噻吩并噠嗪酮及其在調節自身免疫疾病中的用途的制作方法

專利名稱：噻吩并噠嗪酮及其在調節自身免疫疾病中的用途的制作方法
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本發明涉及噻吩并噠嗪酮、它們的制備方法、含有它們的藥物組合物以及它們在治療中的用途。本發明還涉及它們在調節自身免疫疾病中的用途。
T-細胞在免疫應答中起重要作用，然而，在自身免疫疾病中，針對特定的組織，T-細胞被不適當激活并增殖，例如，導致與類風濕性關節炎有關的炎癥。在自身免疫疾病的調節中，抑制T-細胞增殖是有益的。本發明涉及有益于調節自身免疫疾病的化合物。
根據本發明，提供了式(1)化合物及其可藥用鹽和溶劑化物 其中R1和R2各自獨立地表示C1-6烷基、C3-6鏈烯基、C3-5環烷基C1-3烷基或C3-6環烷基，它們各自可任選被1-3個鹵素原子取代；Q是CR4R5，其中R4是氫、氟或C1-6烷基，R5是氫、氟或羥基；Ar是5-10-員芳香環系，其中最多4個環原子可以是獨立選自氮、氧和硫的雜原子，該環系任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自C1-4烷基(任選被1、2或3個羥基取代)、C1-4烷氧基、鹵素、鹵代烷基、二鹵代烷基或三鹵代烷基(其中烷基適宜含有1-4個碳原子)、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷硫基、C1-4烷氧基羰基、C2-4烷酰基、氧代、硫代、硝基、氰基、-N(R6)R7和-(CH2)pN(R8)R9、羥基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基亞磺酰基、氨基甲酰基、C1-4烷基氨基甲酰基、二-(C1-4烷基)氨基甲酰基、羧基、SO2N(R8)R9；Ar2是含有最多4個獨立地選自氮、氧和硫的雜原子的5或6-員芳環，該環可任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自C1-4烷基(任選被1、2或3個羥基取代)、C1-4烷氧基、鹵素、鹵代烷基、二鹵代烷基或三鹵代烷基(其中烷基適宜含有1-4個碳原子)、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷硫基、C1-4烷氧基羰基、C2-4烷酰基、氧代、硫代、硝基、氰基、-N(R6)R7和-(CH2)pN(R8)R9、羥基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基亞磺酰基、氨基甲酰基、C1-4烷基氨基甲酰基、二-(C1-4烷基)氨基甲酰基、羧基、SO2N(R8)R9；p是1-4；R6和R7各自獨立地表示氫、C1-4烷酰基或C1-4烷基，或R6和R7與相連的氮原子一起形成5-7-員飽和雜環，該雜環任選含有其它O、S、NH或N烷基；R8和R9各自獨立地表示氫、C1-4烷酰基或C1-4烷基，或R8和R9與相連的氮原子一起形成5-7-員飽和雜環，該雜環任選含有其它O、S、NH或N烷基；前提條件是，上述化合物不是5-[(4S)-4-羥基異噁唑烷-2-基羰基]-1-(異丁基)-3-甲基-6-[5-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-基甲基]噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮、6-[3，5-二甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-基甲基]-5-[(4S)-4-羥基異噁唑烷-2-基羰基]-1-異丁基-3-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮或6-[3，5-二甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-基甲基]-5-[(4S)-4-羥基異噁唑烷-2-基羰基]-3-甲基-1-丙基噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮或它們的可藥用鹽或溶劑化物。
R1適合是C1-6烷基或C3-6環烷基，特別是C1-6烷基。更優選R1是乙基、丙基、丁基或環丙基。最優選R1是乙基、異丁基、異丙基或環丙基。
更優選R1是諸如異丁基或異丙基的C1-4烷基。
優選R2是諸如乙基或甲基的C1-6烷基，更優選為甲基。
Q適合為CR5R6，其中R5是氫、C1-6烷基和R6是氫。優選Q是CR4R5，其中R4和R5都為氫。
對于Ar，5-10員單或雙芳香環系的實例包括噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡咯并吡啶并、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三嗪基、噁唑基、噻唑基、異噁唑基、吡唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基和喹啉基。
由R6和R7以及由R8和R9形成的5-7-員飽和雜環的實例包括嗎啉、哌啶、N-烷基哌啶、哌嗪、吡咯烷等。優選Ar是5或6-員芳香環系，其中至多2個環原子可以是獨立地選自氮、氧和硫的雜原子，該環系任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自C1-4烷基、C1-4烷氧基、鹵素、鹵代C1-4烷基、二鹵代C1-4烷基、三鹵代C1-4烷基、氧代、硫代、氰基或C1-4烷基磺酰基。
更優選Ar是含有兩個氮原子的5-員芳環，該環如上所述取代。
Ar的一個具體實例是任選被取代的吡唑環。優選Ar是被取代的吡唑環。
最優選Ar是被C1-4烷基，尤其是被甲基二取代的吡唑環。
例如，Ar適宜是下式(i)基團， 其中，R10和R11獨立地選自H、C1-6烷基、鹵代C1-4烷基、二鹵代C1-4烷基或三鹵代C1-4烷基，Ar2定義同上。
R10和R11選自H或C1-3烷基，例如甲基。特別是，R10和R11都是C1-3烷基，如甲基。
Ar2適宜是5或6-員芳香環系，其中最多3個環原子可以是獨立選自氮、氧和硫的雜原子，該環系任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自C1-4烷基、C1-4烷氧基、鹵素、二鹵烷基、三鹵代烷基、氧代、硫代、氰基或C1-4烷基磺酰基。
優選Ar2不是苯基。特別是Ar2包括至少一個雜原子。
鹵代烷基的實例是包括鹵代甲基在內的鹵代C1-4烷基，如氟代乙基。二鹵代烷基的實例是二鹵代C1-4烷基，其包括二氟甲基和二氯甲基。三鹵代烷基的實例是三鹵代C1-4烷基，如三氟甲基。
在優選的實施方案中，Ar2是含有氮和硫原子的5-員芳環，其如上所述取代。最優選Ar2是被鹵素，尤其是被氟取代的噻唑環。
在本發明的另一個實施方案中，Ar2是吡啶或嘧啶。該環上帶有至少一個取代基，但優選不被取代。
優選Ar2是吡啶基或嘧啶基。
優選的式(I)化合物包括
6-[[3，5-二甲基-1-(2-嘧啶基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-5-[[(4S)-4-羥基-2-異噁唑烷基]羰基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮和6-[[3，5-二甲基-1-(2-吡啶基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-5-[[(4S)-4-羥基-2-異噁唑烷基]羰基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮以及它們的可藥用鹽。
其它優選的式(I)化合物包括(S)-2-[[6-[[3，5-二甲基-1-(2-噻唑基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-1，2，3，4-四氫-3-甲基-1-(1-甲基乙基)-2，4-二氧代噻吩并[2，3-d]嘧啶-5-基]羰基]-4-異噁唑烷醇和其可藥用鹽。
烷基，單獨的或者作為其它基團的一部分，可以是直鏈的或支鏈的。除非另有說明，烷基可以含有1-6個碳原子，優選含有1-4個碳原子。
當然，式I化合物或其鹽可以存在互變異構現象，本說明書中的結構圖僅表示一種可能的互變異構體。不用說，本發明包括任何互變異構體。
某些式(1)化合物能夠以立體異構體的形式存在。當然本發明包括式(1)化合物的所有幾何和光學異構體及其混合物，包括外消旋體。這些內容也構成了本發明的一個方面。
在藥物組合物中使用的鹽是可藥用鹽，但其它鹽可以用于生產式(1)化合物和其可藥用鹽。例如，本發明的可藥用鹽包括上文定義的式(1)化合物的酸加成鹽，該式(1)化合物的堿性足以形成所述的酸加成鹽。這種酸加成鹽包括例如與提供可藥用陰離子的無機或有機酸形成的鹽，例如，與鹵化氫(尤其是鹽酸或氫溴酸，其中特別優選鹽酸)、硫酸、磷酸、三氟乙酸、枸櫞酸或馬來酸形成的鹽。合適的鹽包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、烷基磺酸鹽、芳基磺酸鹽、乙酸鹽、苯甲酸鹽、枸櫞酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、丁二酸鹽、乳酸鹽和酒石酸鹽。另外，當式I化合物具有足夠的酸性時，可以與提供可藥用陽離子的無機或有機堿形成可藥用鹽。例如，這種與無機或有機堿形成的鹽包括堿金屬鹽，如鈉鹽或鉀鹽，堿土金屬鹽，如鈣鹽或鎂鹽，銨鹽或例如與甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、嗎啉或三-(2-羥乙基)胺形成的鹽。
優選的鹽包括酸加成鹽，例如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、延胡索酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸、草酸鹽、甲磺酸鹽或對甲苯磺酸鹽或堿金屬鹽，如鈉鹽或鉀鹽。
另一方面，本發明提供了式(I)化合物的制備方法，包括
(a)將式(II)化合物， 其中R1和R2同式(I)中的定義或是其被保護的衍生基團，X和Y選自C1-4烷基(任選被1、2或3個羥基取代)、C1-4烷氧基、鹵代烷基、二鹵代烷基、三鹵代烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基或-(CH2)pN(R8)R9，與式(III)化合物反應，Ar2-G1-G2(III)其中Ar2同式(I)中的定義或是其被保護的衍生基團，G1是NH，G2是NH2、SH或OH，或者(b)將式(IV)化合物， 其中R1、R2、Ar和Ar2同式(I)中的定義或是其被保護的衍生基團，與式(V)化合物反應， 其中P是保護基團，或者(c)對于其中Ar具有NH基團的式(I)化合物而言，將式(VI)化合物，
其中R1、R2和Ar同式(I)中的定義，條件是Ar具有NH基團，或是其被保護的衍生基團，與式(VII)化合物反應，Ar2-L (VII)其中Ar2同式(I)中的定義或是其被保護的衍生基團，L是離去基團，和在方法(a)、(b)或(c)后，任選以任意順序進行下述步驟●除去任何保護基團●形成可藥用鹽。
化合物(II)和(III)的反應適宜在惰性溶劑(如乙醇)中，在溫度0-100℃，優選在10-50℃，任選在催化量的酸(如三氟乙酸)存在下進行。
化合物(IV)與化合物(V)反應如下在諸如二氯甲烷的惰性溶劑中，在堿(優選三乙胺或乙基二異丙基胺)存在下，在溫度0-100℃，優選在10-50℃，在化合物(V)存在下，通過化合物(IV)與偶聯劑(如EDCI和1-羥基苯并三唑)反應，使羧酸官能團轉化成活性形式，進而與化合物(V)反應。
在諸如NMP的惰性溶劑中，在諸如金屬碳酸鹽的堿存在下，在微波輻射條件下，通過加熱使化合物(VI)和(VII)反應；或者，使用帶有二胺配體的Cu(I)鹽，在催化(或化學計量)Buchwald條件下，在諸如二氧六環的溶劑中，在溫度約100℃下進行化合物(VI)和(VII)的反應。基團L是任何合適的離去基團，優選L是鹵素。
使式(VIII)化合物與基團Ar的親核片段(如，β-二酮的鋅鹽)反應，可制備式(II)化合物，
其中R1、R2和P定義同上，L是離去基團。優選L是鹵素，如溴。
通過例如在諸如氯仿的惰性溶劑中，在光照條件下，在溫度15-80℃，優選在50-70℃，使用N-溴代琥珀酰胺進行溴化反應，可以由式(IX)化合物制備式(VIII)化合物， 其中R1、R2和P定義同上。
通過保護式(X)所示的相應醇可制備式(IX)化合物， 其中R1、R2和P定義同上，例如，在諸如二氯甲烷的惰性溶劑中，在溫度0-60℃，優選在10-30℃，在諸如咪唑的堿存在下，通過例如與三烷基甲硅烷基鹵反應，可制備式(IX)化合物。
在諸如二氯甲烷的惰性溶劑中，在溫度0-60℃，優選在10-30℃，用諸如草酰氯的試劑處理式(XI)所示的酸，形成酰氯，然后，在諸如二氯甲烷的溶劑中，在溫度0-60℃，優選在10-30℃，在諸如三乙胺的堿存在下，將得到的的酰氯用羥基異噁唑烷處理，可以制備式(X)化合物，式(XI)中R1、R2和P定義同上。
使用標準方法，從相應的酯制備式(XI)化合物。
式(IV)化合物可由式(XII)化合物制備， 其中R1、R2和Ar定義同上，條件是Ar含有NH基團，R20是酯形成基團，例如，通過式(XII)化合物與式(XIII)化合物反應可得到式(IV)化合物，Ar2-鹵素(XIII)其中Ar2定義同上；或者，通過式(XII)化合物與化合物Ar2反應可得到式(IV)化合物，其中Ar定義同上，其條件是Ar含有氮中心。
可以在諸如二氧六環的惰性溶劑中，在溫度10-120℃，在銅(I)鹽和亞烷基二胺存在下，使式(XII)化合物與式(XIII)化合物反應。基團R20為酯生成基，例如，烷基，特別是甲基。
可以在諸如二甲基乙酰胺的溶劑中，在溫度10-200℃，在諸如碳酸鉀的堿存在下，任選使用微波輻射進行式(XII)化合物與Ar2的反應。
在諸如THF的溶劑中，在-78-0℃，使式(XV)化合物與諸如二異丙基氨基化鋰的強堿反應，
其中R1、R2和R20定義同上，然后與式(XVI)化合物加成，可制備式(XII)化合物，Ar-CHO(XVI)在諸如三乙基硅烷的氫化物源存在下，任選在諸如二氯甲烷的溶劑中，在溫度10-40℃，使用諸如TFA的強酸，使式(XVII)化合物脫氧制備式(IV)化合物；或者，在諸如乙酸乙酯的惰性溶劑中，通過式(XVII)化合物與活性羧酸(如，三氟乙酸酐)或甲磺酰氯進行酯化反應，使羥基活化，然后進行氫解，例如，在1-5巴和10-80℃下，使用鈀碳進行氫解，制備式(IV)化合物， 其中R1、R2、R20、Ar和Ar2定義同上。
使用類似于上述化合物(XV)與(XVI)反應的條件，通過上文定義的式(XV)化合物與式(XVIII)化合物反應，Ar2-Ar-CHO(XVIII)其中Ar和Ar2定義同上，制備式(XVII)化合物。
在溫度0-100℃下，在含水溶劑中，例如，在乙醇水溶液或甲醇水溶液中，使用堿金屬或堿土金屬氫氧化物，或者，在溫度20-100℃下，在惰性溶劑中，使用無機酸水溶液，將式(XII)化合物的酯官能團水解，然后，在諸如PyBrOP的縮合劑存在下，在諸如THF的惰性溶劑中，在諸如三乙胺的堿存在下，在溫度0-30℃，使酸性殘基與式(V)化合物偶合，可以制備式(VI)化合物。
上述原料可從市場購得或可以通過本領域已知的常規化學方法制備。
由于本發明化合物在人類和非人類動物體內具有藥學活性，因此，本發明化合物是有用的。本發明化合物可以表示為藥物，所述藥物用于(預防)治療自身免疫性、炎性、增生性和過度增生性疾病以及免疫介導疾病，包括器官或組織移植排異反應和獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)。
上述疾病的實例是(1)(呼吸道)氣道疾病，包括慢性阻塞性肺疾病(COPD)；哮喘，例如，支氣管哮喘、變應性哮喘、內因性哮喘、外因性哮喘和塵埃性哮喘，特別是慢性或慢性頑固性哮喘(例如，晚期哮喘和氣道反應性過強)；支氣管炎；急性、變應性、萎縮性鼻炎和慢性鼻炎，包括干酪性鼻炎、肥厚性鼻炎、膿性鼻炎、干燥性鼻炎和藥物性鼻炎；膜性鼻炎，包括格魯布性鼻炎、纖維蛋白性鼻炎和假膜性鼻炎和結核性鼻炎；季節性鼻炎，包括神經性鼻炎(花粉病)和血管舒縮性鼻炎；肉樣瘤病、農民肺和相關疾病、纖維化肺和自發性間質性肺炎；(2)(骨和關節)類風濕病性關節炎、血清反應陰性脊椎關節病(包括強直性脊柱炎、銀屑病關節炎和賴特病)、貝切特氏病、斯耶格倫氏病和系統性硬化病；(3)(皮膚)牛皮癬、特應性皮炎、接觸性皮炎和其它濕疹性皮炎、皮脂溢性皮炎、扁平苔癬、天皰瘡、大皰性天皰瘡、大皰性表皮松解、蕁麻疹、血管皮炎、血管炎、紅斑、皮膚嗜曙紅細胞增多、葡萄膜炎、斑禿和春季結膜炎；(4)(胃腸道)腹腔疾病、直腸炎、嗜曙紅細胞性胃腸炎、肥大細胞增生、節段性回腸炎、潰瘍性結腸炎、與食物有關但對腸無影響的變態反應，例如，偏頭痛、鼻炎和濕疹；(5)(其它組織和系統疾病)多發性硬化癥、動脈粥樣硬化、獲得性免疫缺失綜合征(AIDS)、紅斑狼瘡、全身性狼瘡、紅斑、橋本氏甲狀腺炎、重癥肌無力、I型糖尿病、腎病綜合征、嗜曙紅細胞增多性筋膜炎、IgE過多綜合征、結節性麻風、賽塞利綜合征和特發性血小板減少性紫瘢；(6)(同種異體移植物排斥)例如，腎、心臟、肝、肺、骨髓、皮膚和角膜移植之后的急性和慢性排異；和慢性移植物抗宿主疾病；(7)癌。
因此，本發明提供了上文定義的用于治療的式(1)化合物或其可藥用鹽。
另一方面，本發明提供了上文定義的式(1)化合物或其可藥用鹽在制備用于治療的藥物中的用途。
在本說明書中，除非另有說明，術語“治療”也包括“預防”。術語“治療的”和“治療地”應當作相應的解釋。
預計，預防與人的治療特別相關，這里，所述的人患有上述疾病或病癥或被認為患上述疾病或病癥的危險性加大。有患特定疾病或病癥危險性的人通常包括那些有上述疾病或病癥家族史的人或那些通過遺傳測試或篩查被確定為特別易患上述疾病或病癥的人。
本發明還提供了一種進行免疫抑制(例如，在同種異體移植物排斥的治療中)的方法，包括對患者給藥治療有效量的上文定義的式(1)化合物或其可藥用鹽。
本發明還提供了一種治療患有氣道疾病(例如，哮喘或COPD)或有患這種疾病危險的患者的這種疾病或降低患這種疾病危險性的方法，包括對所述患者給藥上文定義的治療有效量式(1)化合物或其可藥用鹽。
對于上述治療用途，給藥劑量當然取決于所用化合物、給藥方式、所需的治療和所顯示的疾病。然而，對于進行免疫抑制，式(1)化合物日劑量一般為從0.1mg/kg，優選從0.3mg/kg，更優選從0.5mg/kg，最優選從1mg/kg至30mg/kg。對于氣道疾病的治療，式化合物(1)的典型日劑量為0.001-30mg/kg。
可以使用式(1)化合物和其可藥用鹽本身，但一般以其可藥用組合物的形式給藥，其中式(1)化合物/鹽/溶劑化物(活性組分)與可藥用輔藥、稀釋劑或載體組合。根據給藥方式，藥物組合物優選含有0.05-99w％(重量百分比)活性組分，更優選低于80w％，例如，0.10-70w％，甚至更優選低于50w％，所有的重量百分比是基于組合物的總重量。
因此，本發明還提供了藥物組合物，其含有上文定義的式(1)化合物或其可藥用鹽以及可藥用輔藥、稀釋劑或載體。
本發明還提供了制備本發明藥物組合物的方法，包括將上文定義的式(1)化合物或其可藥用組合物與可藥用輔藥、稀釋劑或載體混合。
本發明藥物組合物可以以溶液、混懸液、七氟烷烴氣霧劑和干粉制劑的形式局部給藥(例如，對肺和/或氣道給藥或對皮膚給藥)；或進行系統給藥，例如，以片劑、膠囊、糖漿、粉劑或粒劑的形式口服給藥，或者以溶液或混懸液的形式腸胃外給藥，或者皮下給藥，或以栓劑形式直腸給藥，或者經皮給藥。
例如，可以使用下文描述的方法，評定能夠抑制PMA/離子霉素刺激的外周血單核細胞增殖的化合物的能力。
現用下述實施例來舉例說明本發明，除非另有說明，其中(i)通過真空旋轉式汽化進行蒸發和在過濾除去諸如干燥劑的殘余固體后進行處理步驟；(ii)在常溫(即，18-25℃)和在諸如氬氣或氮氣的惰性氣氛下進行操作；(iii)收率僅用于舉例說明，不一定是可得到的最高收率；(iv)式I終產物的結構通過核(通常是質子)磁共振(NMR)和質譜技術確認；質子磁共振化學位移值用δ來測量，峰多重性表示如下s，單峰；d，雙峰；t，三重峰；m，多重峰；br，寬峰；q，四重峰；quin，五重峰；(v)中間體一般沒有被充分表征，純度通過薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)、質譜法(MS)、紅外光譜法(IR)或NMR分析來測定；縮寫2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌 DDQ二甲基甲酰胺 DMF四氫呋喃 THF下述實施例舉例說明了本發明。
實施例16-[[3，5-二甲基-1-(2-嘧啶基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-5-[[(4S)-4-羥基-2-異噁唑烷基]羰基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮 a)2-甲基-5-(N，N-甲基乙基氨基)-噻吩-3，4-二甲酸乙基甲基酯在氮氣氣氛下，在65℃下，用異硫氰酸異丙酯(10.1g)處理無水THF(200ml)中的乙氧基羰基亞甲基三苯基正膦(33.8g)16小時。將混合物冷卻至-78℃，加入3-溴-2-氧代-丁酸甲酯。使反應物緩慢升至室溫。在室溫保持24小時后，再加入3-溴-2-氧代-丁酸甲酯(2.8g)，并在60℃加熱混合物16小時。將冷卻的反應物傾入水(1.5L)中，并萃取到乙醚中。干燥并蒸發，得到油狀物，用色譜法提純(SiO2/先10∶1異己烷-乙酸乙酯后5∶1異己烷-乙酸乙酯)，得到副標題化合物(23.5g)。
δ1HCDCl31.23-1.35(9H，m)，2.26(3H，s)，3.46(1H，m)，3.82(3H，s)，4.2(2H，q)，7.42(1H，br.s)。
b)1，2，3，4-四氫-3，6-二甲基-1-(1-甲基乙基)-2，4-二氧代-噻吩并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸甲酯在氮氣氣氛下，滴加乙酰氯(5.34ml)處理懸浮在無水甲苯(90ml)中的氰酸銀(13.5g)，并劇烈攪拌30分鐘。加入溶解在無水甲苯(15ml)中的步驟a)產物(23g)，攪拌混合物72小時。加入乙醚(360ml)，濾出不溶物并用少量乙醚洗滌。將合并的有機液用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，干燥并蒸發。在室溫下，用甲醇鈉的甲醇溶液(25wt％，64ml)處理殘余物72小時。在冰中冷卻反應物，用氯化三甲基硅烷(50.8ml)處理，并在室溫攪拌過夜。真空除去所有揮發物，將殘余物在水和乙酸乙酯之間分配。干燥并蒸發有機溶液，得到殘余物，將殘余物用色譜法提純(SiO2/先2∶1異己烷-乙酸乙酯后3∶2異己烷-乙酸乙酯)，分離出主要組分(12.2g)。在室溫下，將其轉移至含有碳酸鉀(6.95g)和碘代甲烷(7.1g)的無水DMF(150ml)中并保持72小時。將混合物傾入水(2L)中，酸化并萃取至乙醚中。用鹽水洗滌，干燥并蒸發，得到固體，將固體在含有乙酸乙酯(3ml)的異己烷(200ml)中煮沸。冷卻時，收集沉淀出的淺黃色固體并干燥，得到副標題化合物(10.5g)。
MS(APCI)[M+H]+297δ1HCDCl31.6(6H，d)，2.44(3H，s)，3.37(3H，s)，3.95(3H，s)，4.66(1H，br)c)1，2，3，4-四氫-3，6-二甲基-1-(1-甲基乙基)-2，4-二氧代-噻吩并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸向步驟b)產物(3.81g)在THF(50ml)和甲醇(5ml)中的溶液中加入1NNaOH(25.7ml)，并在氮氣氣氛下攪拌混合物18小時。用2.5N HCl酸化，并用DCM萃取，將有機萃取液用水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發，得到固體副標題化合物(3.40g)。
MS(ESI)283[M+H]+d)5-[[(4S)-4-羥基-2-異噁唑烷基]羰基]-3，6-二甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮向步驟c)產物(3.40g)在DCM(50ml)中的懸浮液中加入草酰氯(1.16ml)和DMF(10μl)，并在氮氣氣氛下攪拌混合物2小時。在0℃和氮氣氣氛下，將酰基氯溶液加入到(S)-4-異噁唑烷醇鹽酸鹽(1.51g)和三乙胺(3.52ml)在DCM(20ml)中的懸浮液中，并在室溫攪拌混合物3小時。用水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發。殘余物用硅膠柱色譜法提純，用乙酸乙酯洗脫，得到固態副標題化合物(2.52g)。
MS(ESI)354[M+H]+δ1HDMSO1.50-1.52(6H，m)，2.30-2.34(3H，m)，3.18-3.19(3H，m)，3.42-4.08(4H，m)，4.59-4.74(2H，m)，5.49-5.50(1H，m)e)5-[[(4S)-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-2-異噁唑烷基]羰基]-3，6-二甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮向步驟d)產物(2.52g)的DCM(30ml)溶液中加入咪唑(0.53g)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(1.18g)，并在氮氣氣氛下攪拌混合物24小時。用1N HCl酸化并用DCM萃取，有機萃取液用水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發。殘余物用硅膠柱色譜法提純，用異己烷-乙酸乙酯(3∶1)洗脫，然后用異己烷-乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到副標題化合物(2.42g)。
δ1HDMSO0.09(6H，d)，0.86(9H，s)，1.50(6H，d)，2.31-2.34(3H，m)，3.18-3.19(3H，m)，3.44-4.15(4H，m)，4.50-4.97(2H，m)f)6-溴甲基-5-[[(4S)-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-2-異噁唑烷基]羰基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮向步驟e)產物(2.42g)的氯仿(100ml)溶液中加入N-溴琥珀酰亞胺(1.01g)，并在300W鎢燈照射下回流加熱混合物2小時。冷卻后，用1N NaOH溶液和水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發，得到副標題化合物(2.83g)。
MS(ESI)546和548[M+H]+g)6-(2-乙酰基-3-氧代丁基)-5-[[(4S)-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-2-異噁唑烷基]羰基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮將步驟f)產物(2.83g)和乙酰丙酮酸鋅水合物(1.47g)的氯仿(50ml)溶液回流加熱1小時。冷卻后用碳酸氫鈉溶液洗滌，通過塞力特硅藻土過濾，用鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發，得到副標題化合物(2.93g)。
MS(ESI)566[M+H]+h)5-[[(4S)-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-2-異噁唑烷基]羰基]-6-[[3，5-二甲基-1-(2-嘧啶基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮向步驟g)產物(0.73g)的氯仿(25ml)溶液中加入嘧啶-2-基肼(0.27g)，并攪拌混合物48小時。用水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發。將殘余物用硅膠柱色譜法提純，先用異己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，后用異己烷/乙酸乙酯(1∶4)洗脫，得到副標題化合物(0.43g)。
MS(ESI)640[M+H]+i)6-[[3，5-二甲基-1-(2-嘧啶基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-5-[[(4S)-4-羥基-2-異噁唑烷基]羰基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮將步驟h)產物(0.43g)和三氟乙酸(0.5ml)的DCM(10ml)溶液攪拌72小時。真空濃縮，用碳酸氫鈉溶液稀釋，用乙酸乙酯萃取，將有機萃取液用水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發。將殘余物用硅膠柱色譜法提純，先用乙酸乙酯后用乙酸乙酯/甲醇(9∶1)洗脫，得到標題化合物(30mg)。
MS(APCI)526[M+H]+δ1HDMSO1.44-1.46(6H，m)，2.16-2.19(3H，m)，2.53-2.55(3H，m)，3.17-3.19(3H，m)，3.48-4.14(6H，m)，4.38(1H，s，br)，4.60-4.80(1H，m)，5.48-5.52(1H，m)，7.46(1H，dt)，8.87(2H，t)。
實施例26-[[3，5-二甲基-1-(2-吡啶基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-5-[[(4S)-4-羥基-2-異噁唑烷基]羰基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮
a)5-[[(4S)-4-[[(1，1-二甲基乙基)二甲基甲硅烷基]氧基]-2-異噁唑烷基]羰基]-6-[[3，5-二甲基-1-(2-吡啶基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮向實施例1步驟g)產物(0.73g)的氯仿(25ml)溶液中加入吡啶-2-基肼(0.28g)，攪拌混合物48小時。用水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發。將殘余物用硅膠柱色譜法提純，先用異己烷后用異己烷/乙酸乙酯(1∶1)洗脫，得到副標題化合物(0.28g)。
MS(ESI)639[M+H]+b)6-[[3，5-二甲基-1-(2-吡啶基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-5-[[(4S)-4-羥基-2-異噁唑烷基]羰基]-3-甲基-1-(1-甲基乙基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮將步驟a)產物(0.28g)和三氟乙酸(0.5ml)的DCM(10ml)溶液攪拌72小時。真空濃縮，用碳酸氫鈉溶液稀釋，用乙酸乙酯萃取，將有機萃取液用水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發。將殘余物用硅膠柱色譜法提純，先用乙酸乙酯后用乙酸乙酯/甲醇(49∶1)洗脫，得到標題化合物(88mg)。
MS(APCI)525[M+H]+δ1HDMSO1.44-1.47(6H，m)，2.17-2.19(3H，m)，2.56-2.58(3H，m)，3.47-4.14(6H，m)，4.38(1H，s，br)，4.60-4.80(1H，m)，5.51-5.52(1H，m)，7.30-7.34(1H，m)，7.80(1H，d)，7.95(1H，dt)，8.45-8.47(1H，m)。
實施例3(S)-2-[[6-[[3，5-二甲基-1-(2-噻唑基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-1，2，3，4-四氫-3-甲基-1-(1-甲基乙基)-2，4-二氧代噻吩并[2，3-d]嘧啶-5-基]羰基]-4-異噁唑烷醇
在100℃下，在1，4-二氧六環(1ml)中，將(S)-2-[[6-[(3，5-二甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]-1，2，3，4-四氫-3-甲基-1-(1-甲基乙基)-2，4-二氧代噻吩并[2，3-d]嘧啶-5-基]羰基]-4-異噁唑烷醇(237mg)、2-溴噻唑(237mg)、碘化銅(I)(20mg)、反-環己烷-1，2-二胺(15mg)和碳酸鉀的混合物加熱24小時。濃縮反應混合物至干，用SiO2色譜法(Biotage cartridge)(用EtOAc-5％MeOH/EtOAc溶液洗脫)，接著用反相色譜法提純，得到白色固體標題化合物(110mg)。
MS(APCI+ye)M+H＝531.1δ1HDMSO，120℃ 1.47(6H，d)，2.17(3H，s)，2.60(3H，s)，3.20(3H，s)，3.46(1H，d)，3.75(1H，d)，3.89-3.95(2H，m)，3.89(2H，s)，4.46(1H，sep)，4.70(1H，s)，5.08(1H，s)，7.38(1H，d)，7.56(1H，d)。
藥理學數據抑制PMA/離子霉素刺激的外周血單核細胞增殖在96孔平底微量滴定板中進行PMA/離子霉素刺激的PBMC增殖試驗。將化合物配制成10mM二甲亞砜儲備液。在RPMI中制備該儲備液的50倍稀釋液，并用該溶液制備系列稀釋液。將10μl稀釋50倍的稀釋儲備液或其稀釋液加到孔中，使試驗起始濃度為9.5μM并遞減。每個孔中加入在RPMI1640培養基中的1×105個PBMC，PBMC由來自單個供體的人類外周血獲得，RPMI 1640培養基中補充有10％人血清、2mM谷氨酰胺和青霉素/鏈霉素。將佛波醇乙酸肉豆蔻酸酯(PMA)(最終濃度為0.5ng/ml)和離子霉素(最終濃度為500ng/ml)加到在補料RPMI 1640培養基(如上所述)中的細胞中，使得最終試驗體積為0.2ml。在5％二氧化碳下，在潮濕氣氛中，于37℃下培養細胞72小時。加入3H-胸腺嘧啶脫氧核苷(0.5μCi)，培養最后6小時。然后測定細胞摻入的放射性水平，即，測定增殖。
在上述試驗中，發現實施例化合物的IA50值小于1×10-6M。對于具體的實施例，在上述試驗中，實施例1的PIA50為8.3，實施例3的PIA50為9.07。
權利要求
1.式(1)化合物或其可藥用鹽或溶劑化物， 其中R1和R2各自獨立地表示C1-6烷基、C3-6鏈烯基、C3-5環烷基C1-3烷基或C3-6環烷基，它們各自可任選被1-3個鹵素原子取代；Q是CR4R5，其中R4是氫、氟或C1-6烷基，R5是氫、氟或羥基；Ar是5-10-員芳香環系，其中最多4個環原子可以是獨立選自氮、氧和硫的雜原子，該環系任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自C1-4烷基(任選被1、2或3個羥基取代)、C1-4烷氧基、鹵素、鹵代烷基、二鹵代烷基或三鹵代烷基(其中烷基適宜含有1-4個碳原子)、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷硫基、C1-4烷氧基羰基、C2-4烷酰基、氧代、硫代、硝基、氰基、-N(R6)R7和-(CH2)pN(R8)R9、羥基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基亞磺酰基、氨基甲酰基、C1-4烷基氨基甲酰基、二-(C1-4烷基)氨基甲酰基、羧基、SO2N(R8)R9；Ar2是含有最多4個獨立地選自氮、氧或硫的雜原子的5或6-員芳環，該環可任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自C1-4烷基(任選被1、2或3個羥基取代)、C1-4烷氧基、鹵素、鹵代烷基、二鹵代烷基或三鹵代烷基(其中烷基適宜含有1-4個碳原子)、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷硫基、C1-4烷氧基羰基、C2-4烷酰基、氧代、硫代、硝基、氰基、-N(R6)R7和-(CH2)pN(R8)R9、羥基、C1-4烷基磺酰基、C1-4烷基亞磺酰基、氨基甲酰基、C1-4烷基氨基甲酰基、二-(C1-4烷基)氨基甲酰基、羧基、SO2N(R8)R9；p是1-4；R6和R7各自獨立地表示氫原子、C1-4烷酰基或C1-4烷基，或R6和R7與相連的氮原子一起形成5-7-員飽和雜環，該雜環任選含有其它O、S、NH或N烷基；R8和R9各自獨立地表示氫、C1-4烷酰基或C1-4烷基，或R8和R9與相連的氮原子一起形成5-7-員飽和雜環，該雜環任選含有其它0、S、NH或N烷基；前提條件是，上述化合物不是5-[(4S)-4-羥基異噁唑烷-2-基羰基]-1-(異丁基)-3-甲基-6-[5-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-基甲基]噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮、6-[3，5-二甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-基甲基]-5-[(4S)-4-羥基異噁唑烷-2-基羰基]-1-異丁基-3-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮或6-[3，5-二甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-基甲基]-5-[(4S)-4-羥基異噁唑烷-2-基羰基]-3-甲基-1-丙基噻吩并[2，3-d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮或它們的可藥用鹽或溶劑化物。
2.根據權利要求1的化合物，其中R1是C1-6烷基。
3.根據權利要求1或2的化合物，其中R2是甲基。
4.根據權利要求1-3中任一權利要求的化合物，其中Q是CH2。
5.根據權利要求1-4中任一權利要求的化合物，其中Ar是5或6-員芳香環系，其中至多2個環原子可以是獨立選自氮、氧和硫的雜原子，所述環系任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自C1-4烷基、C1-4烷氧基、鹵素、二鹵代烷基、三鹵代烷基、氧代、硫代、氰基和C1-4烷基磺酰基。
6.根據權利要求5的化合物，其中Ar是式(i)基團 其中R10和R11獨立地選自H、C1-6烷基或鹵代C1-6烷基，和Ar2定義同上。
7.根據上述權利要求中任一權利要求的化合物，其中Ar2不是苯基。
8.根據權利要求7的化合物，其中Ar2含有至少一個雜原子。
9.根據權利要求1-6中任一權利要求的化合物，其中Ar2是5或6-員芳香環系，其中最多3個環原子可以是獨立選自氮、氧和硫的雜原子，所述環系任選被一個或多個取代基取代，所述取代基獨立地選自C1-4烷基、C1-4烷氧基、鹵素、二鹵烷基、三鹵代烷基、氧代、硫代、氰基或C1-4烷基磺酰基。
10.根據權利要求9的化合物，其中Ar2是吡啶基或嘧啶基。
11.根據權利要求9的化合物，其中Ar2是噻唑基。
12.式(I)化合物，選自(S)-2-[[6-[[3，5-二甲基-1-(2-噻唑基)-1H-吡唑-4-基]甲基]-1，2，3，4-四氫-3-甲基-1-(1-甲基乙基)-2，4-二氧代噻吩并[2，3-d]嘧啶-5-基]羰基]-4-異噁唑烷醇和其可藥用鹽。
13.權利要求1-12中任一權利要求定義的用于治療的化合物。
14.藥物組合物，含有權利要求1-12中任一權利要求定義的式(I)化合物或其可藥用鹽和可藥用載體。
15.進行免疫抑制(例如，在同種異體移植物排斥的治療中)的方法，包括對患者給藥治療有效量的權利要求1-12中任一權利要求限定的式(I)化合物或其可藥用鹽。
16.治療患有氣道疾病(例如，哮喘或COPD)或有患這種疾病危險的患者的這種疾病或降低患這種疾病危險性的方法，包括對所述患者給藥治療有效量的權利要求1-12中任一權利要求限定的式(I)化合物或其可藥用鹽。
17.制備權利要求1的式(I)化合物的方法，包括(a)將式(II)化合物， 其中R1和R2同式(I)中的定義或是其被保護的衍生基團，X和Y選自C1-4烷基(任選被1、2或3個羥基取代)、C1-4烷氧基、鹵代烷基、二鹵代烷基、三鹵代烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、C1-4烷氧基羰基或-(CH2)pN(R8)R9，與式(III)化合物反應，Ar2-G1-G2(III)其中Ar2同式(I)中的定義或是其被保護的衍生基團，G1是NH，G2是NH2、SH或OH，或者(b)將式(IV)化合物， 其中R1、R2、Ar和Ar2同式(I)中的定義或是其被保護的衍生基團，與式(V)化合物反應， 其中P是保護基團，或者(c)對于其中Ar具有NH基團的式(I)化合物而言，將式(VI)化合物， 其中R1、R2和Ar同式(I)中的定義，條件是Ar具有NH基團，或是其被保護的衍生基團，與式(VII)化合物反應，Ar2-L (VII)其中Ar2同式(I)中的定義或是其被保護的衍生基團，L是離去基團，和在方法(a)、(b)或(c)后，任選以任意順序進行下述步驟·除去任何保護基團·形成可藥用鹽。
全文摘要
本發明涉及式(I)噻吩并噠嗪酮化合物，其中，R
文檔編號A61P37/00GK1738825SQ200480002404
公開日2006年2月22日 申請日期2004年1月15日 優先權日2003年1月17日
發明者西蒙·D·吉爾, 安東尼·H·英戈爾 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司