一種烏塌菜細胞質雄性不育系及保持系的選育方法與流程

本發明屬于十字花科蕓薹屬蔬菜新品種選育技術領域，涉及一種烏塌菜細胞質雄性不育系及保持系的選育方法。

背景技術：

烏塌菜是一種十字花科蕓薹屬葉用蔬菜，現在烏塌菜品種的選育方法通常有三種途徑：一、常規品種；二、利用自交不親和系為母本培育的雜種一代；三、采用細胞質雄性不育系為母本培育的雜種一代，其雄性不育胞質主要是ogu CMS和pol CMS。Ogu CMS常表現黃化現象，而pol CMS的育性容易受到溫度的影響。在以雄性不育為主導的新品種選育中，長期的單一胞質類型容易造成發病率增加，進而影響作物產量。因此在以雄性不育系為母本的雜種優勢利用中尋找和使用更多的細胞質雄性不育類型是育種家一項長期的工作內容。

技術實現要素：

為了克服現有技術的上述缺點，本發明提供一種烏塌菜細胞質雄性不育系及保持系的選育方法，它能夠豐富烏塌菜中細胞質雄性不育系胞質類型，提高以細胞質雄性不育為母本的新品種選育安全性，本發明選育一種新的不育性穩定、徹底、不受溫度及光照條件影響的烏塌菜細胞質雄性不育系，為烏塌菜雜種優勢的利用提供新的種質資源。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：一種烏塌菜細胞質雄性不育系及保持系的選育方法，它以大白菜細胞質雄性不育系CMS65-7為母本，以保持系烏塌菜15-141為父本，雜交獲得F₁，通過多代連續回交，結合栽培試驗、抗性鑒定及育性鑒定得到了遺傳穩定、抗病性強、生長性狀優良的烏塌菜細胞質雄性不育系和保持系，繁殖該烏塌菜細胞質雄性不育系，得到的烏塌菜不育系CMS-72是不同于Ogu CMS、nap CMS、tour CMS的新型細胞質雄性不育系。具體選育步驟如下：

1、父本的選育

以韶關學院英東農業科學與工程學院多年選育的烏塌菜優良自交系10-222與10-327為親本，通過常規育種手段結合抗病性鑒定及長勢分析選育出15-141為父本材料；

2、母本的選育

Hau CMS是華中農業大學傅廷棟院士發現的一種不同于Ogu CMS、nap CMS、tour CMS新型細胞質雄性不育系，以該細胞質雄性不育系構建了大白菜細胞質雄性不育系（專利公開號為：CN 1849881A），本發明以該不育系材料CMS63-5為母本，進行不育系的選育；

3、不育系的選育

以CMS63-5為母本，15-141為父本，在抗病性鑒定及育性鑒定的基礎上，采用撥蕾授粉方法獲得F₁，再對F₁進行抗病性鑒定及育性鑒定，選擇抗病性良好的不育單株為母本（非輪回親本），15-141為父本（輪回親本），經過8次回交獲得BC₈F₁，將其命名為CMS-72，經育性鑒定為不育材料，表現型為抗病性強、長勢優良的烏塌菜不育系；

4、烏塌菜不育系及保持系的擴繁

以CMS-72為母本，15-141為父本，以網罩擴繁的方式進行雜交，CMS-72收獲的種子為不育胞質為hau CMS的烏塌菜不育系，15-141收獲的種子為烏塌菜的保持系。

本發明的積極效果是：

（1）本發明的烏塌菜細胞質雄性不育系的不育性非常穩定和徹底，該不育系不受溫度和光照條件影響，在中國韶關（短日照）和甘肅和政（長日照）連續4年8代種植的育性鑒定表明，其育性均表現0級，不育株率及不育度均為100%；

（2）本發明的烏塌菜細胞質雄性不育系沒有任何死蕾和苗期黃化現象；

（3）選育出的不育系及保持系抗病性好，長勢優良。

附圖說明

圖1為本發明選育過程結構示意圖。

具體實施方式

參見圖1，一種烏塌菜細胞質雄性不育系及保持系的選育及繁殖方法，它以大白菜細胞質雄性不育系CMS65-7為母本，以保持系烏塌菜15-141為父本，雜交獲得F₁，通過多代連續回交，結合栽培試驗、抗性鑒定及育性鑒定得到了遺傳穩定、抗病性強、生長性狀優良的烏塌菜細胞質雄性不育系和保持系，繁殖該烏塌菜細胞質雄性不育系，得到的烏塌菜不育系CMS-72是不同于Ogu CMS、nap CMS、tour CMS的新型細胞質雄性不育系。具體選育步驟如下：

一、父本的選育

1、將本單位選育的烏塌菜自交系10-222與10-327去雄雜交，得到F₁；

2、將F₁自交得到F₂，在F₂群體中進行抗病性試驗及株型觀察，選擇抗病性好、株型優異的多個F₃單株進入下一步選育；

3、在F₃群體中，進一步進行抗病性試驗及株型觀察，選擇優異F₄單株進行下一步選育；

4、在F₄單株中進行抗病性及株型觀察試驗，同時進行豐產性試驗，選擇抗病性好、株型及產量俱佳的F₅單株作為保持系，編號為15-141；

二、母本的選育

選用華中農業大學選育的大白菜細胞質雄性不育系（專利公開號為：CN 1849881A）為母本材料，經過育性鑒定及抗性試驗、長勢觀察，選擇長勢優良、抗病性好的不育單株為母本，編號為CMS63-5；

三、烏塌菜不育系CMS-72的選育

1、以CMS63-5為母本，15-141為父本，采用人工撥蕾授粉的方法獲得F₁，同時15-141套袋自交留種備用；

2、將F₁及15-141群體小區種植，進行抗病性試驗、株型觀察及育性鑒定，選擇株型好、抗病性強同時不育的單株為母本，選擇15-141中抗病性好，株型優良的單株為父本，采用人工撥蕾授粉方式進行雜交，獲得BC₁F₁群體；

3、重復2中步驟，以BC₁F₁中不育單株為母本，15-141為父本，獲得BC₂F₁群體；

4、重復3中步驟，以BC₂F₁中不育單株為母本，15-141為父本，獲得BC₃F₁群體；

5、在回交8代的基礎上，獲得BC₈F₁不育群體，其編號為CMS-72；

四、烏塌菜不育系CMS-72及保持系的擴繁

1、將CMS-72及15-141隔行種植，行數比例為3:1，待初花期以網罩方法進行繁種；

2、分別收獲CMS-72及15-141種子，第二年分別進行抗病性鑒定、長勢測定及育性鑒定，結果CMS-72所收獲的種子全部為不育單株，15-141上收獲種子全部為可育單株，并長勢好，抗病性強。CMS-72上所收獲種子為本發明中的不育系，15-141上所收獲種子為本發明中的保持系。