一種江蘺屬海藻的育苗方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及海藻的育苗方式，具體的說是一種江蘺屬海藻的育苗方法。
【背景技術】
[0002]我國是世界第一海藻大國，人工養殖的海藻產量占世界的70% ο近年來，我國藻類開發利用取得重大成就，以藻類為原料的食品加工、化工、保健品和海藻肥產業發展迅速，不論是產業規模還是出口貿易，在世界上都占重要地位，已經初步形成了從海藻育苗、栽培、加工到精加工的產業群。海藻產業已經成為我國海洋經濟重要的支柱產業之一。但是我國海藻養殖產業在漁業中的比重仍然相對較小，產業科技含量偏低，產業基礎還存在一些制約產業進一步發展的薄弱環節。
[0003]江蘺屬大型海藻是一類重要的經濟海藻，是瓊膠產業的主要原料，也是經濟動物養殖的重要飼料。目前我國栽培的江蘺主要有二種類型:一種是龍須菜，主要在南方(如福建和廣東沿海)淺海區浮筏夾苗栽培；另一種是原產于海南的細基江蘺繁枝變種，在南方半咸淡的池塘中撒播栽培。此外，重要的江蘺屬產瓊膠海藻還有真江蘺、脆江蘺和菊花心江蘺等。目前，江蘺養殖已成為我國第三大海藻養殖產業。但是，與已經相對成熟海帶和紫菜養殖業不同，由于孢子發育需經過盤狀體時期，發育過程長，成活率低，目前江蘺屬海藻的苗種來源仍依靠營養繁殖。如:龍須菜的栽培采用“夾苗”模式:將龍須菜成菜夾在苗繩上用作種菜，一般每畝用量達100?200千克，且下海20天左右必須收回重新夾苗。如果每畝栽培面積按10公斤的“種”菜計算，10000畝的栽培面積一次性就需要100噸的龍須菜；在臺灣地區池養江蘺的苗種用量通常是每畝300Kg，海南島和廣東池塘內栽培細基江蘺繁枝變種的苗種用量達每畝500Kg以上。可靠的苗種供應是海藻養殖業能否持續、健康發展的先決條件之一。并且由于龍須菜在北方不能越冬，在南方不能度夏，從而形成了南北相互供應的局面。一方面，隨著江蘺養殖產業的不斷擴大，種菜的運輸費用高昂，且經常出現菜匱缺，另一方面，采用營養繁殖操作繁雜，勞動強度大，在我國勞動力成本日趨走高的今天，人力成本越來越高。
[0004]所謂孢子采苗，就是室內保留龍須菜的雌、雄配子體，然后利用龍須菜果孢子體放散的果孢子以及四分孢子體放散的四分孢子進行采苗的技術。具體地說，就是在育苗池中將雌、雄配子體混合培養，雌配子體性成熟后產生果胞(卵子)，雄配子體性成熟后產生精子；雌配子體上的果胞受精后形成合子，合子進一步發育成果孢子體，果孢子體成熟后放散果孢子；果孢子進一步發育為四分孢子體，四分孢子體成熟后大量放散四分孢子。使用孢子采苗，大幅度減少“種菜”數量，并降低保種成本保證生產過程的集約化和延續性。然而，現有技術是將直接將孢子附著與基質(如苗繩、石塊等)上養殖，這樣育苗占用育苗室的面積大，控溫能耗高，苗量不足，成活率低，育苗周期長，幼苗個體小，生長緩慢，所需育苗池面積大。
[0005]因而現急需能夠推廣并能大大促進江蘺屬海藻的孢子育苗在海藻養殖業中應用的方法。
【發明內容】
[0006]本發明目的在于提供一種江蘺屬海藻的育苗方法。
[0007]為實現上述目的，本發明采用技術方案為:
[0008]一種江蘺屬海藻的育苗方法:
[0009]I)種藻前處理:將清洗的成熟江蘺藻體用次氯酸鈉消毒藻體3?5min，消毒后在煮沸過的淡水刷洗，而后置于煮沸過的海水中作為種藻備用；
[0010]2)陰干刺激:將種藻放在空氣流通較好的陰涼處進行陰干刺激30?70min，脫水率控制在20%?50% ;
[0011]3)孢子釋放:在光照強度1000-20001UX的光照條件下，將上述陰干刺激后種藻置于承裝海水并底部鋪有無毒光滑平板的容器中，使藻體吸水后孢子自然釋放，待附著孢子平均密度達到每平方厘米50-80個時取出種藻；并向海水培養液中加入6-10ppm 二氧化鍺，光周期12:12，溫度為22±5°C條件下靜置培養2-3天；
[0012]4)盤狀體生長:上述孢子釋放的孢子在2000-40001ux的光照強度，12:12的光周期，22±5°C的溫度下，靜置進一步培養6-8天，而后將發育中的盤狀體剝離置于承裝海水的容器中，并向海水培養液中加入40-80ppm 二氧化鍺，懸浮培養10-15天；
[0013]所述每立方海水中添加4-8ppm的NO3-N和0.4-0.8ppm的PO4-P ；
[0014]5)擴大培養:將上述培養的盤狀體組織用切碎，置于承裝海水的容器中，進行循環擴大種質培養，將切碎的組織置于承裝海水的容器中，并向海水中加入6-10ppm 二氧化鍺，在2000-40001ux的光照強度，12:12的光周期，22±5°C的溫度下懸浮培養10-15天，此步驟可循環進行，從而實現種質擴大培養；
[0015]所述每立方米海水中添加4-8的NO3-N和0.4-0.8ppm的PO4-P ；
[0016]6)分級培養:將上述擴大培養獲得的組織在加入6-10ppm 二氧化鍺和0.2_lmg/L生長素(IAA)的海水中，以2000-40001UX的光照強度，12:12的光周期，22±5°C的溫度下培養，培養的過程中通入空氣使盤狀體保持懸浮狀態，培養至直立枝開始形成，而后調節光強至3000-40001ux，在5-10g/L的培養密度下，使苗種不斷生長，在直立枝長度達到4_5cm后可用于海上養殖。
[0017]上述海水均為經過多次煮沸消毒的消毒海水，其鹽度為15-30%。。
[0018]所述采集成熟江蘺藻體切段，剪除基部污染嚴重的藻體，取藻體表面光滑，顏色鮮艷，無明顯附著物和壞死組織的藻段作為種藻，洗凈，去除雜藻和其他附生物；將挑取的種藻在煮沸過的淡水中刷洗3-5遍，然后用2-5%的次氯酸鈉消毒種藻，進一步去除可能殘留的雜藻和原生動物。
[0019]所述步驟3)靜置培養2-3天后，在附著有孢子的無毒光滑平板上撒一層薄薄的經過煮沸消毒處理的細沙，同時向海水培養液中加入40ppm 二氧化鍺。
[0020]所述擴大培養獲得的盤狀體或盤狀體培養物在10°C弱光(光強< 501ux)條件下靜置保存。
[0021]本發明所具有的優點:
[0022]本發明整個孢子育苗過程在較小而可控的立體空間實現，育苗量大，成活率高達90% -100%，幼苗生長快，出苗率高，在30-40天時可培養出大小均勻，體長5cm的適養規格的江蘺苗種。同時獲得的懸浮盤狀體培養物可用于長期保種，以及褪化苗種復壯，解決龍須菜種質退化問題，建立瓊膠含量高、生長勢強等經濟性狀優勢明顯的龍須菜基礎種群體系。本發明也可用于其他經歷盤狀體(匍匐組織)發育生物，如石花菜等。
【具體實施方式】
[0023]通過以下實施例，對本發明作進一步具體說明。但是本發明絕非僅限于此。
[0024]其中海水均為經過多次煮沸消毒的消毒海水，或是按照所需鹽度要求用淡水配好鹽度為15-30%。半咸水經多次煮沸消毒后待用。
[0025]實施例1
[0026]1.種藻準備:采集成熟龍須菜藻體(果孢子體、四分孢子體)，選取發育健壯，成熟度較好的藻株，剪掉藻體基部表面附著有大量雜藻的老枝部分，取藻體表面光滑，顏色鮮艷，無明顯附著物和壞死組織的藻段作為種藻，洗凈，去除雜藻和其他附生物；
[0027]2.種藻清洗:將挑取的藻體在煮沸過的淡水中刷洗3遍，然后用3%次氯酸鈉消毒藻體4min，進一步去除可能殘留的雜藻和原生動物，最后在煮沸過的淡水沖洗后置于煮沸過的海水中備用；
[0028]3.陰干刺激:將種菜放在空氣流通較好的陰涼處進行陰干刺激50min，脫水率控制在 20-30% ；
[0029]4.孢子釋放:種菜經陰干刺激后，放裝有鹽度為30%。的消毒海水，且底部鋪有玻璃板的容器中，讓孢子自然脫落在玻璃板上，然后將藻體和生殖枝取出，靜置培養，光照強度15001UX，光周期12:12，溫度為20 ± 2°C，靜置培養2-3天后，撒上一層薄薄的經過煮沸消毒處理的細沙，同時向海水培養液中加入40ppm 二氧化鍺，以保護開始分裂的孢子免受直射光的傷害，并進一步去除可能存在的雜藻，使用此方法孢子的成活率可達90-100% ;
[0030]所述容器中的消毒海水每立方米內添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P ；
[0031]5.盤狀體生長，上述附著的孢子在25001ux的光照強度，12:12的光周期，20±2°〇的溫度下，靜置進一步培養6-8天，而后將發育中的盤狀體從玻璃板上用軟毛刷刷下，置于承裝有鹽度為30%。的消毒海水的錐形瓶中，并向培養液中加入40ppm 二氧化鍺，懸浮培養10-15 天。
[0032]所述容器中的消毒海水每立方米內添加4ppm的NO3-N和0.4ppm的PO4-P ；
[0033]6.擴大培養:將上述培養的盤狀體組織用搗碎機切碎，置于承裝鹽度為30%。的消毒海水的錐形瓶中，將切碎的組織置于承裝海水的容器中，并向海水培養液中加入1ppm二氧化鍺，在25001ux的光照強度，12:12的光周期，20±2°C的溫度下懸浮培養10-15天，此步驟循環進行，從而實現種質擴大培養；
[0034]由于盤狀體及其培養物本身具有耐儲存和逆境的特性，并且在低溫低光條件下，保存組織只進行微弱的光合和呼吸作用，因此可以長期保存。培養獲得的盤狀體或盤狀體培養物可在10°c弱光條件下靜置保存；將采