用于治療癌癥的吡唑啉衍生物的制作方法

專利名稱：用于治療癌癥的吡唑啉衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及新型取代的吡唑啉化合物、包含所述化合物的藥物組合物以及這些化合物用于治療癌癥的用途，具體用于治療腦癌、骨癌、唇癌、口癌、食道癌、胃癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌、皮膚癌，特別用于治療結腸癌和/或腸癌和/或前列腺癌。
WO 00/76503公開了1-(4-氨基磺酰基芳基)-3-取代的5-芳基-4，5-二氫-吡唑作為環加氧酶-2的抑制劑用于治療炎癥和與炎癥相關的疾病以及作為細胞腫瘤變異和腫瘤轉移增長的抑制劑。
癌癥仍是世間最令人恐懼的疾病之一。尋找有效的治療方法和治療用藥物為正在進行的研究的目標，對人的預期壽命和健康將會有很大的影響。
因此本發明的目標為提供在治療癌癥中具有改進活性的新型化合物。
令人驚訝地發現式I和式I′的取代的吡唑啉化合物在治療癌癥(特別是結腸和/或前列腺癌)方面具有改進的抗腫瘤活性，雖然這些化合物不抑制環加氧酶-1和/或環加氧酶-2。
因此，本發明的一方面為提供式I和式I′的化合物及其非對映異構體和/或對映異構體或其混合物包括其外消旋物及其藥學上可接受的鹽
其中R1和R2為甲基；R3和R4相同或不同，為C1-6烷基，其中至少一個被至少一個鹵原子取代。
優選式I′化合物，其中R3和R4相同或不同，為C1-3烷基，其中至少一個被至少一個鹵原子取代，及其非對映異構體和/或對映異構體或其混合物包括其外消旋物及其藥學上可接受的鹽。
優選式I′化合物，其中R3和R4為甲基，其中至少一個被至少一個鹵原子取代，及其非對映異構體和/或對映異構體或其混合物包括其外消旋物及其藥學上可接受的鹽。
還優選式I′化合物，其中R3和R4為甲基，其中至少一個被至少一個氟和/或氯原子取代，及其非對映異構體和/或對映異構體或其混合物包括其外消旋物及其藥學上可接受的鹽。
還更優選式I′化合物，其中R3和R4為甲基，且被至少一個氟和/或氯原子取代，及其非對映異構體和/或對映異構體或其混合物包括其外消旋物及其藥學上可接受的鹽。
還優選式I′化合物，其中R3和R4為CF3基團，及其非對映異構體和/或對映異構體或其混合物包括其外消旋物及其藥學上可接受的鹽。
最優選式I化合物為1-(4-氨基磺酰基苯基)-3-三氟甲基-5-(2，5-二甲基苯基)-4，5-二氫-吡唑和式I′化合物為1-(4-氨基磺酰基苯基)-3-三氟甲基-5-[3，5-雙-(三氟甲基)-苯基]-4，5-二氫-吡唑及其非對映異構體和/或對映異構體或其混合物包括其各自的外消旋物及其藥學上可接受的鹽。
本發明的式I化合物可根據以下反應流程通過常規路線制備 其中R1和R2如上定義。
本發明的式I化合物通過式II化合物(其中R1和R2如上定義)與式III化合物反應制得。
所述反應優選在有機溶劑如醇(甲醇或乙醇)或醚(二烷或四氫呋喃)中進行。所述反應優選在酸性介質中進行。優選加入有機酸(如乙酸)或無機酸(如鹽酸)。所述反應還可在堿性介質中進行。優選加入堿如哌啶、哌嗪、氫氧化鈉、氫氧化鉀、甲醇鈉或乙醇鈉。反應溫度可從室溫至有機溶劑的回流溫度，反應時間可從數小時至最長達數天。
本發明的式I′化合物可根據以下流程通過常規路線制備 其中R3和R4如上定義。
本發明的通式I′化合物可通過通式II′化合物(其中R3和R4如上定義)與式III化合物反應制得。
所述反應可在有機溶劑如醇(例如甲醇或乙醇)或醚(例如二烷或四氫呋喃)中進行。所述反應可在酸性介質中進行。優選加入有機酸(如乙酸)或無機酸(如鹽酸)。所述反應還可在堿性介質中進行。因此優選加入堿如哌啶、哌嗪、氫氧化鈉、氫氧化鉀、甲醇鈉或乙醇鈉。反應溫度可從室溫至最高達有機溶劑的回流溫度，反應時間可從數小時至最長達數天。
式II化合物為得到本發明的式I化合物的合成路線中的中間體，可通過公知的路線制備在膦酸二烷基酯(如甲基膦酸二乙酯(diethylmethylphosphonate))和強堿(優選有機堿，如LDA)存在下，將式IV的取代的苯甲醛(其中R1和R2如上定義) 與N-苯基-1-氯-三氟乙亞胺反應，或者通過Wittig反應與單-、二-或三氟乙酰基甲叉三苯膦烷和堿(如碳酸鈉或碳酸鉀)反應。所述反應可在溶劑如二氯甲烷、氯仿或醚(如四氫呋喃、乙醚、二甲氧基乙烷或二烷)中進行。反應溫度可從-70℃至有機溶劑的回流溫度。反應時間可從數分鐘至最長達幾小時。
式II化合物還可通過通式IV的醛(其中R1和R2如上定義)與1，1，1-三氟丙酮的羥醛縮合反應制備。所述反應可在無機堿(例如堿金屬(如鋰、鈉)的氫氧化物或氫氧化鉀)或有機堿(例如哌啶)存在下，在有機溶劑(如四氫呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、甲醇、乙醇)，任選在水存在下進行。所述縮合反應的反應溫度可從-20℃至室溫，反應時間可從數小時至最長達數天。
式II′化合物可通過常規路線制備在膦酸二烷基酯(如甲基膦酸二乙酯)和強堿(優選有機堿，如LDA)存在下，將式IV′的取代的苯甲醛(其中R3和R4如上定義) 與N-苯基-1-氯-三氟乙亞胺反應，或者通過Wittig反應與單-、二-或三氟乙酰基甲叉三苯基膦烷和堿(如碳酸鈉或碳酸鉀)反應。所述反應可在有機溶劑如二氯甲烷、氯仿或醚(如四氫呋喃、乙醚、二甲氧基乙烷或二烷)中進行。反應溫度可從-70℃至有機溶劑的回流溫度。反應時間可從數分鐘至最長達幾小時。
式II化合物還可通過通式IV的醛(其中R3和R4如上定義)與1，1，1-三氟丙酮的羥醛縮合反應制備。所述反應可在無機堿(例如堿金屬(如鋰、鈉)的氫氧化物或氫氧化鉀)或有機堿(例如哌啶)存在下，在溶劑(如四氫呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺、甲醇、乙醇)，任選在水存在下進行。所述縮合反應的反應溫度可從-20℃至室溫，反應時間可從數小時至最長達數天。
本發明的式I和I′化合物可以其堿形式或其任何藥學上可接受的鹽形式分離。
本發明還涉及至少一種通式I和/或式I′的取代的吡唑啉化合物用于制備治療癌癥用藥物的用途，具體用于治療腦癌、骨癌、唇癌、口癌、食道癌、胃癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌、皮膚癌、腸癌、結腸癌和/或前列腺癌，特別用于治療結腸癌、腸癌和/或前列腺癌。
本發明還涉及一種包含至少一種通式I和/或式I′化合物的藥物組合物，所述藥物組合物用于對人或動物(優選人，包括嬰兒、兒童和成人)給藥。本發明的組合物可通過本領域的技術人員已知的標準方法制備。根據給藥的方式，可通過加入公知的助劑來改變藥物的組成。
本發明的藥物組合物可例如與常規的可注射的液體載體(例如水或合適的醇)胃腸道外給藥。常規的注射用藥物賦形劑(例如穩定劑、增溶劑和緩沖劑)可包括在這些可注射的組合物中。這些藥物組合物可優選肌內、腹膜內或靜脈內注射。
本發明的藥物制劑還可配制成包含一種或多種固體或液體形式的生理學上相容的載體或賦形劑的口服給藥制劑。這些制劑可包含常規的組分，例如粘合劑、填料、潤滑劑和可接受的濕潤劑。所述制劑可采用任何方便的形式，例如片劑、丸劑、膠囊劑、錠劑、水溶液或油性溶液、混懸液、乳劑或適用于在使用之前與水或其他合適的液體介質再構成用于瞬間釋放或緩釋的干燥的粉末形式。本發明的組合物還可更具體地進行配制。
口服給藥用液體組合物還可包含某些添加劑，例如增甜劑、矯味劑、防腐劑和乳化劑。還可配制包含食用油的口服給藥用非含水的液體組合物。這些液體組合物可方便地以單位劑量包封在例如膠囊中。
本發明的藥物組合物的各種制劑還可局部或通過栓劑給藥。
人和動物的日劑量可基于各自的種類或其他因素(例如年齡、性別、體重或疾病程度等)而變。優選人的日劑量可為1-2000，優選1-1500，更優選1-1000mg待給藥的活性物質，每天一次或幾次給藥。
實施例表1中概述了各實施例的化合物，表2中概述了它們的物理和光譜數據。
實施例1制備4-[5-(2，5-二甲基-苯基)-3-三氟甲基-4，5-二氫吡唑-1-基]-苯磺酰胺步驟1制備(E)-4-(2，5-二甲基-苯基)-1，1，1-三氟-丁-3-烯-2-酮 在圓底燒瓶中，將5g(37mmol)2，5-二甲基苯甲醛、3ml(53mmol)冰醋酸和3.6ml(37.3mmol)哌啶與70ml THF混合。將該溶液冷卻至5-10℃，隨后向該溶液中鼓泡加入4.7g(41.4mmol)CF3COCH3。在2小時內攪拌下將反應混合物升至室溫。加入另一份2.1g(19mmol)CF3COCH3，隨后將該混合物攪拌2小時。最后加入第三份2gCF3COCH3，隨后攪拌2小時。接著，加入13ml 20％的氯化銨溶液，減壓除去溶劑。加入水，隨后該混合物用二氯甲烷萃取。有機相經水、5％的H2SO4、水洗滌，并經無水硫酸鈉干燥。過濾混合物，除去溶劑。得到8.5g粗產物，經硅膠柱層析純化，用石油醚洗脫。得到2.1g油狀形式的4-(2，5-二甲基苯基)-1，1，1-三氟-3-丁烯-2-酮。
IR(薄膜，cm-1)1718，1595,7，1200,7，1145,8，1058,41H-NMR(CDCl3，δ)2,36(s，3H)，2,45(s，3H)，6,94(d，J＝15,8Hz，1H)，7,15(m，2H)，7,49(s，1H)，8,28(d，J＝15,8Hz，1H).
步驟2制備4-[5-(2，5-二甲基-苯基)-3-三氟甲基-4，5-二氫-吡唑-1-基]-苯磺酰胺 在惰性氣氛下，在100ml圓底燒瓶中，將1.47g(6.48mmol)(E)-4-(2，5-二甲基苯基)-1，1，1-三氟-3-丁烯-2-酮、1.49g(7.13mmol)4-氨基磺酰基苯基鹽酸肼和0.77ml哌啶在40ml無水乙醇中混合，攪拌回流20小時。減壓除去溶劑，向殘余物中加入水，將燒瓶攪動數分鐘，過濾混合物，收集固體。得到2.6g粗制的固體物質，用乙醇重結晶，得到1.75g 1-(4-氨基磺酰基)-4，5-二氫-5-(2，5-二甲基苯基)-3-三氟甲基-1H-吡唑，熔點200-202℃。
IR(KBr，cm-1)3385,5，3274,7，1594,3，1327,8，1149,11H-NMR(d6-DMSO，δ)2,1(s，3H)，2,3(s，3H)，2,84(dd，J＝6,8y 12,8Hz，1H)，3,9(dd，12,8y 13,2Hz，1H)，5,8(dd，J＝6,8y 13,2Hz，1H)，6,7(s，1H)，6,9(m，3H)，7,1(m，1H)，7,6(d，J＝8,9Hz)實施例2制備4-[5-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-三氟甲基-4，5-二氫吡唑-1-基]-苯磺酰胺步驟1制備(E)-4-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-1，1，1-三氟-丁-3-烯-2-酮 在惰性氣氛下，在圓底燒瓶中，將20ml不含水的THF冷卻至-70℃。加入8ml(16mmol)2M的LDA的THF/己烷溶液和溶解于5ml THF中的1.17ml(8mmol)甲基膦酸二乙酯，并攪拌30分鐘。滴加1.66g(8mmol)N-苯基-1-氯-三氟乙亞胺(根據Tamura，K.；Mizukami，H.等人；J.Org.Chem.，1993，58，32-35制備)，并繼續攪拌1小時。加入1.93g(8mmol)3，5-雙(三氟甲基)苯甲醛，隨后將反應混合物升至室溫，并攪拌16小時。加入20ml 2N的HCl，再繼續攪拌4小時。旋轉蒸發除去THF，殘余物用乙醚(3×30ml)萃取，合并的有機相經碳酸氫鈉溶液(5％)和飽和氯化鈉溶液(pH約6)洗滌。經無水硫酸鈉干燥，蒸發溶劑后，得到2.66g粗制的油狀產物，該粗產物立即固化，無需進一步純化即可用于下一步驟。
IR(KBr，cm-1)1731，1614，1382，1280，1135，10561H-RMN(CDCl3，δ)7,1(d，J＝16Hz，1H)；7,9(m，4H).
步驟2制備4-[5-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-三氟甲基-4，5-二氫-吡唑-1-基]-苯磺酰胺
在惰性氣氛下，在圓底燒瓶中，將0.336g(1mmol)(E)-4-(3，5-雙-三氟甲基苯基)-1，1，1-三氟-3-丁烯-2-酮、0.25g(1.1mmol)4-(氨基磺酰基苯基)-鹽酸肼和0.12ml(1.2mmol)哌啶溶解于10ml乙醇中。將該混合物回流12小時。旋轉蒸發除去溶劑后，向殘余物中加入水，過濾收集固體。粗制固體用乙醇/水混合物重結晶。得到0.37g(收率73％)白色固體狀的4-[5-(3，5-雙-三氟甲基苯基)-3-三氟甲基-4，5-二氫-吡唑-1-基]-苯磺酰胺，熔點195-197℃。
IR(KBr，cm-1)3362，3264，1597，1509，1334，1279，1136，903.
1H-RMN(CDCl3，δ)1,8(bs，2H)，3,0(dd，J＝7,1y 17,8Hz，1H)，3,8(dd，J＝12,9y17,8Hz，1H)，5,5(dd，J＝7,1y 12,7Hz，1H)，6,95(d，J＝8,8Hz，2H)，7,65(s，2H)，7,7(d，J＝8,8Hz，2H)，7,8(s，1H).
表1
表2
化合物名稱4-[5-(2，5-二甲基-苯基)-3-三氟甲基-4，5-二氫-吡唑-1-基]-苯磺酰胺4-[5-(3，5-雙-三氟甲基-苯基)-3-三氟甲基-4，5-二氫-吡唑-1-基]-苯磺酰胺生物學評價抗腫瘤活性使用XTT試劑盒，采用廠商(Roche Diagnostics)的建議，通過測定細胞代謝能力(生存能力)來評價本發明化合物的抗腫瘤活性。測定至少進行5次，參照物包含未暴露的細胞、含有溶媒的細胞(cell withvehicle)或者介質加上化合物。將各細胞接種在96-孔的板上，在100μl介質中溫育24小時。隨后以不同的濃度組合(1μM-80μM)加入本發明的化合物4小時(短時XTT)或60小時(長時間XTT)。溫育過程結束后，向各孔中加入50μl包含XTT和電子耦合試劑的混合物。于37℃下溫育4小時后，觀察490nm處的吸光率。與未處理的參照物相比，減去空白的吸光率得到各化合物的生長抑制活性，用細胞生長抑制百分比表示。使用Sigmaplot 5.0軟件，采用Hill sigmoidal方程式(三個參數)，由化合物濃度與細胞生存能力百分比關系的劑量-反應曲線確定50％抑制時的濃度(IC50)。
表3
實施例1和2的化合物不具有酶COX-1和COX-2的抑制活性。
權利要求
1.一種式I和式I′的化合物及其非對映異構體和/或對映異構體或其混合物包括其外消旋物，或其藥學上可接受的鹽 其中R1和R2為甲基；R3和R4相同或不同，為C1-6烷基，其中至少一個被至少一個鹵原子取代。
2.權利要求1的式I′化合物，其中R3和R4相同或不同，為C1-3烷基，其中至少一個被至少一個鹵原子取代。
3.權利要求1的式I′化合物，其中R3和R4相同或不同，為甲基，其中至少一個被至少一個鹵原子取代。
4.權利要求1的式I′化合物，其中R3和R4為甲基，其中至少一個被至少一個氟和/或氯原子取代。
5.權利要求1的式I′化合物，其中R3和R4為被至少一個氟和/或氯原子取代的甲基。
6.權利要求1的式I′化合物，其中R3和R4為CF3基團。
7.權利要求1的式I化合物，所述化合物為1-(4-氨基磺酰基苯基)-3-三氟甲基-5-(2，5-二甲基苯基)-4，5-二氫-吡唑。
8.權利要求6的式I′化合物，所述化合物為1-(4-氨基磺酰基苯基)-3-三氟甲基-5-[3，5-雙-(三氟甲基)-苯基]-4，5-二氫-吡唑。
9.一種藥物組合物，所述組合物包含藥學上可接受的載體和至少一種權利要求1-8中任一項的化合物。
10.至少一種權利要求1-8中任一項的式I和/或I′的化合物在制備治療癌癥的藥物組合物中的用途。
11.至少一種權利要求10的式I和/或I′的化合物在制備治療以下癌癥的藥物組合物中的用途腦癌、骨癌、唇癌、口癌、食道癌、胃癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌、皮膚癌和/或前列腺癌。
12.至少一種權利要求10的式I和/或I′的化合物在制備治療結腸癌、腸癌和/或前列腺癌的藥物組合物中的用途。
全文摘要
本發明涉及新型取代的吡唑啉化合物、包含所述化合物的藥物組合物以及這些化合物用于治療癌癥的用途，所述化合物具體用于治療腦癌、骨癌、唇癌、口癌、食道癌、胃癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌、皮膚癌，特別用于治療結腸癌和/或腸癌和/或前列腺癌。
文檔編號A61P35/00GK1942446SQ200580011136
公開日2007年4月4日 申請日期2005年2月16日 優先權日2004年2月16日
發明者R·庫韋雷斯阿爾蒂森, J·弗里戈拉康斯坦薩, R·曼格斯巴法盧伊, I·卡薩諾瓦里加爾 申請人:埃斯特韋實驗室有限公司