專利名稱：齊多夫定棕櫚酸酯原料精制方法及制劑的制作方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，確切地說是一種齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯原料精制方法、相對的質量指標及采用該精制原料所制備的制劑。
背景技術：
齊多夫定棕櫚酸酯是由齊多夫定和棕櫚酰氯二者經酯化而形成的化合物，是抗艾滋病藥物齊多夫定的一種前藥，目前國內外均未有廠家生產。國內生產齊多夫定的廠家有東北制藥總廠、河南天方藥業股份有限公司、北京博康健基因科技有限公司、上海現代浦東藥廠有限公司、山東海山藥業有限公司、上海迪賽諾化學制藥有限公司、齊魯制藥有限公司、湖北蓋瑞特藥業有限公司、廈門邁克制藥有限公司等9家。齊多夫定棕櫚酸酯化學結構如下 齊多夫定是美國FDA批準的第1個應用于臨床的抗艾滋病藥物，其療效確切，美國藥典、英國藥典、歐洲藥典均有收載，為抗艾滋病的首選藥之一。齊多夫定為核苷類逆轉錄酶抑制劑，逆轉錄酶是HIV從mRNA逆轉錄為DNA過程中起主要作用的酶，齊多夫定可作為逆轉錄酶的底物或競爭性抑制劑而阻止病毒的復制。
發明內容
本發明的目的是提供一種具有抗HIV病毒作用的齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯原料精制方法及制劑，即對自己合成的原料進行精制，建立符合工業化大生產的純化(精制)方法，制訂高質量原料的標準，并采用所純化的高質量原料研究相對應的各種高質量制劑。
系將齊多夫定棕櫚酸酯原料用適量的有機溶劑溶解，加入吸附劑或不加入吸附劑，室溫至80℃保溫攪拌5～500分鐘，過濾除去吸附劑后，所得溶液于低溫(5℃～零下50℃度)放置1～100小時，收集沉淀，干燥即得。所述的有機溶劑包括C1～C5醇類或其與水的適當比例的混合溶劑；C3～C8有機酸酯類、C1～C4有機酸類、C2～C8醚類、C3～C8酮類以及乙腈；吸附劑為活性炭、硅膠、氧化鋁、硅酸鎂、聚酰胺、硅藻土中的一種或幾種；純化后的齊多夫定棕櫚酸酯原料由原來的微黃色或淡黃色蠟狀固體改變為白色至類白色的針狀結晶或結晶性粉末；在色譜柱Betasil ODS柱(ID4.6mm×200mm，5μm)；流動相乙醇∶水＝95∶5；室溫；檢測波長266nm條件下進行HPLC檢查，純度大于99％。
采用所精制齊多夫定棕櫚酸酯原料可以制備成不同制劑，包括脂質體、乳劑(包括注射乳劑、口服乳劑)、硬膠囊、軟膠囊(包括自乳化)、片劑、顆粒劑、混懸劑。
所述的乳劑(包括注射乳劑和口服乳劑)為一種齊多夫定棕櫚酸酯乳劑，含有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯作為藥物，并含有藥用輔料，其特征是藥用輔料包括油、乳化劑、助乳化劑、等滲調節劑、pH調節劑；藥∶油＝1∶3～1∶300。所述的油為C6～C28的植物油或動物油(包括經過結構改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(稱為中鏈三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯，用量為1～30％(w/v)。乳化劑包括磷脂(蛋黃磷脂或大豆磷脂)(0.5％～5％)(w/v)、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660hydroxystearate)(0.1％～5％)(w/v)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)(0.1％～5％)(w/v)、DSPE-PEG、泊洛沙姆(0.05％～5％)(w/v)、吐溫類(0.1％～5％)(w/v)、司盤類中的一種或幾種的混合物；口服乳劑還可以采用明膠、阿拉伯膠作為乳化劑；可以根據需要加入助乳化劑，如油酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕櫚酸、亞油酸、亞麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸(DHA)、膽酸(包括豬、鵝、熊去氧膽酸)中的一種或幾種的混合物；等滲調節劑是甘油、葡萄糖、甘露醇、木糖醇中的一種或幾種的混合物；pH調節劑是鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鈉、磷酸、磷酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉等中的一種或幾種的混合物，最佳pH范圍是4～9；所制乳劑的粒徑范圍是10nm～10μm。乳劑的制備工藝為1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將注射用油加熱至40～90℃，加入乳化劑(或加在水相中)，強烈攪拌至溶解，加入藥物，強烈攪拌混勻。
2)在配制罐中制備水相將水和甘油在40～90℃下攪拌5min，使之完全混溶。
3)在40～80℃時，將油相加入水相(或水相加入油相)，強烈攪拌混勻，形成初乳。
4)調節pH值到4～9。
5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至520～600kg/cm2，第二步再調節至100～140kg/cm2，(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至4000～8000psi，第二步再調節至10000～16000psi)將溶液反復勻化，得到均勻的乳劑，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。
所述的的脂質體為一種齊多夫定棕櫚酸酯的脂質體，含有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯作為藥物，并含有藥用輔料，藥用輔料包括膜材、pH調節劑、表面修飾輔料或不含表面修飾輔料。所述的膜材為天然磷脂，包括大豆磷脂、氫化大豆磷脂、卵磷脂、磷脂酰乙醇胺(PE)、膽固醇、腦磷脂、膽固醇乙酰脂、β-谷甾醇、磷脂酰肌醇(Phosphatidyl inostiols簡稱PI)、神經鞘磷脂(SPH)、鞘髓磷脂(SM)、牛膽酸鈉；也包括合成磷脂，二棕櫚酰-DL-α磷脂酰膽堿(Synthetic dialmitoylpDLα-Phosphatidyl choline簡稱DPPC)、二肉豆蔻酰卵磷脂(DMPC)、二硬脂酰磷脂酰膽堿、合成磷脂酰絲氨酸(Phosphatidyl Serine，PS)、二鯨蠟磷酸酯(DCP)、硬脂胺(SA)等中的一種或幾種的混合物，用量為1～30％(w/v)；可以根據需要加入/或不加表面修飾輔料，如與體內某些抗原對應的抗體、單克隆抗體、轉鐵蛋白、半乳糖及其衍生物、PEG及其衍生物，如PEG2000-CH-S(聚乙二醇膽固醇硫酸酯)、PEG2000-CHS(聚乙二醇膽固醇琥珀酸酯)中的一種或幾種的混合物；還可以加入pH調節劑，鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸鉀中的一種或幾種，pH范圍是3～9，所制脂質體的粒徑范圍為10nm～10μm。脂質體的制備工藝為1)在配制罐中制備藥物溶液在配制罐中，將膜材加入適量無水乙醇(或其它有機溶劑)中，加熱至30～90℃，攪拌使其完全溶解，再加入藥物攪拌使其溶解，形成藥物溶液。
2)在配制罐中制備水相將水和pH調節劑在30～90℃下攪拌5min，使之完全溶解。
3)在30～80℃時，將藥物溶液加入水相(或水相加入藥物溶液)中，攪拌孵化10～1000分鐘。
4)過均質儀，第一步調節勻化壓力至520～600kg/cm2，第二步再調節至100～140kg/cm2，(或微射流儀，第一步調節勻化壓力至4000-8000psi，第二步再調節至10000-16000psi)將溶液反復勻化，得到均勻的脂質體，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。
所述的軟膠囊劑(包括自乳化)，其溶劑可以是C6～C18的植物油或動物油(包括經過結構改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、玉米油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(稱為中鏈三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。自乳化軟膠囊劑中所采用的油為C8～C10的中鏈油，除此之外，尚有乳化劑、助乳化劑。所說的乳化劑包括磷脂、高HLB表面活性劑，如聚氧乙烯蓖麻油、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660hydroxystearate)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、泊洛沙姆、吐溫類、蔗糖脂肪酸酯類中的一種或幾種的混合物；助乳化劑(乙醇、丙二醇、聚乙二醇200-600、二甲基異山梨酯中的一種或幾種的混合物)；除此之外，還可以加入抗氧化劑，包括丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、維生素C棕櫚酸酯中的一種或幾種的混合物。
所述的硬膠囊劑，可以直接填裝精制原料粉顆粒，也可以加入適當的輔料混合后填裝；片劑、顆粒劑、混懸劑按照常規方法、采用常規輔料制備。
齊多夫定棕櫚酸酯溶解度的測定取研成細粉的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g若干份，分別置于10mL具塞磨口試管中，再分別加入水、甲醇、乙醇等溶媒，加塞置于37±0.5℃氣浴恒溫振蕩器中(60次/分)振蕩10h，飽和液靜置，至室溫后，過濾，吸取續濾液0.1～1.0mL，置于10mL量瓶中，以流動相稀釋定容后，進行HPLC分析。外標法求出齊多夫定棕櫚酸酯在不同溶劑中的飽和溶液的濃度，計算溶解度。結果見表1。
表1 齊多夫定棕櫚酸酯在不同溶劑中的溶解度數據表(20℃，室溫)
齊多夫定棕櫚酸酯正辛醇-緩沖液分配系數的測定取pH3.6、pH5.8、pH7.4的緩沖液(參考中國藥典(2000版)附錄XV D配制，其實測值分別為3.74，5.66與7.37)飽和的正辛醇配制溶液(1mg·mL-1)。分別移取上述溶液5.0mL，室溫(20℃±1℃)下，加入正辛醇飽和過的相應緩沖液5.0mL，密塞，渦旋10min，靜置分層后分液，得上層液態正辛醇層，分別吸取分配前及分配后的正辛醇溶液，稀釋適當倍數，HPLC測定藥物含量，根據公式P=C(O)C(W)=CproCpre-Cpro]]>來求算分配系數，結果見表2。
表2齊多夫定棕櫚酸酯的正辛醇-緩沖液分配系數(20℃，室溫)
血漿中母體藥物齊多夫定的濃度測定制劑乳劑、脂質體；給藥途徑靜脈注射色譜柱Betasil C18柱(200mm×4.6mm，5μm)；流動相甲醇∶水＝35∶65；流速1.0mL/min；柱溫40℃；檢測波長266nm。內標為苯乙醇。其典型色譜圖見附圖1。
乳劑及脂質體給藥后，不同時間點下，母體藥物齊多夫定的血藥濃度見表1。藥時曲線見附圖2。
表1齊多夫定棕櫚酸酯脂質體與乳劑大鼠尾靜脈注射后的血藥濃度(μg·mL-1)數據(9.93mg·kg-1)
大鼠體內的藥物動力學研究表明，齊多夫定棕櫚酸酯靜脈內給藥后，在體內廣泛存在的羧酸酯酶的作用下，可以迅速酶解為有活性的母體化合物齊多夫定。
粒度測定本實驗中應用PSS.NICOMPTM380作為測定粒徑的儀器。
本發明的優點是建立了一種齊多夫定棕櫚酸酯的純化方法，所獲得的產品由原來的淡黃色改善為白色或類白色；用所建立的HPLC方法控制藥物的純度大于99％，從而大大提高了用藥安全性；以高質量的齊多夫定棕櫚酸酯原料制備的脂質體和乳劑研究了齊多夫定棕櫚酸酯靜脈注射后的體內藥物動力學，在國內外首次獲得了這些參數，為臨床應用提供可靠的依據。
圖1齊多夫定在大鼠血漿中的HPLC色譜圖。
圖2大鼠靜脈注射齊多夫定棕櫚酸酯脂質體及亞微乳后齊多夫定的藥-時曲線。
圖3齊多夫定棕櫚酸酯差示掃描量熱圖。
圖4純化后齊多夫定棕櫚酸酯純度檢查HPLC圖譜。
具體實施例方式實施例1取合成的齊多夫定棕櫚酸酯粗品10g，于50℃下溶于400mL 95％乙醇中，加入活性炭0.5g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，攪拌10分鐘，繼續降溫至-20℃，半小時后齊多夫定棕櫚酸酯大量析出，為針狀結晶，抽濾得純品。外觀為白色，HPLC測定有關物質0.73％，純度為99.27％。
實施例2取合成的齊多夫定棕櫚酸酯粗品10g，于40℃下溶于300mL甲醇中，加入硅膠1g，攪拌，充分混勻，抽濾除去硅膠，將濾液降溫，攪拌10分鐘，繼續降溫至-20℃，1小時后齊多夫定棕櫚酸酯大量析出，為針狀結晶，抽濾得純品。外觀為白色，HPLC測定有關物質0.78％，純度為99.22％。
實施例3取合成的齊多夫定棕櫚酸酯粗品10g，于40℃下溶于100mL甲醇-乙酸乙酯(100∶1)中，加入硅膠1g，攪拌，充分混勻，抽濾除去硅膠，將濾液降溫，攪拌10分鐘，繼續降溫至-20℃，1小時后齊多夫定棕櫚酸酯大量析出，為針狀結晶，抽濾得純品。外觀為白色，HPLC測定有關物質0.88％，純度為99.12％。
實施例4取合成的齊多夫定棕櫚酸酯粗品10g，于50℃下溶于100mL甲醇-甲酸-乙醚-丙酮(100∶0.1∶1∶1)中，加入活性炭0.5g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，攪拌10分鐘，繼續降溫至-20℃，半小時后齊多夫定棕櫚酸酯大量析出，為針狀結晶，抽濾得純品。外觀為白色，HPLC測定有關物質0.67％，純度為99.33％。
實施例5取合成的齊多夫定棕櫚酸酯粗品10g，于50℃下溶于200mL乙腈中，加入活性炭0.5g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，攪拌10分鐘，繼續降溫至-20℃，半小時后齊多夫定棕櫚酸酯大量析出，為針狀結晶，抽濾得純品。外觀為白色，HPLC測定有關物質0.65％，純度為99.35％。
實施例6取合成的齊多夫定棕櫚酸酯粗品10g，于40℃下溶于50mL丙酮中，加入硅膠1g，攪拌，充分混勻，抽濾除去硅膠，將濾液降溫，攪拌10分鐘，繼續降溫至-20℃，1小時后齊多夫定棕櫚酸酯大量析出，為針狀結晶，抽濾得純品。外觀為白色，HPLC測定有關物質0.73％，純度為99.27％。
實施例7齊多夫定棕櫚酸酯DSC分析初始溫度為30℃，最終溫度為300℃，升溫速度為5℃·min-1。所得DSC圖譜見圖附3。由圖可知，齊多夫定棕櫚酸酯在60.19℃開始熔化吸熱到65.15℃全部熔化。
實施例8齊多夫定棕櫚酸酯HPLC純度檢查儀器P230高壓恒流泵，DAD230二極管陣列檢測器，DAD2000色譜數據處理工作站；色譜柱Betasil ODS柱(ID 4.6mm×200mm，5μm)；流動相乙醇∶水＝95∶5；室溫；檢測波長266nm。結果見附圖4。
實施例9齊多夫定棕櫚酸酯乳劑的制備成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，磷脂1.2g，中鏈油10g，甘油2.5g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將中鏈油加熱至70℃，加入磷脂，強烈攪拌至溶解，加入藥物，攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將甘油加入注射用水中，在70℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在50℃時，將油相加入水相，強烈攪拌12min，形成初乳；4)用適量的氫氧化鈉溶液調節pH值至9；5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節至120kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻的乳劑，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為232nm，不含大于5μm的粒子。所得乳劑可以注射也可以口服。
實施例10成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，磷脂1.2g，油酸乙酯20g，甘油2.5g，鹽酸適量，其余為注射用水，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將油酸乙酯加熱至80℃，加入磷脂，強烈攪拌至溶解，加入藥物，攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將甘油加入注射用水中，在70℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在40℃時，將油相加入水相，強烈攪拌15min，形成初乳；4)用適量的鹽酸溶液調節pH值至4；5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至580kg/cm2，第二步再調節至140kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻的乳劑，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為265nm，不含大于5μm的粒子。所得乳劑可以注射也可以口服。
實施例11成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，磷脂1.5g，注射用大豆油30g，甘油2.5g，磷酸鈉適量，其余為注射用水，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將注射用大豆油加熱至80℃，加入磷脂，強烈攪拌至溶解，加入藥物，攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將甘油加入注射用水中，在70℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在40℃時，將油相加入水相，強烈攪拌20min，形成初乳；4)用適量的磷酸鈉溶液，調節PH值至7；
5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至520kg/cm2，第二步再調節至100kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻的乳劑，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為386nm，不含大于5μm的粒子。所得乳劑可以注射也可以口服。
實施例12成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，磷脂1.2g，中鏈油10g，大豆油10g，PEG2000-CH-S(聚乙二醇膽固醇硫酸酯)0.3g、甘油2.5g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將中鏈油加熱至70℃，加入磷脂，強烈攪拌至溶解，加入藥物，攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將PEG2000-CH-S、甘油加入注射用水中，在70℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在50℃時，將油相加入水相，強烈攪拌12min，形成初乳；4)用適量的氫氧化鈉溶液，調節pH值至9；5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節至120kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻的乳劑，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為232nm，不含大于5μm的粒子。所得乳劑可以注射也可以口服。
實施例13成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，磷脂1.2g，中鏈油10g，紅花油1g，PEG2000-CHS(聚乙二醇膽固醇琥珀酸酯)0.3g、甘油2.5g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將中鏈油加熱至70℃，加入磷脂，強烈攪拌至溶解，加入藥物，攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將PEG2000-CHS、甘油加入注射用水中，在70℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在50℃時，將油相加入水相，強烈攪拌12min，形成初乳；4)用適量的氫氧化鈉溶液，調節pH值至9；5)過均質儀，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節至120kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻的乳劑，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為232nm，不含大于5μm的粒子。所得乳劑可以注射也可以口服。
實例14齊多夫定棕櫚酸酯脂質體的制備成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，氫化大豆磷脂2g，膽固醇0.25g，無水乙醇適量，其余為5mM的磷酸鈉緩沖液(pH7.4)，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備藥物溶液在配制罐中，將磷脂與膽固醇溶于適量無水乙醇中加熱至50℃，強烈攪拌至溶解，加入藥物，強烈攪拌5min使之溶解；
2)在配制罐中制備水相將5mM的磷酸鈉緩沖液加熱至50℃，備用。
3)在40℃時，將藥物溶液加入水相，強烈攪拌20min；4)過均質儀，第一步調節勻化壓力至500kg/cm2，第二步再調節至100kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻半透明的脂質體，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為85nm，不含大于5μm的粒子。所得脂質體可用于注射或口服。
實施例15成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，大豆磷脂3g，膽固醇0.375g，無水乙醇適量，其余為5mM的磷酸鈉緩沖液(pH5.5)，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備藥物溶液在配制罐中，將磷脂與膽固醇溶于適量無水乙醇中加熱至60℃，強烈攪拌至溶解，加入藥物，強烈攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將5mM的磷酸緩沖液加熱至60℃，備用。
3)在60℃時，將藥物溶液加入水相，強烈攪拌15min；4)過均質儀，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節至120kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻半透明的脂質體，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為88nm，不含大于5μm的粒子。所得脂質體可用于注射或口服。
實施例16成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，Degussa 1704g，膽固醇0.5g，無水乙醇適量，其余為5mM的枸櫞酸緩沖液(pH3.0)，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備藥物溶液在配制罐中，將磷脂與膽固醇溶于適量無水乙醇中加熱至55℃，強烈攪拌至溶解，加入藥物，強烈攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將5mM的枸櫞酸緩沖液加熱至55℃，備用。
3)在55℃時，將藥物溶液加入水相，強烈攪拌25min；4)過均質儀，第一步調節勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調節至150kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻半透明的脂質體，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為125nm，不含大于5μm的粒子。所得脂質體可用于注射。
實施例17成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，Degussa 2005g，膽固醇0.625g，無水乙醇適量，其余為5mM的碳酸鈉緩沖液，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備藥物溶液在配制罐中，將磷脂與膽固醇溶于適量無水乙醇中加熱至45℃，強烈攪拌至溶解，加入藥物，強烈攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將5mM的碳酸鈉緩沖液加熱至45℃，備用。
3)在45℃時，將藥物溶液加入水相，強烈攪拌30min；4)過均質儀，第一步調節勻化壓力至580kg/cm2，第二步再調節至150kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻半透明的脂質體，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為225nm，不含大于5μm的粒子。所得脂質體可用于注射。
實施例18成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，Degussa 1704g，膽固醇0.375g，PEG2000-CH-S(聚乙二醇膽固醇硫酸酯)0.4g、無水乙醇適量，其余為5mM的磷酸鈉緩沖液，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備藥物溶液在配制罐中，將磷脂、膽固醇與PEG2000-CH-S溶于適量無水乙醇中加熱至50℃，強烈攪拌至溶解，加入藥物，強烈攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將5mM的磷酸鈉緩沖液加熱至50℃，備用。
3)在40℃時，將藥物溶液加入水相，強烈攪拌20min；4)過均質儀，第一步調節勻化壓力至500kg/cm2，第二步再調節至100kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻半透明的脂質體，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為85nm，不含大于5μm的粒子。所得脂質體可用于注射。
實施例19成分為有效劑量的齊多夫定棕櫚酸酯0.3g，Degussa 1704g，膽固醇0.375g，PEG2000-CHS(聚乙二醇膽固醇琥珀酸酯)0.4g、無水乙醇適量，其余為5mM的磷酸鈉緩沖液，共100mL。
制造方法1)在配制罐中制備藥物溶液在配制罐中，將磷脂、膽固醇與PEG2000-CHS溶于適量無水乙醇中加熱至50℃，強烈攪拌至溶解，加入藥物，強烈攪拌5min使之溶解；2)在配制罐中制備水相將5mM的磷酸鈉緩沖液加熱至50℃，備用。
3)在40℃時，將藥物溶液加入水相，強烈攪拌20min；4)過均質儀，第一步調節勻化壓力至500kg/cm2，第二步再調節至100kg/cm2，將溶液反復勻化，得到均勻半透明的脂質體，過微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。平均粒徑為85nm，不含大于5μm的粒子。所得脂質體可用于注射。
實施例20硬膠囊劑將實例1或實例2或實例3或實例4或實例5或實例6所得精制品與10％微粉硅膠混合均勻后，直接裝填于硬膠囊中即得。每個規格50mg或100mg。
實施例21片劑將實例1或實例2或實例3或實例4或實例5或實例6所得精制品與20％多孔淀粉、10％微晶纖維素、5％PVPP、10％微粉硅膠混合均勻后，直接壓片即得。每個規格50mg或100mg。
實施例22顆粒劑將實例1或實例2或實例3或實例4或實例5或實例6所得精制品與20％蔗糖、5％糊精、5％羧甲基纖維素鈉、2％HPMC混合均勻后，按照濕法制粒，干燥、整粒即得。每個規格50mg或100mg。
實施例23混懸劑將實例1或實例2或實例3或實例4或實例5或實例6所得精制品與50％蔗糖、5％HPMC混合均勻后，加入0.1％尼泊金乙酯，或0.1％苯甲酸，并加入蒸餾水，用膠體磨分散即得。每個規格50mg或100mg。
實施例24軟膠囊劑或自乳化軟膠囊劑將實例1或實例2或實例3或實例4或實例5或實例6所得精制品與C6～C18的植物油或動物油(包括經過結構改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、玉米油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(稱為中鏈三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。自乳化軟膠囊劑中所采用的油為C8～C10的中鏈油，除此之外，尚有乳化劑、助乳化劑。所說的乳化劑包括磷脂、高HLB表面活性劑，如聚氧乙烯蓖麻油、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660hydroxystearate)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、DSPE-PEG、泊洛沙姆、吐溫類、蔗糖脂肪酸酯類、椰子油C8/C10聚乙二醇甘油酯、杏仁油酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯(25)甘油三油酸酯、聚氧乙烯(20)山梨醇油酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯中的一種或幾種的混合物；助乳化劑(乙醇、丙二醇、聚乙二醇200-600、二甲基異山梨酯中的一種或幾種混合物)；除此之外，還可以加入抗氧化劑，包括丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、維生素C棕櫚酸酯中的一種或幾種混合物。壓丸即得。每個規格50mg或100mg。
權利要求
1.齊多夫定棕櫚酸酯原料精制方法，其特征在于將齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯原料用有機溶劑溶解，加入吸附劑或不加入吸附劑，室溫至80℃保溫攪拌5～500分鐘，過濾除去吸附劑后，所得溶液于低溫5℃～零下50℃度放置1～100小時，收集沉淀，干燥即得，純化后的齊多夫定棕櫚酸酯原料為白色至類白色的針狀結晶或結晶性粉末。
2.根據權利要求1所述的齊多夫定棕櫚酸酯原料精制方法，其特征在于所述有機溶劑包括C1～C5醇類或其與水適當比例的混合溶劑；C3～C8有機酸酯類、C1～C4有機酸類、C2～C8醚類、C3～C8酮類以及乙腈；吸附劑為活性炭、硅膠、氧化鋁、硅酸鎂、聚酰胺、硅藻土中的一種或幾種。
3.根據權利要求1所述的齊多夫定棕櫚酸酯原料精制方法，其特征在于純化后的齊多夫定棕櫚酸酯原料在色譜柱Betasil ODS柱；流動相乙醇∶水＝95∶5；室溫；檢測波長266nm條件下進行HPLC檢查，純度大于99％。
4.一種齊多夫定棕櫚酸酯乳劑，其特征在于含有效劑量的純化后的齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯作為藥物，并含有藥用輔料，藥用輔料包括油、乳化劑、等滲調節劑、pH調節劑、抗氧劑、助乳化劑或不含有助乳化劑；藥∶油＝1∶3～1∶300。
5.根據權利要求4所述的齊多夫定棕櫚酸酯乳劑，其特征在于所述的油為C6～C28的植物油或動物油，包括經過結構改造和水解后的植物油、甘油三酸酯，椰子油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯或Delios，稱為中鏈三甘油酯；也包括脂肪酸的衍生物，油酸乙酯、亞油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、亞油酸乙酯、油酸山梨醇酯、油酸甘油酯、椰子油C8/C10甘油單酯或雙酯、椰子油C8/C10丙二醇雙酯、椰子油C8/C10甘油三酯、椰子油C8/C10甘油三酯、純化的乙酰化單甘油酯、純化的向日葵油單甘油酯中的一種或幾種的混合物，用量為1～30％(w/v)；所述的乳化劑包括0.5％～5％磷脂(w/v)、0.1％～5％聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660 hydroxystearate)(w/v)、0.1％～5％維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(w/v)、0.05％～5％聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺衍生物(w/v)、0.05％～5％泊洛沙姆(w/v)、0.05％～5％聚乙二醇膽固醇硫酸酯PEG2000-CH-S(w/v)、0.05％～5％聚乙二醇膽固醇半琥珀酸酯(w/v)、0.1％～5％吐溫類(w/v)、司盤類中的一種或幾種的混合物；口服乳劑還可以采用明膠、阿拉伯膠、西黃嗜膠、人血清白蛋白作為乳化劑；可以根據需要加入/或不加入助乳化劑，如油酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕櫚酸、亞油酸、亞麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸、膽酸中的一種或幾種的混合物；還可以加入防腐劑，如尼泊金酯類、苯甲酸類。
6.根據權利要求4所述的齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯乳劑，其特征在于其等滲調節劑是甘油、葡萄糖、甘露醇、木糖醇中的一種或幾種混合物；pH調節劑是鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鈉、磷酸、磷酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉中的一種或幾種，pH范圍是3～9；抗氧劑為惰性氣體、EDTA及其鹽類、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、維生素C及其衍生物，維生素E棕櫚酸酯中的一種或幾種混合物。
7.一種齊多夫定棕櫚酸酯的脂質體，其特征在于含有效劑量的純化后的齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯作為藥物，并含有藥用輔料，藥用輔料包括膜材、pH調節劑、表面修飾輔料或不含表面修飾輔料。
8.根據權利要求7所述的齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯脂質體，其特征在于所述的膜材為天然磷脂，大豆磷脂、氫化大豆磷脂、卵磷脂、磷脂酰乙醇胺、膽固醇、腦磷脂、膽固醇乙酰脂、β-谷甾醇、磷脂酰肌醇、神經鞘磷脂、鞘髓磷脂、牛膽酸鈉；也包括合成磷脂，二棕櫚酰-DL-α磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿、合成磷脂酰絲氨酸、二鯨蠟磷酸酯、硬脂胺中的一種或幾種混合物，用量為1～30％(w/v)；可以根據需要加入/或不加入表面修飾輔料，如與體內某些抗原對應的抗體、單克隆抗體、轉鐵蛋白、半乳糖及其衍生物、PEG及其衍生物，如PEG2000-CH-S聚乙二醇膽固醇硫酸酯、PEG2000-CHS聚乙二醇膽固醇琥珀酸酯、DSPEPEG中的一種或幾種的混合物；還可以加入pH調節劑，鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸鉀中的一種或幾種，pH范圍是3～9。
9.一種齊多夫定棕櫚酸酯制劑，其特征在于用純化后的齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯原料制備片劑、膠囊、顆粒劑、混懸劑、乳劑、脂質體，脂質納米粒、微囊、微球、納米粒，包括自乳化軟膠囊、片劑、顆粒劑、混懸劑。
10.齊多夫定棕櫚酸酯用途，其特征在于齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯可用于制備治療由HIV感染所引起的人類免疫缺陷綜合癥的抗病毒藥物。
全文摘要
本發明涉及一種齊多夫定棕櫚酸酯(或硬脂酸酯)原料精制方法及制劑。建立了一種齊多夫定棕櫚酸酯的純化方法，提高了用藥安全性。主要技術方案是將齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯原料用適量的有機溶劑溶解，加入吸附劑或不加入吸附劑，室溫至80℃保溫攪拌5～500分鐘，過濾除去吸附劑，低溫5～－50℃放置1～100小時，收集沉淀，干燥即得。純化后的齊多夫定棕櫚酸酯原料為白色至類白色，經HPLC檢查，純度大于99％。所得精制齊多夫定棕櫚酸酯或硬脂酸酯原料可以進一步制備各種制劑，包括乳劑、脂質體、硬、軟膠囊、片劑、顆粒劑，混懸劑。本發明以高質量的齊多夫定棕櫚酸酯原料制備的脂質體和乳劑研究了齊多夫定棕櫚酸酯靜脈注射后的體內藥物動力學，為臨床應用提供可靠的依據。
文檔編號A61K31/7042GK1827632SQ20061007426
公開日2006年9月6日 申請日期2006年4月5日 優先權日2006年4月5日
發明者鄧意輝, 陳國良, 畢殿洲, 雷杰杰, 徐暉, 王紹寧, 周欣羽, 趙靜, 王寧, 沈琳 申請人:沈陽藥科大學