黃芩素的提取工藝、藥用組合物及制劑制備工藝的制作方法

專利名稱：黃芩素的提取工藝、藥用組合物及制劑制備工藝的制作方法
技術領域：
本發明涉及中藥有效部位、藥物組合物以及制備方法和用途，具體地說，本發明涉及高純度的黃芩素、藥物組合物以及提取工藝和醫藥用途。
背景技術：
黃芩是一種相當古老的中藥，在我國已使用了上千年，安全無害，早在《神農本草經》中就被列為中品。其中以根入藥的黃芩有滇黃芩、粘毛黃芩、甘肅黃芩、麗江黃芩、川黃芩、大黃芩等。臨床上黃芩具有清熱、瀉火、解毒、止血、安胎等功效，其主要作用是抗氧化、清除自由基、抗炎、抗腫瘤、阻止鈣離子通道、抑制醛糖還原酶、抗病毒、抗過敏等并對免疫、心腦血管、消化、神經等系統均有保護作用。
黃芩化學成分的研究由來已久，國內外學者對其化學成分和藥理作用進行了系統的研究，從中分離得到的黃酮類化合物有黃芩苷(baicalin)、漢黃芩苷(wogonside)、黃芩素(baicalein)、漢黃芩素(wogonin)、千層紙素A(oroxylinA)、黃芩黃酮I(skullcapflavone I)、以及黃芩黃酮II(skullcapflavone II)等，其根中主要含黃芩苷、黃芩苷元、漢黃芩苷元等多種黃酮類成分(宋萬志 藥用黃芩的資源學研究。藥學學報1981，16(2)139～145)。
黃芩中的黃酮類成分具有較強的藥理活性。黃芩素(也稱黃芩苷元，baicalein)被確證具有抑菌、利尿、抗炎抗變態活性，黃芩素除具有抑菌、利尿、解痙作用外，并證明具有較強的抗癌作用等(曾廣方 天然黃酮類最近研究進展 上海中國科學院藥物所，1963)。
黃芩素(baicalein)亦稱為黃芩苷元，為黃芩苷經水解失去一分子葡萄糖醛酸的產物。該化合物與某些文獻上習稱的黃芩素不同，后者往往指未經水解的黃酮苷類化合物，現稱黃芩苷(baicalin)。

發明內容
本發明的目的之一是提供一種高純度的黃芩素。本發明的高純度的黃芩素，具有5，6，7-三羥基黃酮結構的黃酮類化合物，其中黃芩素的含量按重量百分比計算為90％以上，還含有含量按重量百分比計算低于10％的漢黃芩素、千層紙素和白楊素化合物。
本發明的目的之二是提供一種制備上述的高純度的黃芩素的方法。
本發明的目的之三是提供上述的高純度的黃芩素和藥學上可以接受的藥物載體混合形成藥物組合物，可用于臨床治療各種病毒感染的疾病。
本發明的目的之四是提供上述的高純度的黃芩素以及其藥物組合物的醫藥用途。
為實現上述的發明目的，本發明通過采用下述的技術方案。
一種高純度的黃芩素，具有5，6，7-三羥基黃酮結構的黃酮類化合物，其中黃芩素的含量按重量百分比計算為90％以上，還含有含量按重量百分比計算低于10％的漢黃芩素、千層紙素和白楊素化合物。
一種藥物組合物，由上述所述的黃芩素與藥學上可以接受的藥物載體混合形成組合物；優選該藥物組合物為片劑、膠囊劑、軟膠囊、噴霧劑、凝膠劑、凝膠吸入劑、口服劑、混懸劑、沖劑、貼劑、軟膏、丸劑、散劑、注射劑、輸液劑、凍干注射劑、脂質體注射劑、靶向給藥注射劑、栓劑、緩釋制劑或控釋制劑；所述的片劑或膠囊劑優選為所述黃芩素與填充劑或崩解劑組配的常規片劑或膠囊劑；所述的緩釋制劑優選為所述的黃芩素與填充劑和羥丙甲纖維素K4M組配的緩釋片劑或緩釋膠囊劑；所述的軟膠囊優選為所述的黃芩素分散于油相中得到的軟膠囊；所述的軟膏優選是以所述黃芩素的微粉制備得到的。所述的注射劑優選為所述黃芩素與增溶劑或助溶劑形成的注射劑或混懸型注射液；所述凍干注射劑優選為所述黃芩素與亞硫酸鈉形成的凍干注射用粉針。
上述的填充劑優選為乳糖、微晶纖維素、糊精、淀粉或磷酸鈣；崩解劑優選為羥丙纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚維酮或交聯羧甲基纖維素鈉；可選加粘合劑、潤濕劑及潤滑劑。
其中，所述的片劑或膠囊劑按下述配方組成所述的黃芩素∶乳糖或微晶纖維素∶羥丙纖維素或羧甲基淀粉鈉，按重量比計算為1∶0.5～2.5∶0.1～1.0，優選為1∶1.0～2.0∶0.4～0.6；或者為所述的黃芩素∶乳糖或微晶纖維素∶羥丙甲纖維素K4M，按重量比計算為1∶0.1～0.7∶0.15～0.8，優選為1∶0.2～0.5∶0.4～0.8。
其中，所述的軟膠囊，所用油相優選為大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油或橄欖油；亦可加增溶劑或潛溶劑或抗氧劑。
其中，所述注射劑，所用增溶劑優選為聚氧乙烯醚蓖麻油、吐溫或普流羅尼F-68；所用助溶劑優選為亞硫酸鈉、尿素、煙酰胺、脯氨酸、葡萄糖、枸櫞酸或其鈉鹽。
其中，所述混懸型注射液，優選實施方案是將所述黃芩素的微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、尼泊金酯和羧甲基纖維素鈉的水溶液，經研磨而制得。
上述所述的高純度的黃芩素，是通過下述的方法制備得到黃芩藥材用水潤濕后于20～30℃保溫12～24小時，用溶劑1回流提取，提取液濃縮后用70～100％的乙醇回流，使大部分提取物溶解，濾取不溶的黃色固體物，所得到的黃色固體物經溶劑2重結晶即得到黃芩素，其中的溶劑1為乙醇、乙酸乙酯、丙酮或其組合，溶劑2為丙酮、氯仿、丙酮與乙醇的混合液、氯仿與乙醇的混合液或氯仿與丙酮的混合液。
本發明的藥用組合物制劑可以制成各種制劑形式，包括片劑、膠囊劑、軟膠囊、噴霧劑、凝膠劑、凝膠吸入劑、口服劑、混懸劑、沖劑、貼劑、軟膏、丸劑、散劑、注射劑、輸液劑、凍干注射劑、脂質體注射劑，靶向給藥注射劑、栓劑、緩釋制劑、控釋制劑。優選的是片劑、膠囊劑、緩釋片劑和膠囊劑、軟膠囊、注射劑、凍干注射劑、混懸注射劑、軟膏。
本發明的藥物組合物特征在于可以是黃芩素與填充劑、崩解劑組配的常規片劑或膠囊劑；或者是黃芩素與填充劑和羥丙甲纖維素K4M組配的緩釋片劑或膠囊劑；其中填充劑可選用乳糖、微晶纖維素、糊精、淀粉、磷酸鈣等；崩解劑可選用羥丙纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚維酮、交聯羧甲基纖維素鈉等；亦可選加粘合劑、潤濕劑及潤滑劑。
本發明的藥物組合物制備片劑或膠囊劑配方組成為按重量比，黃芩素1∶乳糖或微晶纖維素0.5～2.5∶羥丙纖維素或羧甲基淀粉鈉0.1～1.0；或者，黃芩素1∶乳糖或微晶纖維素0.1～0.7∶羥丙甲纖維素K4M 0.15～0.8。
優選的配方為按重量比，黃芩素1∶乳糖或微晶纖維素1.0～2.0∶羥丙纖維素或羧甲基淀粉鈉0.4～0.6；或者，黃芩素1∶乳糖或微晶纖維素0.2～0.5∶羥丙甲纖維素K4M 0.4～0.8。
上述輔料還可選用，崩解劑如羥丙基淀粉、羥丙纖維素、羧甲基淀粉鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯聚維酮、交聯羧甲基纖維素鈉等；填充劑如乳糖、蔗糖、甘露醇、微晶纖維素、糊精、淀粉、磷酸鈣、磷酸氫鈣、硫酸鈣、碳酸鈣、環糊精、微粉纖維素等；潤濕劑和粘合劑如預膠化淀粉、聚維酮、羧甲基纖維素鈉、羥丙甲纖維素；潤滑劑如滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、微粉硅膠、氫化植物油、聚乙二醇4000和6000；潤濕劑如十二烷基硫酸鈉、吐溫80；骨架材料如羥丙甲纖維素、乙基纖維素等。
本發明所述的藥物組合物軟膠囊，其特征在于將黃芩素分散與油相中制得。其中油相可以是大豆油、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄欖油等；亦可加增溶劑或潛溶劑及抗氧劑等。
本發明的軟膠囊還可選用如下輔料溶劑如聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄欖油等；增溶劑或潛溶劑如吐溫80、聚氧乙烯醚蓖麻油、苯甲酸芐酯、乳酸乙酯等；抗氧劑如沒食子酸丙酯、特丁基苯酚(BHT)、維生素E等。膠殼中明膠、甘油與水的比例可適當調節，如明膠/甘油/水三者的比例在1∶0.3～0.4∶0.7～1.4為宜，膠殼中還可添加其他成分，如防腐劑對羥基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯等；增塑劑如山梨醇等；穩定劑如阿拉伯膠等；遮光劑如二氧化鈦、硫酸鋇、沉降碳酸鈣等。
本發明所述的藥物組合物注射劑特征在于將黃芩素與增溶劑或助溶劑形成的可注射溶液。增溶劑可選用聚氧乙烯醚蓖麻油、吐溫、普流羅尼F-68、聚維酮、聚乙二醇等；助溶劑可選用亞硫酸鈉、磷酸二氫鉀、尿素、煙酰胺、脯氨酸，葡萄糖、枸櫞酸及其鈉鹽等。
本發明還可以將黃芩素與亞硫酸鈉形成注射用凍干粉針。
本發明所述的藥物組合物混懸型注射液，其特征在于將黃芩素微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、尼泊金酯和羧甲基纖維素鈉的水溶液，經研磨制得。
本發明的注射劑還可選用如下輔料增溶劑如吐溫類、普流羅尼F-68、聚乙二醇、聚氧乙烯醚蓖麻油、聚維酮等；助溶劑如亞硫酸氫鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸二氫銨等；酰胺類化合物如尿素、乙酰胺、硫脲、苯甲酰胺等，氨基酸類如精氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、組氨酸、谷氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸，含羥基或羧基的化合物如蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖、甘露糖、枸櫞酸及其鈉鹽、乳酸、水楊酸鈉等；助懸劑如羧甲基纖維素鈉、聚維酮、羥丙甲基纖維素等；防腐劑如尼泊金甲、乙、丙和丁酯；pH調節劑如枸櫞酸及枸櫞酸鹽、磷酸鹽等；抗氧劑如維生素C、半胱氨酸鹽酸鹽等；溶劑如注射用水、注射用乙醇、丙二醇等。
本發明所述的藥物組合物軟膏，其特征在于以黃芩素微粉制備軟膏。
本發明的藥用組合物優選口服劑型每片或每粒含有黃芩素40-120mg，注射劑每支含有20mg。
本發明式(I)藥用組合物的施用量可根據用藥途徑、患者年齡、體重、體表面積、所治療的疾病的類型和嚴重程度等變化，其日劑量可以是40-720mg，優選40-240mg。可以一次或多次施用。
本發明的上述所述的高純度黃芩素和所述的藥物組合物，可以用于各種病毒感染疾病，優選在制備治療肝炎、病毒性感冒、病毒感染引起的急性呼吸道綜合征等的藥物中應用。
具體實施例方式
為更好的理解本發明，下面通過具體的實施例進一步闡述本發明，但不應被理解為對本發明有任何的限制。
實施例1取黃芩藥材20kg粉碎成粗粉，加水潤濕，并于20～30℃保溫過夜，用乙醇回流提取三次。減壓回收乙醇至無乙醇蒸出，殘余物加入85％的乙醇，加熱使大部分溶解，過濾，取不溶物(為黃色固體)，用丙酮重結晶，過濾，得黃芩素約200g，經純度檢查，主要為黃芩素(含量大于90％)，還含有少量漢黃芩素、千層紙素和白楊素化合物(含量小于10％)。
實施例2取黃芩藥材20kg粉碎成粗粉，加水潤濕，并于20～30℃保溫過夜，用乙酸乙酯回流提取三次。減壓回收至無乙酸乙酯蒸出，殘余物加入75％的乙醇，加熱使大部分溶解，過濾，取不溶物(為黃色固體)，用氯仿重結晶，過濾，得黃芩素約200g，經純度檢查，主要為黃芩素(含量大于90％)，還含有少量漢黃芩素、千層紙素和白楊素化合物(含量小于10％)。
實施例3黃芩素膠囊劑的制備處方黃芩素 40mg乳糖 80mg羥丙纖維素 20mg聚山梨酯80 16mg3％羥丙甲基纖維素(E5)水溶液適量滑石粉2.5mg將黃芩素、乳糖，羥丙纖維素過60目篩混均，加入適量的聚山梨酯80，加入3％羥丙甲基纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。40-50℃烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的滑石粉，混合均勻。按處方量灌裝1號膠囊，每粒含黃芩素40mg。用法每天三次，每次二粒。
實施例4黃芩素片劑的制備處方黃芩素 40mg乳糖 80mg羥丙纖維素 20mg聚山梨酯80 16mg3％羥丙甲基纖維素(E5)水溶液適量滑石粉2.5mg將黃芩素、乳糖、羥丙纖維素過60目篩混均，加入適量的聚山梨酯80，加入3％羥丙甲基纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。40-50℃烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的滑石粉，混合均勻，壓片，每片含黃芩素40mg。用法每天三次，每次二片。
實施例5黃芩素緩釋膠囊劑的制備處方黃芩素 120mg聚維酮 60mg微晶纖維素 40mg羥丙甲纖維素E15 20mg羥丙甲纖維素K4M 80mg3％羥丙甲基纖維素(E5)水溶液 適量滑石粉 4mg將黃芩素和聚維酮溶于乙醇中，減壓蒸發除去乙醇，所得固體放置在真空干燥器中過夜以除盡乙醇。將上述固體與微晶纖維素、羥丙甲纖維素E15、羥丙甲纖維素K4M過60目篩混均，加入3％羥丙甲基纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。40-50℃烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的滑石粉，混合均勻。按處方量灌裝膠囊，每粒含黃芩素120mg。用法每天二次，每次一粒。
實施例6黃芩素緩釋片劑的制備處方黃芩素 120mg聚維酮 60mg乳糖 40mg羥丙甲纖維素E15 20mg羥丙甲纖維素K4M 80mg3％羥丙甲基纖維素(E5)水溶液 適量滑石粉4mg將將黃芩素和聚維酮溶于乙醇中，減壓蒸發除去乙醇，所得固體放置在真空干燥器中過夜以除盡乙醇。將上述固體與乳糖、羥丙甲纖維素E15、羥丙甲纖維素K4M過60目篩混均，加入3％羥丙甲基纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。40-50℃烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的滑石粉，混合均勻，壓片，每粒含黃芩素120mg。用法每天二次，每次一片。
實施例7黃芩素軟膠囊處方內容物 每粒含膠殼黃芩素 40mg 明膠 46.00％PEG400 0.5ml 甘油 17.82％水36.18％取黃芩素溶于PEG400中，將此溶液制成軟膠囊。每粒含黃芩素40mg。
實施例8黃芩素注射劑處方黃芩素20mg聚氧乙烯醚蓖麻油 1.0mg注射用水加至 5.0mL將黃芩素溶于無水乙醇，加入聚氧乙烯醚蓖麻油(CremophorELP)，混勻，減壓蒸發除去乙醇，加入適量注射用水混勻成澄清透明溶液，經0.22μm微孔濾膜過濾，分裝封口，于100℃流通蒸汽滅菌30分鐘即得，每支含黃芩素20mg。
實施例9黃芩素注射劑處方黃芩素 2.0g亞硫酸鈉 4.0g聚維酮10.0g乙醇 50mL注射用水加至 1000mL將黃芩素分散在乙醇中，亞硫酸鈉溶于水中，在超聲或攪拌條件下將亞硫酸鈉溶液逐漸加入黃芩素中，使成澄清透明溶液；加聚維酮，攪拌使溶解，補加注射用水至足量；經0.22μm微孔濾膜過濾，分裝封口，于100℃流通蒸汽滅菌30分鐘即得，每支含黃芩素20mg。
實施例10注射用黃芩素(粉針劑)處方黃芩素20mg亞硫酸鈉 40mg聚維酮50mg甘露醇100mg將黃芩素分散在15％乙醇中，將亞硫酸鈉加入，超聲使溶解，加入聚維酮和甘露醇，攪拌使溶解；按0.1％加入針用活性炭，攪拌15分鐘，經鈦砂芯脫炭抽濾到潔凈的容器中，補加注射用水至足量，將溶液攪拌5分鐘使均勻，再經0.22μm微孔濾膜過濾，濾液灌裝在7ml西林瓶中，每瓶2ml，然后部分地塞上丁基橡膠塞，送至凍干箱內的板層上，插入溫度探頭，關閉箱門。按凍干曲線冷凍干燥，最后干燥溫度為35℃以上并保持2小時。密塞，放氣，出箱，軋蓋。每支含黃芩素20mg。
實施例11黃芩素混懸型注射劑處方黃芩素20mg羧甲基纖維素鈉10mg聚山梨酯800.1mg尼泊金乙酯0.5mg尼泊金丙酯0.5mg磷酸二氫鉀16.7mg磷酸氫二鉀1.7mg注射用水 加至2ml將黃芩素進行氣流粉碎，得粒徑10μm以下的微粉。將磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀溶于注射用水中，加入尼泊金乙酯和丙酯，再加入羧甲基纖維素鈉，60℃條件下使全部溶解。將微粉化后的黃芩素置于容器中，加聚山梨酯80研成細糊狀，將上述溶液逐漸加入，攪拌均勻后，經膠體磨研磨5至10次。按常規測定方法測定含量合格后，分裝在安瓿中，于100℃流通蒸汽滅菌30分鐘即得，每支含黃芩素20mg。
實施例12黃芩素軟膏處方黃芩素 50g單硬脂酸甘油酯 120g石蠟50g蜂蠟50g白凡士林50g液體石蠟250g司盤80 20g吐溫80 10g對羥基苯甲酸乙酯1g蒸餾水加至 1000g將黃芩素研為極細粉，按乳化法制備O/W型乳膏。
權利要求
1.一種高純度的黃芩素，具有5，6，7-三羥基黃酮結構的黃酮類化合物，其中黃芩素的含量按重量百分比計算為90％以上，還含有含量按重量百分比計算低于10％的漢黃芩素、千層紙素和白楊素化合物。
2.一種藥物組合物，其特征在于權利要求1所述的黃芩素與藥學上可以接受的藥物載體混合形成組合物。
3.權利要求2的藥物組合物是片劑、膠囊劑、軟膠囊、噴霧劑、凝膠劑、凝膠吸入劑、口服劑、混懸劑、沖劑、貼劑、軟膏、丸劑、散劑、注射劑、輸液劑、凍干注射劑、脂質體注射劑、靶向給藥注射劑、栓劑、緩釋制劑或控釋制劑。
4.權利要求3所述的片劑或膠囊劑為所述黃芩素與填充劑或崩解劑組配的常規片劑或膠囊劑；所述的緩釋制劑為所述的黃芩素與填充劑和羥丙甲纖維素K4M組配的緩釋片劑或緩釋膠囊劑；所述的軟膠囊為所述的黃芩素分散于油相中得到的軟膠囊；所述的軟膏是以所述黃芩素的微粉制備得到的；所述的注射劑為所述黃芩素與增溶劑或助溶劑形成的注射劑或混懸型注射液；所述凍干注射劑為所述黃芩素與亞硫酸鈉形成的凍干注射用粉針。
5.權利要求4所述的填充劑選自乳糖、微晶纖維素、糊精、淀粉和磷酸鈣；所述的崩解劑選自羥丙纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯聚維酮和交聯羧甲基纖維素鈉；可選加粘合劑、潤濕劑及潤滑劑。
6.權利要求5所述藥物組合物，其中所述的黃芩素∶乳糖或微晶纖維素∶羥丙纖維素或羧甲基淀粉鈉，按重量比計算為1∶0.5～2.5∶0.1～1.0，優選為1∶1.0～2.0∶0.4～0.6。
7.權利要求5所述藥物組合物，其中所述的黃芩素∶乳糖或微晶纖維素∶羥丙甲纖維素K4M，按重量比計算為1∶0.1～0.7∶0.15～0.8，優選為1∶0.2～0.5∶0.4～0.8。
8.權利要求4所述的軟膠囊所用油相選自大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油和橄欖油；亦可加增溶劑或潛溶劑或抗氧劑；所述的注射劑所用增溶劑選自聚氧乙烯醚蓖麻油、吐溫和普流羅尼F-68，所用助溶劑選自亞硫酸鈉、尿素、煙酰胺、脯氨酸、葡萄糖、枸櫞酸及其鈉鹽；所述的混懸型注射液是將所述黃芩素的微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、尼泊金酯和羧甲基纖維素鈉的水溶液，經研磨而制得。
9.一種權利要求1所述黃芩素的提取工藝，黃芩藥材用水潤濕后于20～30℃保溫12～24小時，用溶劑1回流提取，提取液濃縮后用70～100％的乙醇回流，使大部分提取物溶解，濾取不溶的黃色固體物，所得到的黃色固體物經溶劑2重結晶即得到黃芩素，其中的溶劑1為乙醇、乙酸乙酯、丙酮或其組合，溶劑2為丙酮、氯仿、丙酮與乙醇的混合液、氯仿與乙醇的混合液或氯仿與丙酮的混合液。
10.權利要求1-8中任意一項在制備治療肝炎、病毒性感冒、病毒感染引起的急性呼吸道綜合征等的藥物中應用。
全文摘要
本發明涉及高純度的黃芩素、其藥物組合物、制備方法和醫藥用途，該高純度的黃芩素按重量百分比計算含黃芩素為90％以上，另有漢黃芩素、千層紙素和白楊素等化合物；本發明的黃芩素及其藥物組合物臨床上用于治療各種病毒感染的疾病，如肝炎、病毒性感冒、病毒感染引起的急性呼吸道綜合癥等。
文檔編號A61K9/48GK1556108SQ200310110338
公開日2004年12月22日 申請日期2003年12月31日 優先權日2003年12月31日
發明者馮鋒, 柳文媛, 郭青龍, 柯學, 尤啟冬, 馮 鋒 申請人:中國藥科大學