皮膚病學的制劑的制作方法

專利名稱：皮膚病學的制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及治療皮膚病的制劑。特別是關于包含有甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物用于治療皮膚疾病的局部用制劑，可在整容外科前用作預防治療，或作為局部用的皮質類固醇的輔助治療用于整容。一個較佳的制劑含有三碘甲狀腺乙酸(TriAc)作為活性成分。
背景技術：
世界專利WO96/40048中提到甲狀腺激素及類甲狀腺激素化合物，特別是甲狀腺激素的類似物三磺甲狀腺乙酸([4-(4-羥基-3-碘苯氧基)-3-5-二碘苯]乙酸，CAS號碼51-24-1，下文稱為TriAc)，在用于局部用制劑中對皮膚病的治療具有生物活性。在建立的人皮膚模型中發現，TriAc可以調控一些對皮膚的結構和功能具有重要意義的基因的表達。各種不同的體內和體外試驗亦表明，其它的甲狀腺激素及類甲狀腺激素化合物具有與TriAc相似的功效。
皮膚病學活性的甲狀腺激素和類甲狀腺激素化合物有很多潛在的用途，包括對皮質類固醇引起的皮膚萎縮，光化性皮膚損傷，內部皮膚老化，皮膚褶皺，皮膚膠原缺乏，擦傷，蜂窩織炎，皮膚粗糙和皮膚瘢痕的治療。這些化合物可以愈合皮膚挫傷和小的傷口，增加皮膚厚度，防止有皮膚病的糖尿病人發生皮膚潰瘍。它們也可以用于有計劃的整容手術前的預防治療，例如二氧化碳激光換膚，也可以作為局部使用皮質類固醇的輔助治療用于牛皮癬、濕疹等皮膚病，減輕皮膚萎縮。該應用有助于延長皮質類固醇的治療時間，擴大適用范圍，而原本對身體的某些部位，例如臉，以及皮膚較為敏感的病人，尤其兒童，局部使用高濃度的皮質類激素是受到限制的。
對小鼠的一系列實驗顯示，TriAc作為輔助治療可以完全防止由局部使用倍他米松(一種強皮質類固醇)引起的皮膚萎縮(表現為總膠原的減少和真皮膠原束間的交叉連接)。
為實現這些化合物潛在的皮膚病學的優點，必須將它們配制成組合物，其具有滿意的穩定性、毒性、流變學參數、化妝品的及給藥等性質。這樣的組合物在他人先前的工作中都沒有報道過。
在專利US5883294中，公開了一種含有甲狀腺激素激動劑的局部用的組合物。該組合物包含一油相、表面活性劑和水。UA5322689公開了一種局部用組合物，可釋放出芳香族化合物治療呼吸系統紊亂。一個組合物含有水化的三乙醇胺和兩種脂肪醇，但除了在呼吸道疾病中的用途以外，在化合物的給藥上沒有體現出實用性。
因此，本發明的一個目的就是提供具有這些特性的組合物。
本發明的一個方面是提供一種組合物，包含有至少一種甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物，一種形成親水相的組分，一種氨基醇和至少兩種選自以下物質的乳化或潤滑賦形劑礦物油，C12-C24醇，C12-C24羧酸，C12-C24羧酸的C1-C8支鏈或直鏈烷酯，C12-C24羧酸甘油酯，聚乙二醇(macrogol ethers)，C12-C24羧酸聚乙二醇酯，C12-C24羧酸脫水山梨糖醇酯(山梨糖醇酯類化合物)和C12-C24羧酸聚氧乙烯化脫水山梨糖醇酯(吐溫類化合物)。
這里所謂的“甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物”指一類化學體，它可以結合到TRα受體或TRβ受體上，解離常數Kd小于1μM，Kd＝(R)·(L)/(RL)其中，(R)為受體濃度，(L)為配體濃度，(RL)為受體-配體復合物濃度。本發明組合物的氨基醇較佳每條醇鏈中含2-6個碳原子，同時氨基醇的羥基較佳位于遠離氨基氮原子的碳原子上，該氨基醇可以是一種乙醇胺，以三乙醇胺為佳。
形成親水相的組分最好含有水。較佳的乳化或潤滑賦形劑包括軟脂酸辛酯，十四烷酸異丙酯，軟脂酸異丙酯，十元醇十八醇混合物，Cetearth-20，Cetromacrogol 1000，單硬脂酸甘油酯，十六烷醇，硬脂酸，硬脂酸甘油酯和PEG-100硬脂酸酯。
氨基醇，如三乙醇胺，在組合物中的含量較佳為0.1-5％w/w。該組合物可以含有一種濕潤劑，如山梨糖醇，較佳濃度為1-5％w/w。也可以含有一種合成的聚合物作為增稠劑，如卡波沫(Carbomer)或卡波普(Carbopol)，增稠劑較佳濃度為0.1-1％w/w。也可以包括防腐成分，它們可從以下物質中選擇羥苯甲酸甲酯，羥苯甲酸丙酯，咪唑啉酮脲(imidurea)和1-(3-chloroallyl)-3，5，7-triaza-1-azoniaadomaniane(CAS號碼51229-78-8)。防腐成分在組合物中的含量較佳為0.1-0.5％w/w。
組合物中也可含有EDTA，較佳濃度為0.02-2％w/w。最好加入一種或多種抗氧劑，該抗氧劑可從以下物質中選擇丁羥基苯甲醚，丁羥基甲苯，三羥基苯甲酸丙酯，叔-丁基氫醌(較佳濃度均為0.01-0.05％w/w)及dl-α，δ，γ-維生素E(較佳濃度為0.1-2％w/w)。
組合物中也可加入一種紫外線過濾組分，它包含選自于下列化合物中的一種或幾種氨基苯甲酸，二羥甲氧苯酮，羥甲氧苯酮，舒利苯酮，二乙醇胺，甲氧基肉桂酸鹽，對氨基苯甲酸乙基二羥丙基酯，對氨基苯甲酸甘油酯，二甲基對羥基苯甲酸辛酯，三乙醇胺水楊酸鹽和甲氧基肉桂酸辛酯。以上化合物的較佳濃度均為0.01-1％(w/w)。
組合物中含有的至少一種甲狀腺激素或其類甲狀腺激素化合物較佳地選自于以下化合物
三碘甲狀腺原氨酸(3，5，3’-三碘甲狀腺原氨酸，T3)；D和L四碘甲狀腺原氨酸-甲狀腺素(T4)；3，3’，5’-三碘甲狀腺原氨酸(反相T3)；3，3’-二碘甲狀腺原氨酸；T3T4類似物如3，5，3’-三碘甲腺乙酸；3，5，3’-四碘甲腺乙酸，3，5，3’-三碘-L-甲狀腺原氨酸；3，5，3’-三碘甲狀腺原氨酸甲酯；3，5，3’-三碘-L-甲狀腺原氨酸鹽酸；L-甲狀腺素；L-甲狀腺素鹽酸鹽；L-T3；T4Fo；Tetrac(3-[4-(4-羥基-3，5-二碘苯氧基)-3，5-二碘苯]乙酸)；Triac([4-(4-羥基-3-碘苯氧基)-3，5-二碘苯]乙酸)；Tetraprop；Triprop([4-(4-羥基-3-二碘苯氧基)-3，5-二碘苯]丙酸)；T4Bu；T3Bu；Thyroxamine；三碘thyronamine；L-3’-T1’；L-3’-T1；L-3，5’-T2；L-3，3’-T2；L-3，3’，5’-T3；DL-Br2I；L-Br2iPr；L-Me2I；L-Me3；L-Me4；L-Me2iPr；DL-IMEI；L-3，5-二甲基-3’-異丙基甲狀腺原氨酸(DIMIT)；DL-BPT4；B-triac；BP-tetrac；DL-SBT3；DL-SBT4；DL-MBT3；MB-tetrac；T2；T2F；T2Cl；T2Br；T3；T2Me；T2Et；T2iPr；T2nPr；T2sBu；T2tBu；T2iBu；T2Phe；T2OH；T2NO2；T2F2；T2Cl2；T4；T2Me2；3，5，3’，5’-四碘-D-甲狀腺原氨酸；3，5，3’-三碘-D-甲狀腺原氨酸；3，5-二碘-4-羥基苯基丙酸(DIHPA)；芳基草氨酸；(芳氨基)乙酸；芳基丙酸；芳硫基乙酸；(芳氧基)乙酸；3，3’-T2；3，5-T2；3’5’-T2；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(2-甲氧基吡啶-5-基)甲醇；(芐氧基-2-甲氧苯基)-(6-甲氧基吡啶-3-基)甲醇；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(5-溴-2甲氧基吡啶-4-基)甲醇；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(2，6-二氟吡啶-3-基)甲醇；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(2-甲氧基吡啶-4-基)甲醇；4-甲氧基-3-[(2-甲氧基嘧啶-5-基)甲基]苯酚；4-甲氧基-3-[(6-甲基吡啶-3-基)甲基]苯酚；5-芐氧基-2-甲氧苯基溴化物；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(6-氯噠嗪-3-基)乙腈；
4-芐氧基-2[(2-甲氧基噻唑-5-基)甲基]苯甲醚；6-[(5-羥基-2-甲氧基苯)甲基]-2-(3H)-噻唑；(3’-雜環芳基甲基-4’)-甲基-3，5-二硝基-N-三氟-乙酰基-L-甲狀腺原氨酸乙酯；(3’-雜環芳基甲基-3，5-二碘-4’)-甲基-N-三氟-乙酰基-L-甲狀腺原氨酸乙酯；3，3’，5-三碘-L-甲狀腺原氨酸(T3)的3’-雜環芳基甲基類似物；甲狀腺激素3，3’，5-三碘-L-甲狀腺原氨酸(T3)的3’-取代衍生物；L-3’-T1；L-3，5’-T2；L-3，3’-T2；L-3，3’，5’-T3；DL-Br2I；L-Br2IPr；L-Me2I；L-Me3；L-Me4；L-Me2iPr；DL-IMeI；L-3，5-二甲基-3’-異丙基甲狀腺原氨酸(DIMIT)；DL-BPT4；B-triac；BP-tetrac；DL-SBT3；DL-SBT4；DL-MBT3；MB-tetrac；T2；T2F；T2CI；T2Br；T3；T2Me；T2Et；T2iPr；T2nPr；T2sBu；T2tBu；T2iBu；T2Phe；T2OH；T2NO2；T2F2；T2CI2；T4；T2Me2；3，5，3’，5’-四碘-D-甲狀腺原氨酸；3，5，3’-三碘-D-甲狀腺原氨酸；3 ，5-二磺-4-羥基苯基丙酸(DIHPA)；芳基草氨酸(芳氨基)乙酸；芳基丙酸；芳基硫代乙酸(芳氧基)乙酸；3 ，3’-T2；3，5-T2；3’-5’-T2；α-甲基-3 ，5 ，3’-三碘甲腺乙酸；α-甲基-3 ，5 ，3’-三碘甲腺丙酸；α-甲基-3 ，5，3’，5’-四碘-甲腺丙酸；甲狀腺原氨酸碘或甲腺乙酸的亞甲基和羰基-橋連類似物；或苯并呋喃碘化物；3，5-二碘-4-(2-N，N-二乙基胺乙氧基)苯基-(2-丁基苯并呋喃-3-基)甲醇鹽酸鹽；2-甲基-3-(3，5-二碘-4-(2-N，N-二乙基胺乙氧基)苯基)-苯并呋喃鹽酸鹽；2-正丁基-3-(3，5二碘-4-羰基甲氧基-苯酰基)苯并呋喃；2-甲基-3-(3，5二碘-4-羰基甲氧基-苯基)苯并呋喃；[4’-羥基-3’-碘-3，5-二碘-4-(2-N，N-二甲基胺-(乙氧基)二苯甲酮鹽酸鹽；2-丁基-3-(3-碘-4-羥基苯酰基)苯并呋喃；4’，4-二羥基-3’，3，5-三碘-二苯甲烷；3，5-二碘-4-(2-N，N-二乙基胺乙氧基)苯基-(2-丁基苯并呋喃-3-基)甲醇鹽酸鹽；2-正丁基-3-(3，5-二碘-4-羰基甲氧基-苯酰基)苯并呋喃；2-甲基-3-(3，5-二碘-4-羥基-苯酰基)苯并呋喃；2-甲基-3-(3，5-二碘-4-羰基甲氧基-苯基)苯并呋喃；4’-羥基-3’碘-3，5-二碘-4-(2-N，N-二甲基胺-乙氧基)二苯甲酮鹽酸鹽；2-丁基-3-(3-碘-4-羥基苯酰基)苯并呋喃；4’，4-二羥基-3’，3，5-三碘-二苯基甲烷；3，5-二乙基-3’-異丙基甲狀腺原氨酸(DIET)；和IpTA2(3，5-二碘-3’-異丙基甲腺乙酸)以及藥物上可接受的鹽及其衍生物。
三碘甲狀腺乙酸(TriAc)是一個較好的甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物。TriAc較好的濃度是0.001-0.3％w/w，最好是0.01-0.3％w/w。
本發明的另一方面是提供一種方法，用于預測含甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物的局部用的組合物的功效。該方法步驟包括將該組合物與一堆多萜醇/丙二醇凝膠膜充分接觸，溫育該組合物和膜，使甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物擴散到膜中，再將擴散到膜中的甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物抽提出來，并測定抽提出來的甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物的量。
這種功效預測的方法可用于相同化合物的不同批號，分析批號與批號間的差異。它也可以用來評價和比較含有相同甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物的不同組合物的功效，這樣就可以比較由不同制造商制得的組合物。
理想的局部用制劑應該有吸引人的化妝品特性，可接受的藥物特性，無刺激無毒，并在符合局部用藥物制劑的生產質量管理規范(GMP)要求下易于大量生產。
本發明的制劑較佳地含有一種水包油的乳膏基質，甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物(在不同濃度下)可和這種基質完全融合。
實施例本發明將通過實例及附圖更為詳細地闡述。


圖1為本發明功效預測方法的圖解說明，以及一個樣品通過這種方法測得的實驗結果。
圖2為本發明的一種組合物治療倍他米松引起的真皮成纖維細胞膠原合成改變的體內實驗結果。
例1制劑開發引言乳膏最重要的優點在于它們有良好的結構，舒適的觸感和漂亮的外觀，因此易于被人接受，乳膏是半固體乳劑，可以是水包油或油包水的。一個水包油組合物典型地含有水，乳化劑，潤滑劑，表面活性劑及凝膠劑組成的乳膏基質。通常加入防腐劑防止使用過程中污染的微生物引起變質。加入螯合劑作為可能引起著色或沉淀的金屬化合物的清除劑。乳膏中也通常加入抗氧劑防止腐敗及增加敏感成份的穩定性。乳膏中加入紫外線過濾成分可以防止由于紫外線引起的成分的降解。
乳膏作為生物活性成分(例中為TriAc)局部給藥的載體，對活性物質從中釋放進入皮膚有決定性作用。活性成分從載體進入皮膚的釋放速率依賴于多種因素共同決定，如擴散，溶解性及分配系數。含相同活性成分的乳膏可以表現不同的釋放模式，這取決于它們的制造工藝。因此，發明了一種檢測方法(多層膜系統(MMS)—模型)，用于評價標準制劑中TriAc釋放度，得到的檢測結果可作為制劑開發中的迭代工具。
結果開發了八個水包油乳膏制劑(見表1)。
制劑的制造是在攪拌下將水加熱到75-85℃，加入羥苯甲酸甲酯，羥苯甲酸丙酯，EDTA，增稠劑(卡波普)和山梨糖醇。然后，潤滑劑和乳化劑在75-85℃下混合形成的油相加到水相中，再加入三乙醇胺調pH值約6.8-7.1。容器溫度降至60℃后，加入咪唑啉酮脲或Promulgen。
開發了兩個先導制劑(P1和P2)。TriAc溶于異丙醇(70％)與乳膏充分混合。乳膏中TriAc的釋放速率(見例2)是一個重要的參數，用于決定哪一個制劑可以進一步開發。兩種乳膏中的TriAc均表現良好的釋放速率。然后，根據先導制劑制得六種變化制劑(F1-F6)，用相同的方法制造與測試，發現F1有最佳的釋放速率，因而選擇這個制劑進一步開發。
生產含四種不同濃度TriAc的F1(0，0.03％，0.1％，0.3％)用于局部耐受性實驗(見例4)及臨床試驗。在三個不同的時候分別生產含TriAc濃度0(安慰劑)，0.03％，0.1％的大規模批號(7千克乳膏)，必須采用如上所述的相同的操作流程，在最后一步加入溶于異丙醇的TriAc(安慰劑僅加異丙醇)。另一種將TriAc加入到制劑中的方法是在75-85℃下將TriAc加到油相中。在工業化生產中后者更方便，經測試也得到了良好的實驗結果(見例2)。
制劑(F1-TriAc)在人皮膚上的功效經臨床試驗加以評價(見例5)。
F1-TriAc(0，0.03％和0.1％)中關鍵性成分的穩定性試驗數據(TriAc，羥苯甲酸丙酯，羥苯甲酸甲酯和咪唑啉酮脲)顯示產品穩定性大于12個月(見例3)。
表1例1中用于八個制劑制造的成分(重量比)表

注Arlacel 165是甘油硬脂酸酯和PEG-100硬脂酸酯的混合物。
Dowicil 200是一種防腐劑(94％，1-(3-chloroally)3，5，7-triaza-1-azoniaadomaniane chloride)。
Promulgen D是十六醇十八醇混合物(CAS 267/008/16)和Ceterth-20(CAS 200/849/9，INCI名稱乙氧基化(20摩爾)十六醇/十八醇)的混合物的商業化產品。
*較佳的PH范圍。
表211個不同產物中的TriAc在MMS-模型中的釋放度比較

例2體外釋放度試驗引言制劑開發的最終目的是開發一種用于影響皮膚的基因表達的TriAc的局部用制劑，為了達到這個目的，活性成分TriAc必須可以從制劑中釋放出來進入真皮和表皮的靶細胞。皮膚的結構有三層真皮層(成纖維細胞)，表皮層(角質細胞)和有多層死角質細胞構成的角質層。角質層是機體與環境間的屏障，局部使用的藥物必須穿過角質層到達下面的細胞層才能發揮作用。
在局部用藥物的開發過程中，關鍵就是要評價這個參數。我們知道在制劑中使用的載體對藥物穿透角質層的能力有顯著影響。如果目的是開發人用藥，那么采用的角質層穿透模型應該能夠預測藥物在人皮膚上的使用情況。然而，試驗用動物的角質層與人是完全不同的。因為人皮膚上的毛發很少，所以角質層很厚。例如，小鼠角質層有三層死細胞，而人多達十五層。
制劑開發的釋放度試驗我們聯系了德國哈勒馬丁-路德大學的應用皮膚藥物研究所(IAPD)，決定采用他們的體外釋放模型作為制劑開發的工具。這個釋放模型是Reinhardt Neubert教授建立的(Neubert，R.，Bends，C.，Wohlrab，W.，Gienau，B.，Furst，W.A multiplayer membrane system formodeling drug penetration into skin Int J.Pharm.75(1991)89-94；Knorst，M.，Neubert，R.，Wohlrab，W.Reiease of urea from semisolidformulation using a multiplayer membrane system.Drug Dev.Ind.Pharm.23(1997)253-257)，并已用于評價從不同局部用制劑中尿素，二羥基蒽酚及其他皮膚病藥物的釋放情況。這個模型的基礎是活性成分從載體釋放到一層用于模擬人角質層的多萜醇/丙二醇凝膠膜上。開發這個膜系統是為了使藥物得到在移植的人皮膚中相同的釋放模式。這體外釋放方法和移植人皮膚釋放度實驗方法同樣有效(Neubert等和Knorst等見上)。
這釋放方法經標準化，某一制劑得到的實驗數據就可以用來預測其在臨床上是否有效(也就是說，藥物的釋放是快還是慢)。藥物從制劑到膜有快的釋放速率，預示它可以較快進入角質層，進而預示藥物制劑的臨床功效。這個方法比傳統的釋放實驗體系(例Framx-cells)有顯著的優越性，它可以用于對一般的藥物制劑進行比較。但是這個方法還不能作為標準(也就是說，藥物從一般制劑中的釋放模式還沒有獲得注冊)。
圖1提供多層膜系統(MMS)方法評價從制劑進入膜的TriAc的釋放度的說明(Neubert等和Knorst等見上)。這里的每一個實驗將大約10毫克制劑置于膜上，樣品在32℃分別溫育30，100，300分鐘(n＝5)。然后，每個膜放置在無水酒精中震蕩洗滌抽提TriAc。移走膜后酒精組分加到HPLC-系統檢測。膜上的TriAc全部含量(占加到乳膏中的總TriAc的百分數)作為釋放的TriAc對溫育時間作圖，預測出0-100分鐘內的AUC(曲線下面積)。圖1的右圖是Essex-乳膏用MMS-法檢測釋放度實驗結果的圖例說明，用陰影部分表示預測AUC的范圍。
表2列出了F1及另外兩個TriAc制劑一系列批號的釋放度實驗數據。TriAc溶于異丙醇與Essex-乳膏充分混合。TriAcanaTM是TriAc的一個商業制劑(在法國注冊用于治療肥胖)。制劑開發過程中，F1先作為試點性批號生產，然后含0.1％TriAc(F1A，F1B，F1C)或0.03％TriAc(F1D，F1E，F1F)的F1在GMP要求下在三個不同時候大規模生產。F1TestA是一個試驗批號，TriAc直接加到油相中(含TriAc的油相)，因而其中不含異丙醇。在試驗批號F1TestB中，TriAc也是直接加到油相中，但在乳膏中另加入了和其它批號等量的異丙醇。
結果及結論基于專家對本法的經驗性觀察(R.Neubert教授，LAPD)，較快的釋藥速度預示較大的臨床功效。如果30分鐘后，100％的實驗品都可以從膜上回收，就可以得到MMS-模型的最大理論釋放速率。然而，任何MMS-模型實驗都未見到如此快的釋放速率。30分鐘后，活性成分(在F1中)釋放40-50％就可以認為比Essex-乳膏和TriAcanaTM有優越性。另一種比較不同產品釋藥速率的方法是繪制開始100分鐘的釋放百分數對時間的AUC(曲線下面積)。F1的0-100分鐘的AUC比其它產品Essex-乳膏和TriAcanaTM大了三倍。
如果得到最大理論釋放速率(30分鐘100％)，100分鐘后AUC的值高達8500(％x分鐘)TriAc(0.03-0.1％)-F1的最后批號(即F1A-F1F)顯示出的釋放速率均大于8500的50％。而在Essex-乳膏和TriAcanaTM制劑中的釋放速率小于8500的20％。
F1不同的批號得到的實驗結果很相似，顯示出MMS-方法作為一種質量控制工具的實用性，它可用于比較批號與批號間的差異或評價TriAc的一般制劑是否和F1有一樣的臨床功效。
實驗結果也顯示出TriAc從低劑量(0.03％)和高劑量(0.1％)中釋放出了相同的百分比。此外，結果顯示F1中TriAc的釋放速率與其加到乳膏基質中的方式無關。F1TestB和F1TestA的制備工藝與其它批號的不同之處在于TriAc在制備時加到油相中(見例1)而不是作為最后的成分加到冷的乳膏基質里。而且F1TestA與F1所有其它批號有相同的釋放速率，表明異丙醇可以從乳膏基質中省去。
例3制劑穩定性試驗產品保存24個月后，通過測關鍵性成分的含量及pH值評價F1-TriAc的穩定性(見表3)。表3給出的例子是在4℃儲存的低劑量制劑(0.03％TriAc)。高劑量制劑(0.1％TeiAc)的實驗結果相似。在不同時候生產的乳膏穩定性也相似。
從以上結果，我們可以得出結論對TriAc，F1是一種合適的穩定的乳膏制劑。
表3 F1-TriAc的儲存穩定性

例4安全性實驗局部耐受性實驗在完好的和擦傷的Himalayan兔子的皮膚上進行，每天兩次表面涂敷給藥四周，三種TriAc含量在F1中進行了試驗0.03％，0.1％及0.3％。對照組給予F1的乳膏基質。通過表皮涂敷給藥，每天兩次，間隔六小時。每個給藥部位每次給乳膏0.5毫升。共有24只實驗兔(每組3只雄兔3只雌兔)。乳膏涂敷于每只實驗兔的完好皮膚(左側)和破損皮膚上(右側)。對兔子進行日常觀察和解剖時均未發現有藥物相關的局部不耐性反應出現。無死亡。行為及外觀上未觀察到與藥物相關的影響。用含TriAc的F1涂敷四周后，兔子的體重也沒有受到藥物的影響。攝食正常。宏觀和微觀上均未觀察到藥物相關的病理學變化。因此無論是含有TriAc的F1還是乳膏基質本身對兔子的皮膚都沒有局部的不良作用。
例5臨床功效實驗用含有TriAc的F1的人臨床試驗已完成。是單中心的一期實驗，研究兩種濃度的TriAc(0.03％或0.1％w/w)與安慰劑(F1乳膏基質)相比對皮膚原膠原生成的影響。實驗在瑞典，戈森堡，薩赫爾格倫司卡大學醫院皮膚病科進行。該實驗是一個雙盲的，平行組，對照的，隨機的，單中心實驗，志愿者隨機接受0.03％TriAc，0.1％TriAc或安慰劑乳膏。每試驗組有6名志愿者。藥涂敷于腹部的皮膚上。主要目的是為了比較皮膚原膠原I型和III型的變化。
我們知道局部使用倍他米松(一種強皮質類固醇，通常用于治療皮膚病各種炎癥)導致真皮成纖維細胞膠原合成降低。局部涂敷倍他米松(或其它強皮質類固醇)三天導致原膠原I(原膠原是膠原前體)表達顯著降低(比基線降低了70％)，而且恢復很慢。甚至14天不用皮質類固醇，原膠原的合成依然降低50％(Haapasaari K-M，RisteliJ，Koivukangas V，Oikarinen A.，Comparison of the effect ofhydrocortisone，hydrocortisone-17-butyrate and betamethasone on collagensynthesis in human skin in vivo.Acta Derm Venerol(Stockholm)75(1995)269-271)。另一種膠原(膠原III)前體也受到局部用倍他米松的調控，與原膠原I情況相似。
原膠原(膠原I型和膠原III型的氨基端前肽，PINP和PIIINP)在真皮中的含量可以通過對吸入式發泡劑放射免疫檢測測量(KiistlaU.Suction blister device for separation of viable epidermis fromdermis.J.Invest Dermatol 50(1968)220-5)。吸入式水泡被誘導，收集其中的發泡劑用于分析。
圖2顯示給予F1-安慰劑或F1-TriAc(0.03％)后的典型反應。受試對象腹部皮膚局部倍他米松給藥(2次/天)3天(0-3天)。再在相同部位分別用F1-安慰劑或F1-TriAc(0.03％)涂敷14天。
在第3、10、17天收集吸入式發泡劑，PINP含量測定后與基線值比較，在圖2中以基線值百分數形式給出。
結果顯示倍他米松處理的皮膚，涂敷F1-TriAc(0.03％)后PINP的表達恢復得比F1-安慰劑快。因為PINP是膠原的前體，這就意味著用F1-TriAc(0.03％)治療可以增加真皮的厚度及彈性，由此真皮的萎縮得到了恢復。
權利要求
1.一種組合物，含有至少一種甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物，一種形成親水相的組分，一種氨基醇和至少兩種選自以下物質的乳化或潤滑賦形劑礦物油，C12-C24醇，C12-C24羧酸，C12-C24羧酸的C1-C8支鏈或直鏈烷酯，C12-C24羧酸甘油酯，聚乙二醇，C12-C24羧酸聚乙二醇酯，C12-C24羧酸脫水山梨糖醇酯(山梨糖醇酯類化合物)和C12-C24羧酸聚氧乙烯化脫水山梨糖醇酯(吐溫類化合物)。
2.根據權利要求1所述的組合物，其中氨基醇的每條醇鏈中有2-6個碳原子。
3.根據權利要求1或2所述的組合物，其中氨基醇的羥基應位于遠離氨基氮原子的碳原子上。
4.根據權利要求3所述的組合物，其中氨基醇是一種乙醇胺。
5.根據權利要求4所述的組合物，其中氨基醇是三乙醇胺。
6.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其中形成親水相的組分含有水。
7.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其中乳化或潤滑賦形劑是選自于軟脂酸辛酯，十四烷酸異丙酯，軟脂酸異丙酯，十六醇十八醇混合物，Cetearth-20，Cetromacrogol 1000，單硬脂酸甘油酯，十六烷醇，硬脂酸，硬脂酸甘油酯和PEG-100硬脂酸酯。
8.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其中氨基醇在組合物中的含量為0.1-5％w/w。
9.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其進一步含有一種濕潤劑。
10.根據權利要求9所述的組合物，其中濕潤劑的濃度為1-5％w/w。
11.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其進一步含有一種增稠劑。
12.根據權利要求11所述的組合物，其中增稠劑含有卡波沫或卡波普。
13.根據權利要求11或12所述的組合物，其中增稠劑的濃度為0.1-1％w/w。
14.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其進一步含有一種或多種防腐成分。
15.根據權利要求14所述的組合物，其中防腐成分是選自于羥基甲酸甲酯，羥基甲酸丙酯，咪唑啉酮脲和1-(3-chloroallyl)-3，5，7-triaza-1-azoniaadomaniane chloride。
16.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其進一步含有EDTA。
17.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其進一步含有一種或多種抗氧劑。
18.根據權利要求17所述的組合物，其中抗氧劑是選自于丁羥基苯甲醚，丁羥基甲苯，三羥基苯甲酸丙酯，叔-丁基氫醌及dl-α，δ，γ-維生素E。
19.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其進一步含有一種紫外線過濾組分。
20.根據權利要求19所述的組合物，其中紫外線過濾組分含有以下化合物中的一種或多種氨基苯甲酸，二羥甲氧苯酮，羥甲氧苯酮，舒利苯酮，二乙醇胺甲氧基肉桂酸鹽，對氨基苯甲酸乙基二羥丙基酯，對氨基苯甲酸甘油酯，二甲基對羥基苯甲酸辛酯，三乙醇胺水楊酸鹽和甲氧基肉桂酸辛酯。
21.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其pH值是6.1-7.1。
22.根據權利要求21所述的組合物，其pH值是6.8-7.1。
23.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，其中所含的至少一種甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物是選自于三碘甲狀腺原氨酸(3，5，3’-三碘甲狀腺原氨酸，T3)；D和L四碘甲狀腺原氨酸-甲狀腺素(T4)；3，3’，5’-三碘甲狀腺原氨酸(反相T3)；3，3’-二碘甲狀腺原氨酸；T3T4類似物如3，5，3’-三碘甲腺乙酸；3，5，3’-四碘甲腺乙酸，3，5，3’-三碘-L-甲狀腺原氨酸；3，5，3’-三碘甲狀腺原氨酸甲酯；3，5，3’-三碘-L-甲狀腺原氨酸鹽酸；L-甲狀腺素；L-甲狀腺素鹽酸鹽；L-T3；T4Fo；Tetrac(3-[4-(4-羥基-3，5-二碘苯氧基)-3，5-二碘苯]乙酸)；Triac([4-(4-羥基-3-碘苯氧基)-3，5-二碘苯]乙酸)；Tetraprop；Triprop([4-(4-羥基-3-二碘苯氧基)-3，5-二碘苯]丙酸)；T4Bu；T3Bu；Thyroxamine；三碘thyronamine；L-3’-T1’；L-3’-T1；L-3，5’-T2；L-3，3’-T2；L-3，3’，5’-T3；DL-Br2I；L-Br2iPr；L-Me2I；L-Me3；L-Me4；L-Me2iPr；DL-IMEI；L-3，5-二甲基-3’-異丙基甲狀腺原氨酸(DIMIT)；DL-BPT4；B-triac；BP-tetrac；DL-SBT3；DL-SBT4；DL-MBT3；MB-tetrac；T2；T2F；T2Cl；T2Br；T3；T2Me；T2Et；T2iPr；T2nPr；T2sBu；T2tBu；T2iBu；T2Phe；T2OH；T2NO2；T2F2；T2Cl2；T4；T2Me2；3，5，3’，5’-四碘-D-甲狀腺原氨酸；3，5，3’-三碘-D-甲狀腺原氨酸；3，5-二碘-4-羥基苯基丙酸(DIHPA)；芳基草氨酸；(芳氨基)乙酸；芳基丙酸；芳硫基乙酸；(芳氧基)乙酸；3，3’-T2；3，5-T2；3’5’-T2；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(2-甲氧基吡啶-5-基)甲醇；(芐氧基-2-甲氧苯基)-(6-甲氧基吡啶-3-基)甲醇；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(5-溴-2甲氧基吡啶-4-基)甲醇；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(2，6-二氟吡啶-3-基)甲醇；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(2-甲氧基吡啶-4-基)甲醇；4-甲氧基-3-[(2-甲氧基嘧啶-5-基)甲基]苯酚；4-甲氧基-3-[(6-甲基吡啶-3-基)甲基]苯酚；5-芐氧基-2-甲氧苯基溴化物；(5-芐氧基-2-甲氧苯基)-(6-氯噠嗪-3-基)乙腈；4-芐氧基-2[(2-甲氧基噻唑-5-基)甲基]苯甲醚；6-[(5-羥基-2-甲氧基苯)甲基]-2-(3H)-噻唑；(3’-雜環芳基甲基-4’)-甲基-3，5-二硝基-N-三氟-乙酰基-L-甲狀腺原氨酸乙酯；(3’-雜環芳基甲基-3，5-二碘-4’)-甲基-N-三氟-乙酰基-L-甲狀腺原氨酸乙酯；3，3’，5-三碘-L-甲狀腺原氨酸(T3)的3’-雜環芳基甲基類似物；甲狀腺激素3，3’，5-三碘-L-甲狀腺原氨酸(T3)的3’-取代衍生物；L-3’-T1；L-3，5’-T2；L-3，3’-T2；L-3，3’，5’-T3；DL-Br2I；L-Br2IPr；L-Me2I；L-Me3；L-Me4；L-Me2iPr；DL-IMeI；L-3，5-二甲基-3’-異丙基甲狀腺原氨酸(DIMIT)；DL-BPT4；B-triac；BP-tetrac；DL-SBT3；DL-SBT4；DL-MBT3；MB-tetrac；T2；T2F；T2CI；T2Br；T3；T2Me；T2Et；T2iPr；T2nPr；T2sBu；T2tBu；T2iBu；T2Phe；T2OH；T2NO2；T2F2；T2CI2；T4；T2Me2；3，5，3’，5’-四碘-D-甲狀腺原氨酸；3，5，3’-三碘-D-甲狀腺原氨酸；3，5-二磺-4-羥基苯基丙酸(DIHPA)；芳基草氨酸(芳氨基)乙酸；芳基丙酸；芳基硫代乙酸(芳氧基)乙酸；3，3’-T2；3，5-T2；3’-5’-T2；α-甲基-3，5，3’-三碘甲腺乙酸；α-甲基-3，5，3’-三碘甲腺丙酸；α-甲基-3，5，3’，5’-四碘-甲腺丙酸；甲狀腺原氨酸碘或甲腺乙酸的亞甲基和羰基-橋連類似物；或苯并呋喃碘化物；3，5-二碘-4-(2-N，N-二乙基胺乙氧基)苯基-(2-丁基苯并呋喃-3-基)甲醇鹽酸鹽；2-甲基-3-(3，5-二碘-4-(2-N，N-二乙基胺乙氧基)苯基)-苯并呋喃鹽酸鹽；2-正丁基-3-(3，5二碘-4-羰基甲氧基-苯酰基)苯并呋喃；2-甲基-3-(3，5二碘-4-羰基甲氧基-苯基)苯并呋喃；[4’-羥基-3’-碘-3，5-二碘-4-(2-N，N-二甲基胺-(乙氧基)二苯甲酮鹽酸鹽；2-丁基-3-(3-碘-4-羥基苯酰基)苯并呋喃；4’，4-二羥基-3’，3，5-三碘-二苯甲烷；3，5-二碘-4-(2-N，N-二乙基胺乙氧基)苯基-(2-丁基苯并呋喃-3-基)甲醇鹽酸鹽；2-正丁基-3-(3，5-二碘-4-羰基甲氧基-苯酰基)苯并呋喃；2-甲基-3-(3，5-二碘-4-羥基-苯酰基)苯并呋喃；2-甲基-3-(3，5-二碘-4-羰基甲氧基-苯基)苯并呋喃；4’-羥基-3’碘-3，5-二碘-4-(2-N，N-二甲基胺-乙氧基)二苯甲酮鹽酸鹽；2-丁基-3-(3-碘-4-羥基苯酰基)苯并呋喃；4’，4-二羥基-3’，3，5-三碘-二苯基甲烷；3，5-二乙基-3’-異丙基甲狀腺原氨酸(DIET)；和IpTA2(3，5-二碘-3’-異丙基甲腺乙酸)以及藥物上可接受的鹽及其衍生物。
24.根據權利要求23所述的組合物，其中所含的甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物為三碘甲狀腺乙酸(TriAc)。
25.根據權利要求24所述的組合物，其中TriAc的濃度為0.001-0.3％w/w。
26.根據權利要求25所述的組合物，其中TriAc的濃度為0.01-0.3％w/w。
27.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，包含(％w/w)水(77-79)，軟脂酸辛酯(5.0)，十六醇十八醇混合物(1.0)，單硬脂酸甘油酯(6.0)，十六烷醇(2.0)，硬脂酸(3.0)，山梨糖醇(2.8)，三乙醇胺(0.4-0.8)，羥苯甲酸甲酯(0.2)，羥苯甲酸丙酯(0.1)，咪唑啉酮脲(0.3)，EDTA二鈉鹽(0.2)，異丙醇(0.7)，卡波普980(0.2)和TriAc(0.03-0.1)。
28.根據前述權利要求中任一權利要求所述的組合物，按MMS方法將組合物與多萜醇/丙二醇凝膠膜接觸，顯示甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物的釋放速率超過0-100分鐘AUC預測的最大理論值的25％。
29.一種預測含甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物的局部用組合物功效的方法，該方法步驟包括將該組合物與一堆多萜醇/丙二醇凝膠膜充分接觸，溫育該組合物與膜，使甲狀腺激素或類甲狀腺激素擴散到膜中，再將擴散到膜中的甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物抽提出來，并測定抽提出來的甲狀腺激素或類甲狀腺激素化合物的量。
全文摘要
一種組合物含有至少一種甲狀腺激素化合物或者類甲狀腺激素化合物，一種形成親水相的組分，一種氨基醇和至少兩種選自于以下物質的乳化或潤滑賦形劑礦物油，C
文檔編號A61K47/10GK1518469SQ02809467
公開日2004年8月4日 申請日期2002年5月3日 優先權日2001年5月9日
發明者博·卡爾松, 博 卡爾松 申請人:卡羅生物股份公司