一種四季桂組培快繁方法
【專利摘要】本發明為一種四季桂組培快繁的方法。該方法通過組織培養離體的四季桂外植體，誘導其在培養瓶中生長發根，從而大大提高其增殖系數，縮短育苗周期，達到快速繁育的目的。本技術的實施包括以下具體步驟：取四季桂當年生半木質化或木質化莖尖，用75％的酒精和0.1％的升汞進行消毒；將消毒后的外植體接種于初代培養基中；培養10～20天后，將長勢健壯未染菌的外植體轉移至繼代培養基中繼續培養；待腋芽萌發生長至1～2cm左右，將外植體轉入生根培養基；將誘發出不定根的無菌苗進行3-5天的煉苗后，移栽至含營養土的塑料缽內，溫室培養后獲得成苗。
【專利說明】一種四季桂組培快繁方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于農林業【技術領域】，具體涉及一種四季桂組培快繁的方法。
【背景技術】
[0002]桂花的常規扦插因受季節時間、地區環境差異和桂花生長速度等因素的限制，存在生根慢、生長慢、擴繁周期長和擴繁倍數低等缺陷，尤其對于一些珍貴的優良品種，由于來源稀缺而導致遲遲不能推廣。利用植物組織培養技術來彌補常規育苗的不足，對于來源稀缺的珍貴桂花品種的推廣具有極大的應用價值。
【發明內容】
[0003]本發明的目的在于利用植物離體再生的特性，通過組織培養構建四季桂的離體再生系統，從而達到增加桂花擴繁增殖倍數，減少生根所需時間，提高產量。
[0004]本技術的實施包括以下具體步驟:
[0005](I)外植體的選取和消毒:取四季桂當年生的莖尖，剪成小段后，用酒精和升汞進行消毒；
[0006](2)初代培養:配制初代培養基并滅菌，將消毒后的外植體在無菌操作臺上接種于初代培養基中，在光照培養室進行培養，每天光照14小時，溫度控制在為20?26°C ；
[0007](3)增殖繼代培養:初代培養10?20天后，將未染菌的外植體轉移至繼代培養基中繼續培養；
[0008](4)生根培養:繼代培養I個月左右，將腋芽萌發長度超過Icm的外植體轉移至生根培養基中繼續培養；
[0009](5)煉苗移栽:生根20天后，將生根的培養瓶移至大棚并敞開瓶口，煉苗3?5天后，將瓶苗移出培養瓶洗凈附著的培養基，最后移至裝有營養土的塑料缽中。
【具體實施方式】
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[0010](I)外植體的選取和消毒:選取當年生半木質化或木質化的四季桂莖尖，取回后用肥皂清洗2?3遍，再用流水沖洗0.5?I小時，之后在無菌操作臺上用消過毒的鑷子和解剖刀將外植體切成I?2厘米長的小段，每段至少含一個腋芽，用消毒的紗布包裹住以75%的酒精處理10?30秒，再用0.1 %的升汞處理3?10分鐘，最后用無菌水漂洗3?6遍。
[0011](2)初代培養:將消毒處理后的外植體在無菌操作臺上接入初代培養基中，在光照培養室進行培養，每天光照14小時，溫度控制在為20?26°C ;培養基成份為B5基礎培養基+3%的蔗糖+0.7%的瓊脂粉，pH為5.8，并添加10%的桂花葉浸出物，培養基配制好后進行高壓滅菌；所述桂花葉浸出物用新鮮桂花葉1g在研缽中研磨碎后，加入10ml水混合后用濾紙過濾，取濾液。
[0012](3)增殖繼代培養:初代培養10?20天后，將未染菌的外植體轉移至繼代培養基中繼續培養，每兩周更新一次培養基，繼代時截去底端褐化部分I?2mm ;繼代培養基的成份是在初代培養基的基礎上添加I?2mg/L的6-芐氨基嘌呤和0.2?0.5mg/L的吲哚丁酸。
[0013](4)生根培養:繼代培養I個月左右，將腋芽萌發長度超過Icm的外植體轉移至生根培養基中繼續培養，生根培養時，先進行5?10天左右的暗培養，再移至光照培養室進行正常培養；生根培養基的成份是在初代培養基的基礎上添加I?2mg/L的萘乙酸和2?3mg/L的B引哚丁酸。
[0014](5)煉苗移栽:生根20天后，將生根的培養瓶移至大棚并敞開瓶口進行煉苗，煉苗時在瓶內噴灑10%的多菌靈，保持其濕度不低于70%，煉苗3?5天后，將瓶苗移出培養瓶洗凈附著的培養基，最后移至裝有營養土的塑料缽中；營養土宜采用肥沃的黃土并添加少量陶粒，移栽前的營養土要用多菌靈澆透。
[0015]需要說明，根據上述說明書的闡述，本發明所屬領域的技術人員還可以對上述實施方式進行變更和修改。因此，本發明并不局限于上面所述的【具體實施方式】，對本發明的一些等同修改和變更也應當在本發明的權利要求的保護范圍。同時，本說明書中使用的一些特定的術語并不對本發明構成任何限制。
【權利要求】
1.一種四季桂組培快繁的方法，其主要技術實施步驟為: (1)外植體的選取和消毒:取四季桂當年生的莖尖，剪成小段后，用酒精和升汞進行消毒； (2)初代培養:配制初代培養基并滅菌，將消毒后的外植體在無菌操作臺上接種于初代培養基中，在光照培養室進行培養，每天光照14小時，溫度控制在為20?26°C ； (3)增殖繼代培養:初代培養10?20天后，將未染菌的外植體轉移至繼代培養基中繼續培養； (4)生根培養:繼代培養1個月左右，將腋芽萌發長度超過1cm的外植體轉移至生根培養基中繼續培養； (5)煉苗移栽:生根20天后，將生根的培養瓶移至大棚并敞開瓶口，煉苗3-5天后，將瓶苗移出培養瓶洗凈附著的培養基，最后移至裝有營養土的塑料缽中。
2.如權利要求1所述的四季桂組織培養快繁方法，其特征在于:選取當年生半木質化或木質化的四季桂莖尖，取回后用肥皂清洗2?3遍，在用流水沖洗0.5?1小時，之后在無菌操作臺上用75%的酒精處理10?30秒，再用0.1%的升汞處理3?10分鐘，最后用無菌水漂洗3?6遍。
3.如權利要求1所述的四季桂組織培養快繁方法，其特征在于:初代培養基成份為B5基礎培養基+3%的蔗糖+0.7%的瓊脂粉，pH為5.8，并添加10%的桂花葉浸出物，培養基配制好后進行高壓滅菌。
4.如權利要求1所述的四季桂組織培養快繁方法，其特征在于:繼代培養基的成份是在初代培養基的基礎上添加1?2mg/L的6-芐氨基嘌呤和0.2?0.5mg/L的吲哚丁酸；生根培養基的成份是在初代培養基的基礎上添加1?2mg/L的萘乙酸和2?3mg/L的吲哚丁酸。
5.如權利要求1所述的四季桂組織培養快繁方法，其特征在于:在生根培養時，先進行5?10天的暗培養，再移至光照培養室進行正常培養。
6.如權利要求1所述的四季桂組織培養快繁方法，其特征在于:煉苗時在瓶內噴灑10%多菌靈，保持其濕度不低于70%，移栽前的營養土要用多菌靈澆透。
【文檔編號】A01H4/00GK104351048SQ201410556952
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年10月14日 優先權日:2014年10月14日
【發明者】王迅, 蔡金術, 謝云軍, 向盈, 曹莉 申請人:深圳文科園林股份有限公司