用于檢測子宮內膜癌的dna探針、基因芯片及其應用的制作方法
【專利摘要】本發明屬于生物【技術領域】,公開了一種檢測子宮內膜癌的DNA探針。本發明所述檢測子宮內膜癌的DNA探針具有序列表SEQ ID No.1至SEQ ID No.26所示的核苷酸序列,其檢測子宮內膜癌特異性強,靈敏度高。本發明還提供包含所述DNA探針的基因芯片。采用本發明所述基因芯片可實現對可能患子宮內膜癌的樣品的高通量、自動化及快速檢測,特異性強,可保證檢測結果的精確性,具有廣泛的應用前景。
【專利說明】用于檢測子宮內膜癌的DNA探針、基因芯片及其應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物【技術領域】,具體涉及用于檢測子宮內膜癌的DNA探針、基因芯片 及其應用。
【背景技術】
[0002] 子宮內膜癌,又稱為子宮體癌,是指原發于子宮內膜的一組上皮性惡性腫瘤,多 數起源于內膜腺體,稱子宮內膜腺癌或子宮內膜樣腺癌,是女性生殖道最常見的三大惡性 腫瘤之一,占女性全身惡性腫瘤7%,占女性生殖道惡性腫瘤的20%?30%,多見于老年 婦女。近年來發病率在世界范圍內有上升趨勢,僅次于子宮頸癌,而5年生存率卻逐年下 降。子宮內膜癌主要是根據病史、臨床檢查、病理檢查及各種輔助檢查結果確定診斷及臨床 分期,現今主要檢測方法包括B超檢查、診斷性刮宮、宮腔鏡檢查和淋巴造影,檢出率不高, 而且容易給病人造成痛苦。目前,子宮內膜癌尚沒有有效早期診斷與預后指標。
[0003] 基因芯片(GeneChip)是將大量的寡核苷酸分子固定于固相載體上形成DNA微點 陣,借助核苷酸分子雜交配對的特性對DNA樣品的序列信息進行高效解讀和分析。
[0004]基因芯片起源于20世紀80年代,近年來得到了迅猛的發展,但主要是應用于醫藥 和研究領域,應用于子宮內膜癌的早期檢測在我國尚屬首次,這將會極大促進子宮內膜癌 早期診斷的發展。
【發明內容】
[0005]本發明提供了用于檢測子宮內膜癌的DNA探針、基因芯片及其應用,應用該探針 和基因芯片檢測子宮內膜癌特異性好、靈敏度高、準確率高。
[0006] 本發明的用于檢測子宮內膜癌的DNA探針包括27個基因片段,參見序列表中SEQ ID No. 1至SEQ ID No. 27所示序列,其中第27種基因片段為質控基因。這27個基因片段 是針對子宮內膜癌的27個指標而設計的,利用27個基因片段共同來檢測子宮內膜癌基因 表達譜的改變,進而對子宮內膜癌進行偵檢和預后監控。表1為27個基因片段的名稱以及 對應的特異性引物。
[0007] 表1 27個基因片段及其對應的特異性引物
[0008]
【權利要求】
1. 一種用于檢測子宮內膜癌的DNA探針,具有SEQ ID No. 1至SEQ ID No. 26所示序 列。
2. -種用于子宮內膜癌檢測的基因芯片,通過將寡核苷酸探針固定在固相載體表面 形成,其特征在于,所述寡核苷酸探針包含權利要求1所述的DNA探針。
3. 根據權利要求2所述的基因芯片,其特征在于,所述寡核苷酸探針還包括陽性對照 探針和陰性對照探針。
4. 根據權利要求3所述的基因芯片,其特征在于,所述陽性對照探針為人的GAPDH, ACTIN基因片段。
5. 根據權利要求3所述的基因芯片,其特征在于,所述陰性對照不含任何基因序列。
6. -種用于檢測子宮內膜癌的試劑盒,包含權利要求1所述DNA探針。
7. 權利要求1所說的DNA探針、權利要求2-5任一所述的基因芯片、權利要求6所述的 試劑盒在制備檢測子宮內膜癌的試劑中的應用。
8. -種對可能含子宮內膜癌的樣品進行檢測的方法,包含以下步驟: 步驟1 :提取并擴增樣品的核酸序列,所述擴增將信標分子標記到擴增產物; 步驟2 :取步驟1所得擴增產物與固定于權利要求2-6任一項所述基因芯片上的探針 進行雜交; 步驟3 :根據所述信標分子采用相應的檢測方法對基因芯片進行掃描分析。
9. 根據權利要求8所述的方法,其特征在于,步驟1所述擴增步驟的引物為5'- AAG CAG TGG TAA CAA CGC AGA GT -3,。
10. 根據權利要求8所述的方法,其特征在于,所述信標分子可以為放射性核素、生物 素、地高辛、熒光素、膠體鐵、膠體金以及聯合標記。
【文檔編號】C12Q1/68GK104450887SQ201410636655
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月12日 優先權日:2014年11月12日
【發明者】車團結, 文惠方, 陳小蘭, 李琳, 張尚弟, 蔡傳勇 申請人:蘭州百源基因技術有限公司