一種添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，由以下重量份的原料制成：營養液40～50份，主料35～45份，蠶蛹粉4～11份，茉莉花渣8～15份。使用本發明的添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，在蛹蟲草子實體生長過程可以有效抑制雜菌生長，提高蛹蟲草的產量和質量，同時能增強蛹蟲草的抗氧化功效。此外，在本發明蛹蟲草子實體培養基中添加作為廢料處理的茉莉花渣價格低廉，實現資源充分利用，降低培養基18％以上成本。
【專利說明】一種添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基
【技術領域】
[0001] 本發明涉及食用菌培養基領域，特別涉及一種添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養 基。
【背景技術】
[0002] 蛹蟲草亦稱北蟲草或北冬蟲夏草，屬于真菌門、子囊菌亞門、肉座菌目、麥角菌科、 蟲草屬，寄生于夜蛾科等蛹體上，分布于世界各地，是一種國內外公認的既可食用又可藥用 的真菌。蛹蟲草與冬蟲夏草同屬異種，是我國分布最廣的具有藥用價值的兩種蟲草菌。研 究表明蛹蟲草與冬蟲夏草具有相同屬性，相似的藥理功能及詳盡的臨床效果，可替代冬蟲 夏草入藥。蛹蟲草中含有蟲草素、蟲草多糖、蟲草酸、腺苷等成分，具有增強免疫、抗氧化、抗 病毒、抗菌、明顯抑制腫瘤生長、預防治療腦血栓、腦溢血、腎功能衰竭，利尿、抑制血小板積 聚防止血栓形成，消除面斑，抗衰防皺、保護心臟、肝臟，抗痙等多種功能。
[0003] 野生蟲草資源有限，因此人們開始轉而研究用蟲草的人工栽培。蛹蟲草對于生長 環境的要求相對較低，人工培養相比之下較容易，目前主要以液體發酵形成菌絲體，通過人 工大規模固體培養獲得子實體，另外通過活體培養進行規模化蛹蟲草生產成為現實。蛹蟲 草在培養過程中，如果殺菌不好或者消毒不嚴，易發生細菌、酵母菌和霉菌等污染。若出現 細菌、酵母菌和霉菌污染，將對母鐘進一步純化，嚴重的將被淘汰。由此可見細菌、酵母菌和 霉菌對蛹蟲草的污染，將造成培養財力、物力損失,增加不必要的麻煩。尋找一種有抑菌功 能的培養基成為蛹蟲草培養基領域的新需求。
[0004] 茉莉花是一種天然高級香料植物。茉莉花渣是茉莉鮮花窨制花茶后的干燥花蕾， 或是提取精油后的廢棄花蕾，通常作為廢料處理。花茶窨制過程中，茶葉僅吸收茉莉花中的 芳香物質的一部分。花渣中仍存在大量有價值的芳香物質和微量元素，仍有很大的利用價 值。林金芳較早的研究了茉莉花渣的營養成分，認為茉莉花渣的營養價值類似略或優于麥 麩、米糠類。葉耀輝等研究發現10 %茉莉花渣可以代替2 %豆餅和85 %的麥麩，說明茉莉花 渣仍具有較高的營養價值。王發左較為體系地研究了茉莉花渣中的主要內含物成分，結果 表明茉莉花渣中含水分5. 97%、粗蛋白20. 8%、粗脂肪2. 4%、粗纖維12. 4%、水溶性碳水 化合物8. 04%、游離氨基酸3. 41 %、維生素 C0. 21%。游離氨基酸檢出15中，其中含人體必 需氨基酸6中；檢出蛋白水解氨基酸16種，其中人體必需氨基酸7中。王發左研究茉莉花渣 中除了含上述的天然產物成分，還含豐富的黃酮類物質，達3%以上。黃酮類化合物具有殺 菌、抗氧化、抗衰老、防癌抗癌、降血糖等多種生理活性。茉莉花在我國有較大的栽培面積， 資源豐富，窨制花茶和提取精油、浸膏產生大量的茉莉花渣，作為廢料處理，浪費資源。將茉 莉花渣應用在蛹蟲草子實體培養基中具有廣闊的市場前景和經濟價值。
【發明內容】
[0005] 本發明所要解決的技術問題是提供一種抑制雜菌生長，增強蛹蟲草抗氧化作用的 添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基。
[0006] 為實現上述目的，本發明采用如下步驟：
[0007] -種添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，由以下重量份的原料制成：營養液 40?50份，主料35?45份，蠶蛹粉4?11份，茉莉花渣8?15份。
[0008] 本發明的添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，優選由以下重量份的原料制成： 營養液44?47份，主料38?42份，蠶蛹粉7?9份，茉莉花渣10?13份。
[0009] 本發明所述的主料為大米、小麥、玉米、黃豆中的一種或者多種，當多種混合時， 可以是任意比例。在培養基中適當添加碳源，如大米、小麥、玉米、黃豆，有利于蛹蟲草合成 碳水化合物和氨基酸。
[0010] 本發明所述的營養液由以下重量份的原料制成：糖0. 7?1. 5份，酵母膏0. 7? 1. 2份，磷酸二氫鉀0. 01?0. 03份，硫酸鎂0. 01?0. 03份，檸檬酸銨0. 01?0. 03份，維 生素 B1 0. 001?0. 003份，水94?98份。一般通過添加無機鹽類來滿足蛹蟲草對礦物質 元素的需求，本發明優選硫酸鎂、磷酸二氫鉀，其中磷酸二氫鉀還有調節培養基的pH值作 用，將培養基調節為偏酸性，滿足蛹蟲草偏酸性需求。由于蛹蟲草不能合成必要維生素，適 當添加維生素有利于蛹蟲草的生長發育。在培養基中適當添加氮元素無機鹽，如檸檬酸 銨，促進蛹蟲草自身合成的蛋白質、核酸等有機氮以及銨鹽等無機氮。
[0011] 本發明所述的糖為葡萄糖或蔗糖。葡萄糖和蔗糖等為小分子糖類，也作為蛹蟲草 碳源，促進蛹蟲草合成碳水化合物和氨基酸的效果最好。
[0012]為抑制雜菌生長，增強蛹蟲草抗氧化作用，本發明在培養基中添加茉莉花渣，本發 明所述的茉莉花渣是茉莉鮮花窨制花茶后的干燥花蕾，或是提取精油、浸膏后的干燥花蕾。
[0013] 本發明添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基的制備，步驟如下：
[0014] (1)原料前處理：將茉莉花渣經粉碎成粉末后，過20?50目篩，再將主料粉碎成 細粉，過50?100目篩；稱取糖、酵母膏、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、檸檬酸銨，加入水，邊攪拌邊 加熱至90°C?10(TC，持續攪拌至原料全部溶解，冷卻至環境溫度，加入維生素 B1，得營養 液；
[0015] (2)原料混合：將主料細粉、茉莉花渣粉末、蠶蛹粉混合均勻，將混合物邊攪拌邊 加入營養液中，攪拌均勻，得混合液；
[0016] (3)裝瓶：將混合液分裝至培養容器中，裝入量為培養容器實際容量的2/3 ；
[0017] (4)殺菌：將裝有混合液容器在119°C?124°C高溫下殺菌30?45min，冷卻至 25°C?27°C，得到添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基。
[0018] 與現有技術相比，本發明的有益效果在于：
[0019] 1、茉莉花渣中含有豐富的黃酮和黃酮類成分，茉莉花渣中的黃酮和黃酮類成分對 普通變形桿菌、葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、木霉、根霉有一定的抑制作用，將茉莉 花渣添加到蛹蟲草子實體培養基中達到抗菌目的。
[0020] 2、茉莉花渣中的成分有抗氧化作用，本發明通過在蛹蟲草子實體培養基中加入茉 莉花渣，可以增強蛹蟲草抗氧化功效。
[0021] 3、廣西的東南部橫縣盛產茉莉花，產量和質量居全國之首，窨制花茶和提取精油、 浸膏產生大量的茉莉花渣，作為廢料處理，浪費資源，本發明在蛹蟲草子實體培養基中添加 茉莉花渣，可以充分利用茉莉花渣，變廢為寶，實現資源的循環利用，提升茉莉花渣的價值， 降低蛹蟲草子實體培養基18%以上成本。
【具體實施方式】
[0022] 以下結合實施例對本發明作進一步說明，但本發明并不局限于這些實施例。
[0023] 實施例1
[0024] 一種添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，由以下重量份的原料制成：營養液40 份，大米35份，蠶蛹粉4份，茉莉花渣8份。
[0025] 營養液，由以下重量份的原料制成：葡萄糖0.7份，酵母膏0.7份，磷酸二氫鉀 0.01份，硫酸鎂0.01份，檸檬酸銨0.01份，維生素 B1 0. 001份，水94份。
[0026] 營養液的制備：稱取葡萄糖、酵母膏、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、檸檬酸銨，加入水，邊攪 拌邊加熱至90°C，持續攪拌至原料全部溶解，冷卻至環境溫度，加入維生素 B1，得營養液。
[0027] 添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基的制備，步驟如下：
[0028] (1)原料前處理：將茉莉花渣經粉碎成粉末后，過20目篩，再將大米粉碎成細粉， 過50目篩；
[0029] (2)原料混合：將大米細粉、茉莉花渣粉末、蠶蛹粉混合均勻，將混合物邊攪拌邊 加入營養液中，攪拌均勻，得混合液；
[0030] (3)裝瓶：將混合液分裝至培養容器中，裝入量為培養容器實際容量的2/3 ；
[0031] (4)殺菌：將裝有混合液容器在119°C高溫下殺菌45min，冷卻至25°C，得到添加茉 莉花渣的蛹蟲草子實體培養基。
[0032] 實施例2
[0033] -種添加茉莉花洛的蛹蟲草子實體培養基，由以下重量份的原料制成：營養液44 份，大米25份，黃豆13份，蠶蛹粉7份，茉莉花渣10份。
[0034] 營養液，由以下重量份的原料制成：蔗糖0. 9份，酵母膏0. 9份，磷酸二氫鉀0. 02 份，硫酸鎂0. 02份，檸檬酸銨0. 02份，維生素 B1 0. 002份，水96份。
[0035] 營養液的制備：稱取蔗糖、酵母膏、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、檸檬酸銨，加入水，邊攪拌 邊加熱至95°C，持續攪拌至原料全部溶解，冷卻至環境溫度，加入維生素 B1，得營養液。
[0036] 添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基的制備，步驟如下：
[0037] (1)原料前處理：將茉莉花渣經粉碎成粉末后，過30目篩，再將大米、黃豆粉碎成 細粉，過60目篩；
[0038] (2)原料混合：將大米細粉、黃豆細粉、茉莉花渣粉末、蠶蛹粉混合均勻，將混合物 邊攪拌邊加入營養液中，攪拌均勻，得混合液；
[0039] (3)裝瓶：將混合液分裝至培養容器中，裝入量為培養容器實際容量的2/3 ；
[0040] (4)殺菌：將裝有混合液容器在121°C高溫下殺菌40min，冷卻至26°C，得到添加茉 莉花渣的蛹蟲草子實體培養基。
[0041] 實施例3
[0042] 一種添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，由以下重量份的原料制成：營養液47 份，玉米12份，小麥20份，黃豆10份，蠶蛹粉9份，茉莉花渣13份。
[0043] 營養液，由以下重量份的原料制成：蔗糖1. 2份，酵母膏1. 0份，磷酸二氫鉀0. 03 份，硫酸鎂0. 03份，檸檬酸銨0. 03份，維生素 B1 0. 003份，水97份。
[0044] 營養液的制備：稱取蔗糖、酵母膏、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、檸檬酸銨，加入水，邊攪拌 邊加熱至95°C，持續攪拌至原料全部溶解，冷卻至環境溫度，加入維生素 Bl，得營養液。
[0045] 添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基的制備，步驟如下：
[0046] (1)原料前處理：將茉莉花渣經粉碎成粉末后，過40目篩，再將玉米、小麥、黃豆粉 碎成細粉，過80目篩；
[0047] (2)原料混合：將玉米細粉、小麥細粉、黃豆細粉、茉莉花渣粉末、蠶蛹粉混合均 勻，將混合物邊攪拌邊加入營養液中，攪拌均勻，得混合液；
[0048] (3)裝瓶：將混合液分裝至培養容器中，裝入量為培養容器實際容量的2/3 ；
[0049] (4)殺菌：將裝有混合液容器在122°C高溫下殺菌35min，冷卻至27°C，得到添加茉 莉花渣的蛹蟲草子實體培養基。
[0050] 實施例4
[0051] -種添加茉莉花洛的蛹蟲草子實體培養基，由以下重量份的原料制成：營養液50 份，大米25份，玉米20份，蠶蛹粉11份，茉莉花渣15份。
[0052] 營養液由以下重量份的原料制成：葡萄糖1. 5份，酵母膏1. 2份，磷酸二氫鉀0. 02 份，硫酸鎂0. 02份，檸檬酸銨0. 02份，維生素 B1 0. 002份，水98份。
[0053] 營養液的制備：稱取葡萄糖、酵母膏、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、檸檬酸銨，加入水，邊攪 拌邊加熱至100°c，持續攪拌至原料全部溶解，冷卻至環境溫度，加入維生素 B1，得營養液。
[0054] 添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基的制備，步驟如下：
[0055] (1)原料前處理：將茉莉花渣經粉碎成粉末后，過50目篩，再將大米、玉米粉碎成 細粉，過100目篩；
[0056] (2)原料混合：將大米細粉、玉米細粉、茉莉花渣粉末、蠶蛹粉混合均勻，將混合物 邊攪拌邊加入營養液中，攪拌均勻，得混合液；
[0057] (3)裝瓶：將混合液分裝至培養容器中，裝入量為培養容器實際容量的2/3 ；
[0058] (4)殺菌：將裝有混合液容器在124°C高溫下殺菌30min，冷卻至25°C，得到添加茉 莉花渣的蛹蟲草子實體培養基。
[0059] 對比例
[0060] 一種蛹蟲草子實體培養基，由以下重量份的原料制成：營養液44份，大米30份，黃 豆15份，蠶蛹粉9份。
[0061] 營養液，由以下重量份的原料制成：蔗糖0. 9份，酵母膏0. 9份，磷酸二氫鉀0. 02 份，硫酸鎂0. 02份，檸檬酸銨0. 02份，維生素 B1 0. 002份，水96份。
[0062] 營養液的制備：稱取蔗糖、酵母膏、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、檸檬酸銨，加入水，邊攪拌 邊加熱至95°C，持續攪拌至原料全部溶解，冷卻至環境溫度，加入維生素 B1，得營養液。
[0063] 蛹蟲草子實體培養基的制備，步驟如下：
[0064] (1)原料前處理：將大米、黃豆粉碎成細粉，過60目篩；
[0065] (2)原料混合：將大米細粉、黃豆細粉、蠶蛹粉混合均勻，將混合物邊攪拌邊加入 營養液中，攪拌均勻，得混合液；
[0066] (3)裝瓶：將混合液分裝至培養容器中，裝入量為培養容器實際容量的2/3 ；
[0067] (4)殺菌：將裝有混合液容器在121°C高溫下殺菌40min，冷卻至26°C，得到蛹蟲草 子實體培養基。
[0068] 試驗例1:本發明添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基對雜菌的抑制作用
[0069] 1、培養基液體制備：將本發明實施例1、實施例2、實施例3、實施例4、對比例提取 三次，合并提取液，濃縮至一定體積，加 3倍95%的乙醇沉淀，取上清液濃縮、干燥，得實施 例1、實施例2、實施例3、實施例4、對比例培養基粗提物備用。
[0070] 2、供試菌種及其純化培養與鑒定：
[0071] 變形桿菌、葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌，由廣西大學動物科技學院提供。
[0072] 菌種采用連續劃線法進行純化，培養后的菌落采用革蘭氏染色法進行鑒別，鑒別 后的菌種斜面培養、備用。
[0073] 革蘭氏染色法：細菌先經堿性染料結晶紫染色，而經碘液媒染后，用酒精脫色，在 一定條件下有的細菌紫色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細菌分為兩大類，前者叫做革 蘭氏陽性菌，后者為革蘭氏陰性菌。為觀察方便，脫色后再用一種紅色染料如堿性蕃紅、稀 釋復紅等進行復染。陽性菌仍帶紫色，陰性菌則被染上紅色。有芽胞的桿菌和絕大多數的 球菌，以及所有的放線菌和真菌都呈革蘭氏正反應；弧菌，螺旋體和大多數致病性的無芽胞 桿菌都呈現負反應。
[0074] 3、細菌培養基的配制：
[0075] 采用牛肉膏蛋白胨培養基，為了增加細菌的生長速度，每lkg水中加入10g葡萄糖 以對培養基進行改良，0. IMpa滅菌20min，制成平板。
[0076] 4、供試菌液的制備：
[0077] 挑取經純化和鑒定的菌落，接種于普通肉湯培養基中，36°C恒溫振蕩培養至渾濁。 然后吸取一定量菌液接種于數支大試管中，重復上述條件培養。菌液10倍稀釋，分別取 0. lml涂于平板，36°C恒溫培養，菌落形成后計數，制成5X 108CFU/ml菌液。
[0078] 4、打孔器法測定本發明添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基對雜菌的抑制作 用：
[0079] 用R = 0. 6cm的打孔器在平板上打孔，涂布己經準備好的菌液，然后在孔中加入濃 度為100g/L的不同培養基備用粗提物的溶液，37°C恒溫培養2?3天后觀察，測其抑菌圈 的大小。
[0080] 6、試驗結果：
[0081] 表1加入不同蛹蟲草子實體培養基溶液抑菌圈半徑的大小統計單位：cm
[0082]
【權利要求】
1. 一種添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，其特征在于，由以下重量份的原料制成： 營養液40?50份，主料35?45份，蠶蛹粉4?11份，茉莉花渣8?15份。
2.根據權利要求1所述的添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，其特征在于，由以下 重量份的原料制成：營養液44?47份，主料38?42份，蠶蛹粉7?9份，茉莉花渣10? 13份。
3.根據權利要求1或2所述的添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，其特征在于：所 述的主料為大米、小麥、玉米、黃豆中的一種或者多種。
4.根據權利要求1或2所述的添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，其特征在于，所 述的營養液由以下重量份的原料制成：糖0. 7?1. 5份，酵母膏0. 7?1. 2份，磷酸二氫 鉀0.01?0. 03份，硫酸鎂0.01?0. 03份，檸檬酸銨0.01?0. 03份，維生素 B1 0. 001? 0. 003份，水94?98份。
5.根據權利要求1或2所述的添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，其特征在于：所 述的糖為葡萄糖或蔗糖。
6.根據權利要求1或2所述的添加茉莉花渣的蛹蟲草子實體培養基，其特征在于：所 述的茉莉花渣是茉莉鮮花窨制花茶后的干燥花蕾，或是提取精油、浸膏后的干燥花蕾。
【文檔編號】C05G3/00GK104045461SQ201410311196
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年6月30日 優先權日:2014年6月30日
【發明者】王運鳳 申請人:桂林豐茂源農業技術開發有限公司