長壽花抑菌組培方法
【專利摘要】本發明涉及長壽花抑菌組培方法，包括抑菌劑配制、容器消毒、培養基配制、誘導培養、增殖培養、生根培養和瓶苗移栽。采用本發明的長壽花的抑菌組培方法，培養容器和培養基都無需進行高溫高壓滅菌，一方面降低了長壽花組織培養對設施設備的要求，尤其不需要高溫高壓滅菌所需配置的高壓鍋設備，縮減了投資成本，電能消耗也將大幅度降低；另一方面，采用這種培養基開展長壽花組織培養，組培環節大為簡化，人工操作的速度大幅提高，從而降低了人工成本。本發明的長壽花抑菌組培方法與常規方法比較，可以降低成本10％以上。本發明的抑菌組培方法可以在其它植物的組培中應用。
【專利說明】長壽花抑菌組培方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種植物組織培養方法，具體涉及一種長壽花抑菌組培方法，屬生物
【技術領域】。
【背景技術】
[0002] 長壽花（Kalanchoe bolssfeldiana)又名紅景天，是景天科和枷藍菜屬多年生肉 質草本，喜溫暖、陽光充足、通風條件好的環境。長壽花耐干旱，要求土壤疏松、肥沃、排水良 好。長壽花的葉片密集翠綠，花色豐富，有紅、黃、橙紅、粉紅、緋紅、桃紅等，花期長2?3個 月，臨近圣誕節開花，花朵細密擁簇成團，整體觀賞效果好，是最受人們喜愛的室內盆栽花 卉。長壽花在中國栽培的時間不長，多數是從國外引進優良品種，借助于組織培養技術具有 繁殖系數高、周期短、成本低等優點，迅速地繁殖出所需要的大量花卉新品種種苗，以滿足 大批量現代化溫室生產的需求，并使其在質量上達到更高標準。
[0003] 長壽花組織培養，一方面可以擴大其繁殖系數，從而實現規模化繁殖；另一方面， 可以在保存其原有的優良性狀的基礎上，實現長壽花種苗的快速繁殖和壯苗生產。常規的 長壽花組織培養方法要求在無菌培養基中進行，無菌消毒耗能大，設施設備、供電成本、耗 材和人工成本高。如果長壽花組織培養能通過培養基改造，獲得既保證長壽花組織正常生 長，又具有殺菌、抗菌或抑菌功能的培養基，菌類也就不能在培養基中滋生。由于這種改造 后的培養基不需要進行高溫高壓滅菌，一方面可以降低長壽花組織培養對設施設備的要 求，尤其不需要高溫高壓滅菌所需配置的高壓鍋設備，縮減了投資成本，電能消耗也將大幅 度降低；另一方面，采用這種培養基開展長壽花組織培養，組培環節大為簡化，人工操作的 速度大幅提高，從而降低了人工成本。此外，由于改造后的培養基自身具有殺菌、抗菌或抑 菌作用，組織培養過程中的污染問題得到有效控制，長壽花組織培養無需在嚴格的無菌環 境中進行，從根本上簡化了長壽花組織培養。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種長壽花的抑菌組培方法。
[0005] 本發明的目的是通過以下方法實現的。
[0006] 本發明的長壽花抑菌組培方法，包括抑菌劑配制、培養容器消毒、培養基配制、誘 導培養、增殖培養、生根培養和瓶苗移栽，其特征在于：
[0007] 1.抑菌劑的配制：取20 %的次氯酸鈉溶液100ml，加2g乳酸鏈球菌素，加40g的 山梨酸鉀，再加4g過氯霉素，用蒸餾水定容到200ml ;即為抑菌劑；
[0008] 2.培養容器消毒：將培養瓶及瓶蓋在抑菌劑與水的體積比為1%。?2%。（ V / V ) 的水溶液中浸泡不少于l〇h,保存備用；
[0009] 3.培養基配制：誘導培養基為 MS+0. 5 ?1. 0mg/L6-BA+0. 1 ?0· 5mg/L ΝΑΑ+0. 5 ? 0· 6ml/L抑菌劑+20g/L蔗糖+3. 5g/L瓊脂粉，ρΗ5· 8 ;增殖培養基為MS+0. 5mg/L6-BA+0. 1? 0· 5mg/L ΝΑΑ+0. 5?0· 6ml/L抑菌劑+20g/L蔗糖+3. 5g/L瓊脂粉，ρΗ5· 8 ;生根培養基為 1/2MS+0. 5?0. 6ml/L抑菌劑+20g/L蔗糖+3. 5g/L瓊脂粉，pH5. 8 ;所述MS培養基為1962 年，Murashige和Skoog公開的MS培養基；所述6-BA，指6-節氨基噪吟；所述NAA，指-萘 乙酸；配制培養基時，先不加抑菌劑，按各培養基配方配齊其他原料后，定容、加熱至瓊脂粉 完全溶解，然后按各培養基配方添加抑菌劑，用lmol/L的NaOH或lmol/L的HC1調pH值至 5. 8,分裝到容器中，封口，冷卻凝固后備用。
[0010] 本發明的應用效果：
[0011] 1、本發明的不同抑菌劑濃度對培養基污染的影響：我們設計了 8種抑菌劑濃度的 對比試驗，培養基配制后15天統計培養基的污染率，結果如表1所示。試驗結果表明，抑菌 劑濃度為〇. 5ml/L以上，污染率均為0。
[0012] 表1本發明的不同抑菌劑濃度對培養基污染的影響
[0013]
【權利要求】
1. 一種長壽花抑菌組培方法，包括抑菌劑配制、培養容器消毒、培養基配制、誘導培養、 增殖培養、生根培養和瓶苗移栽，其特征在于： (1) 抑菌劑配制：取20%的次氯酸鈉溶液100ml，加2g乳酸鏈球菌素，加40g的山梨酸 鉀，再加4g過氯霉素，用蒸餾水定容到200ml ;即為抑菌劑； (2) 培養容器消毒：將培養瓶及瓶蓋在抑菌劑與水的體積比為1%。?2%。的水溶液中浸 泡不少于l〇h，保存備用； (3) 培養基配制：誘導培養基為MS+0. 5?L 0mg/L6-BA+0. 1?0· 5mg/L ΝΑΑ+0. 5? 0· 6ml/L抑菌劑+20g/L蔗糖+3. 5g/L瓊脂粉，ρΗ5· 8 ;增殖培養基為MS+0. 5mg/L6-BA+0. 1? 0· 5mg/L ΝΑΑ+0. 5?0· 6ml/L抑菌劑+20g/L蔗糖+3. 5g/L瓊脂粉，ρΗ5· 8 ;生根培養基為 1/2MS+0. 5?0. 6ml/L抑菌劑+20g/L蔗糖+3. 5g/L瓊脂粉，ρΗ5. 8 ;所述MS培養基為1962 年，Murashige和Skoog公開的MS培養基；所述6-BA，指6-節氨基噪吟；所述NAA，指-萘 乙酸；配制培養基時，先不加抑菌劑，按各培養基配方配齊其他原料后，定容、加熱至瓊脂粉 完全溶解，然后按各培養基配方添加抑菌劑，用lmol/L的NaOH或lmol/L的HC1調pH值至 5. 8,分裝到容器中，封口，冷卻凝固后備用。
2. 根據權利要求1所述的一種長壽花抑菌組培方法，其特征在于所述誘導培養基為 MS+1. 0mg/L6-BA+0. 2mg/L ΝΑΑ+0. 5ml/L 抑菌劑 +20g/L 蔗糖 +3. 5g/L 瓊脂粉，ρΗ5· 8。
3. 根據權利要求1所述的一種長壽花抑菌組培方法，其特征在于所述增殖培養基為 MS+0. 5mg/L6-BA+0. 2mg/L ΝΑΑ+0. 5ml/L 抑菌劑 +20g/L 蔗糖 +3. 5g/L 瓊脂粉，ρΗ5· 8。
4. 根據權利要求1所述的一種長壽花抑菌組培方法，其特征在于所述生根培養基為 1/2MS+0. 5ml/L 抑菌劑 +20g/L 蔗糖 +3. 5g/L 瓊脂粉，ρΗ5. 8。
【文檔編號】A01H4/00GK104094842SQ201410184113
【公開日】2014年10月15日 申請日期:2014年5月4日 優先權日:2014年5月4日
【發明者】林慶良, 陳曉英, 許莉萍, 高世宇 申請人:福建農林大學