專利名稱：一種蝴蝶蘭品種的植株再生方法
技術領域：
本發明屬于蝴蝶蘭植株快速繁殖技術領域，具體涉及一種蝴蝶蘭品種的植株再生方法。
背景技術：
蝴蝶蘭又稱蝶蘭，屬蝶科蘭屬，是一種多年生單莖性附生蘭，原產于亞洲，主要分布在菲律賓、馬來半島及我國臺灣省。蝴蝶蘭屬是著名的切花種類，其株型美觀莖短，葉大，花莖一至數枚，拱形，花大，花期持久其花形如彩蝶飛舞，色彩艷麗，因花形似蝶得名。其花姿優美，顏色華麗，為熱帶蘭中的珍品，有“蘭中皇后”之美譽，是蘭科植物中栽培最廣泛、最普及的種類之一.全世界原生種約有70多種，經雜交選育的品種有530多個，但原生種的觀賞性較差。商業上用于大規模生產的品種多為雜交種，其品種多，花期長，深受人們的 喜愛。蝴蝶蘭的學名按希臘文的原意為“好像蝴蝶般的蘭花”。它固能吸收空氣中的養分而生存，歸入氣生蘭范疇，可說是熱帶蘭花中的一個大族。它的植株非常奇特，既無匍匐莖，也無假球莖。每棵只長出數張活象湯匙般肥厚的闊葉，交互疊列在基部之上。白色粗大的氣根則露在葉片周圍，有的攀附在花盆的外壁，極富天然野趣。到了新春時節，一枝長達盈尺的花梗就從葉腋抽出，然后一朵接一朵地開放。每花均有5暮，中間嵌鑲唇瓣。其生長習性喜高溫、高濕、半陰環境，越冬溫度不低于18度。由于蝴蝶蘭原產于熱帶雨林地區，本性喜暖畏寒。生長適溫為15 20°C，冬季IOC以下就會停止生長，低于5°C容易死亡。在嶺南各地如要進行批量生產，必須要有防寒設施，實行保護性栽培。如果家庭小量種植，在遇冷時立即移入室內便可以安全過冬。對它的繁殖大多采用細胞組織培養，經試管育成幼苗移栽，大約經過兩年左右便可開花。有些母株當花期結束后，有時花梗上的腋芽也會生長發育成為子株，當它長出根時可從花梗上切下進行分株繁殖。其盆栽的植料不宜用泥土，而要采用水苔、浮石、桫欏屑、木炭碎等，或者直接把幼苗固定在渺楞板(又稱蛇木)上，讓它自行附著生長。這種栽培方法乃系仿照它在原始時的生態環境。當它開花時把整塊板子掛在墻上觀賞，確實別有一番韻味。蝴蝶蘭的氣根頗多，其根尖翠綠，相當敏感，要細心加以保護，切不可觸動損傷，否則，就好像打壞了人的嘴巴，要正常進食就困難了。蝴蝶蘭喜歡潮濕和半陰的環境，要求空間經常保持濕度50% 70%，盆內不能淋水過多。如果種于家居陽臺，在晴日最好每天灑濕地面三四次，讓它的植株能吸收蒸發的水分。在夏秋季節不能讓陽光直射。但早上的朝陽對它生長最好，應充分加以利用。如果春季陰雨天過多，晚上要用光管給它增加光照，以利日后開花。蝴蝶蘭對病蟲害的抵抗力較弱，經常會發生葉斑病和根腐病，可采用農藥百菌清或達仙沖1000倍溶液噴射，每隔七八天噴I次，連噴3次。這些藥液沾在葉上留有白色痕跡，可不必抹去，以利于繼續發揮殺菌作用。蝴蝶蘭的花色鮮艷奪目，既有純白、鵝黃。絆紅、也有淡紫、橙赤和蔚藍。有不少品種兼備雙色或三色，有的好像繡上圖案的條紋，有的又有如噴了均勻的彩點，每枝開花七八朵，多的十二三朵，可連續觀賞六七十天。當全部盛開時，仿佛一群列隊而出的蝴蝶正在輕輕飛翔，它那種飄逸的閑情，真令人產生一種如詩如畫，似夢似幻的感覺。其中以開黃花的較為名貴，有個稱為“天皇”的黃花品種，堪稱為“超級巨星”，討價甚昂。至于藍花品種亦較為珍稀，1952年與1953年的國際洋蘭博覽會上，臺灣送展的蝴蝶蘭連續兩年獲得金牌獎杯。1989年香港舉辦的第14次蘭花展覽，胡炳熾先生送展的一棵白瓣紅唇的蝴蝶蘭獲得全場的總冠軍獎。這些杰出的殊榮為蝴蝶蘭的開拓奠定了堅實的基礎。如今，歐美各國人士對蝴蝶蘭的消費量不斷增加，舉凡高級宴會都少不了蝴蝶蘭作擺設。各種花色的蝴蝶蘭所代表的含義也不一樣，白蝴蝶蘭代表愛情純潔、友誼珍貴，紅心蝴蝶蘭代表鴻運當頭、永結同心，紅色蝴蝶蘭代表仕途順暢、幸福美滿，條點蝴蝶蘭代表事事順心、心想事成，黃蝴蝶蘭代表事業發達、生意興隆，迷你蝴蝶蘭代表快樂天使、風華正茂。
蘭花在我國古代便與梅、竹、菊并稱為四大名花，喻為“四君子”。蘭中皇后——蝴蝶蘭更是以卓越的風姿，迷煞了無數騷客文雅之士。為家居增添無限色彩和生機，同時又改善了小環境空氣質量，吸收有毒廢氣，釋放怡人的清新空氣，平添無限動感活力。通過蘭展，又陶冶了不少人的心性，使人不覺間拒污惡穢、潔身自好，從其豐姿又體會出叢生固本，團結自強，從而達到無私奉獻，播馨香于人間的良好氛圍。固亦常成為文豪大師的鐘愛，常見于文墨、流傳百世。蝴蝶蘭同時也是一種極具有商業價值的“三高產品”，其具有廣泛的藥用及食 用價值，但由于現在人們對其研究和栽培的認識，蘭類植物的神秘和價值遠遠沒有被人們認可，鑒于此，本發明通過對各種花色蝴蝶蘭品種的植株再生及產業化關鍵技術開發的研究，為我國蘭業發展提供技術支持。
發明內容
本發明的目的在于提供一種蝴蝶蘭品種的植株再生方法，解決現有技術中植株繁殖速度慢、種子發芽率低，病毒病嚴重，植株生長周期不一致，開花時間參差不齊，不能大批量控制花期，直接影響蘭花品質和銷售數量及價格，同時還影響儲藏和運輸。本發明所采取的措施是可以使優質蝴蝶蘭品種在短時間內建立無菌株系進行大量產業化生產，并可以周年生產，繁殖速度快，為消費者提供各種顏色新、鮮、香、艷花朵造型一致的產品；為企業提供技術含量高的生產技術，使其植株大小一致，便于花期控制和產業化統一管理，為降低企業生產成本和提供品質優秀產品站穩市場銷售量帶來了巨大的經濟效益。為實現上述目的，本發明采用如下技術方案
一種蝴蝶蘭品種的植株再生方法，選取蝴蝶蘭品種的植株，從健壯母株上切取長度為2飛厘米的花梗腋芽莖段為外植體材料，經過莖尖2 3周的誘導培養，生長點開始呈綠色，莖葉先開始生長，然后生長點的基部開始肥大，25 30天逐漸形成原球莖，形成的原球莖通過不斷分割，進行繼代加速繁殖直到獲得所需數量為止，將I厘米高的新形成的幼苗移入較大的培養容器壯苗培養基上培養3飛個月，20 25天誘導生根后長到8 10厘米高即可進行移栽。具體包括以下步驟
(1)取材方法選取從臺灣引進的無病蟲害的若干花色蝴蝶蘭品種的植株，從健壯母株上切取長度為2飛厘米的花梗腋芽莖段為外植體材料；
(2)培養基的配制
芽誘導培養基MS +1. Omg/L BA +1. Omg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5 g/L Ac +50 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值為 5. 6 ；
叢芽誘導培養基1/2MS +3. Omg/L BA +0. 5mg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac +150 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值為 5. 6 ；
芽增殖培養基l/2MS+2. Omg/L BA +0. 3g/L NAA + 6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5g/L Ac +100 g/L 香蓮汁 +1-3 g/L Hyponexl+1-3 g/L Peptone, pH 值為 5.6 ；
生根培養基1/2 MS + 0. 5mg/L IBA +0. 3mg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac, pH 值為 5. 6 ；
(3)材料處理將帶有側芽的無病蟲害的若干花色蝴蝶蘭花梗剪成2 3cm的節段，用自來水沖洗，再在飽和漂白粉上清液中浸泡15min，浸泡時要不斷攪動；浸泡后的花梗側芽在自來水下滴沖I小時后浙干，在超凈工作臺內以質量濃度為75%的酒精消毒搖蕩3飛秒鐘后倒出酒精，加入質量分數為O. 1%的氯化汞溶液處理8 12分鐘，將汞液倒入廢汞瓶，用無菌水沖3 4遍后，用消毒濾紙吸干表面水分；
(4)誘導培養將經嚴格消毒后的花梗用手術刀切成I芽I段材料接種在芽誘導培養基中；
(5)培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1500 20001x；
(6)叢芽誘導培養將上述誘導培養、生長健壯的誘導芽切成O.5cm的小塊，分別接種在從芽誘導培養基中；13 15天后莖尖開始膨大，呈淺綠半球狀，3個月后誘導原球莖體；
(7)增殖培養將上述誘導培養生長良好的原球莖體切割成小塊，分別接種在芽增殖培養基中繼代培養；5(Γ60天繼代一次，增殖倍數為1(Γ13，將原球莖放在含低濃度細胞分裂素的培養基上繼續培養60天后陸續長出小芽，成為完整的原球莖；95天后，大部分長成2 3片葉的小苗；一個花梗側芽萌發形成小苗，再利用小苗的葉片誘導原球莖繼代增殖，試管苗出瓶種植生長性狀穩定，通過原球莖增殖的方法極大提高繁殖速度，實現蝴蝶蘭的產業化生產；
(8)誘導生根當叢生芽長至2cm高時，將芽分割成單株，轉移到不同的生根培養基中；
(9)小苗移栽當試管苗長至3 4cm高，有3 5條根，5 7片葉片，長度2 3cm時，就可進行煉苗，將試管苗放在自然光下煉苗5 7天，打開瓶蓋先進行煉苗2 3天，以增強試管苗對室外環境的適應能力；然后從培養瓶中取出小苗，洗凈根部培養基，用干凈的水苔包裹根部種植于穴盤中，保持溫度25 30°C，空氣濕度為85%，25 30天，當新葉、新根長出時，噴施質量分數為O. 39ΓΟ. 5%的KH2PO4溶液，每7天一次，成活率達95%。本發明的有益效果在于本發明可以使優質蝴蝶蘭品種在短時間內建立無菌株系進行大量產業化生產，并可以周年生產，繁殖速度快，為消費者提供各種顏色新、鮮、香、艷花朵造型一致的產品；為企業提供技術含量高的生產技術，使其植株大小一致，便于花期控制和產業化統一管理，為降低企業生產成本和提供品質優秀產品站穩市場銷售量帶來了巨大的經濟效益。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步說明。實施例1 :
(1)取材方法選取從臺灣引進的無病蟲害的若干花色蝴蝶蘭品種的植株，從健壯母株上切取長度為2飛厘米的花梗腋芽莖段為外植體材料；
(2)培養基的配制芽誘導培養基MS +1. Omg/L BA +1. Omg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5 g/L Ac +50 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值為 5. 6 ；
叢芽誘導培養基1/2MS +3. Omg/L BA +0. 5mg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac +150 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值為 5. 6 ；
芽增殖培養基l/2MS+2. Omg/L BA +0. 3g/L NAA + 6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5g/L Ac +100 g/L 香蓮汁 +1-3 g/L Hyponexl+1-3 g/L Peptone, pH 值為 5.6 ；
生根培養基1/2 MS + 0. 5mg/L IBA +0. 3mg/L NM +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac, pH 值為 5. 6 ；
(3)材料處理將帶有側芽的無病蟲害的若干花色蝴蝶蘭花梗剪成2 3cm的節段，用自來水沖洗，再在飽和漂白粉上清液中浸泡15min，浸泡時要不斷攪動；浸泡后的花梗側芽在 自來水下滴沖I小時后浙干，在超凈工作臺內以質量濃度為75%的酒精消毒搖蕩3飛秒鐘后倒出酒精，加入質量分數為0. 1%的氯化汞溶液處理8 12分鐘，將汞液倒入廢汞瓶，用無菌水沖3 4遍后，用消毒濾紙吸干表面水分；
(4)誘導培養將經嚴格消毒后的花梗用手術刀切成I芽I段材料接種在芽誘導培養基中；
(5)培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1500 20001x；
(6)叢芽誘導培養將上述誘導培養、生長健壯的誘導芽切成0.5cm的小塊，分別接種在從芽誘導培養基中；13 15天后莖尖開始膨大，呈淺綠半球狀，3個月后誘導原球莖體；
(7)增殖培養將上述誘導培養生長良好的原球莖體切割成小塊，分別接種在芽增殖培養基中繼代培養；5(Γ60天繼代一次，增殖倍數為1(Γ13，將原球莖放在含低濃度細胞分裂素的培養基上繼續培養60天后陸續長出小芽，成為完整的原球莖；95天后，大部分長成2 3片葉的小苗；一個花梗側芽萌發形成小苗，再利用小苗的葉片誘導原球莖繼代增殖，試管苗出瓶種植生長性狀穩定，通過原球莖增殖的方法極大提高繁殖速度，實現蝴蝶蘭的產業化生產；
(8)誘導生根當叢生芽長至2cm高時，將芽分割成單株，轉移到不同的生根培養基中；
(9)小苗移栽當試管苗長至3 4cm高，有3 5條根，5 7片葉片，長度2 3cm時，就可進行煉苗，將試管苗放在自然光下煉苗5 7天，打開瓶蓋先進行煉苗2 3天，以增強試管苗對室外環境的適應能力；然后從培養瓶中取出小苗，洗凈根部培養基，用干凈的水苔包裹根部種植于穴盤中，保持溫度25 30°C，空氣濕度為85%，25 30天，當新葉、新根長出時，噴施質量分數為0. 39ΓΟ. 5%的KH2PO4溶液，每7天一次，成活率達95%。以上所述僅為本發明的較佳實施例，凡依本發明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應屬本發明的涵蓋范圍。
權利要求
1.一種蝴蝶蘭品種的植株再生方法，其特征在于選取蝴蝶蘭品種的植株，從健壯母株上切取長度為2飛厘米的花梗腋芽莖段為外植體材料，經過莖尖2 3周的誘導培養，生長點開始呈綠色，莖葉先開始生長，然后生長點的基部開始肥大，25 30天逐漸形成原球莖，形成的原球莖通過不斷分割，進行繼代加速繁殖直到獲得所需數量為止，將I厘米高的新形成的幼苗移入較大的培養容器壯苗培養基上培養3飛個月，20 25天誘導生根后長到8 10厘米高即可進行移栽。
2.根據權利要求1所述的蝴蝶蘭品種的植株再生方法，其特征在于包括以下步驟 (1)取材方法選取從臺灣引進的無病蟲害的若干花色蝴蝶蘭品種的植株，從健壯母株上切取長度為2飛厘米的花梗腋芽莖段為外植體材料； (2)培養基的配制芽誘導培養基MS +1. Omg/L BA +1. Omg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5 g/L Ac +50 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值為 5. 6 ；叢芽誘導培養基1/2MS +3. Omg/L BA +0. 5mg/L NAA +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac +150 g/L 挪子汁 +1-3 g/L Peptone, pH 值為 5. 6 ； 芽增殖培養基l/2MS+2. Omg/L BA +0. 3g/L NAA + 6.5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2.5g/L Ac +100 g/L 香蓮汁 +1-3 g/L Hyponexl+1-3 g/L Peptone, pH 值為 5.6 ；生根培養基1/2 MS + 0. 5mg/L IBA +0. 3mg/L NM +6. 5 g/L Ag +30 g/L Su +2-2. 5g/L Ac, pH 值為 5. 6 ； (3)材料處理將帶有側芽的無病蟲害的若干花色蝴蝶蘭花梗剪成2 3cm的節段，用自來水沖洗，再在飽和漂白粉上清液中浸泡15min，浸泡時要不斷攪動；浸泡后的花梗側芽在自來水下滴沖I小時后浙干，在超凈工作臺內以質量濃度為75%的酒精消毒搖蕩3飛秒鐘后倒出酒精，加入質量分數為0. 1%的氯化汞溶液處理8 12分鐘，將汞液倒入廢汞瓶，用無菌水沖3 4遍后，用消毒濾紙吸干表面水分； (4)誘導培養將經嚴格消毒后的花梗用手術刀切成I芽I段材料接種在芽誘導培養基中； (5)培養條件培養室溫度為25±2°C，光照時間12h/d，光照強度1500 20001x； (6)叢芽誘導培養將上述誘導培養、生長健壯的誘導芽切成0.5cm的小塊，分別接種在從芽誘導培養基中；13 15天后莖尖開始膨大，呈淺綠半球狀，3個月后誘導原球莖體； (7)增殖培養將上述誘導培養生長良好的原球莖體切割成小塊，分別接種在芽增殖培養基中繼代培養；50飛0天繼代一次，增殖倍數為1(T13，將原球莖放在含低濃度細胞分裂素的培養基上繼續培養60天后陸續長出小芽，成為完整的原球莖；95天后，大部分長成2 3片葉的小苗；一個花梗側芽萌發形成小苗，再利用小苗的葉片誘導原球莖繼代增殖，試管苗出瓶種植生長性狀穩定，通過原球莖增殖的方法極大提高繁殖速度，實現蝴蝶蘭的產業化生產； (8)誘導生根當叢生芽長至2cm高時，將芽分割成單株，轉移到不同的生根培養基中； (9)小苗移栽當試管苗長至3 4cm高，有3 5條根，5 7片葉片，長度2 3cm時，就可進行煉苗，將試管苗放在自然光下煉苗5 7天，打開瓶蓋先進行煉苗2 3天，以增強試管苗對室外環境的適應能力；然后從培養瓶中取出小苗，洗凈根部培養基，用干凈的水苔包裹根部種植于穴盤中，保持溫度25 30°C，空氣濕度為85%，25 30天，當新葉、新根長出時，噴施質量分數為0. 39TO. 5%的KH2PO4溶液，每7天一次，成活率達95%。
全文摘要
本發明公開了一種蝴蝶蘭品種的植株再生方法，屬于蝴蝶蘭栽培領域。選取蝴蝶蘭品種植株上長度為2~5厘米的花梗腋芽莖段為外植體材料，經過莖尖2~3周的誘導培養，25~30天逐漸形成原球莖，不斷分割進行繼代加速繁殖，將1厘米高的幼苗移入壯苗培養基上培養3~6個月，20～25天誘導生根后長到8~10厘米高即可進行移栽，成活率高達95%以上；苗木成活后生長健壯，長勢良好。本發明可以使優質蝴蝶蘭品種在短時間內建立無菌株系進行大量產業化生產，并可以周年生產，繁殖速度快，為消費者提供各種顏色新、鮮、香、艷花朵造型一致的產品；為企業提供技術含量高的生產技術，使其植株大小一致，便于花期控制和產業化統一管理，降低企業生產成本，帶來了巨大的經濟效益。
文檔編號A01H4/00GK103004603SQ201210577538
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月27日 優先權日2012年12月27日
發明者蘭思仁, 吳少華, 何碧珠, 何官榕, 鐘鳳林, 林蔚 申請人:福建農林大學