專利名稱：用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種醫藥技術領域的組合物及其制備方法，具體的說，涉及的是一種用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物及其制備方法。
背景技術：
咳喘病是嚴重危害人民群眾身體建康的常見病、多發病。咳喘病目前尚無特效的治療方法，在我國，多年的臨床經驗表明，中醫藥治療該病有較高的療效，且毒副作用小。研究療效確切、安全可靠的抗咳喘病的中藥有效物質，進一步開發新藥，將造福患者，產生顯著的社會效益與經濟效益。
麻黃始載于《神農本草經》，列為中品，歷代本草均有收集。《中華人民共和國藥典》2005年版一部規定麻黃為麻黃科植物草麻黃Ephedra sinicaStpaf.、中麻黃Ephedra intermedia Schrenket C.A.Mey或木賊麻黃Ephedmequisetina Bge.的干燥草質莖。近代藥理、藥物化學研究的結果表明，麻黃對支氣管平滑肌的解痙作用較持久，特別在支氣管處于痙攣狀態時作用更顯著；麻黃堿、偽麻黃堿、甲基麻黃堿具有平喘作用；麻黃煎劑體外實驗證明對金黃色葡萄球菌、甲型和乙型鏈球菌、炭疽桿菌、白喉桿菌、綠膿桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌有不同程度的抗菌作用。
《中華人民共和國藥典》2005年版收載的地龍為鉅蚓科動物參環毛蚓Pheretima aspergillum(E.Perrier)、通俗環毛蚓Pheretima vulagris Chen、威廉環毛蚓Pheretima guillelm(Michaelsen)或櫛盲環毛蚓Pheretimapectinifera Michaelsen的干燥體，具有清熱定驚、通絡、平喘、利尿之功效，是一種常用動物藥材，藥理活性顯著，資源豐富。有文獻報道地龍的某種組分可阻滯組胺受體，對抗組胺使氣管痙攣及增加毛細血管通透性；地龍90％醇提取液可明顯增加大鼠和家兔氣管肺灌流量，并能對抗組胺和毛果蕓香堿引起的支氣管收縮。鮮地龍體液對肺部感染的常見病菌高度敏感；地龍還可明顯地促進免疫細胞——小鼠腹腔巨噬細胞活化，具有免疫調節作用。
經對現有技術的文獻檢索發現，還未見麻黃與地龍兩藥組合用于咳喘病治療的報道，麻黃與地龍都是與其他多味藥材合用組成大復方治療咳喘病，如《中華人民共和國藥典》2005版一部收錄的成方制劑“清肺消炎丸”含有麻黃、地龍、苦杏仁(炒)、羚羊角、牛蒡子、人工牛黃、石膏、葶藶子等八味藥材，定喘湯組方含有麻黃、杏仁、地龍、僵蠶、川貝、瓜萎、蘆根、蟬蛻、金銀花、黃芩、葶藶子、甘草等12味藥材(楊麗榮.定喘湯治療小兒支氣管哮喘臨床觀察.醫藥論壇雜志2003年10月第24卷第20期)。這些含有麻黃與地龍的治療咳喘病的復方雖然經過臨床驗證，具有較好的療效，但是也有服藥劑量大，化學組成復雜，平喘作用的物質基礎與作用機制研究困難，毒副作用研究困難，質量可控性差等缺點。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物及其制備方法，使其針對咳喘病，首次提出了僅用麻黃與地龍兩藥配伍來治療咳喘病，能夠比較好的治療臨床各種咳喘病。
本發明是通過以下技術方案來實現的，用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物，其重量百分比是麻黃10％～50％，地龍50％～90％。
所述的用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物，其組成的較好比例是麻黃的重量百分比為20％-30％，地龍的重量百分比為70％-80％。
本發明還提供一種上述用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物的制備方法，具體為取麻黃，粉碎成粗粉，加入5～10倍量鹽酸溶液浸泡過夜，回流提取，趁熱濾過，藥渣加入再回流提取，過濾，合并三次濾液，減壓濃縮，真空干燥得到麻黃浸膏；取地龍，粉碎成粗粉，第一次加入地龍5～8倍量水室溫浸泡，過濾；第二次加入地龍3～6倍量水溫浸，過濾，重復此操作一次，過濾，合并三次濾液，低速離心，取離心上清液，減壓濃縮，真空干燥得到地龍浸膏，將所得的麻黃浸膏和地龍浸膏合并，即得麻黃與地龍組合物。
本發明上述方法中，鹽酸溶液濃度為0.5％，回流提取時間為1～3h。
本發明上述方法中，藥渣加入再回流提取2次，每次加5～10倍量0.5％鹽酸溶液回流1～3h。
本發明上述方法中，第一次加入地龍5～8倍量水室溫浸泡3～5h，過濾；第二次、第三次加入地龍3～6倍量水40℃～50℃溫浸1～3h。
本發明上述方法中，50℃下減壓濃縮，真空干燥。
本發明具有以下有益的效果本發明藥物具有鎮咳、祛痰、平喘作用，由純中藥組成，無毒副作用；由二味中藥組成的中藥復方，各組分協同作用，多環節、多靶點治療咳喘病，優于單方；提取濃縮藥材中有效組分，減少了患者服用劑量。
圖1為麻黃地龍3種配比組合物對卡巴膽堿引起的大鼠氣管平滑肌張力增加的松弛作用曲線。
圖2為麻黃地龍3種配比組合物對組氨引起的豚鼠氣管平滑肌張力增加的松弛作用曲線。
圖3為麻黃地龍3種配比組合物對卡巴膽堿引起的大鼠氣管上皮短路電流增加的抑制作用曲線。
具體實施例方式
下面結合具體實施例和附圖對本發明進行詳細說明。
實施例1麻黃與地龍組合物制備藥物組合麻黃25％，地龍75％其制備過程取麻黃1000g，粉碎成粗粉，加入10倍量0.5％鹽酸溶液浸泡過夜，回流提取3h，趁熱濾過，藥渣加入再回流提取2次，每次加10倍量0.5％鹽酸溶液回流3h，過濾，合并三次濾液，減壓濃縮，真空干燥得到麻黃浸膏。取地龍3000g，粉碎成粗粉，第一次加入地龍8倍量水室溫浸泡5h，過濾；第二次加入地龍6倍量水40℃溫浸3h，過濾，重復此操作一次，過濾，合并三次濾液，低速離心10min，取離心上清液，50℃下減壓濃縮，真空干燥得到地龍浸膏。將所得的麻黃浸膏和地龍浸膏合并，即得麻黃與地龍組合物。
實施例2麻黃與地龍組合物制備藥物組合麻黃50％，地龍50％其制備過程取麻黃1000g，粉碎成粗粉，加入8倍量0.5％鹽酸溶液浸泡過夜，回流提取2h，趁熱濾過，藥渣加入再回流提取2次，每次加8倍量0.5％鹽酸溶液回流2h，過濾，合并三次濾液，減壓濃縮，真空干燥得到麻黃浸膏。取地龍1000g，粉碎成粗粉，第一次加入地龍7倍量水室溫浸泡4h，過濾；第二次加入地龍5倍量水45℃溫浸2h，過濾，重復此操作一次，過濾，合并三次濾液，低速離心10min，取離心上清液，50℃下減壓濃縮，真空干燥得到地龍浸膏。將所得的麻黃浸膏和地龍浸膏合并，即得麻黃與地龍組合物。
實施例3麻黃與地龍組合物制備藥物組合麻黃10％，地龍90％其制備過程取麻黃500g，粉碎成粗粉，加入5倍量0.5％鹽酸溶液浸泡過夜，回流提取1h，趁熱濾過，藥渣加入再回流提取2次，每次加5倍量0.5％鹽酸溶液回流1h，過濾，合并三次濾液，減壓濃縮，真空干燥得到麻黃浸膏。取地龍4500g，粉碎成粗粉，第一次加入地龍5倍量水室溫浸泡3h，過濾；第二次加入地龍3倍量水50℃溫浸1h，過濾，重復此操作一次，過濾，合并三次濾液，低速離心10min，取離心上清液，50℃下減壓濃縮，真空干燥得到地龍浸膏。將所得的麻黃浸膏和地龍浸膏合并，即得麻黃與地龍組合物。
實施例4麻黃與地龍組合物制備藥物組合麻黃20％，地龍80％其制備過程取麻黃400g，粉碎成粗粉，加入7倍量0.5％鹽酸溶液浸泡過夜，回流提取1.5h，趁熱濾過，藥渣加入再回流提取2次，每次加5倍量0.5％鹽酸溶液回流1.5h，過濾，合并三次濾液，減壓濃縮，真空干燥得到麻黃浸膏。取地龍1600g，粉碎成粗粉，第一次加入地龍7倍量水室溫浸泡4h，過濾；第二次加入地龍4倍量水50℃溫浸1h，過濾，重復此操作一次，過濾，合并三次濾液，低速離心10min，取離心上清液，50℃下減壓濃縮，真空干燥得到地龍浸膏。將所得的麻黃浸膏和地龍浸膏合并，即得麻黃與地龍組合物。
實施例5麻黃與地龍組合物制備藥物組合麻黃30％，地龍70％其制備過程取麻黃600g，粉碎成粗粉，加入8倍量0.5％鹽酸溶液浸泡過夜，回流提取2h，趁熱濾過，藥渣加入再回流提取2次，每次加5倍量0.5％鹽酸溶液回流1h，過濾，合并三次濾液，減壓濃縮，真空干燥得到麻黃浸膏。取地龍1400g，粉碎成粗粉，第一次加入地龍8倍量水室溫浸泡3h，過濾；第二次加入地龍5倍量水50℃溫浸1h，過濾，重復此操作一次，過濾，合并三次濾液，低速離心10min，取離心上清液，50℃下減壓濃縮，真空干燥得到地龍浸膏。將所得的麻黃浸膏和地龍浸膏合并，即得麻黃與地龍組合物。
實施例6麻黃與地龍三種配比組合物的平喘作用研究觀察麻黃、地龍三種配比(50％∶50％、25％∶75％、10％∶90％)組合物對10μmol·L-1卡巴膽堿(Carbachol，CCh)、10μmol·L-1組胺(Histamine，His)引起豚鼠離體氣管平滑肌張力增加的松弛作用，以及對10μmol·L-1CCh引起的大鼠離體氣管上皮離子分泌的抑制作用。結果見附圖1、圖2、圖3。
1、三種組合物都呈劑量依賴性舒張CCh和His引起的氣管平滑肌收縮，但不同配比組合物作用強度有所不同，麻黃含量高時，對CCh收縮的氣管平滑肌解痙作用較強；地龍含量高時，對His收縮的氣管平滑肌解痙作用較強。故麻黃與地龍配伍，能起到協同解痙作用。
2、在抑制CCh誘發的離體氣管平滑肌張力增加方面，三種用量配比的作用強度順序為50％∶50％＞25％∶75％＞10％∶90％；在抑制His誘發的離體氣管平滑肌張力增加方面，三者的作用強度順序為10％∶90％＞25％∶75％＞50％∶50％；在抑制CCh引起的氣管上皮短路電流增加方面，三者的作用強度順序為25％∶75％＞50％∶50％＞10％∶90％，以上比較統計學上沒有顯著性差異。可見，麻黃、地龍三種配比組合物均具有平喘效果，綜合考慮抑制粘液分泌和舒張平滑肌兩方面因素，25％∶75％的配比為麻黃地龍藥對發揮平喘作用的最適配比。
實施例7麻黃與地龍組合物優化配比范圍的考察考察麻黃與地龍2種配比(20％∶80％、30％∶70％)組合物對10μmol·L-1卡巴膽堿(Carbachol，CCh)、10μmol·L-1組胺(Histamine，His)引起豚鼠離體氣管平滑肌張力增加的松弛作用，以及對10μmol·L-1CCh引起的大鼠離體氣管上皮離子分泌的抑制作用，并且將這2種配比組合物作用與實施例6中另外3種配比組合物作用進行比較。結果如下在抑制CCh誘發的離體氣管平滑肌張力增加方面，5種用量配比的作用強度順序為50％∶50％＞30％∶70％＞25％∶75％＞20％∶80％＞10％∶90％；在抑制His誘發的離體氣管平滑肌張力增加方面，5種用量配比的作用強度順序為10％∶90％＞20％∶80％＞25％∶75％＞30％∶70％＞50％∶50％；在抑制CCh引起的氣管上皮短路電流增加方面，三者的作用強度順序為25％∶75％＞30％∶70％＞20％∶80％＞50％∶50％＞10％∶90％，以上比較統計學上沒有顯著性差異。可見，麻黃與地龍5種配比組合物均具有平喘效果，但是綜合考慮抑制粘液分泌和舒張平滑肌兩方面因素，麻黃與地龍組合物優化配比范圍為麻黃的重量百分比為20％～30％，地龍的重量百分比為70％～80％。
實施例8麻黃與地龍組合物單煎合用與合煎的比較實驗中建立了麻黃中麻黃堿、偽麻黃堿含量的高效液相色譜測定方法，并以麻黃堿、偽麻黃堿、總氨基酸為評價指標，比較了麻黃與地龍單煎合用、合煎的提取工藝。結果見表1，以麻黃堿和偽麻黃堿為指標，合煎優于單煎合用，可能是地龍所含酸性成分有利于麻黃堿的溶出；以地龍中總氨基酸的溶出為指標，單煎合用優于合煎；單煎合用的浸膏得率大于合煎，可能是因為合煎時麻黃中的堿性成分使地龍微粒表面的蛋白質變性，抑制了地龍中的氨基酸和其他成分的溶出。因此，麻黃、地龍組方宜單煎合用，麻黃單煎時可以加入稀鹽酸溶液以利于麻黃堿的溶出。
表1麻黃與地龍組合物單煎合用與合煎考察含量測定結果
實施例9藥理毒理研究1.主要藥效學實驗將實施例1所制得的麻黃與地龍組合物按3.12，6.24，12.48g生藥/kg劑量對小鼠灌胃給藥，可延長濃氨水和二氧化硫誘發的小鼠咳嗽潛伏期，減少咳嗽次數，使小鼠氣管酚紅排泌量明顯增加；按2.21，4.42，8.82g生藥/kg對豚鼠灌胃給藥，對卵蛋白引起的過敏性哮喘潛伏期明顯延長，對吸入組胺引起的哮喘潛伏期也明顯延長。在體外，麻黃與地龍組合物0.24mg/ml濃度對豚鼠離體氣管由組胺引起的收縮有明顯的抑制作用。以上結果說明，麻黃與地龍組合物具有鎮咳、祛痰、平喘作用。
實施例1所制得的麻黃與地龍組合物可抑制金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、甲型鏈球菌的生長及對抗炎性鼠耳的腫脹。與對照組慶大霉素比較，P＜0.05；可減少患者痰液中皮脫落細胞與炎癥細胞的數量，表明有抗炎作用。
選用巨噬細胞的活化率來評價實施例1所制得的麻黃與地龍組合物的免疫作用，結果表明，麻黃與地龍組合物具有明顯地促進免疫細胞——巨噬細胞活化的作用，濃度在5％～10％時作用較為顯著。過高或過低作用較弱或無作用。檢測了麻黃與地龍組合物對MΦ和脾細胞分泌NO和TNF2α的影響.以探討其對機體免疫功能的調節作用。麻黃與地龍組合物對MΦ和脾細胞的激活作用有一個最佳的濃度，0.1g/L的刺激MΦ和脾細胞分泌NO的作用最強，與對照相比分別提高了1.05和1.16倍，并可以拮抗Dex對MΦ和脾細胞分泌NO的抑制作用；而1×10-4及1×10-3g/L的麻黃與地龍組合物刺激MΦ和脾細胞分泌TNF2α的作用較強，并可拮抗Dex抑制細胞分泌TNF2α的作用。
2.急性毒性實驗實施例1所制得的麻黃與地龍組合物，經小鼠的急性毒性試驗表明，其小鼠的口服LD50為78g生藥/kg，95％可信限為74.1-81.9g生藥/kg。
由主要藥效學等一系列實驗得出實施例1為最佳實施例，該中藥組合物安全有效。
權利要求
1.一種用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物，其特征在于，由麻黃與地龍兩種中藥組成，麻黃的重量百分比為10％-50％，地龍的重量百分比為50％-90％。
2.根據權利要求1所述的用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物，其特征是，麻黃的重量百分比為20％～30％，地龍的重量百分比為70％～80％。
3.一種用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物的制備方法，其特征在于，所述的組合物中，麻黃的重量百分比為10％-50％，地龍的重量百分比為50％-90％，制備方法為取麻黃，粉碎成粗粉，加入5～10倍量鹽酸溶液浸泡過夜，回流提取，趁熱濾過，藥渣加入再回流提取，過濾，合并三次濾液，減壓濃縮，真空干燥得到麻黃浸膏；取地龍，粉碎成粗粉，第一次加入地龍5～8倍量水室溫浸泡，過濾；第二次加入地龍3～6倍量水溫浸，過濾，重復此操作一次，過濾，合并三次濾液，低速離心，取離心上清液，減壓濃縮，真空干燥得到地龍浸膏，將所得的麻黃浸膏和地龍浸膏合并，即得麻黃與地龍組合物。
4.根據權利要求3所述的用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物的制備方法，其特征是，鹽酸溶液濃度為0.5％，回流提取時間為1～3h。
5.根據權利要求3所述的用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物的制備方法，其特征是，藥渣加入再回流提取2次，每次加5～10倍量0.5％鹽酸溶液回流1～3h。
6.根據權利要求3所述的用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物的制備方法，其特征是，第一次加入地龍5～8倍量水室溫浸泡3～5h，過濾；第二次、第三次加入地龍3～6倍量水40℃～50℃溫浸1～3h。
7.根據權利要求3所述的用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物的制備方法，其特征是，50℃下減壓濃縮，真空干燥。
全文摘要
一種醫藥技術領域的用于治療咳喘病的麻黃與地龍組合物的制備方法，組合物中，麻黃10％－50％，地龍50％－90％，其制備方法為取麻黃，粉碎成粗粉，加入5～10倍量鹽酸溶液浸泡過夜，回流提取，趁熱濾過，藥渣加入再回流提取，過濾，合并三次濾液，減壓濃縮，真空干燥得到麻黃浸膏；取地龍，粉碎成粗粉，第一次加入地龍5～8倍量水室溫浸泡，過濾；第二次加入地龍5～8倍量水溫浸，過濾，重復此操作一次，過濾，合并三次濾液，低速離心，取離心上清液，減壓濃縮，真空干燥得到地龍浸膏，將所得的麻黃浸膏和地龍浸膏合并，即得麻黃與地龍組合物。本發明藥物具有鎮咳、祛痰、平喘功能，療效可靠，適用于各類咳喘病。
文檔編號A61P11/06GK1839895SQ200610023458
公開日2006年10月4日 申請日期2006年1月19日 優先權日2006年1月19日
發明者賈偉, 徐朝暉, 趙愛華, 邱明豐, 褚襄萍 申請人:上海交通大學