專利名稱：一種抗腫瘤的西米特酸注射液及其制備方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，特別涉及一種抗腫瘤的西米特酸注射液及其制備方法。
背景技術：
西米特酸是一種從海綿中分離提取得到的海洋天然活性物質，結構上屬于異臭椿酸三萜，具有抗腫瘤的活性。西米特酸的化學名稱為(13E，15E，17E，22E，24E)-3，12-二氧-13，15，17，22，24-五烯-26-異臭椿酸，英文名稱為Rhabdastrellic Acid-A，化學結構式如下 目前還尚未有將西米特酸用于注射液的任何報道。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術中存在的缺點，提供一種抗腫瘤的西米特酸注射液。
本發明的另一目的在于提供一種上述抗腫瘤的西米特酸注射液的制備方法。
本發明的目的通過下述技術方案實現本發明抗腫瘤的西米特酸注射液，包含活性成分西米特酸和可藥用輔料。
所述可藥用輔料，包含抗氧化劑、增溶劑、助溶劑和水。
所述抗氧化劑為2，6-二叔丁基對甲酚(BHT)；所述增溶劑為聚氧乙烯蓖麻油；所述助溶劑為藥用級無水乙醇；所述水為注射用水。在注射液中加入2，6-二叔丁基對甲酚作為抗氧化劑，能有效避免在高溫滅菌過程中活性成分的化學變化。
本發明抗腫瘤的西米特酸注射液，優選按重量百分比包含下述組分0.25～0.35％的西米特酸、0.005～0.015％的2，6-二叔丁基對甲酚、5～20％的聚氧乙烯蓖麻油、15～40％的藥用級無水乙醇、50～70％的注射用水。
所述西米特酸的用量優選0.30％(重量百分比)。所述2，6-二叔丁基對甲酚的用量優選0.01％。所述聚氧乙烯蓖麻油的用量優選7～15％，更優選10％。所述藥用級無水乙醇的用量優選20～30％，更優選25％。所述注射用水的用量優選60～70％，更優選65％。
本發明抗腫瘤的西米特酸注射液的制備方法，是由活性成分西米特酸粉末與可藥用輔料混合、并過濾除菌配制而成，具體包括下述步驟在藥用級無水乙醇中，加入聚氧乙烯蓖麻油并攪拌均勻；然后加入西米特酸和2，6-二叔丁基對甲酚，攪拌15～30分鐘；再加入注射用水，攪拌15～30分鐘；最后過濾、高溫滅菌，得到抗腫瘤的西米特酸注射液。本發明制備的西米特酸注射液的規格可為5ml∶15mg。
本發明抗腫瘤的西米特酸注射液，其活性成分西米特酸是一類具有重要生理活性、高效低毒的海洋天然產物。初步篩選發現，西米特酸對B淋巴細胞和T淋巴細胞的增殖顯示出100％的抑制作用(0.1μM濃度下)。體外活性試驗表明，西米特酸對小白鼠淋巴白血病L1210、小白鼠黑色素瘤B16、人鼻咽癌KB和人早幼粒白血病HL-60等四種細胞系具有顯著的抑制增殖作用，IC50在7.5～10.2μg/ml之間。生物活性測試表明，西米特酸在濃度10-8mol/L時對P-388小鼠白血病瘤株的抑制率達91.1％，對A-549人肺腺癌的抑制率超過60％。動物體內抑瘤試驗表明，西米特酸對艾氏腹水癌實體瘤、S180肉瘤、人肺巨細胞(PG)癌和人LOVO結腸癌等多種腫瘤模型有較高的抑制增殖活性，且毒性不高，安全系數較大。抗癌作用機理研究表明，西米特酸能通過激活Caspase-3酶誘導HL-60腫瘤細胞的凋亡；基因芯片檢測試驗顯示，西米特酸能增高或降低一些凋亡基因的表達；抑制PI3K/AKT信號轉導途徑可能是其抗腫瘤的作用機制。
本發明與現有技術相比具有如下優點和效果(1)本發明抗腫瘤的西米特酸注射液，屬于一種天然藥物，抗腫瘤性能好，安全性高，穩定性好，臨床副作用低。
(2)原料價格便宜，成本低。
(3)制備工藝簡單。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明做進一步詳細的描述，但本發明的實施方式不限于此。
實施例1西米特酸注射液的配方組成0.3克的西米特酸、0.01克的2，6-二叔丁基對甲酚、10克的聚氧乙烯蓖麻油、30克的藥用級無水乙醇、59.69克的注射用水。
配制程序在燒杯中準確稱取30克藥用級無水乙醇，加入10克聚氧乙烯蓖麻油，攪勻后，加入0.3克西米特酸粉末和0.01克2，6-二叔丁基對甲酚粉末，攪拌15分鐘；再加入59.69克注射用水，攪拌30分鐘，再經注射液專用過濾裝置過濾，高溫滅菌，得到抗腫瘤的西米特酸注射液。
實施例2西米特酸注射液的配方組成0.25克的西米特酸、0.005克的2，6-二叔丁基對甲酚、20克的聚氧乙烯蓖麻油、15克的藥用級無水乙醇、64.745克的注射用水。
配制程序在燒杯中準確稱取15克藥用級無水乙醇，加入20克聚氧乙烯蓖麻油，攪勻后，加入0.25克西米特酸粉末和0.005克2，6-二叔丁基對甲酚粉末，攪拌20分鐘；再加入64.745克注射用水，攪拌20分鐘，再經注射液專用過濾裝置過濾，高溫滅菌，得到抗腫瘤的西米特酸注射液。
實施例3西米特酸注射液的配方組成0.35克的西米特酸、0.015克的2，6-二叔丁基對甲酚、5克的聚氧乙烯蓖麻油、40克的藥用級無水乙醇、54.635克的注射用水。
配制程序在燒杯中準確稱取40克藥用級無水乙醇，加入5克聚氧乙烯蓖麻油，攪勻后，加入0.35克西米特酸粉末和0.015克2，6-二叔丁基對甲酚粉末，攪拌30分鐘；再加入54.635克注射用水，攪拌15分鐘，再經注射液專用過濾裝置過濾，高溫滅菌，得到抗腫瘤的西米特酸注射液。
試驗1本發明西米特酸注射液的質量分析1、顏色檢查根據中國藥典，用標準比色法測得西米特酸注射液的色調為黃綠色8號。
2、PH值測定PHS3B精密PH計，按照藥典規定校準儀器，室溫18℃，濕度65％，測得西米特酸注射液的PH范圍3.99～4.33。(PH計事先用PH＝6.86、PH＝4.00的標準緩沖液兩點法校正)3、原料藥的特征反應西米特酸具有特征的Carr-Priew顯色現象。原理根據中國藥典對維甲酸VA的鑒別方法，利用西米特酸的共軛多烯側鏈與SbCl3-氯仿飽和溶液具有由橙→深紅的特征顏色反應來鑒別。
4、注射液的特征吸收用UV-2550 SHIMADZU紫外吸收儀測得西米特酸注射液最大吸收波長λ＝389nm，Abs＝28630。
5、澄明度按藥典澄清度檢查法測得西米特酸注射液小于0.5號濁度標準液。
6、含量測定用紫外分光光度法，測得濃度范圍0.25％～0.35％。
試驗2本發明西米特酸注射液的穩定性研究將西米特酸注射液分別置于100℃環境1小時、80℃環境7天及10℃環境7天后經HPLC(測定波長為389nm)測定活性成分西米特酸的峰面積，通過計算得到西米特酸的殘留百分比，見表1。
表1 西米特酸注射液穩定性研究
由表1可知，西米特酸注射液在常溫(20℃以下)環境中比較穩定，活性成分的濃度基本保持不變。但在高溫加熱時，活性成分濃度略有下降。因此存放環境的溫度不宜過高，最好不超過30℃。
試驗3本發明西米特酸注射液的抗腫瘤藥效學試驗(1)西米特酸注射液對艾氏腹水癌實體瘤的影響取S-180腹水瘤接種小鼠皮下，隨機分組，每組10只，共6組。第一組為生理鹽水對照組；第二組為溶劑(含體積25％乙醇和10％聚氧乙烯蓖麻油的水溶液)對照組；第三組為陽性藥物環磷酰胺(CTX)組；第四～六組為西米特酸注射液組，分為5、10、20mg/kg/d三個劑量組。尾靜脈注射，連續給藥10天，處死小鼠，稱瘤重并按下列公式計算腫瘤抑制率。
公式中對照組是指生理鹽水對照組。
實驗結果表明，5、10、20mg/kg/d三個劑量組的西米特酸注射液組的抑制率分別為38.5％、46.4％、66.06％，這說明劑量為20mg/kg/d時西米特酸注射液有明顯抑制艾氏腹水癌實體瘤的作用。CTX組的抑瘤率為56％。實驗重復一次，結果相似。
(2)西米特酸注射液在裸鼠體內對肝癌細胞Hep3B移植瘤的抑制實驗取Hep3B細胞接種于裸鼠皮下，1周后腫瘤增殖到可清楚摸到時，將動物隨機分成6個組，每組8只裸鼠。第一組為生理鹽水對照組；第二組為溶劑(含體積25％乙醇和10％聚氧乙烯蓖麻油的水溶液)對照組；第三組為陽性藥物CTX組；第四～六組為西米特酸注射液組，分為5、10、20mg/kg/d三個劑量組。腹腔注射，注射體積為0.2ml/只，隔天給藥，共給藥12次，處死裸鼠，稱瘤重并按上述公式計算腫瘤抑制率。
實驗結果表明，5、10、20mg/kg/d三個劑量組的西米特酸注射液組的抑制率分別為18.1％、36.2％、57.8％，這說明劑量為20mg/kg/d時西米特酸注射液有明顯抑制肝癌細胞Hep3B移植瘤的作用。CTX組的抑瘤率為54％。實驗重復一次，結果相似。
權利要求
1.一種抗腫瘤的西米特酸注射液，其特征在于含有作為活性成分的西米特酸化合物。
2.根據權利要求1所述的西米特酸注射液，其特征在于含有活性成分西米特酸和可藥用輔料。
3.根據權利要求2所述的西米特酸注射液，其特征在于所述可藥用輔料包括抗氧化劑、增溶劑、助溶劑和水。
4.根據權利要求3所述的西米特酸注射液，其特征在于所述抗氧化劑為2，6-二叔丁基對甲酚；所述增溶劑為聚氧乙烯蓖麻油；所述助溶劑為藥用級無水乙醇；所述水為注射用水。
5.根據權利要求4所述的西米特酸注射液，其特征在于按重量百分比包含下述組分0.25～0.35％的西米特酸、0.005～0.015％的2，6-二叔丁基對甲酚、5～20％的聚氧乙烯蓖麻油、15～40％的藥用級無水乙醇、50～70％的注射用水。
6.根據權利要求5所述的西米特酸注射液，其特征在于所述西米特酸的用量為0.30％(重量)。
7.根據權利要求5所述的西米特酸注射液，其特征在于所述2，6-二叔丁基對甲酚的用量為0.005～0.015％(重量)。
8.根據權利要求5所述的西米特酸注射液，其特征在于所述聚氧乙烯蓖麻油的用量為7～15％(重量)。
9.根據權利要求5所述的西米特酸注射液，其特征在于所述藥用級無水乙醇的用量為20～30％。
10.一種權利要求4～9任一項所述的抗腫瘤的西米特酸注射液的制備方法，其特征在于包括下述步驟在藥用級無水乙醇中，加入聚氧乙烯蓖麻油并攪拌均勻；然后加入西米特酸和2，6-二叔丁基對甲酚，攪拌15～30分鐘；再加入注射用水，攪拌15～30分鐘；最后過濾、高溫滅菌，得到抗腫瘤的西米特酸注射液。
全文摘要
本發明公開了一種抗腫瘤的西米特酸注射液及其制備方法。本西米特酸注射液含有活性成分西米特酸和可藥用輔料，通過在藥用級無水乙醇中，加入聚氧乙烯蓖麻油、西米特酸、2，6－二叔丁基對甲酚和注射用水，攪拌、過濾、高溫滅菌制得。本西米特酸注射液屬于一種天然藥物，抗腫瘤性能好，安全性高，穩定性好，臨床副作用低；原料價格便宜，成本低；制備工藝簡單。
文檔編號A61K47/30GK1861043SQ20061003589
公開日2006年11月15日 申請日期2006年6月12日 優先權日2006年6月12日
發明者肖定軍, 鄧松之 申請人:中國科學院廣州化學研究所