作用消滅侵入機體的大腸桿菌、沙門氏菌等病原微生物；3)通過對機體微生態平衡的調節，促進腸道中有益菌的增殖，抑制有害細菌，從而有效地降低血漿中內毒素含量，達到降低血清內毒素水平，抑制外藉菌在腸道定植，阻止腸道革蘭氏陰性菌向腸道外轉移的目的。有研究表明在狗的日糧中添加(0%，0.05%，0.25%，0.45%，0.65% )酵母細胞壁得出添加量小于1%時會影響總的營養物質的消化率和大腸桿菌的定植。而有研究也表明酵母多糖對蛋用仔雞小腸絨毛和微絨毛發育方面也有顯著作用可以促進在大腸桿菌攻毒條件下小腸絨毛的正常發育。④促進幼齡動物免疫器官的發育動物幼齡時免疫器官發育不成熟，免疫功能較為低下，對各種應激的抵抗能力較差，因此，對幼齡動物來說通過飼喂免疫增強因子的方式來促進其免疫器官的迅速發育具有重要意義。在蛋用雛雞的飲水中分別添加0. 1%和0. 5%的酵母多糖，結果表明酵母多糖可以促進雛雞免疫器官的生長發育，尤其是主要的免疫器官如胸腺、脾臟、法氏囊和盲腸扁桃體，其中對中樞免疫器官胸腺和法氏囊的刺激作用大于對外周免疫器官脾臟和盲腸扁桃體的作用，特別是對胸腺生長和成熟的促進作用最大。摘自張運濤，谷文英.酵母多糖對蛋用雛雞免疫器官生長發育的影響[J].飼料研究，1999 (10) 4-6.在肉仔雞日糧中添50mg/kg ￠-葡聚糖可顯著提高21日齡肉仔雞脾臟的相對重量和21日齡仔雞法氏囊的重量。摘自李志清，民于明，袁建敏，等.￠-葡聚糖對肉仔雞生產性能及免疫功能的影響[J].中國家禽，2004，26 (9) :39-42.3、在動物生產中的應用①在水產養殖上的應用酵母￠-葡聚糖在水產動物中的應用主要表現為提高水產動物機體對各種病原菌的抵抗力，進而提高動物的生長性能。3 -葡聚糖的主要機能是增強水產動物的非特異性免疫系統功能，具體作用機制是水產動物機體內巨噬細胞的表面上存在著一個￠-葡聚糖，其與巨噬細胞結合后，能激活巨噬細胞的活性，繼而誘發一系列的免疫反應，從而使機體通過吞噬作用吸收、破壞和清除體的病原微生物，提高水產動物的免疫功能。陽會軍(2001)等在飼料中添加含18% P -I，3-D葡聚糖(彡2g)顯著提高斑節對蝦增重、存活和抗白斑病毒感染的能力，降低飼料系數。摘自陽會軍.飼料中添加不同水平
葡聚糖對斑節對蝦生長存活及其抗病力的影響[J].飼料工業，2001，22 (9).陳超然(2003)等在研究中認為在飼料中添加250mg/ (kg) ^ -葡聚糖時對異育銀鯽的促長作用明顯。摘自陳超然，陳萱，陳昌福，等.酵母P -葡聚糖對受免異育銀鯽免疫應答的增強作用[J].華中農業大學學報，2003，22 (4) =380-384.張耀武(2006)等認為，隨著P -(1，3)_葡聚糖添加量的增加，對錦鯉的促生長作用越明顯，在飼料中添加￠-(1,3)-葡聚糖能夠提高錦鯉血清中溶菌酶的活力和能夠顯著 提高錦鯉的吞噬細胞活性，即能提高錦鯉的非特異性免疫功能。摘自張耀武，屈文俊，李文輝.￠-(1, 3)-葡聚糖對錦鯉非特異性免疫功能的影響.淡水漁業，200636 (4).②在家畜飼料與營養中的應用
^ -葡聚糖具有抗癌和抗菌的能力能夠增強自身的免疫功能，對斷奶仔豬生長有很好的作用，因為它能夠引起特異性免疫反應和增加非特異性免疫和抗原的免疫反應，3 -葡聚糖豬上有廣泛應用，不僅能提高豬的日增重、日采食量、免疫能力和降低料肉比，而且對其生長有很好的促進作用。周友明(2008)研究表明在日糧中添加啤酒酵母￠-葡聚糖對改善生豬的日增重、飼料報酬、腹瀉率具有顯著作用，但隨著日齡增長，其影響逐漸減弱，尤其是對飼料轉化率影響。摘自周友明，馬友福，楊茜，等.日糧添加啤酒酵母葡聚糖對生豬生產性能的影響[J].當代畜牧，2008，9 :30-31.金淑英等(2001)選取28日齡杜長大斷奶仔豬，研究酵母多糖對斷奶仔豬抗病促生長作用的影響，研究發現當日糧中添加I %酵母多糖時仔豬日增重提高6. 06%，飼料轉化率提高4. 76%，腹瀉率降低50%。摘自金淑英，李斯華，黃挺進.酵母多糖對斷奶仔豬抗病促生長作用的影響[J].浙江畜牧獸醫，2001，3 :3-4. ③在家禽飼料與營養中的應用在家禽養殖當中酵母P -葡聚糖能提高雞的日增重、飼料轉化率和免疫能力，并且能夠改善雞的腸道環境促進免疫器官生長和腸道修復。李志清(2004)研究表明肉仔雞日糧中添加50mg/kg ￠-葡聚糖可顯著提高0-49日齡日增重和飼料轉化效率，顯著提高21日齡肉仔雞脾臟的相對重量，并且添加3 -葡聚糖有提高非特異性免疫力的趨勢。摘自李志清，咼于明，袁建敏，等.￠-葡聚糖對肉仔雞生產性能及免疫功能的影響[J].中國家禽，2004，26 (9) :39-42.張運濤等(1999)研究了酵母多糖對蛋用雛雞腸道微生態環境的影響，結果表明，在飲水中分別添加0. 1%和0. 5%的酵母多糖時，可顯著降低雛雞腸道內的大腸桿菌和沙門氏菌數，同時對乳酸桿菌數的提高也有積極作用；進一步研究了在大腸桿菌攻毒條件下，酵母多糖對蛋用仔雞小腸粘膜的保護作用，通過掃描電鏡觀察發現，對照組小腸絨毛變形、微絨毛脫落，而試驗組小腸絨毛和微絨毛發育正常。摘自張運濤，谷文英.酵母多糖對蛋用雛雞免疫器官生長發育的影響[J].飼料研究，1999 (10) 4-6.4、羔羊早期斷奶的意義及開發早期斷奶羔羊益生素飼料添加劑的必要性隨著生態環境的日益惡化及國家治理生態環境力度的不斷加強，我國養羊業不得不從傳統的放牧為主向舍飼養羊為主轉變。目前，舍飼養羊已逐步成為我國養羊業特別是肉羊業的重要組成部分。但伴隨舍飼養羊所產生的飼養成本增加、比較效益下降又制約著我國的養羊業的健康、穩定發展。因此，要使舍飼養羊業呈現旺盛的活力和持續健康發展態勢，就必須在飼養關鍵技術方面取得重大突破，通過縮短飼養周期、提高母羊繁殖效率、積極開展肥羔生產等相關高新技術來降低飼養成本、提高經濟效益。顯然，降低飼養成本、提高經濟效益已成為舍飼養羊的當務之急。舍飼養羊成本中，飼草料和母羊周轉為主要成本。通過提高母羊的繁殖效率，降低母羊周轉成本，實現“二年三產”或“三年五產”可有效地降低飼養成本、提高養羊效益。而傳統的舍飼養羊方式通常是3 4月齡斷奶，斷奶后母羊經過膘情恢復期、配種期和5個月左右的妊娠期，僅能實現一年一產。因此，在生產實踐中，采用母羊“二年三產”或“三年五產”等高繁、頻繁技術，必須以實施羔羊早期斷奶為前提，將斷奶時間提前到I月齡左右。羔羊早期斷奶作為縮短飼養周期、提高母羊繁殖效率和開展肥羔生產的先決條件，已得到業界的普遍認可與重視。
然而，實施羔羊早期斷奶面臨著許多技術問題。首先是斷奶應激。羔羊斷奶要經受“營養、環境和情感”三重因素的綜合挑戰，要經歷離開母羊，從接受母乳中乳蛋白、乳脂肪和乳糖等動物源性營養成份為主向采食具有不同抗原特性的植物性蛋白質、分子結構迥異的植物性多糖、植物脂肪等一系列轉變。伴隨著這些轉變，斷奶羔羊特別是早期斷奶羔羊往往出現采食量下降、生長停滯、腹瀉、甚至死亡等斷奶應激性癥狀，致使羔羊的培育效率和效益降低，嚴重影響著羔羊早期斷奶技術的普及推廣。斷奶應激是限制羔羊早期斷奶技術乃至其它高新技術廣泛應用的主要技術瓶頸。因此在羔羊早期斷奶技術的應用過程中，需要開發相關的飼料添加劑產品，減少羔羊斷奶應激，提高免疫力，促進羔羊消化道結構和功能的發育，同時完善羔羊早期斷奶飼養管理條件，在實現早期斷奶的同時，促進羔羊終生生長性能和健康。而酵母葡聚糖可以作為益生素激發動物的免疫功能、維持微生態平衡進而來改善動物免疫力和動物健康狀況，以此増加動物對外界的應激和不良刺激的適應性，是開發早期斷奶羔羊飼料添加劑很好的選擇。
發明內容
本發明的目的在于利用酵母葡聚糖開發ー種飼料添加劑產品，以減少早期斷奶羔羊斷奶應激，提高免疫力，促進消化道結構和功能的發育，在實現羔羊早期斷奶的同時，促進羔羊健康和生長性能。因為酵母β_葡聚糖是ー種廣譜的免疫調節劑，在促進幼齡動物免疫器官的發育、強化免疫系統的功能、調節腸道環境、提高應激能力、促進動物生長方面有很顯著的作用，這些生物功能對于早期斷奶羔羊面臨的斷奶應激等問題有重要意義。通過在早期斷奶羔羊不同生長階段的飼糧中添加不同劑量酵母葡聚糖，對羔羊斷奶前后生產性能和經濟效益等指標進行分析，以研究早期斷奶羔羊不同生長階段飼糧中添加不同劑量酵母β -葡聚糖對羔羊斷奶前后生長發育狀況的影響，篩選出最佳的添加劑量和添加方法。通過動物試驗，研究在基礎日糧中添加不同水平的酵母葡聚糖對早期斷奶羔羊生產性能(羔羊試驗末重、平均日增重、采食量和料肉比)的影響。分析添加酵母β_葡聚糖的經濟效益，篩選出酵母β -葡聚糖的最佳添加劑量。I、材料與方法(I)試驗動物及試驗設計從甘肅省永昌肉用種羊場選取體況良好、健康無疾病、體重相近的甘肅肉用綿羊新品種選育群初生羔羊50只，其中公羔30只、母羊20只，按同質原則分為5組，每組公羔6只、母羔4只。采用單因子試驗設計，共設A、B、C、D、E 5個處理組，基礎飼糧中酵母β-葡聚糖的添加量分別為 O. 00mg/kg、37. 50mg/kg、75. 00mg/kg、112. 50mg/kg、150. OOmg/kg,其中A組為對照組，其它組為試驗組。試驗期為91天(13周)。(2)試驗飼糧參照中國肉羊飼養標準(中華人民共和國農業行業標準，NYT816-2004)中預期日增重200g的生長育肥綿羊羔羊營養需要量配制基礎飼糧配方，按不同階段的預期體重配制3種基礎飼糧，分別供7 28天(基礎日糧I)、29 56天(基礎飼糧II)、57 91天 (基礎飼糧III)飼喂。飼料原料的干物質(DM)、粗蛋白質(CP)、粗脂肪(EE)、鈣(Ca)、磷(P)含量采用實測值，消化能(DE)為參考值。酵母β-葡聚糖購自珠海天添生物工程技術有限公司，批號20080701，干物質含量95. 58%，純度80. 00%, 5個試驗處理組在基礎飼糧中分別添加 O. 00mg/kg、37. 50mg/kg、75. 00mg/kg、II2· 50mg/kg> 150. 00mg/kg。表I試驗基礎飼糧配方(風干基礎)
權利要求
1.酵母￠-葡聚糖作為羔羊早期斷奶飼料添加劑的應用。
全文摘要
本發明涉及酵母β-葡聚糖作為羔羊早期斷奶飼料添加劑的新用途。酵母β-葡聚糖作為羔羊早期斷奶飼料添加劑，對羔羊的生長發育有顯著的促進作用，可以顯著增加羔羊的平均日增重，降低全期料肉比，增加經濟效益，根據羔羊的生長階段添加不同劑量的酵母β-葡聚糖對健康高效地實施羔羊早期斷奶具有促進作用。
文檔編號A01K67/02GK102669431SQ20121016949
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月25日 優先權日2012年5月25日
發明者葉得河, 李沖, 李發弟, 馬友記, 魏占虎 申請人:蘭州鑫祥生物工程有限公司