雞爪槭青龍組培繁殖工藝的制作方法
【專利摘要】本發明公開了雞爪槭青龍組培繁殖工藝，它包括以下步驟：S1、采集無病害的雞爪槭青龍當年生枝條，去掉多余葉片，剪成帶芽莖段，滅菌；S2、將滅菌后帶芽莖段接種于培養基上生長，誘導腋芽萌發；S3、繼代增殖培養，將已萌發的腋芽剪下，接種在繼代培養基上，誘導叢生芽產生；S4、生根培養，切割叢生芽上的不定芽，接種于生根培養基上，誘導根產生。本發明的有益效果是：建立了青龍的組培繁殖體系，實現了青龍繁殖體系的突破；生產成本低廉，得到的組培苗遺傳狀一致，且繁殖系數高，繁殖周期短，是雞爪槭青龍快繁的有效途徑，且避免了病毒積累。
【專利說明】雞爪槭青龍組培繁殖工藝
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物組織培養【技術領域】，特別是雞爪槭青龍組培繁殖工藝。
【背景技術】
[0002]槭樹科(Aceraceae)槭樹屬(Acer)通常泛稱槭樹，習慣又稱“楓”或“楓樹”。全世界槭樹共有200多種，分布于亞洲、歐洲、北美洲以及非洲北部。我國有160余種，占全世界總數的75%以上，全國各地均有分布，主產長江流域及其以南的各省區。槭樹可用作建筑用材、造紙原料、藥物提取、工業用油和蜜源植物。有些槭樹樹形豐富、姿態瀟灑、葉形豐富、葉色多變，譽為世界著名的觀葉植物。雞爪槭(Acer palmatum)又名雞爪楓，屬槭樹科、槭樹屬落葉小喬木或喬木。樹姿優美秀麗，葉形美觀，葉色多變，是著名的觀賞樹種。世界各國早已引種栽培，變種和變型很多。日本雞爪槭目前培育出450余個賞葉品種。
[0003]我國槭樹觀賞資源的開發利用與國外相比有很大差異。槭樹作為重要的觀葉樹種，栽培苗木供不應求。其繁殖目前主要采用扦插和播種繁殖方法。雖然，槭樹科植物在大田里的生長有著很大的容量，但目前進行組培繁育的品種較少。
[0004]綜上所述，國內外對槭樹科植物的組織培養研究較少，僅有少數幾個種建立了較為完善的葉腋增殖組織培養再生體系，如大槭樹、美洲糖槭、尖尾槭、茶條槭、青榨槭、復葉槭。而對于扦插生根困難的雞爪槭及其品種鮮有報道。
[0005]雞爪槭青龍(Acer palmatum ’ Seiryu’)為眾多雞爪槭栽培變異品種之一,其葉片羽狀，夏季翠綠，秋季轉紅，枝繁葉茂，株形優美，頗具觀賞價值。是現今市場上較為普遍及珍貴的觀賞品種，但對于青龍的組培繁殖方法還從未有過報道。
【發明內容】
`[0006]本發明的目的在于克服`現有技術的缺點，提供一種繁殖率高、繁殖速度快、操作簡便的雞爪槭青龍組培繁殖工藝。
[0007]本發明的目的通過以下技術方案來實現:雞爪槭青龍組培繁殖工藝，它包括以下步驟:
51、采集無病害的雞爪槭青龍當年生枝條，去掉多余葉片，剪成帶芽莖段，帶芽莖段先用酒精滅菌30~60s,再用升萊滅菌3~5min,然后用無菌水清洗4~6遍；
52、將滅菌后帶芽莖段接種于培養基上生長，所述的培養基為MS+NAA0.3mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養2~3周，誘導腋芽萌發；
53、繼代增殖培養，將已萌發的腋芽剪下，接種在繼代培養基上，繼代培養基為MS+6-BA1.5mg/L +NAA0.3mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養3~5周，誘導叢生芽產生；
54、生根培養，切割叢生芽上的不定芽，接種于生根培養基上，生根培養基為1/2MS+NAA0.2mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養2~3周，誘導根產生。
[0008]本發明具有以下優點:
本發明為采集青龍莖段外植體，在初代培養基上誘導腋芽發生，再在增殖培養基上誘導叢生芽產生，切割叢生芽上不定芽入生根培養基，誘導生根，建立了青龍的組培繁殖體系，實現了青龍繁殖體系的突破。
[0009]本發明生產成本低廉，得到的組培苗遺傳狀一致，且繁殖系數高，繁殖周期短，是雞爪槭青龍快繁的有效途徑，且避免了病毒積累。
[0010]本發明培養基配方簡單，培養流程簡捷，操作簡便，培養效率高，能夠比較容易的獲得雞爪槭青龍無菌苗，煉苗易成活，省時省力。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0011]圖1為本發明的雞爪槭青龍初代培養的示意圖 圖2為本發明的雞爪槭青龍繼代培養的示意圖
圖3為本發明的雞爪槭青龍生根培養的示意圖 圖4為本發明的雞爪槭青龍根系的示意圖。
【具體實施方式】
[0012]下面結合附圖及實施例對本發明做進一步的描述，本發明的保護范圍不局限于以下所述:
實施例1:
雞爪槭青龍組培繁殖工藝，它包括以下步驟:
51、在晴天中午或下午采集無病害的雞爪槭青龍當年生枝條，去掉多余葉片，剪成帶芽莖段，帶芽莖段先用酒精滅菌30s，再用升汞滅菌5min，然后用無菌水清洗4~6遍；
52、將滅菌后帶芽莖段接種于培養基上生長，所述的培養基為MS+NAA0.3mg/L，并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養15天，誘導腋芽萌發，如圖1所示；
53、繼代增殖培養，將已萌發的腋芽剪下，接種在繼代培養基上，繼代培養基為MS+6-BA1.5mg/L +NAA0.3mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養30天，誘導叢生芽產生，如圖2所示；
54、生根培養，切割叢生芽上的不定芽，接種于生根培養基上，如圖3所示，生根培養基為1/2MS+NAA0.2mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養15天周，誘導根產生，如圖4所示。
[0013]實施例2:
雞爪槭青龍組培繁殖工藝，它包括以下步驟:
51、在晴天中午或下午采集無病害的雞爪槭青龍當年生枝條，去掉多余葉片，剪成帶芽莖段，帶芽莖段先用酒精滅菌50s，再用升汞滅菌4min，然后用無菌水清洗4~6遍；
52、將滅菌后帶芽莖段接種于培養基上生長，所述的培養基為MS+NAA0.3mg/L，并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養2周，誘導腋芽萌發，如圖1所示；53、繼代增殖培養，將已萌發的腋芽剪下，接種在繼代培養基上，繼代培養基為MS+6-BA1.5mg/L +NAA0.3mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養3周，誘導叢生芽產生，如圖2所示；
54、生根培養，切割叢生芽上的不定芽，接種于生根培養基上，如圖3所示，生根培養基為1/2MS+NAA0.2mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養2周，誘導根產生，如圖4所示。
[0014]實施例3:
雞爪槭青龍組培繁殖工藝，它包括以下步驟:
51、在晴天中午或下午采集無病害的雞爪槭青龍當年生枝條，去掉多余葉片，剪成帶芽莖段，帶芽莖段先用酒精滅菌60s，再用升汞滅菌3min，然后用無菌水清洗4~6遍；
52、將滅菌后帶芽莖段接種于培養基上生長，所述的培養基為MS+NAA0.3mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養3周，誘導腋芽萌發，如圖1所示；
53、繼代增殖培養，將已萌發的腋芽剪下，接種在繼代培養基上，繼代培養基為MS+6-BA
1.5mg/L +NAA0.3mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養5周，誘導叢生芽產生，如圖2所示；
54、生根培養，切割叢生芽上的不定芽，接種于生根培養基上，如圖3所示，生根培養基為1/2MS+NAA0.2mg/L,并將接 種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養3周，誘導根產生，如圖4所示。
【權利要求】
1.雞爪槭青龍組培繁殖工藝，其特征在于:它包括以下步驟: ， 51、采集無病害的雞爪槭青龍當年生枝條，去掉多余葉片，剪成帶芽莖段，帶芽莖段先用酒精滅菌30~60s,再用升萊滅菌3~5min,然后用無菌水清洗4~6遍； ，52、將滅菌后帶芽莖段接種于培養基上生長，所述的培養基為MS+NAA0.3mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養2~3周，誘導腋芽萌發； ，53、繼代增殖培養，將已萌發的腋芽剪下，接種在繼代培養基上，繼代培養基為MS+6-BA，1.5mg/L +NAA0.3mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的培養室內培養，培養3~5周，誘導叢生芽產生； ，54、生根培養，切割叢生芽上的不定芽，接種于生根培養基上，生根培養基為1/2MS+NAA0.2mg/L,并將接種后的培養材料置于光照強度為2000~3000LX、光照時間為16h/d、溫度為24~26°C的 培 養室內培養，培養2~3周，誘導根產生。
【文檔編號】A01H4/00GK103477981SQ201310402032
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月6日 優先權日:2013年9月6日
【發明者】馬建華, 王小輝, 朱曉菲, 吳佳川, 沈香蘭 申請人:巴中市光霧山植物研究所