北美紅杉離體生根培養方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及一種北美紅杉離體生根培養方法，屬于杉木培養繁殖技術領域。
【背景技術】
[0002] 北美紅杉原產于美國加尼福尼亞州海岸，最早由尼克松訪華時引種至中國杭州。 北美紅杉屬于特大喬木，在原產地可高達110米。北美紅杉樹姿雄偉，枝葉密生，生長迅速。 適用于湖畔、水邊、草坪中孤植或群植，景觀秀麗，也可沿園路兩邊列植，氣勢非凡，是非常 優良的園林樹種。
[0003] 但由于北美紅杉桿插成活率低，組織培養方法生根階段困難，國內繁殖的情況罕 見報道，因此克服北美紅杉培育技術難關，提高離體培養效率，對中國園林植物的豐富具有 重要意義。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是為了解決北美紅杉桿插成活率低，組織培養生根階段較困難的問 題，提供了一種方法簡便易于操作，生根速度較快，成活率較高的北美紅杉離體生根培養方 法。 陽〇化]本發明采用如下技術方案：一種北美紅杉離體生根培養方法，包括如下步驟：
[0006] (1)無菌材料的獲得：選取當年生的北美紅杉枝條為材料，經過消毒、清洗后用無 菌濾紙吸干多余水分后接種到MS培養基中，20~22天后蔽芽長出無菌苗；
[0007] (2)增殖培養：將無菌苗作為材料，切下頂芽或蔽芽作為外植體，接種至增殖培養 基上，所述增殖培養基的為MS+0. 1~1.Omg/L6-節氨基腺嚷嶺+0. 1~1.Omg/L糞乙酸 +30g/L薦糖巧g/L瓊脂粉，P冊.5~6,培養25~30天時間；
[0008] (3)壯苗：將增殖的無菌苗切下后，移入壯苗培養基，壯苗培養基為MS+0. 1~0.4 糞乙酸，P冊.5~6,培養2~3周，溫度為16~25°C; 陽009] (4)生根培養基的配制：將MS培養基中的大量元素、微量元素、肌醇、有機物的用 量分別減至常規用量的1/4,配制成1/4MS培養基；
[0010] (5)生根培養：將壯苗后的組培苗接種到生根培養基上，生根培養基為 1/4MS+0. 1~1.Omg/L嗎I噪下酸+30g/L薦糖巧g/L瓊脂粉，P冊.5~6,12~16天后，基部 長出3~6條主根，主根長度均值達到4. 5~6cm; 1] (6)煉苗與移栽：將高度在2~5cm，根系長度在3~6cm的組培苗進行煉化打開 瓶蓋3~7天，使其適應外界環境，3~7天后洗掉根部的生根培養基，用800~1000倍的 多菌靈浸泡1~lOmin，移栽至大棚內，覆膜保濕，適度遮光。
[0012] 進一步的，所述步驟（4)中生根培養基的培養條件溫度為20~24°C。
[0013] 進一步的，所述步驟（1)中的消毒、清洗方法為：在超凈工作臺上用70~75%的 酒精消毒10~40s，用無菌水沖洗3~5次，然后用次氯酸鋼溶液消毒10~30min，用無菌 水沖洗4~6次。
[0014] 進一步的，所述大量元素為硝酸鐘、硝酸錠、屯水硫酸儀、憐酸二氨鐘和二水氯化 巧。
[0015] 進一步的，所述微量元素為四水硫酸儘、屯水硫酸鋒、棚酸、艦化鐘、屯水鋼酸鋼、 五水硫酸銅和六水氯化鉆。
[0016] 進一步的，所述有機物為甘氨酸、鹽酸化唉醇、鹽酸硫錠素和煙酸。
[0017] 本發明培養方法簡單，步驟易于操作，將北美紅杉離體生根中壯苗的步驟提前到 生根培養之前，有效的提高了組培苗移栽后的成活率，將生根培養基進行改良，能夠加速北 美紅杉離體培養時的生根效率。
【具體實施方式】
[0018] 下面將結合具體實施例對本發明作進一步的描述。
[0019] 實施例一：一種北美紅杉離體生根培養方法，包括如下步驟：
[0020] (1)無菌材料的獲得：選取當年生的北美紅杉枝條為材料，在超凈工作臺上用 75%的酒精消毒20s，用無菌水沖洗3次，然后用次氯酸鋼溶液消毒lOmin，用無菌水沖洗4 次，然后用無菌濾紙吸干多余水分后接種到MS培養基中，20天后蔽芽長出無菌苗；
[0021] (2)增殖培養：將無菌苗作為材料，切下頂芽或蔽芽作為外植體，接種至增殖培養 基上，增殖培養基的為MS+0.1 mg/L 6-節氨基腺嚷嶺+0.1 mg/L糞乙酸+30g/L薦糖巧g/L 瓊脂粉，P冊.5,培養30天時間，溫度在16°C ;
[0022] (3)壯苗：將增殖的無菌苗切下后，移入壯苗培養基，壯苗培養基為MS+0. 1糞乙 酸，P冊，培養2周，溫度16°C。
[0023] (4)生根培養基的配制：將MS培養基中的大量元素硝酸鐘、硝酸錠、屯水硫酸儀、 憐酸二氨鐘和二水氯化巧，微量元素四水硫酸儘、屯水硫酸鋒、棚酸、艦化鐘、屯水鋼酸鋼、 五水硫酸銅和六水氯化鉆，肌醇、有機物甘氨酸、鹽酸化唉醇、鹽酸硫錠素和煙酸的用量分 別減至常規用量的1/4,組成改良后的1/4MS培養基；
[0024] 妨生根培養：將步驟做中壯苗后的組培苗接種到生根培養基上，生根培養基為 1/4MS+0.1 mg/L嗎I噪下酸+30g/L薦糖巧g/L瓊脂粉，P冊.5,生根培養的溫度為20°C，16天 后基部長出3條主根； 陽0巧](6)煉苗與移栽：將高度在2cm，根系長度在3cm的組培苗進行煉苗，打開瓶蓋3 天，使其適應外界環境，3天后洗掉根部的生根培養基，用800倍的多菌靈浸泡lOmin，移栽 至大棚內，覆膜保濕，適度遮光。
[00%] 實施例二：一種北美紅杉離體生根培養方法，包括如下步驟：
[0027] (1)無菌材料的獲得：選取當年生的北美紅杉枝條為材料，在超凈工作臺上用 75%的酒精消毒40s，用無菌水沖洗4次，然后用次氯酸鋼溶液消毒20min，用無菌水沖洗5 次，然后無菌濾紙吸干多余水分后接種到MS培養基中，21天后蔽芽長出無菌苗；
[0028] (2)增殖培養：將無菌苗作為材料，切下頂芽或蔽芽作為外植體，接種至增殖培養 基上，所述增殖培養基的為MS+1. Omg/L 6-節氨基腺嚷嶺+1. Omg/L糞乙酸+30g/L薦糖 +7g/L瓊脂粉，P冊.8,培養28天時間，溫度在20°C ;
[0029](3)壯苗：將增殖的無菌苗切下后，移入壯苗培養基，壯苗培養基為MS+0. 4糞乙 酸，P冊.8,培養3周，溫度25°C ;
[0030] (4)生根培養基的配制：將MS培養基中的大量元素硝酸鐘、硝酸錠、屯水硫酸儀、 憐酸二氨鐘和二水氯化巧，微量元素四水硫酸儘、屯水硫酸鋒、棚酸、艦化鐘、屯水鋼酸鋼、 五水硫酸銅和六水氯化鉆，肌醇、有機物甘氨酸、鹽酸化唉醇、鹽酸硫錠素和煙酸的用量分 別減至常規用量的1/4,組成改良后的1/4MS培養