一種茄果類蔬菜微生物復合菌劑的制作方法
【專利摘要】本發明公開一種茄果類蔬菜微生物復合菌劑、其制備方法和應用；其采用膠質芽孢桿菌（Bacillus?mucilaginosus）發酵液，巨大芽孢桿菌（Bacillus?megaterium）發酵液，褐色球形固氮菌（Azotobacter?chroococcum）發酵液，枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）發酵液混合后作為混合菌劑，經再次發酵制得。本復合菌劑充分利用了各菌種之間的相互作用，起到刺激植物生長、緩解土地板結、改良土壤生態環境、防病抗病等作用，能改善果實外觀質量和提高果實品質，增產效果明顯，能顯著提高經濟效益，達到增產、高產的目的。
【專利說明】一種茄果類蔬菜微生物復合菌劑
【技術領域】
[0001]本發明屬于農業和生物【技術領域】，涉及一種茄果類蔬菜微生物復合菌劑、其制備方法與應用。
【背景技術】
[0002]化肥的誕生在一定的時間里給農民帶來了豐收的希望。然而長期使用化肥產生的弊端隨之而來，土地板結、化學元素殘留、環境污染等等一系列問題浮出水面。化肥已經不能滿足可持續發展的需要，更不能成為綠色農業的支柱。
[0003]而茄果類蔬菜是一類以食用鮮嫩果實為主、生長周期相對較長的蔬菜，主要包括黃瓜、番茄、辣椒等。這些蔬菜對養分需求有相似之處，與葉菜類蔬菜比較，在氮磷鉀三要素中對磷、鉀需求量相對較多，而需氮量較少，同時由于它們生長期長，所以要求養分釋放期長，以免后期脫肥。現有的生產模式是采用化肥等為主，一般是將所有的原料一起發酵，使有機物中養分大部分釋放出來，這對于茄果類蔬菜的后期果實生長不利。要解決上訴問題就要改變現有的生產模式，從而使養分釋放符合茄果類蔬菜養分吸收要求。隨著科學的發展，微生物在農業中的作用漸漸顯露出來。利用微生物制劑改良土壤、降解化學殘留、改善生態環境、作物增產、抑菌防病等，已經成為農業科學研究的熱點。微生物復合菌劑是發展“高產、優質、高效、生態、安全”農業的保證。
【發明內容】
[0004]本發明所要解決的問題是采用多種菌種制備復合菌劑，以及利用該復合菌劑制成植物生物調節劑應用在農作物的種植中。充分利用菌種之間的相互作用，起到刺激植物生長、緩解土地板結、改良土壤生態環境、防病抗病等作用，從而達到解決增產、高產的目的。
[0005]本發明所述的茄果類蔬菜微生物復合菌劑，其采用膠質芽孢桿菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 發酵液，巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium) ACCC10010發酵液，揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142發酵液，枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis) ACCC01183發酵液混合后作為混合菌劑，經再次發酵制得。
[0006]對于上文所述的技術方案，優選的情況下:所述的膠質芽孢桿菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 發酵液，巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium) ACCC10010發酵液，揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142發酵液，枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis) ACCC01183發酵液混合的質量百分比分別為30~40%、30~40%、10 ~20%、5 ~10%。
[0007]對于上文所述的技術方案，優選的情況下:所述的混合菌劑經再次發酵的接種量為混合菌劑占總發酵培養基質量的1~5%。
[0008]對于上文所述的技術方案，優選的情況下:所述再次發酵的發酵培養基為:玉米粉 2 ~20g/100mL、豆栢粉 1 ~10g/100mL、酵母膏 0.05 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2 ~2g/100mL、Κ2ΗΡ04 0.5 ~2g/100mL、MgS04.7Η20 0.001 ~0.02g/100mL、NaCl 0.5 ~0.8g/100mL、(NH4)2S04 0.001 ~0.01g/100mL，溶劑為蒸餾水。
[0009]對于上文所述的技術方案，優選的情況下:所述的膠質芽孢桿菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 發酵液，巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium) ACCC10010 發酵液，褐色球形固氮菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142發酵液的菌種數量均不低于 108 個 /mL。
[0010]對于上文所述的技術方案，優選的情況下:所述的再次發酵制得的終產物總菌數量 6 ~10X108f/mL。
[0011]對于上文所述的技術方案，優選的情況下:所述再次發酵的條件為30°C下培養4~7天。
[0012]對于上文所述的技術方案，優選的情況下:制備膠質芽孢桿菌(鉀細菌)(Bacillus mucilaginosus)CGMCC1.153發酵液所用的一級和二級發酵液體培養基配方為:ΚΗ2Ρ04 0.06g、MgS04.7Η20 0.05g、CaS04.5Η20 0.004g、蛋白胨 5g、玉米漿(50% 干重)2.5g、乳糖 15g、NaCl 4g、蒸懼水 1000mL、pH7.1 ；
[0013]制備巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium) ACCC10010發酵液所用的一級和二級發酵液體培養基配方為:牛肉膏3g、蛋白胨5g、NaC15g、蒸餾水1000mL、pH7.0 ;
[0014]制備揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum)CGMCCl.142發酵液所用的一級和二級發酵液體培養基配方為:ΚΗ2Ρ04 0.2g、K2HP04 0.8g、MgS04.7H20 0.2g、CaS04.2H20
0.lg、Na2Mo04.2H20 微量、酵母膏 0.5g、甘露醇 20g、FeCl3 微量、蒸餾水 1000mL、pH7.2 ；
[0015]制備枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis) ACCC01183發酵液所用的一級和二級發酵液體培養基配方為:牛肉膏log、蛋白胨10g、NaC15g、葡萄糖10g，蒸餾水lOOOmL，pH7.0，
[0016]本發明的有益效果是:這種茄果類蔬菜微生物復合菌劑采用巨大芽孢桿菌、褐色圓形固氮菌、膠質芽孢桿菌(鉀細菌)、枯草芽孢桿菌作為制備菌種。以上菌種分別經過一級菌種培養，二、三級發酵，使發酵液中菌數達到6~10 X 108個/mL，即得茄果類蔬菜微生物復合菌劑。本產品經長期實地驗證，配方合理，功效穩定，能促進作物生長、改善果實品質、促早熟、增加產量，提高肥料利用率，改良土壤生態環境，并且有一定的防病抗病功效。
【具體實施方式】
[0017]本發明采用膠質芽孢桿菌(鉀細菌)(Bacillus mucilaginosus) CGMCC1.153,巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium) ACCC10010,褐色球形固氮菌(Azotobacterchroococcum) CGMCC1.142,枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis) ACCC01183，均可由商業途徑購買獲得，后文中為方便描述，分別簡寫為膠質芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、褐色球形固氮菌、枯草芽孢桿菌。
[0018]實施例1:
[0019]所述的茄果類蔬菜微生物復合菌劑制備步驟如下:
[0020]1.接種:將所述各菌種(膠質芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、褐色球形固氮菌、枯草芽孢桿菌)分別接于斜面培養基上；巨大芽孢桿菌為27~37°C，pH為6.5~7.5，培養時間為4天；褐色球形固氮菌培養溫度25~30°C，pH為7.0~8.0，培養時間為5天；枯草芽孢桿菌培養溫度27~37°C，p`H為6.5~7.5，培養時間為4天；膠質芽孢桿菌(鉀細菌)培養溫度25~35°C，pH為7.5~8.0，培養時間為5天；[0021]2.一級菌種培養:將所述步驟1制備的菌種分別按接種環一環的量接種于盛有相應液體培養基的50mL錐形瓶中，培養基pH為6.5~7.5，錐形瓶放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩24~48h ;采用血球計數板計數，菌液中菌種數量分別達到108個/mL ；
[0022]3.二級發酵:將所述步驟2制備的菌種分別按5%接種于盛有液體培養基的lOOOmL錐形瓶中，培養基pH6.5~7.5，放入搖床振蕩，溫度為30°C，振蕩48~72h ;使菌種數量分別達到108個/mL以上，從而制得膠質芽孢桿菌(鉀細菌)發酵液、巨大芽孢桿菌發酵液、褐色球形固氮菌發酵液和枯草芽孢桿菌發酵液。
[0023]將各菌種按質量百分比混合后進行再次發酵:膠質芽孢桿菌(鉀細菌)發酵液30~40%、巨大芽孢桿菌發酵液30~40%、褐色球形固氮菌發酵液10~20%、枯草芽孢桿菌發酵液5~10%,如表1常用配方表。
[0024]表1.常用配方表
[0025]
【權利要求】
1.一種茄果類蔬菜微生物復合菌劑，其特征在于:采用膠質芽孢桿菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 發酵液，巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium) ACCC10010發酵液，揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142發酵液，枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis) ACCC01183發酵液混合后作為混合菌劑，經再次發酵制得。
2.根據權利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于:所述的膠質芽孢桿菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 發酵液，巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium) ACCC10010發酵液，揭色球形固氣菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142發酵液，枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis) ACCC01183發酵液混合的質量百分比分別為30~40%、30~40%、10 ~20%、5 ~10%。
3.根據權利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于:所述的混合菌劑經再次發酵的接種量為混合菌劑占總發酵培養基質量的1~5%。
4.根據權利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于:所述再次發酵的發酵培養基為:玉米粉 2 ~20g/100mL、豆栢粉 1 ~10g/100mL、酵母膏 0.05 ~0.2g/100mL、KH2P04 0.2 ~2g/100mL、Κ2ΗΡ04 0.5 ~2g/100mL、MgS04.7Η20 0.001 ~0.02g/100mL、NaCl 0.5 ~0.8g/100mL、(NH4)2S04 0.001 ~0.01g/100mL，溶劑為蒸餾水。
5.根據權利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于:所述的膠質芽孢桿菌(Bacillusmucilaginosus) CGMCC1.153 發酵液，巨大芽抱桿菌(Bacillus megaterium) ACCC10010 發酵液，褐色球形固氮菌(Azotobacter chroococcum) CGMCC1.142發酵液的菌種數量均不低于 108 個 /mL。
6.根據權利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于:所述的再次發酵制得的終產物總菌數量6~10X108f/mL。
7.根據權利要求1所述的微生物菌劑，其特征在于:所述再次發酵的條件為30°C下培養4~7天。
【文檔編號】A01N63/02GK103719159SQ201310659244
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年12月6日 優先權日:2013年12月6日
【發明者】顧艷麗, 崔國臣, 周悅, 崔昌娜 申請人:大連三科生物工程有限公司