專利名稱：：經由Mitsunobu反應制備VLA-4拮抗劑的聚乙二醇化共軛物的制作方法
技術領域：
：本發明涉及制備治療用、農業用和食品添加劑化合物的聚合共軛物的方法。更具體來說，本發明涉及采用Mitsimobu反應條件來制備用于治療各種哺乳動物、尤其是人類的疾病和功能紊亂以及用于農業和用作食品添加劑的共軛物的方法。在某些方面，本發明涉及使用Mitsunobu條件與醇(尤其是含醇聚合物)以及胺一起形成所需的共軛物。
背景技術：
：生物學活性化合物與聚合物的結合已經受到了極大地關注，并已經成為了控制多種特性的通用方法，例如，這些化合物的生物分布、藥代動力學、和毒性。經常選擇用于制備生物學活性化合物的聚合共軛物的聚合物是聚乙二醇(PEG)。小和大的生物學活性分子都廣泛地用作共價修飾劑。對于這些共軛物的討論，參見Eur.Polym.J.i^，No.12:第1177-1183頁(Zaplinsky等人，1983)等，JournalofControlledRelease10(1989)145-154(Veronese等人，1989)，和AdvancedDrugDeliveryReviews,157-182(Zaplinsky,1995)。近來已經發現例如(VLA-4)拮抗劑的聚合共軛物已經極大地提高了血清半衰期。這些聚合化合物可使用多種合成方法來制備，包括通過將活性分子的酯與聚合物胺反應形成羧酰胺、活性分子的胺與聚合物氯甲酸酯之間形成氨基甲酸酯、或活性分子的異氰酸酯與聚合物醇之間形成氨基甲酸酯。這些方法的總產率一般不能滿足需要，經常涉及多個步驟和純化手段。因此需要設計一種方法，該方法能以定量或接近定量的產率分離VLA-4抑制劑的共軛物。這些聚合共軛物的重要性表明需要方便和有效地合成這些物質。
發明內容本發明提供了農業用、治療用和食品添加劑化合物的聚合共軛物13的改進合成方法。本發明的方法以優異的產率產生最終的共軛產物。在一個優選的方面，本發明提供了通過使用Mitsunobu反應條件縮合聚合醇與胺而制備共軛物的方法。在另一個優選的方面，本發明提供了通過使用Mitsimobu反應條件縮合聚合胺與醇而制備共軛物的方法。在一個方面，本發明提供了一種用于制備活性化合物的共軛物的方法，該方法包括a)將聚合醇與親核試劑在三價膦和合適的偶氮二甲酰化合物，例如偶氮二羧酸二乙酯或偶氮二甲酰二哌啶的存在下反應形成共軛物；和b)分離該共軛物。在一個具體的方面，活性化合物和生成的共軛物顯示VLA-4拮抗劑特性。在另一個方面，本發明提供了用于制備下面式I的共軛物的方法B是生物相容性聚合物部分；q為從大約1至大約100;在每種情況下A都獨立地是具有生物學或農業活性的化合物或A是食品添加劑化合物。該方法包括a)將式Ia的聚合醇CS>~0H|a在三價膦和適當取代的偶氮二甲酰化合物的存在下，與式H-Nu的親核試劑反應以形成式I的化合物，其中Nu是對應于上述式A的基團，且H是Nu上的酸性氫；和b)分離式I的化合物。具體實施例方式如上所述，本發明提供了用于制備農業用、治療用和食品添加劑化合物(以后稱為"活性化合物")的共軛物的方法。該共軛物包括與一個或多個活性化合物共價連接的一個或多個聚合物部分，其中生成的共軛物與該活性化合物具有相同類型的活性。在一個方面，該活性化合物和生成的共軛物是能抑制白細胞粘附、尤其是至少部分由0U整合素所介導的白細胞粘附的化合物。在一個優選的方面，式I的共軛物中的A基團可由式II代表其中R31是與任選地包括連接基團的聚合物部分連接的共價鍵，或者R3'是-H、R3I'、-NH2、-NHR31^-N(R31')2、-NC3-C6環基、-OR31'、-SR31'，其中每個W獨立地是任選取代的直鏈或支鏈的C,-C6烷基、任選取代的C3-C6環烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基，且R32是與任選地包括連接基團的聚合物部分連接的共價鍵，或者R"是-H、-N02、鹵代烷基或基團-N(MR")R42，其中M是共價鍵、-C(0)-或-S02-，R"是R"'、N(R"')2或-OR"'，其中每個R"'獨立地是氫、任選取代的直鏈或支鏈的C,-C6烷基、任選取代的環垸基、任選取代的芳基、任選取代的雜環或任選取代的雜芳基，其中任選的取代基是鹵化物、C,-C6烷基、或-OC,-C6烷基，且R^是氫或R"';和b)式(b)的基團其中J選自:a)式(a)的基團:其中R選自與聚合物部分連接的共價鍵、氨基、取代的氮基、烷基和取代的烷基，其中每個氨基、取代的氨基、烷基和取代的烷基任選地與聚合物部分共價連接，其中，在每種情況下，聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團與聚合物部分共價連接；A—選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與Ar'共價連接；A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中所述聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與A一共價連接；X選自-NR1-、-O-、-S-、-SO-、-S02和任選取代的-CH2-，其中R'選自氫和垸基；T選自；a)式(c)的基團o義其中Y選自-0-和-NR1-，其中R'選自氫和烷基；W選自與任選地包括連接基團的聚合物部分連接的共價鍵、和-NR2R3，其中Fe和R獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、以及其中W和RS與其結合的氮原子一起形成雜環或取代的雜環，其中每個垸基、取代的烷基、雜環和取代的雜環任選地與聚合物部分共價結合，所述聚合物部分進一步任選地包括連接基團；m是等于0、l或2的整數；n是等于0、l或2的整數；和b)式(d)的基團其中G是任選取代的芳基或任選取代的含有0至3個氮的雜芳基5或6元環，其中所述的芳基或雜芳基任選地進一步包括與任選地包括連接基團的聚合物部分連接的共價鍵；W是與任選地包括連接基團的聚合物部分連接的共價鍵，或者R6是-H;R"選自垸氧基、取代的垸氧基、環烷氧基、取代的環垸氧基、芳氧基和取代的芳氧基、和-OH;A.J、Ar1、A一和T的至少一個含有與聚合物部分連接的共價鍵；B.當J與聚合物部分共價連接時，n是1且X不是-O-、-S-、-SO-或-SOr;禾口C.當X是-O時，則m是2。在一個優選的實施方式中，僅J、Ar1、A一和T中的一個含有與聚合物部分結合的共價鍵。在共軛反應中使用的化合物H-Nu是含有與Nu共價連接的酸性氫的化合物。式H-Nu的優選化合物可以由式II.l代表條件是:其中J和Ar2的定義與式II的定義相同;T是帶有酸性氫的基團；且17R"是酸性保護基團。合適的T基團包括雜環基團、酰亞胺、苯酚、磷酸單酯和-羧酸、異羥肟酸酯、硫醇、硫代酰胺、(3-酮酯和1,3-二酮。優選的T基團是式(c)的基團o十,、W(C)其中Y選自-O-和-NR'-，其中R'選自氫和烷基；W是含有酸性氫的基團，氫優選在鄰近羰基的氮原子上，其中W基團任選地與Y(CO)通過連接基團連接。另一個優選的T基團是式(d)的基團Vnyn、r6丫o(d)其中G是任選取代的芳基或任選取代的含有0至3個氮的雜芳基5或6元環；且R6是氫。應該理解的是，q的數值是根據聚合物部分的數目與A-部分的數目的比例計算而來的。換句話說，當q是1.5時，則預計是例如下式I':優選的由本發明制備的式I的共軛物包括下式Ia的那些化合il3和其藥學上可接受的鹽類，其中B是任選地與載體共價結合的聚合物部分；q為從大約1至大約100;在每種情況下A都獨立地是式IIa的化合物、及其藥學上可接受的鹽;(R)nIIa其沖R選自與聚合物部分結合的共價鍵、氨基、取代的氨基、烷基和取代的烷基，其中每個氨基、取代的氨基、烷基和取代的烷基任選地與聚合物部分共價連接，其中，在每種情況下，聚合物部分任選地包括與聚合物部分共價連接的連接基團；Ar'選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與Ar"共價連接；A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中所述聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與A—共價連接；X選自-NR1-、-O-、-S-、-SO-、-S02和任選取代的-CH2-，其中W選自氫禾口烷基；Y選自-0-和-NR1-，其中R'選自氫和垸基；W選自與任選地包括連接基團的聚合物部分連接的共價鍵、和-NR2113，其中W和R獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、以及其中W和R3與其結合的氮原子一起形成雜環或取代的雜環，其中每個烷基、取代的烷基、雜環和取代的雜環任選地與聚合物部分共價結合，所述聚合物部分進一步任選地包括連接基團；m是等于0、l或2的整數；n是等于0、l或2的整數；19條件是A.R、Ar1、Ar2、W和-NR2113的至少一個含有與聚合物部分結合的共價鍵；B.當R與聚合物部分共價連接時，n是1且X不是-O-、-S-、-SO-或-S02-;C.當X是-0-或-NR'-時，則m是2;和D.式Ia的共軛物的分子量不超過100,000。優選的由本發明制備的式I的共軛物包括下面式Ib的那些化合物:^)一(A)qlb其中每個A獨立地是下面式IIb的化合物Ar1、Slib且其中q為大約1至大約100;B是任選地與載體共價結合的聚合物部分；Ar'選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中PEG部分任選地包括連接基團，所述連接基團將PEG部分與Ar'共價連接；A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中所述聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與A一共價連接；Y選自-O-和-NR'-，其中R'選自氫和烷基；W選自與任選地包括連接基團的聚合物部分連接的共價鍵、和-NR2R3，其中112和RS獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、以及其中F^和Fe與其結合的氮原子一起形成雜環或取代的雜環,其中每個烷基、取代的垸基、雜環和取代的雜環任選地與聚合物部分共價結合，所述聚合物部分進一步任選地包括連接基團；條件是Ar1、Ar2、W和-NR2113的至少一個與任選地包括連接基團的聚合物部分共價結合；且進一步的條件是式Ib的共軛物的分子量不超過100,000。優選的由本發明的方法制備的式I的共軛物包括下面式Ic的那些化合物(^^)一(A)qIc其中每個A獨立地是下面式lie的化合物、及其藥學上可接受的鹽類An、'nc(R)n且其中q為大約l至大約100;B是任選地與載體共價結合的聚合物部分；R選自與聚合物部分結合的共價鍵、氨基、取代的氨基、烷基和取代的垸基，其中每個氨基、取代的氨基、垸基和取代的垸基任選地與聚合物部分共價連接，其中，在每種情況下，聚合物部分任選地包括與聚合物部分共價連接的連接基團；Ar'選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與Ar'共價連接；A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中所述聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與A一共價連接；Y選自-0-和-NR1-，其中R'選自氫和垸基；W選自與任選地包括連接基團的聚合物部分連接的共價鍵、以及-NR2R3，其中W和R與其結合的氮原子一起形成雜環或取代的雜環，其中每個垸基、取代的垸基、雜環和取代的雜環任選地與聚合物部分共價結合，所述聚合物部分進一步任選地包括連接基團；n是等于0、l或2的整數；條件是R、Ar1、Ar2、W和-NR2113的至少一個與聚合物部分共價結合，該聚合物部分任選地包括連接基團；且進一步的條件是式Ic的共軛物的分子量不超過100,000。優選的式I的共軛物包括下面式Id的那些化合物。其中每個A獨立地是下面式lid化合物、及其藥學上可接受的鹽且其中q為大約l至大約100;B是任選地與載體共價結合的聚合物部分；R選自與聚合物部分結合的共價鍵、氨基、取代的氨基、烷基和取代的烷基，其中每個氨基、取代的氨基、垸基和取代的垸基任選地與聚合物部分共價連接，其中，在每種情況下，聚合物部分任選地包括與聚合物部分共價連接的連接基團；A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與Ar'共價連接；A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中所述聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與A一共價連接；!^和RS獨立地選自氫、烷基、取代的垸基、以及其中W和W與其結合的氮原子一起形成雜環或取代的雜環，其中每個烷基、取代的烷基、雜環和取代的雜環任選地與聚合物部分共價結合，所述聚合物部分進一步任選地包括連接基團；n是等于0、l或2的整數；條件是R、Ar1、Ar2、和-NR2113的至少一個與任選地包括連接基團的聚合物共價結合；且進一步的條件是式Id的共軛物的分子量不超過100,000。優選的式I的共軛物包括下面式Ie的那些化合物其中每個A獨立地是下面式IIe的化合物、及其藥學上可接受的鹽且其中q為大約l至大約100;B是任選地與載體共價結合的聚合物部分；Ar'選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中所述聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與Al^共價連接；A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中所述聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與Al^共價連接；Fe和R獨立地選自氫、垸基、取代的烷基、以及其中112和尺3與其結合的氮原子一起形成雜環或取代的雜環，其中每個烷基、取代的垸基、雜環和取代的雜環任選地與聚合物部分共價結合，所述聚合物部分進一步任選地包括連接基團；條件是Ar1、A和-NWl^的至少一個與聚合物部分共價結合，該聚合物部分任選地包括連接基團；且進一步的條件是式Ie的共軛物的分子量不超過100,000。優選的式I共軛物包括下面式If的那些化合物其中每個A獨立地是下面式IIf的化合物、及其藥學上可接受的鹽類:(R5)n且其中q為大約1至大約100;B是任選地與載體共價結合的聚合物部分；114與任選地包括連接基團的聚合物部分共價連接；RS選自烷基和取代的烷基；Al^選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；X選自-NR1-、-O-、-S-、-SO-、-S02和任選取代的-CH2-，其中R選自氫和烷基；m是等于0、l或2的整數；n是等于0、l或2的整數；條件是A.當R與聚合物部分共價連接時，n是1且X不是-O-、-S-、-SO-B.當X是-O-或-NR'-時，則m是2;和C.式If的共軛物的分子量不超過100,000。優選的式I的共軛物包括下面式Ig的那些化合物:其中每個A獨立地是下面式IIg的化合物、及其藥學上可接受的和其中q為大約1至大約100;B是任選地與載體共價結合的聚合物部分；R4與任選地包括連接基團的聚合物部分共價連接；RS選自垸基和取代的垸基；A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基;n是等于0、1或2的整數；條件是式Ig的共軛物的分子量不超過100,000。優選的式I的共軛物包括下面式Ih的那些化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage25</formula>或-SO:其中每個A獨立地是下面式IIh化合物、及其藥學上可接受的鹽類且其中q為大約l至大約100;W與聚合物部分共價連接，該聚合物部分任選地包括連接基團;A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；條件是式Ih的共軛物的分子量不超過100,000。優選的式I的共軛物包括下面式Ii的那些化合物或其藥學上可接受的鹽，且條件是式Ii的共軛物的分子量不超過100,000。優選地，當Ar'不與聚合物部分結合時，式IIa-IIe中的A—和式IIf-IIh中的Ar3選自苯基，4-甲基苯基，4-叔丁基苯基，其中每個a獨立地是下面式m化合2,4,6-三甲基苯基，2-氟苯基，3-氟苯基，4-氟苯基，2,4-二氟苯基，3，4-二氟苯基，3，5-二氟苯基，2-氯苯基，3-氯苯基，4-氯苯基，3,4-二氯苯基，3，5-二氯苯基，3-氯-4-氟苯基，4-溴苯基，2-甲氧基苯基，3-甲氧基苯基，4-甲氧基苯基，3,4-二甲氧基苯基，4-叔丁氧基苯基，4-(3'-二甲基氨基-正丙氧基)-苯基，2-羧基苯基，2-(甲氧基羰基)苯基，4陽(H2NC(0)-)苯基，4-(H2NC(S)-)苯基，4-氰基苯基，4-三氟甲基苯基，4-三氟甲氧基苯基，3，5-二-(三氟甲基)苯基，4-硝基苯基，4-氨基苯基，4-(CH3C(0)NH-)苯基，274-(苯基NHC(O)NH-)苯基，4-脒基苯基，4-甲基脒基苯基，4-[CH3SQ^NH)-]苯基，4陽氯-3-[H2NS(0)2-]苯基，1-萘基，2-萘基，吡啶-2-基，吡啶-3-基，吡啶-4-基，嘧啶-2-基，喹啉-8-基，2-(三氟乙酰基)-l，2，3,4-四氫異喹啉-7-基，2-噻吩基，5-氯-2-噻吩基，2,5-二氯-4-噻吩基，l-N-甲基咪唑—4-基，1—N—甲基吡唑_3_基，1_N—甲基吡唑-4-基，l一N-丁基吡唑-4-基，1-N-甲基-3-甲基-5-氯吡唑-4-基，1_N_甲基-5-甲基-3-氯吡唑-4-基，2-噻唑基和5-甲基-l,3，4-噻二唑-2-基。優選地，當A是式IIa、IIb、IIc、IId和IIe，且A一與聚合物部分結合時，則Ar'具有下式-Ar'-ZKCHsCHR^pR8射Ar'選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，Z選自共價鍵、從1至40個原子的連接基團、-0-和-NR9-，其中W選自氫和烷基，R"選自氫和甲基；RS選自A、-(LXv-聚合物載體、氫、垸基、取代的烷基、芳基、取代的芳基和-CH2CH^NR、11，其中W如上所定義，R'g和R"獨立地選自氫和烷基，A由上面的式IIa至IIh的任意一個所表示，L是l至40個原子的連接基團，且w是O或l;且p是從大約100至2200的整數，優選大約200-1360。當A是式IIa或IIf，且R不與聚合物部分結合時，具有下式的取代基其中R5、X、m和n如上所定義，優選地選自氮雜環丁烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉代、硫代嗎啉基、批咯烷基、4-羥基吡咯垸基、4-氧代吡咯烷基、4-氟代吡咯垸基、4,4-二氟代吡咯烷基、4-(硫代嗎啉-4—基C(O)O-)吡咯烷基、4-[CH3S(0)20-]吡咯垸基、3-苯基吡咯垸基、3-硫代苯基吡咯垸基、4-氨基-吡咯烷基、3-甲氧基吡咯烷基、4,4-二甲基吡咯烷基、4-N-Cbz-哌嗪基、4-[CH3S(0)2-]哌嗪基、5,5-二甲基噻唑垸_4_基、l，l-二氧代-噻唑垸基、1，1-二氧代-5,5-二甲基噻唑垸-2-基和1,1-二氧硫代嗎啉基。優選地，當A是式IIa，且下式的取代基與PEG部分結合時，則優選取代基是下式:Z-(CH2CHR70)PR8m是等于0、l或2的整數；Z選自共價鍵、1至40個原子的連接基團、-0-和-NR9-，其中R9選自氫和垸基，R"選自氫和甲基；rs選自A、-(LXv-聚合物載體、氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基和-CH2CHR7nrWr11，其中R"如上所定義，R'G和rh獨立地選自氫和垸基，A由上面的式IIa至IIh的任意一個所表示，L是l至40個原子的連接基團，且w是0或l;且p是從大約100至2200的整數，優選大約200-1360。當A是式IIa、IIb、IIc、IId、IIe，且Ar2不與聚合物部分結合時，則優選A一選自苯基、取代的苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基和4-吡啶-2-酮基。當A是式IIa、IIb、IIc、IId、IIe，且當A一與聚合物部分結合時，則ArM尤選由下式所示I~Ar2~f"'I'Z-(CH2CHR70)pR8其中A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；Z選自共價鍵、1至40個原子的連接基團、-0-和-NR9-，其中R9選自氫和烷基，W選自氫和甲基；rs選自A、-(LXv-聚合物載體、氫、垸基、取代的垸基、芳基、取代的芳基和-CH2CHE7nrWR11，其中W如上所定義，r"和r"獨立地選自氫和烷基，A由上面的式IIa至IIh的任意一個所表示，L是l至40個原子的連接基團，且w是0或l;且p是從大約100至2200的整數，優選大約200-1360。在由本發明的方法制備的共軛物的一個優選實施方式中，-YC(O)W是-OC(0)NR2r3。當a是式IIa、IIb或IIc，-丫0;0)\￥是-0(:(0^112113，且r2和r3都不與聚合物部分結合時，則優選-OC(0)NR2113選自:CH3)2NC(0)0-，:哌啶-i-基)-c(o)o-，:哌啶-4-基)-C(0)0-,:1-甲基哌啶-4-基)-C(O)O-，:4-羥基哌啶-1-基)-C(O)O-，:4-甲酰氧基哌啶-1-基)-C(O)O-，:4-乙氧基羰基哌啶-1-基)-C(O)O-，:4-羧基哌啶-l-基)-C(0)0-，:3-羥基甲基哌啶-1-基)-C(O)O-，:4-羥基甲基哌啶-l-基)-C(O)O-，:4-苯基-l-Boc-哌啶-4-基)-C(0)0-，:4-哌啶酮-1-基乙二醇縮酮)-C(O)O-，:哌嗪-4-基)-C(0)0-，:1-800哌嗪-4-基)-C(O)O-，:4-甲基哌嗪-l-基)-C(0)0-，:4-甲基高哌嗪-1-基)-C(O)O-，:4-(2-羥基乙基)哌嗪-1-基)-C(O)O-，:4-苯基哌嗪-l-基)-C(0)0，:4-(吡啶-2-基)哌嗉-l]-基)-C(0)0-，:4-(4-三氟甲基吡啶-2-基)哌嗪-l-基)-C(0)0-,:4-(嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)-C(O)O-，:4-乙酰基哌嗪-1-基)-C(O)O-，:4-(苯基-<:(0)-)哌嗪-1-基)-c(o)o-，:4-(吡啶-4'-基-C(0)-)哌嗪-l-基)-C(0)0-，:4-(苯基-^^(0)-)哌嗪-1-基)-C(O)O-，:4-(苯基-NHC(S)-)哌嗪-l-基)-C(0)0-，:4-甲磺酰基哌嗪-1-基)-C(O)O-，:4-三氟甲磺酰基哌嗪-1-基)-C(O)O-，:嗎啉-4-基)-C(0)0-，:硫代嗎啉-4-基)-C(0)0-，硫代嗎啉—4'-基砜)-C(0)0-，(吡咯垸-l-基)-C(O)O-，(2-甲基吡咯烷-1-基)-C(O)O-，(2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基)-C(O)O-，(2-(羥基甲基)吡咯垸-1-基)-C(O)O-,(2-(N,N-二甲基氨基)乙基)(CH3)NC(0)0-，(2-(N-甲基-N-甲苯-4-磺酰基氨基)乙基)(CH3)N-C(0)0-，(2-(嗎啉-4-基)乙基)(CH3)NC(0)0-，(2-(羥基)乙基)(CH3)NC(0)0-，雙(2-(羥基)乙基)NC(0)0-，(2-(甲酰氧基)乙基)(CH3)NC(0)0，(CH3OC(0)CH2)HNC(0)0-，和2-(苯基NHC(O)O-)乙基-]HNC(O)O-。當A是式IIa、IIb或IIc，-YC(O)W是-OC(0)NR2R3，且R2和/或R3與PEG部分結合時，則PEG部分優選由下式表示Z'選自共價鍵和1至40個原子的連接基團；117選自氫和甲基；RS選自A、-(LXv-聚合物載體、氫、烷基、取代的垸基、芳基、取代的芳基和-CH2CHI^NR,11，其中W如上所定義，R^和R"獨立地選自氫和垸基，A由上面的式II所表示，L是1至40個原子的連接基團，且w是0或1;且p是從大約100至2200的整數。優選式II.l中的T基團具有下面的式(d)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>其中W是氫。優選(d)基團包括下面表D中所示的那些基團。表D<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>其中R"是與任選地包括連接基團的聚合物部分結合的共價鍵，或R"是氫或直鏈或支鏈的C,-CV烷基；R"是與任選地包括連接基團的聚合物部分結合的共價鍵，或R"是氫、鹵素或直鏈或支鏈的C,-C6垸氧基；且R88是氫。用于本發明中的其他(d)基團包括表Dl中所示的那些基團。用于本發明的方法中的其它優選的式IU化合物具有式IU-a:II.l-a和其藥學上可接受的鹽類，其中R"是酸保護基團，優選CrC6烷氧基，更優選CVC4烷氧基；Ar'選自烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、環垸基、取代的環烷基、雜環、取代的雜環、雜芳基和取代的雜芳基；且R6是氫。式ll.l-a的優選化合物包括下面的那些化合物其中Ar1是苯基或具有至少一個氮原子的5-或6-元雜芳基，每個都任選地用鹵素、羥基、C廣Qi烷氧基、C廣C6烷基、硝基、三氟甲基、氨基、單或二(C廣C6)烷基氨基、氨基(Q-C6)烷基、C2-C6酰基、CVC6酰基氨基、或氨基(C廣C6)酰基取代。Ar'是任選地用鹵素、羥基、C,-CV烷基、C,-C6烷氧基，硝基、三氟甲基、氨基、單或二(C,-C6)烷基氨基、氨基(C,-C6)烷基、c2-c6酰基、CVC6酰基氨基、或氨基(C,-QO酰基取代的吡啶基。式ll.l-a的特別優選的化合物包括下面的那些化合物其中Ar'是任選地用C,-C6烷基、鹵素、羥基、C,-C6垸氧基，硝基、三氟甲基、氨基、或單或二(C,-C6)烷基氨基取代的吡啶基。式11.1的其他優選的化合物也是式11.2-a的那些化合物和其藥學上可接受的鹽類，其中R"是酸保護基團，優選C,-CV烷氧基，更優選C2-C4垸氧基；R6是氫。式11.2-a的優選化合物包括下列的那些化合物其中R31是氨基或單或二(C,-C6)烷基氨基；且R"是-H、->^02或鹵代垸基，更優選三氟甲基甲基。式11.2-a的其他優選的化合物是下面的那些化合物，其中R"是氨基或單或二(C,-C6)烷基氨基；且R32是-N(MR")R42;其中M是-S02-或-CO-;R41是任選地用下列基團取代的d-C6烷基鹵素、羥基、d-C6垸氧基、氨基、或單或二(C,-C6)烷基氨基；或苯基或含有至少一個氮的5-或6-元雜芳基，每個都任選地用鹵素、羥基、C,-C6垸基、C,-C6烷氧基、C3-C7環垸基、氨基、硝基、三氟甲基、或單或二(C廣C6)烷基氨基取代；且R"是氫、C,-C6垸基或C3-C7環垸基。式11.2-a的進一步優選的化合物包括下列的那些化合物，其中在式11.2-a中的R41基團是任選地用下列基團取代的d-C4垸基鹵素、羥基、C,-C6烷氧基、氨基、或單或二(C,-Q)烷基氨基；或吡啶基或嘧啶基，每個都任選地用鹵素、羥基、C,-CV烷基、C,-C3烷氧基、氨基、或單或二(C,-Q)烷基氨基取代；且R"是氫、C,-C4烷基或C3-C7環垸基。在一個實施例中，本發明的共軛物是二價的且由式m所示其中每個A獨立地如上所規定，且B^-Z'-(CH2CHR70)P-Z'-，其中每個Z'獨立地是共價鍵或連接基團，W是氫或甲基，且p為大約100至1360的整數。在另一個實施例中，本發明的共軛物是三價至十價的，且優選由式IV所示其中每個A獨立地如上所規定，且t為3至10的整數。本發明的方法采用了Mitsimobu反應，即在三芳基膦或三烷基膦和合適的偶氮二羧酸酯存在下的醇縮合反應。在優選的反應中，聚合醇，例如聚乙二醇，與親核試劑在三芳基-或三垸基膦和重氮化試劑的存在下反應生成共軛物。親核試劑是具有酸性氫(即，適合貢獻電子的部分)的化合物。通過聚合醇與親核試劑反應形成的鍵可以是各種各樣的，例如，碳-氧鍵形成、碳-氮鍵形成、碳-硫鍵形成，碳-鹵素鍵形成和碳-碳鍵形成。因此，非衍生的活性化合物可具有各種能與聚合醇反應的官能團。實例包括羧酸、醇、(3-酮酯、胺、硫醇、鹵代烷、酰鹵、(3-二酮和類似物。可在本發明的方法中使用的親核試劑的其他實例可見Orgam'ci^c"wM,1992，42，335-656，該文全部引入本文作為參考。關于三芳基-或三烷基膦的實例的描述見，^涵ei，2003，3,317-334;r"raW腦1998,39,7787;C/zew.C薩漏.1997,759;禾卩MWecw/^sM/c/eo"cfey,1999，18,727，所有文獻都引入本文作為參考，且包括三苯基膦、三甲基膦、三乙基膦、三丁基膦和1,2-雙-(二苯基膦基)乙烷。膦類也可以是聚合物負載的或水溶性的。優選的三芳基膦是三苯基膦。重氮化試劑通常是偶氮二羧酸的酯類或酰胺類，且包括6>"Am&2003，3，317-334;r"ra/7edra1999，40,7359;禾卩5w〃.C7^m.j5^1.，1984,57,2675中提到的那些化合物。這些重氮化合物的具體實例是偶氮二羧酸二乙酯、偶氮二羧酸二異丙酯、4-甲基-1,2,4-三唑垸-3,5-二酮、N,N,N',N'-四甲基偶氮二羧酰胺、偶氮二羧酸二哌啶、雙(N-4-甲基哌嗪-l-基)偶氮二羧酰胺、二嗎啉代偶氮二羧酰胺和偶氮二羧酸二叔丁酯。由本發明的方法制備的代表性共軛物，包括其藥學上可接受的鹽類，顯示在下表中<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>其中，每個結構中，所有p'的總和為100-2200，優選大約200-1360。定義如在此所使用的"烷基"是指具有1至5個碳原子，更優選1至3個碳原子的單價飽和脂肪族烴基。該術語的實例基團如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、正戊基和類似物。"取代的烷基"是指具有1至3個，優選1至2個取代基的垸基，上述的取代基選自烷氧基、取代的垸氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、鹵素、羥基、硝基、羧基、羧基酯、環垸基、取代的環烷基、螺環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環。"亞烷基"是指優選具有1至5個，更優選1至3個碳原子的二價飽和脂肪族烴基，其是直鏈或支鏈的基團。該術語的實例基團如亞甲基(-CH2-)、亞乙基(-CH2CHr)、亞正丙基(-CH2CH2CH2-)、亞異丙基(-CH2CH(CH3)-)和類似基團。"垸氧基"是指"烷基-O-"基團，該基團的實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基和類似基團。"取代的垸氧基"是指"取代的烷基-O-"基團。"酰基"是指基團H-C(O)-、烷基-C(O)-、取代的垸基-C(O)-、烯基-C(O)-、取代的烯基-C(O)-、炔基-C(O)-、取代的炔基-C(O)-、環烷基-c(o)-、取代的環烷基-c(o)-、芳基-c(o)-、取代的芳基-c(o)-、雜芳基-c(o)-、取代的雜芳基-c(o)-、雜環-c(o)-和取代的雜環-c(o)-、其中垸基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、環垸基、取代的環垸基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環如本文所定義。"氨基酰基"是指基團-C(O)NR'OR10，其中每個R'o均單獨選自氫、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、環垸基、取代的環垸基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環、取代的雜環，以及其中每個RW與氮原子連接在一起形成雜環或取代的雜環，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、環垸基、取代的環垸基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環如本文所定義。39"酰氧基"是指基團烷基-C(O)O-、取代的烷基-C(O)O-、烯基-c(o)o-、取代的烯基-c(o)o-、炔基-c(o)o-、取代的炔基-c(o)o-、芳基-c(o)o、取代的芳基-c(o)o-、環烷基-c(o)o-、取代的環烷基-c(o)o-、雜芳基-c(o)o-、取代的雜芳基-c(o)o-、雜環-c(o)o-和取代的雜環-c(o)o-，其中烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、環烷基、取代的環烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環如本文所定義。"烯基"是指具有2至6個碳原子、優選2至4個碳原子，具有至少1個、優選1至2個烯基不飽和位點的烯基基團。這些基團的實例是乙烯基、烯丙基、丁-3-烯-l-基和類似基團。"取代的烯基"是指具有1至3個取代基、優選1至2個取代基的烯基，上述取代基選自烷氧基、取代的垸氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、鹵素、羥基、硝基、羧基、羧基酯、環烷基、取代的環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環，其條件是任何羥基取代不與乙烯基(不飽和)碳原子連接。"炔基"是指具有2至6個碳原子、優選2至3個碳原子，并具有至少1個、優選1至2個炔基不飽和位點的炔基。"取代的炔基"是指具有1至3個取代基、優選1至2個取代基的炔基，上述的取代基選自垸氧基、取代的烷氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、鹵素、羥基、硝基、羧基、羧基酯、環烷基、取代的環垸基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環。"氨基"是指-NH2基團。"氰基"是指-CN基團。"取代的氨基"是指-NR'R"基團，其中R'和R"均獨立地選自氫、烷基、取代的垸基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、環烷基、取代的環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環、取代的雜環，以及其中R'和R"與它們連接的氮連接在一起形成雜環或取代的雜環，條件是R鄰R"都不是氫。當R'是氫，R"是垸基時，本文中取代的氨基有時是指烷基氨基。當R'和R"是烷基時，本文中取代的氨基有時是指垸基氨基。當提到單取代的氨基時，它是指R'或R"是氫但不同時是氫。當提到雙取代的氨基時，它是指R'或R"都不是氫。"氨基酰基"是指基團-NR"C(0)烷基、-NR"C(0)取代的垸基、-NR"C(0)環垸基、-NR"C(0)取代的環垸基、-NR"'C(0)烯基、-NR"C(O)取代的烯基、-NR"C(0)炔基、-服110;0)取代的炔基、^1^(:(0)芳基、^1^(:(0)取代的芳基、^1^(:(0)雜芳基、-NRUc(o)取代的雜芳基、-NR11C(0)雜環和-NR^C(0)取代的雜環，其中R"是氫或垸基，且其中垸基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、環烷基、取代的環垸基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環如本文所定義。"硝基"是指-N02基團。"芳基"或"Ar"是指單價的具有6至14個碳原子的芳香族碳環基團，其具有單環(例如，苯基)或多元稠環(例如，萘基或蒽基)，稠環可以是或不是芳香族的(例如，2-苯并噁唑啉酮、2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮-7-基和類似物)，條件是連接處在一個芳香族碳原子處。優選的芳基包括苯基和萘基。"取代的芳基"是指具有1至3個取代基、優選1至2個取代基的芳基，上述的取代基選自羥基、酰基、酰氨基、酰氧基、垸基、取代的烷基、烷氧基、取代的垸氧基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、羧基、羧基酯、氰基、硫醇、硫代烷基、取代的硫代烷基、硫代芳基、取代的硫代芳基、硫代雜芳基、取代的硫代雜芳基、硫代環垸基、取代的硫代環垸基、硫代雜環、取代的硫代雜環、環烷基、取代的環烷基、鹵素、硝基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環、取代的雜環、雜芳氧基、取代的雜芳氧基、雜環氧基、取代的雜環氧基、氨基磺酰基(NH2-S02-)和取代的氨基磺酰基。"芳氧基"是指芳基-O-基團，其實例包括苯氧基、萘氧基和類似基團。"取代的芳氧基"是指取代的芳基-O-基團。"羧基"是指-COOH或其鹽類。"羧基酯"是指基團-c(o)o-垸基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)-芳基和-C(O)O-取代的芳基，其中烷基、取代的垸基、芳基和取代的芳基如本文所定義。"環烷基"是指3至IO個碳原子的具有單環或多環的環狀烷基，其實例包括金剛烷基、環丙基、環丁基、環戊基、環辛基和類似基團。"環烯基"是指4至IO個碳原子的具有單環或多環，并進一步具有至少1個、優選1至2個烯鍵或乙烯基(>C=C<)不飽和內部位點的環狀烯基。"取代的環垸基"和"取代的環烯基"是指具有1至5個取代基的環烷基或環烯基，上述取代基選自氧基(-0)、硫代(=S)、烷氧基、取代的垸氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、鹵素、羥基、硝基、羧基、羧基酯、環烷基、取代的環垸基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環。"環烷氧基"是指-O-環垸基基團。"取代的環垸氧基"是指-O-取代的環烷基基團。"卣代"或"鹵素"是指氟、氯、溴和碘，優選氟或氯。"羥基"是指-OH基團。"雜芳基"是指在環內由1至10個碳原子和l至4個選自氧、氮和硫的雜原子組成的芳香基團。這種雜芳基可具有單環(例如，吡啶基或呋喃基)或多元稠環(例如，吲嗪基或苯并噻吩基)，其中稠環可以是或不是芳香族的和/或含有雜原子的，條件是連接點在芳香族雜芳基基團的原子上。優選的雜芳基包括吡啶基、吡咯基、吲哚基、苯硫基和呋喃基。"取代的雜芳基"是指被1至3個取代基取代的雜芳基，上述的取代基選自與取代的芳基所定義的取代基相同的基團。"雜芳氧基"是指-O-雜芳基基團，"取代的雜芳氧基"是指-0-取代的雜芳基基團。"雜環"或"雜環的"或"雜環烷基"或"雜環基"是指具有單環或多元稠環的飽和或不飽和基團，在環中具有1至IO個碳原子和1至4個選自氮、硫或氧的雜原子，其中在稠環系中，一個或多個環可以是環垸基、芳基或雜芳基，條件是連接點在雜環上。"取代的雜環"或"取代的雜環烷基"或"取代的雜環基"是指被1至3個與取代的環垸基所定義的相同取代基取代的雜環基基團。雜環基和雜芳基的實例包括但不限于，氮雜環丁垸、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、吲嗪、異吲哚、吲哚、二氫剛哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、酞嗪、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、氮蒽、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、n引哚啉、鄰苯二甲酰亞胺、1，2，3,4-四氫-異喹啉、4，5,6,7-四氫苯并[b]噻吩、噻唑、噻唑垸、噻吩、苯并[b]噻吩、嗎啉基、硫代嗎啉基(也稱為硫嗎啉基(thiamorpholinyl))、哌啶基、吡咯烷、四氫呋喃基和類似物。"硫醇"是指-SH基團。"硫代垸基"或"垸基硫醚"或"硫代烷氧基"是指-S-烷基基團。"取代的硫代垸基"或"取代的垸基硫醚"或"取代的硫代烷氧基"是指-S-取代的烷基基團。"硫代芳基"是指-S-芳基基團，其中芳基如上所定義。"取代的硫代芳基"是指-S-取代的芳基基團，其中取代的芳基如上所定義。"硫代雜芳基"是指-S-雜芳基基團，其中雜芳基如上所定義。"取代的硫代雜芳基"是指-S-取代的雜芳基基團，其中取代的硫代雜芳基如上所定義。"硫代雜環"是指-S-雜環基團，"取代的硫代雜環"是指-S-取代的雜環基團，其中雜環和取代的雜環如上所定義。"雜環氧基"是指雜環基-O-基團，"取代的雜環基-O-"是指取代的雜環基-O-基團，其中雜環基和取代的雜環基如上所規定。"硫代環垸基"是指-S-環垸基基團，"取代的硫代環烷基"是指-S-取代的環烷基基團，其中環烷基和取代的環烷基如上所定義。術語"化合物"和"活性化合物"用來指本發明的共軛物的VLA-4拮抗劑部分或在與聚合物結合之前存在的VLA-4拮抗劑。術語"連接基"、"連接基團"或"1至40個原子的連接基"是指如下基團(1)將聚合物與活性化合物共價連接和/或(2)將聚合物的聚垸撐氧部分彼此共價連接。在任何特定的共軛物內，將聚合物的聚烷撐氧部分連接在一起的連接基團，和將聚合物與活性化合物鍵合的連接基團可以是相同或不同的(即，可具有相同或不同的化學結構)。代表性的官能基連接(其中可具有一個或多個連接基團)是酰胺、醚、氨基甲酸酯、硫代氨基甲酸酯、脲、硫脲、氨基基團、羰基基團、烷氧基基團等。連接基團在其原子內容方面可以是同源的或異源的(例如，僅含有碳原子的連接基團或含有碳原子以及在連接基團上存在的一個或多個雜原子的連接基團)。優選地，連接基團含有1至25個碳原子和0至15個選自氧、NR22、硫、-S(0)-和-S(0)2-的雜原子，其中R"如上所定義。連接基團也可以是手性的或無手性的、線性的、分支的或環狀的。為了插入進連接基團內的官能基連接或鍵之間，連接基團可進一步包含間隔基團，該基團包括但不限于，選自垸基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、環烷基、取代的環垸基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環、取代的雜環、和其組合的間隔基。間隔基在其原子內容方面可以是同源的或異源的(例如，間隔基僅含有碳原子或間隔基含有碳原子以及在間隔基上存在的一個或多個雜原子)。優選地，間隔基含有1至25個碳原子和0至15個選自氧、NR22、硫、-S(O)-和-S(O)r的雜原子，其中R"如上所定義。間隔基也可以是手性的或無手性的、線性的、分支的或環狀的。間隔基的非限制性實例是直鏈或支鏈的亞垸基鏈、苯撐、聯苯撐等、環，它們都能攜帶一個或一個以上的能與活性化合物和一個或多個聚垸撐氧部分形成連接的官能基。多官能性連接基團-間隔基的一個特殊實例是賴氨酸，它可經Q亞烷基鏈上取代的兩個氨基將任何活性化合物與兩個聚合物部分連接。其他的非限制性實例包括對氨基苯甲酸和3,5-二氨基苯甲酸，它們分別具有2和3個用于形成連接的官能基。本領域專業技術人員很容易想到其他這樣的多官能性連接加間隔基。術語"聚合物"是指生物相容的、水溶性的、基本上無免疫原性的聚合物，該聚合物能與一個以上的具有式II的VLA-4拮抗劑偶聯。優選聚合物是非離子的和生物相容的，在所使用的劑量下據測定是沒有毒性的。這些聚合物也包括多個拷貝的與載體連接的聚合物。合適的聚合物的實例包括但不限于聚氧化烯聚合物，如聚乙二醇(PEG)、聚乙烯吡咯酮(PVP)、聚丙烯酰胺(PAAm)、聚二甲基丙烯酰胺(PDAAm)、聚乙烯醇(PVA)、右旋糖、聚(L-谷氨酸)(PGA)、苯乙烯馬來酸酐(SMA)、聚-N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺(HPMA)、聚二乙烯醚馬來酸酐(DIVEMA)(Kameda,Y.等人，Biomaterials25:3259-3266,2004;Thanou，M.等人，CurrentOpinioninInvestigationalDrugs4(6):701-709,2003;Veronese,F.M.等人，IIFarmaco54:497-516,1999)。優選的聚合物是聚氧化烯。"聚氧化烯"是指包括至少一個聚烷撐氧部分的大分子，該聚烷撐氧部分任選地與另外一個或多個聚垸撐氧共價連接，其中聚烷撐氧是相同或不同的。非限制性實例包括聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇(PPG)、聚異丙二醇(PIPG)、PEG-PEG、PEG-PPG、PPG-PIPG和類似物。也包括在聚氧化烯定義中的聚合物是其中聚烷撐氧部分任選地通過連接基團相互連接的大分子。說明性的實例是PEG-連接基團-PEG、PEG-連接基團-PIPG和類似物。更具體的實例包括巿售的聚[二(乙二醇)己二酸酯、聚[二(乙二醇)鄰苯二甲酸酯二醇和類似物。其他實例是氧化烯、聚乙二醇、聚丙二醇和聚氧乙烯化多元醇單元的嵌段共聚物。通過其至少一個末端，聚合物與非聚合物取代的式II化合物任選地通過連接基團采用本發明的方法進行共價連接，為聚合物與非聚合物取代的式II化合物提供了共價連接。當采用連接基團時，連接基團與至少一個聚合物末端共價連接，要不然該末端則共價連接于非聚合物取代的式II化合物。當然要理解的是，如果在非聚合物取代的式II化合物上發現有合適的取代基，則可不需要任選的連接基團，因為聚合物可與非聚合物取代的式II化合物直接連接。連接基團的優選實例包括下列的-O-、-NR22-、-NR22C(0)0-、-OC(0)NR22-、-NR22C(0)-、-C(0)NR22-、-NR22C(0)NR22-、-亞烷基-NR22C(0)0-、-亞烷基-NR22C(0)NR22-、-亞烷基-0(:(0^1122-、-亞烷基-NR22-、-亞烷基-O-、-亞垸基-忖11220(0)-、-亞垸基-C(0)NR22-、-NR3c(0)0-亞烷基-、-NR22c(0)NR22-亞烷基-、-0(3(0)服22-亞烷基、-NR22-亞烷基-、-O-亞烷基-、-NR22c(0)-亞烷基-、-(:(0^1122-亞烷基-、-亞垸基-NR^C(0)0-亞垸基-、-亞垸基-NRC(0)NR^亞烷基-、-亞烷基-OC(0)NR"-亞烷基-、-亞烷基-NR22-亞烷基-、亞烷基-O-亞烷基-、-亞烷基-NR22c(0)-亞垸基-、-C(0)NR22-亞烷基-、禾口其中^^選自芳基、取代的芳基、環垸基、取代的環烷基、雜芳基、取代的雜芳基、雜環和取代的雜環，且D和E獨立地選自化學鍵、-O-、CO、擺22-、-NR22C(0)0-、-OC(0)NR22-、-NR22C(0)-、-C(0)NR22-、-NR22C(0)NR22-、-亞烷基^1122(:(0)0-、-亞烷基-NR22c(0)NR22-、-亞烷基-OC(0)NR22-、-亞烷基-NR22-、-亞烷基-O-、-亞烷基-NR22C(0)-、亞垸基-C(0)NR22-、-NR22C(0)0-亞垸基-、-NR22c(0)NR22-亞烷基-、-OC(0)NR22-亞烷基-、^1122-亞烷基-、-O-亞烷基-、-NR22c(0)-亞烷基-、-C(0)NR22-亞垸基-、-亞垸基-NR22C(0)0-亞烷基-、-亞烷基-NR22c(0)NR22-亞烷基-、-亞烷基-OC(0)NR22-亞烷基-、-亞烷基-NR22-亞烷基-、亞烷基-O-亞烷基-、-亞烷基-順22€(0)-亞烷基-、和-C(0)NR22-亞烷基-，其中R"如上所定義。在上述連接基團中優選的亞垸基基團包括C,-C,5亞垸基，更優選CpQ亞烷基，且最優選d-C3亞烷基。優選的雜環基團包括哌嗪基、哌啶基、高哌嗪基、高哌啶基、吡咯垸基和咪唑烷基。本發明的共軛物可被加入至載體中，該載體上可結合1-19個額外的共軛物。術語"載體"是指一種任選的成分或支架，多個共軛物可結合于其上，且當加入至本發明的共軛物中時不會影響基本的免疫原性或毒性。這種載體優選是含有用于連接聚合物的多官能團的單至十價物質。這些官能團可以是同種的或異種的；但優選同種的官能團。包括同種官能團的市售載體的實例包括，僅作為實例的鄰苯二酚、間苯二酚、1,2-苯二胺、1，3-苯二胺、1，4-苯二胺；鄰苯二甲酸、間苯二甲酸、1,3-丙二醇、甘油、1,2，4-苯三酚、季戊四醇、葡萄糖(以其吡喃糖形式)、二異氰酸1,3-苯酯、二異氰酸1,4-苯酯、間苯二甲醛、苯二甲醛、1,3-環戊二醇、乙二胺、乙二胺四乙酸和類似物。用作載體或支架的代表性結構包括下列的結構(其中PEG僅用于H(OCH2CH2)n'0—廠O—(CH2CH20)nH"0—(CH2CH20)nH三-PEG-甘油H(OCH2CH2)n-、JH(OCH2CH2)n、(CH2CH20)nH、(CH2CH20)nH四-PEG-季戊四醇<CH2CH20)nH(CH2CH20)H二-PEG間苯二酚包括異種官能團的市售載體的實例包括，僅作為實例的6-羥基己酸、氨基酸、水楊酸、3-或4-氨基水楊酸、1,3-二氨基-2-羥基丙烷、2-氨基乙醇、3-氨基丙醇、葡糖胺、唾液酸、氨基酸和類似物。使用這些載體或支架通過結合聚合物產生的代表性結構包括下列結構(其中PEG僅用于舉例的目的)H<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>三-PEG-l,3-二氨基-2-羥基丙烷<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>二-PEG3-氨基苯酚載體可任選地含有任選地通過連接基團與載體連接的一個或多個A的拷貝，條件是至少還有一個官能基可與另外一個A的拷貝結合。例如，下面的每個結構都被認為是載體或支架，因為還有至少一個額外的官能基來結合額外的A取代基H(OCH2CH2)-Q—-0—(CH2CH20)n(L)wA-0—(CH2CH20)(L)wA乂O、H(OCH2CH2>n-q廣、(CH2CH20)(L)AH(OCH2CH2)n'00、(CH2CH2。)H■(CH2CH2Q)nH、一(CH2CH20)(L)wA其中L、W和A如上所定義。術語"氧化烯"是指-OCH2CHRd-，其中Rd是烷基。聚合的氧化烯是指聚氧化烯、聚垸撐氧或聚垸撐二醇，其非限制性的實例包括PEG、聚丙二醇、聚丁二醇、聚異丙二醇和類似物。這些聚合物任選地用取代基單封端，該取代基優選選自垸基、芳基、取代的垸基、取代的芳基和如上所述的載體。包括在這些聚合物中的還有二氨基封端的聚氧化烯聚合物，這些聚合物在本領域已知為Jeffamine^。這些聚合物仍然進一步可任選地含有一個或多個非氧化烯單元，如市售的聚[二(乙二醇)己二酸酯、聚[二(乙二醇)鄰苯二甲酸酯二醇和類似物。也包括氧化烯、聚乙二醇、聚丙二醇和聚氧乙烯化多元醇單元的嵌段共聚物。聚氧化烯，如PEG，通常以水溶性的蠟狀固體提供。一般當聚合物的分子量增加時，其粘度和凝固點也增加。市售的制劑通常以聚合物組分的"平均分子量"來表征。來自本發明共軛物中的單一或多個聚合物部分的聚合物總量的平均分子量一般在大約100至100,000之間；優選大約10,000至80,000;更優選大約20,000至大約70,000。同樣，其他合適的聚合物，如聚乙烯吡咯酮(PVP)、聚丙烯酰胺(PAAm)、聚二甲基丙烯酰胺(PDAAm)、聚乙烯醇(PVA)、右旋糖、聚(L-谷氨酸)(PGA)、苯乙烯馬來酸酐(SMA)、聚-N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺(HPMA)、聚二乙烯醚馬來酸酐(DIVEMA)在本領域中是公知的，其分子量為大約100至100,000;優選從大約10,000至80,000;更優選從大約20，000至大約70，000。"藥學可接受的鹽"是指保留了本發明化合物的生物學作用和特性，且沒有生物學或其他方面不希望出現的特性的鹽類。在許多情況下，本發明的化合物由于存在氨基和/或羧基或與其類似的基團，能形成酸性和/或堿性鹽。藥學可接受的堿性加成鹽可從無機堿和有機堿制備。來自無機堿的鹽類包括(僅作為實例)鈉、鉀、鋰、銨、鈣和鎂鹽。來自有機堿的鹽類包括但不限于伯胺、仲胺和叔胺的鹽，如烷基胺、二烷基胺、三垸基胺、取代的垸基胺、二(取代的垸基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、環垸基胺、二(環烷基)胺、三(環垸基)胺、取代的環烷基胺、雙取代的環烷基胺、三取代的環垸基胺、環烯基胺、二(環烯基)胺、三(環烯基)胺、取代的環烯基胺、雙取代的環烯基胺、三取代的環烯基胺、芳基胺、二芳基胺、三芳基胺、雜芳基胺、二雜芳基胺、三雜芳基胺、雜環胺、二雜環胺、三雜環胺、混合的二和三胺，其中胺上的取代基中至少兩個是不同的，所述取代基選自垸基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、環垸基、取代的環烷基、環烯基、取代的環烯基、芳基、雜芳基、雜環和類似物。也包括其中兩個或三個取代基與氨基氮一起形成雜環或雜芳基的胺。合適的胺的實例包括(僅作為實例)，異丙胺、三甲胺、二乙胺、三(異丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲氨基乙醇、氨基丁三醇、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡因、普魯卡因、哈胺(hydrabamine)、膽堿、甜菜堿、乙二胺、葡萄糖胺、N-垸基葡萄糖胺、可可堿、嘌呤、哌嗪、哌啶、嗎啉、N-乙基哌啶和類似物。還要理解的是在實施本發明過程中也可使用其他的羧酸衍生物，例如羧酸酰胺類，包括羧酰胺、低級烷基羧酰胺、二烷基羧酰胺和類似物。藥學可接受的酸性加成鹽可從無機酸和有機酸制備。來自無機酸的鹽包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸和類似物。來自有機酸的鹽包括乙酸、丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、延胡索酸、酒石酸、擰檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸和類似物。術語"藥學可接受的陽離子"是指藥學可接受的鹽的陽離子。要理解的是在本文所定義的所有取代基中，本文并不要包括用本身進一步取代的取代基定義的取代基(例如，用具有取代的芳基基團的取代芳基作為取代基，即其本身用取代的芳基取代，等等)獲得的聚合物。在這種情況下，這種取代基的最大數目為3。g卩，上述的每個定義都受一定的限制，例如，取代的芳基被限定為-取代的芳基-(取代的芳基)-(取代的芳基)。同樣要理解的是，上述的定義并不要包括不允許的取代方式(例如，甲基用5個氟基取代或羥基(X連接烯屬或炔屬不飽和烴)。這種不允許的取代方式對于本領域技術人員是公知的。化合物制備采用公知的步驟和很容易獲得的起始原料可從很容易獲得的初始原料制備本發明的方法中所使用的起始活性化合物，或當起始原料不是公知或不能從商業渠道獲得時，這些原料可使用文獻中所述的步驟很容易地制備而成。要理解的是，其中指定了典型或優選工藝條件(即，反應溫度、時間、反應物的摩爾比例、溶劑、壓力等)時，除非另外說明，也可使用其他的工藝條件。最佳的反應條件可根據所使用的特殊反應物或溶劑進行變化，但這些條件可由本領域的技術人員通過常規的優化步驟來確定。另外，對于本領域技術人員顯而易見的是，可能需要一些常規的保護基團以保護某些官能基以免發生不希望的反應。對于多種官能基的合適保護基團以及對特殊官能基保護和去保護的合適條件，在本領域中是公知的。例如，大量的保護基團描述在T.W.Greene和G.M.Wuts，有教合成W游保P基歷f尸ra歸."gGra，Og腳.ci)，第二版，Wiley,NewYork,1991和本文所引用的參考文獻中。而且，本發明的化合物典型地含有一個或多個手性中心。因此，如果需要，這些化合物可制備或分離為純的立體異構體，g卩，單獨的對映體或非對映體，或富集立體異構體的混合物。除非另外說明，所50有這些立體異構體(和富集的混合物)都包括在本發明的范圍內。純的立體異構體(或富集的混合物)可采用，例如本領域公知的光學活性起始原料或立體選擇性試劑進行制備。或者，這些化合物的消旋混合物可采用，例如手性柱色譜、手性溶解溶劑和類似物進行分離。根據本發明制備的共軛物優選包括含有大約1至大約100個式II取代基的聚合物部分/任選的載體<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>具體來說，聚合物部分可通過共價鍵與Ar'取代基、R取代基、Ar2取代基連接和/或連接在T取代基內，其中該聚合物部分可直接連接或經連接基團連接。依次，聚合物部分可任選地與其上連接有多個聚合物拷貝的載體結合。式II化合物可首先用適當的芳基磺酰氯連接雜環氨基酸1_來進行制備，如下面的示意圖l所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>示意圖l其中R、Ar1、X、m和w如上所規定。具體來說，在上面的示意圖1中，雜環氨基酸L與化學量等量或過量(優選大約1.1至大約2當量)的芳基磺酰鹵2，在合適的惰性稀釋劑(如二氯甲烷和類似物)中進行混合。通常反應是在大約-7(TC至大約40°C的范圍內進行，直至反應基本上完成，一般在1至24小時內。優選地，在合適的堿存在下進行反應以清除反應中產生的酸。合適的堿包括作為實例的叔胺，如三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基-嗎啉和類似物。或者，反應在Schotten-Baumann-型條件下使用堿性水溶液(如氫氧化鈉水溶液、緩沖至pH7.4的磷酸鹽水溶液和類似物)進行。得到的產物^可通過常規的方法回收，如色譜、過濾、蒸發、結晶和類似方法或，另外可選的是不純化和/或分離就用于下一步驟中。在上面的反應中使用的雜環氨基酸丄，是己知的化合物或是可通過常規的合成步驟從已知化合物制備而成的化合物。用于此反應中的合適的氨基酸的實例包括但不限于，L-脯氨酸、反式-4-羥基-L-脯氨酸、順式-4-羥基-L-脯氨酸、反式-3-苯基-L-脯氨酸、順式-3-苯基-L-脯氨酸、L-(2-甲基)脯氨酸、L-哌啶酸、L-氮雜環丁垸-2-羧酸、L-噻唑垸-4-羧酸、L-(5，5-二甲基)噻唑烷-4-羧酸、L-硫嗎啉-3-羧酸。如果需要，氨基酸丄的相應羧酸酯，例如甲基酯、乙基酯、叔丁基酯和類似物，可與芳基磺酰氯用于上述的反應中。隨后使用常規的試劑和條件將酯基水解為羧酸，即用堿金屬氫氧化物在惰性稀釋劑(如甲醇/水)中進行處理，然后得到N-磺酰氨基酸2。同樣，在上述反應中使用的芳基磺酰氯L是已知的化合物或可通過常規合成步驟從已知化合物制備而成的化合物。這種化合物一般是從相應的磺酸，即從具有結構式Ar'S03H的化合物(其中Ar'如上所定義)使用三氯化磷和五氯化磷制備而成的。該反應一般是通過將磺酸與大約2至5摩爾當量的三氯化磷和五氯化磷，在無溶劑或惰性溶劑(如二氯甲烷)中，在大約(TC至大約80°C的范圍內接觸大約1至大約48小時而得到磺酰氯。或者，芳基磺酰氯2_可從相應的硫醇化合物，即Ar'-SH化合物(其中Ar'如在此所定義)通過用氯(Cl2)和水在常規反應條件下處理硫醇而制備而成的。或者，在上述反應中使用的芳基磺酰氯2，可通過使用C1-S03H將取代的苯或雜環烷基氯磺酰化制備而成。適合用于本發明中的芳基磺酰氯的實例包括但不限于，苯磺酰氯、1-萘磺酰氯、2-萘磺酰氯、對甲苯磺酰氯、鄰甲苯磺酰氯、4-乙酰氨基苯磺酰氯、4-叔丁基苯磺酰氯、4-溴苯磺酰氯、2-羧基苯磺酰氯、4-氰基苯磺酰氯、3,4-二氯苯磺酰氯、3,5-二氯苯磺酰氯、3,4-二甲氧基苯磺酰氯、3,5-二三氟甲基苯磺酰氯、4-氟苯磺酰氯、4-甲氧基苯磺酰氯、2-甲氧羰基苯磺酰氯、4-甲氨基-苯磺酰氯、4-硝基苯磺酰氯、4-三氟甲52基-苯磺酰氯、4-三氟甲氧基苯磺酰氯、2，4,6-三甲基苯磺酰氯、2-噻吩磺酰氯、5-氯-2-噻吩磺酰氯、2,5-二氯-4-噻吩磺酰氯、2-噻唑磺酰氯、2_甲基-4-噻唑磺酰氯、l-甲基-4-咪唑磺酰氯、l-甲基-4-吡唑磺酰氯、5-氯-l，3-二甲基-4-吡唑磺酰氯、3-吡啶磺酰氯、2-嘧啶磺酰氯和類似物。如果需要，磺酰氟、磺酰溴或磺酸酐可替代磺酰氯用于上面的反應中以形成N-磺酰氮基酸2。然后如下面的示意圖2所示，N-芳基磺酰氨基酸L與市售的酪氨酸酯偶聯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage53</formula>示意圖2其中R、Ar1、X、m和n如上所定義，Ra是氫或烷基，但優選例如叔丁基的垸基，Z代表芳環上的任選取代基，o是0、l或2。這種偶聯反應一般采用公知的偶聯劑進行，所述的偶聯劑如碳化二亞胺、BOP試齊U(苯并三唑-l-基氧基-三(二甲氨基)-膦六氟膦酸酯)和類似物。合適的碳化二亞胺的實例包括二環己基碳二亞胺(DCC)、l-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)和類似物。如果需要，也可使用碳化二亞胺偶聯劑的聚合物負載形式，例如包括在r"m/ze^w7丄e"巾，34(48),7685(1993)中所描述的那些。另外，可使用公知的偶聯助催化劑，如N-羥基琥珀酰亞胺、1-羥基苯并三唑和類似物，來加速偶聯反應。這種偶聯反應一般是通過將N-磺酰氨基酸i與大約1至大約2當量的偶聯劑和至少1當量、優選大約1至大約1.2當量的酪氨酸衍生物4，在惰性稀釋劑(如二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氫呋喃、N,N-二甲基甲酰胺和類似物)中接觸而進行的。一般，這種反應是在大約0°C至大約37"C的范圍內進行大約12至大約24小時。在反應完成后，通過常規的方法，包括中和、蒸發、萃取、沉淀、色譜、過濾和類似方法回收化合物i。或者，N-磺酰氨基酸1_可轉變為酸性齒化物，其然后與化合物4偶聯得到化合物1。酸性鹵化物可通過將化合物i與無機酸性鹵化物，如亞硫酰氯、三氯化磷、三溴化磷或五氯化磷，或優選與草酰氯，在常規條件下接觸制備而成。這種反應一般是使用大約1至5摩爾當量的無機酸性鹵化物或草酰氯在無溶劑或在惰性溶劑(如二氯甲垸或四氯化碳)中，在大約(TC至大約8(TC的溫度范圍內進行大約1至大約48小時。在該反應中也可使用催化劑，如DMF。然后N-磺酰氨基酸U勺酸性鹵化物與至少1當量、優選大約1.1至大約1.5當量的酪氨酸衍生物4，在惰性稀釋劑(如二氯甲垸)中，在大約-7(TC至大約40°C的溫度范圍內接觸大約1至大約24小時。優選地，該反應在合適的堿的存在下進行以清除反應過程中產生的酸。合適的堿的實例包括叔胺，如三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉和類似物。或者，反應可在Schotten-Baumann型條件下使用堿性水溶液(如氫氧化鈉和類似物)進行。在反應完成后，通過常規的方法，包括中和、蒸發、萃取、沉淀、色譜、過濾和類似方法回收化合物i。或者，可通過首先形成二氨基酸衍生物，然后將二氨基酸與芳基磺酰鹵化物1偶聯制備化合物5如下面示意圖3所示；示意圖3其中R、Ra、Ar1、X、Z、m、n和o如上所定義。二氨基酸^很容易通過將氨基酸L與氨基酸￡使用如上所述的常規氨基酸偶聯技術和試劑(如碳化二亞胺、BOP試劑和類似物)偶聯制備而成。然后可使用磺酰氯1磺化二氨基酸^，并采用上述的合成步驟得到化合物2。在上述反應中使用的酪氨酸衍生物1是已知的化合物或可通過常規的合成步驟從己知化合物制備而成的化合物。例如，適合用于上述反應中的酪氨酸衍生物1_包括但不限于，L-酪氨酸甲酯、L-酪氨酸叔丁酯、L-3,5-二碘酪氨酸甲酯、L-3-碘酪氨酸甲酯、(3-(4-羥基-萘-l-基)-L-丙氨酸甲酯、p-(6-羥基-萘-2-基)-L-丙氨酸甲酯和類似物。如果需要，當然也可使用上述化合物的其他酯或酰胺。N-芳基磺酰基-雜環氨基酸-酪氨酸衍生物l可用作起始點，通過使用本發明的方法將聚合物部分連接在A一基團上。能夠以上述的方式使用位于分子其他部分上的胺部分來將聚合物基團與分子共價連接。例如，位于A一上、雜環氨基酸上或A一上的胺，同樣可被衍生用于使用本發明的方法進行PEG取代。在合成中胺部分可包含在這些取代基中，如需要適當地進行保護。或者，可使用胺前體。此外，氨基取代基可被加入進雜環氨基酸官能團中，然后被衍生以包含聚合物部分。例如，在美國專利第6,489,300中描述了雜環氨基酸官能團可以是2-羧基哌嗪。或者，市售的3-或4-羥脯氨酸可被氧化為相應的酮，然后在氰基硼氫化鈉的存在下用氨水還原氨化形成相應的胺部分。仍更進一步地，4-氰基脯氨酸可被還原得到結構式-CH2NEb的取代垸基，它可通過胺被衍生。仍進一步地，胺部分可被加入進A一官能團中。優選地，胺部分以胺前體存在，如與A一連接的硝基或氰基。式IIa-IIh的非衍生化合物隨后通過使用本發明的方法與聚合物偶聯。示意圖4描繪了本發明的實施方式示意圖4在示意圖9中，在膦(在此是PPh3)和偶氮二羧酸酯(例如偶氮二羧酸二異丙酯)的存在下，PEG醇100用親核試劑105處理以形成受保護的酯丄m。然后該酯被水解以形成所需的共軛物m。該反應在緩和且基本上中性的條件下發生。該反應優選在至少一種合適的溶劑中進行。實例包括例如二氯甲垸的鹵化溶劑、例如苯或甲苯的芳烴溶劑、或例如四氫呋喃和二乙醚的醚溶劑。其他合適的溶劑包括乙酸乙酯、乙腈和DMF。最優選使用氯化溶劑或醚溶劑。在最優選的實施方式中，該溶劑是二氯甲垸或四氫呋喃。反應溫度一般在大約-100至IO(TC的范圍內，優選在大約-20至5(TC的范圍內，甚至更優選從大約(T至大約室溫的范圍內。在特別優選的實施方式中，反應溫度在大約-10至l(TC之間。56反應時間的范圍是大約5分鐘至大約100小時，優選大約30分鐘至大約50小時之間。更優選該反應在大約45分鐘至大約10小時之間進行至反應完成。如上所述，三芳基-或三院基膦的實例包括三苯基膦、三甲基膦、三乙基膦、三丁基膦和1，2-雙-(二苯基膦基)乙烷。膦也可以是聚合物負載的或水溶性的。優選的三芳基膦是三苯基膦。偶氮化合物的實例是偶氮二羧酸二乙酯、偶氮二羧酸二異丙酯、4-甲基-1,2,4-三唑烷-3,5-二酮、N,N,N',N'-四甲基偶氮二羧酰胺、偶氮二羧酸二哌啶、雙(N-4-甲基哌嗪-l-基)偶氮二羧酰胺、二嗎啉代偶氮二羧酰胺和偶氮二羧酸二叔丁酯。要理解的是其他合適的聚合醇可用來代替PEG，且本領域普通技術人員將能夠很容易地修改下面的反應示意圖以加入這些其他的聚合物。在一些情況下，PEG部分可直接引入至A一基團上，且在其他情況下，PEG部分可通過連接基團部分的連接被引入。適合與式II化合物共軛的其他聚合物包括但不限于，聚乙烯吡咯垸酮(PVP)、聚丙烯酰胺(PAAm)、聚二甲基丙烯酰胺(PDAAm)、聚乙烯醇(PVA)、右旋糖、聚(L-谷氨酸)(PGA)、苯乙烯馬來酸酐(SMA)、聚-N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺(HPMA)、聚二乙烯醚馬來酸酐(DIVEMA)。作為實例，在自由基聚合過程中，通過引入共聚單體，PVP、PAAm和PDAAm可被官能化。PVA和右旋糖都含有適合共軛的一級羥基(OH)。這些生物聚合物的合成方法和將其與生物物質共軛的方法在本領域中是公知的(參見，例如己公開的美國專利申請第20040043030號；美國專利第5,177,059號；美國專利第6,716,821號；美國專利第5,824,701號；美國專利第6,664,331號；美國專利第5,880,131號；Kameda，Y.等人，Biomaterials25:3259-3266，2004;Thanou,M.等人，CurrentOpinioninInvestigationalDrugs4(6):701-709，2003;Veronese,F.M.等人，IIFarmaco54:497-516,1999，所有文獻均全部引入本文作為參考)。適合用于本發明中的代表性聚合物包括:HO(亞烷基-O)ppRbb單封端的單羥基PEG(mPEG)H2N(亞垸基-0)ppRbb單封端的單氨基PEG57HO(亞烷基-O)ppR-OH不封端的二羥基PEGH2N(亞垸基-0)ppR-OH不封端的單氨基PEGHO(亞烷基-0)ppRbb分支的單羥基PEGHO(亞烷基-O)ppRbb樹枝狀的單羥基PEG其中PP和亞垸基如本文中的定義，Rbb優選選自烷基、取代的烷基-芳基和取代的芳基。其他合適的聚合物顯示如下HOO、pOCA'單封端的單羥基PEG(mPEG)O、，OCH3單封端的單氨基PEGHOO、"OH不封端的二羥基PEG分支的PEG:購自NOF的PEG試劑(20kDa4-臂)MH220kDa4-臂PEG四胺購自Nektar的PEG試劑(40kDa8-臂)40kDa8-臂PEG六甘油核心Cat#0J000T08樹枝狀PEG:購自NOF的PEG試劑(40kDa4-臂)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage59</formula>季戊四醇核心cat.#SunbrightPTE-40000<formula>formulaseeoriginaldocumentpage59</formula>40kDa4-臂PEG四胺季戊四醇核心cat.#SunbrightPTE-400PA自NOF的PEG試劑(40kDa3-臂)40kDa3-臂PEG40kDa3-臂PEG三胺甘油核心甘油核心cat#SunbrightGL-40000cat#SunbrightGL-400PA購自SunBio的PEG試劑(40和20kDa)Y-PEG系列(天冬氨酸核心)GmEP-HNNH-mPEGY-PEG胺(40kDa)Cat#PYAM-40GmEP扁HMY-PEG硝基苯基醇氨基甲酸酯(40kDa)Cat#PYNPC-40CH20'(CH2CH2OVHH-(OH2GH2C)n-0HH'6-臂系列(山梨醇核心)在山梨醇6-臂系列中可得到的較低分子量包括10、15禾ll20kDa。醇之外的衍生物包括6-臂胺。例如，10kDa6-臂胺(cat#P6AM-10)可轉化為40kDa6-臂六胺(具有Nektars5kDaBocNH-PEG-NHS酯)，然后與小分子進行共軛。40kDa6-臂PEG定制產叩這些PEG聚合物可進一步被修飾，用PEG二胺通過適當的連接基團，例如氨基甲酸酯(氨基甲酸乙酯)或脲將鏈延伸。■0-(CH2CH20>-H■H■Cr(CH2CH20>-H0-(CH2CH20)-HCH20-<CH2CH20)n-HH2N0NH2n"'PEG二胺H3COH3CO-各種具有酸性氫的親核化合物可用于本發明的方法中。這些化合物可以是生物學活性的化合物，即，治療用化合物(藥物)和農業用化學品(殺蟲劑、除草劑、和植物生長刺激劑，如肥料)或食物添加劑化合物。可加入至這些化合物中的具有酸性氮的基團的實例顯示在上面；見表D和D1中所列的結構。藥學制劑當用作藥物時，本發明的共軛物通常以藥學組合物的形式給藥。這些共軛物可通過多種途徑給藥，包括經口、經直腸、透皮、皮下、靜脈內、肌內、舌下、經眼或吸入(包括通過鼻或口吸入給藥)。優選的給藥途徑包括皮下、靜脈內和吸入。這些組合物可以以制藥領域中公知的方式進行制備，并包括至少一種共軛物。本發明也提供了包括根據本發明的共軛物，例如式I的共軛物，與作為C(4卩7抑制劑的單獨的化合物組合在一起的藥學組合物。這些組合物也包括藥學上可接受的載體或賦形劑，且可如本文其他地方所描述給藥。本發明也包括含有一種或多種式I的共軛物作為活性成分以及藥學上可接受的載體的藥學組合物。在制備本發明的組合物的過程中，活性成分通常與賦形劑混合，用賦形劑稀釋或包封在載體內，該載體可以是無菌注射溶液和無菌包裝的粉末的形式。對于皮下給藥，簡單的載體可包括水、Na2HP04、NaH2P04和NaCl的無菌溶液，其比例可提供等滲的和生理學可接受的pH，己知的有PBS或磷酸鹽緩沖鹽水。其他選擇對于本領域技術人員是公知的，包括混合的溶劑系統，它可影響吸收速率和接觸總量。這些選擇包括含有甘油、聚乙二醇400和棉籽油的混合溶劑系統。有可能使用的還有乙醇、N，N'-二甲基乙酰胺、丙二醇和苯甲醇，它們都可被用來操縱通透性的提高和高滲性。在制備制劑過程中，可能需要將活性化合物磨碎以便在與其他成分混合之前得到合適的粒度。如果活性化合物基本上是不溶的，通常被磨碎至小于200目的粒度。如果活性化合物基本上是水溶性的，一般通過磨碎將粒度調節至例如大約40目，使其在制劑中基本上均勻分布。61合適的賦形劑的一些實例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、水、糖漿和甲基纖維素。制劑可另外包括潤滑劑，如滑石、硬脂酸鎂和礦物油；濕潤劑；乳化劑及懸浮劑；防腐劑，如甲基-和丙基羥基-苯甲酸酯；甜味劑；和調味劑。本發明的組合物可被制成為采用本領域己知的方法給予患者后，活性成分能快速、持久或延遲釋放的劑型。通過皮下或靜脈內制劑給予治療藥物在制藥工業中是公知的。皮下或靜脈內制劑除了組合物中的治療藥物可溶以外，還應該具有某些特性。例如，該劑型應該能促進活性成分的總體穩定性，制劑的制造還應該在成本上是經濟的。所有這些因素最終決定了靜脈制劑總體上的成功和實用性。可包含在本發明化合物的藥學制劑中的其他輔助添加劑如下溶劑乙醇、甘油、丙二醇；穩定劑EDTA(乙二胺四乙酸)、檸檬酸；抗菌性防腐劑苯甲醇、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯；緩沖劑檸檬酸/檸檬酸鈉、酒石酸氫鉀、酒石酸氫鈉、乙酸/乙酸鈉、馬來酸/馬來酸鈉、磷苯二甲酸氫鈉、磷酸/磷酸二氫鉀、磷酸/磷酸氫二鈉；和張力調節劑氯化鈉、甘露醇、右旋糖。需要緩沖液的存在以保持水溶液pH在大約4至大約8的范圍內，更優選在大約4至大約6的范圍內。緩沖系統通常是弱酸及其可溶性鹽的混合物，例如擰檬酸鈉/擰檬酸；或二元酸的單陽離子或雙陽離子鹽，例如，酒石酸氫鉀；酒石酸氫鈉、磷酸/磷酸二氫鉀、和磷酸/磷酸氫二鈉。所使用的緩沖系統的量取決于(1)所需的pH;和(2)藥物的量。通常使用的緩沖液量為制劑中緩沖液:阿倫膦酸鹽(其中緩沖液的摩爾數取自緩沖液成分的合并摩爾數，例如檸檬酸鈉和檸檬酸)0.5:1至50:1的摩爾比例，以保持pH在4至8的范圍內，通常使用緩沖液(合并的)與存在的藥物的摩爾比例為1:1至10:1。在本發明中一種有用的緩沖液是檸檬酸鈉/擰檬酸，其范圍為每ml5至50mg檸檬酸比每ml1至15mg檸檬酸，足以將組合物水溶液的pH保持在4-6。62也可存在緩沖劑以防止藥物通過與溶解的金屬離子(例如Ca、Mg、Fe、Al、Ba)形成可溶性金屬復合體而發生沉淀，這些離子可能是從玻璃容器中或橡皮塞中析出來的或存在于普通的自來水中。這種試劑的作用可以是藥物的競爭性絡合劑，并產生可溶性金屬復合體，生成不需要的微粒。另外，可能需要試劑(例如，大約l-8mg/ml的氯化鈉)的存在來將張力調整至與人血液相同的數值，以避免在靜脈制劑給藥過程中發生紅細胞腫脹或收縮所產生的不良副反應，如惡心或腹瀉以及可能的相關血液疾病。通常，制劑的張力要與人血液相匹配，其范圍是282至288mOsm/kg，通常為285mOsm/kg，其相當于0.9%氯化鈉溶液的滲透壓。靜脈制劑可通過直接靜脈內注射、靜脈快速滴注給藥，或可通過加入合適的輸注溶液(如0.9%氯化鈉注射液或其他相容的輸注溶液)中輸注給藥。組合物優選以單位劑量的形式進行配制，每劑量含有大約5至大約100mg，更普遍的是大約10至大約30mg活性成分。術語"單位劑量形式"是指適合用作人類受試者和其他哺乳動物的單位劑量的物理獨立單位，每單位含有預定數量的計算能產生所需治療效應的活性原料以及合適的藥學賦形劑。共軛物在很寬的劑量范圍內都是有效的，通常以藥學有效量給藥。然而要理解的是，實際給予的共軛物的數量將由醫生根據有關的情況進行確定，這些情況包括被治療的病情、選擇的給藥途徑、給予的實際化合物、每個患者的年齡、重量和反應、患者癥狀的嚴重性和類似情況。為了制備固體組合物，如片劑，主要的活性成分與藥學賦形劑混合形成固體預制劑組合物，該組合物含有本發明化合物的均質混合物。當提到這些預制劑組合物是均質時，其含義是活性成分均勻地分散在組合物中，這樣組合物很容易被再分為同樣有效的單位劑量形式，如片劑、丸劑和膠囊。然后該固體預制劑被再分成上面所述類型的單位劑量形式，該劑型含有，例如O.l至大約500mg的本發明的活性成分。本發明的片劑或丸劑可被覆以包衣或制成復方藥物以提供長效優勢的劑型。例如，片劑或丸劑可包括內用劑型和外用劑型組分，后者的形式是在前者上有包衣。兩種組分可由腸溶層(entericlayer)分隔，該腸溶層的作用是抵抗胃內的崩解，使內組分不受損害的進入十二指腸或延緩釋放。多種材料可用作這種腸溶層或包衣，這些材料包括許多類聚合酸，以及聚合酸與例如蟲膠、鯨蠟醇和乙酸纖維素的材料的混合物。可加入本發明的新組合物用于口服給藥或注射給藥的液體劑型包括，具有合適口味的糖槳水溶液、水性或油性懸液、和具有食用油(如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油)的調味乳劑、以及酏劑和類似的藥學載體。用于吸入或吹入的組合物包括在藥學可接受的水性或有機溶劑、或其混合物中的溶液和懸液，和粉末。液體或固體組合物可含有如前所述的合適的藥學可接受的賦形劑。優選的，組合物經口或鼻吸入途徑給藥以發揮局部或全身效應。在優選的藥學可接受的溶劑中的組合物可通過使用惰性氣體噴霧給藥。噴霧的溶液可從噴霧裝置直接吸入，或噴霧裝置可被接在面罩通氣口或間歇正壓呼吸機上。溶液、懸液或粉末組合物可從裝置給藥，優選經口或經鼻，所述裝置以適當的方式對制劑進行遞送。對于吸入或吹入給藥，優選共軛物的總分子量在大約10,000道爾頓至70,000道爾頓之間，更優選大約20,000道爾頓至45,000道爾頓之間。聚合物共軛物如上配制和給藥的本發明化合物是聚合物共軛物。聚合物共軛物預計相對非共軛的聚合物可提供許多益處，如溶解性和體內穩定性提咼。正是如此，可使用單個聚合物分子與本發明的化合物共軛，盡管也考慮到也可以連接一個以上的聚合物分子，一般是通過載體。本發明的共軛化合物發現可在體內以及非體內應用中都具有可應用性。另外，要認識到共軛聚合物可根據最終的應用使用其他的基團、部分或其他共軛物種。其實例是，在一些應用中使聚合物官能化使其具有反應性，且使其能夠與式n的化合物共軛，以增強總共軛物質的各種特64性或特征，這樣是有益處的。因此，聚合物可含有任何官能基、重復基團、連接或其他組成性結構，它們不會妨礙本發明的共軛化合物的目的用途。用于達到這些所需特征的說明性聚合物如前所述，以及PCTWO01/54690(Zheng等人)中所述，該申請全部引入本文作為參考。聚合物可與本發明的化合物連接(優選經連接基團部分)形成穩定的鍵，該鍵不會被人類的酶顯著切斷。通過本領域中標準的技術測定，通常對于不被"顯著"切斷的鍵需要連接聚合物和與聚合物連接的本發明化合物的鍵在24小時內被切斷的比例不超過20%，這些技術包括但不限于高壓液相色譜(HPLC)。通常，本發明的化合物含有至少大約兩種與聚合物連接的式II的化合物。最終的用量是在反應程度最大、而產物的非特異性修飾最小之間達到平衡，同時規定化學實體要保持最佳的活性，而同時優化了本發明的化合物的半衰期。優選地，保留了本發明化合物至少大約50%的生物學活性，更優選保留100%。如上所述在本發明的優選實踐中，在目標聚合物系統中有利地加入C2-C4垸基聚烷撐二醇的聚烷撐二醇殘基，優選聚乙二醇(PEG)或這些乙二醇的聚(氧)垸撐二醇殘基。因此，與本發明化合物連接的聚合物可以是聚乙二醇(PEG)的均聚物或是聚氧乙烯化的多元醇，條件是在所有情況下聚合物在室溫下都可溶解在水中。這些聚合物的非限制性實例包括聚烷撐氧均聚物，如PEG或聚丙二醇、聚氧乙烯化的乙二醇、其共聚物和其嵌段共聚物，條件是要保留嵌段共聚物的水溶性。聚氧乙烯化的多元醇的實例包括但不限于，聚氧乙烯化的丙三醇、聚氧乙烯化的山梨醇、聚氧乙烯化的葡萄糖或類似物。聚氧乙烯化的丙三醇的丙三醇主鏈與天然的主鏈是相同的，例如動物和人類甘油單-、雙-和三酯中的主鏈。因此，這種分支在體內不一定會被認為是外源物質。本領域普通技術人員要理解的是，前面的列舉僅是說明性的，可考慮具有本文所述性質的所有聚合物材料。聚合物不需要具有特殊的分子量，但優選分子量在大約100至IOO，OOO之間，優選大約10,000至80，000;更優選大約20,000至大約70，000。尤其是大小為20,000或更大的聚合物能最有效地防止由于腎臟過濾引起的產物丟失。PEG衍生物是指其中在聚乙二醇本身上的一個或兩個末端羥基已經被修飾的聚乙二醇聚合物。合適的修飾作用實例包括用另外的官能基替換一個或兩個羥基，該官能基可用低分子量的配基或其他大分子或聚合物保護或不保護。通過將聚乙二醇與包括互補反應性官能基的化合物反應可完成聚乙二醇末端羥基的修飾作用，所述互補反應性官能基包括能與聚乙二醇中的羥基發生反應的官能基。本發明化合物的PEG衍生物可含有通過連接基團與其共價連接的一個或多個聚乙二醇(PEG)取代基。下面的制劑實施例舉例說明了本發明的藥學組合物。制劑實施例1制備含有下列成分的硬明膠膠囊成分(mg/膠囊)活性成分30.0淀粉305.0硬脂酸鎂5.0上述成分混合在一起，以340mg的質量裝入硬明膠膠囊中。制劑實施例2使用下面的成分制備片劑質量成分(mg/片)活性成分25.0纖維素、微晶200.0膠體二氧化硅10.0硬脂酸5.0這些成分混合、壓片成為片劑，每片重240mg。制劑實施例3.制備含有下列成分的干粉吸入制劑成分重量％活性成分5每l糖寸95將活性成分與乳糖混合，混合物加入至干粉吸入裝置中。制劑實施例4如下制備每片含有30mg活性成分的片劑質量成分活性成分淀粉微晶纖維素聚乙烯吡咯烷酮(在無菌水中的10%溶液)羧甲基淀粉鈉(mg/片)30.0mg45.0mg35.0mg4.0mg4.5mg硬脂酸鎂0.5mg滑石1.0mg總計120mg活性成分、淀粉和纖維素通過20目U.S.篩并充分混合。聚乙烯吡咯垸酮的溶液與得到的粉末混合，然后通過16目U.S.篩。得到的顆粒在50°C至60°C進行干燥，并通過16目U.S.篩。然后前面已通過30目U.S.篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石加入至顆粒中，混合后，在壓片機上進行壓片得到每片重120mg的片劑。制劑實施例5如下制備每粒含有40mg藥物的膠囊質量成分(mg/膠囊)活性成分40.0mg淀粉109.0mg硬脂酸鎂1.0mg總計150.0mg將活性成分、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過20目U.S.篩，以150mg的質量裝入硬明膠膠囊中。制劑實施例6如下制備每粒含25mg活性成分的栓劑成分用量活性成分25mg飽和的脂肪酸甘油酯達到2,000mg活性成分通過60目U.S.篩，懸浮在飽和的脂肪酸甘油酯(之前需要少量的熱量將其融化)中。然后混合物倒入至標稱2.0g容量的栓劑模中，并進行冷卻。制劑實施例7如下制備每劑含有50mg藥物/5.0ml劑量的懸液成分活性成分黃原膠羧甲基纖維素鈉(11%)微晶纖維素(89%)蔗糖苯甲酸鈉調味劑和顏料純水達到用量50.0mg4.0mg50.0mg1.75g10.0mg適量(q.v.)5.0ml將活性成分、蔗糖和黃原膠混合，通過10目u.s.篩，然后與之前在水中制備的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉的溶液混合。苯甲酸鈉、調味劑和顏料用一些水稀釋，加入并進行攪拌。然后加入足夠的水得到需要的容]成分活性成分淀粉硬脂酸鎂總計制劑實施例8質量(mg/膠囊)15.0mg407.0mg3.0mg425.0mg將活性成分、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過20目U.S.篩，以425.0mg68的質量裝入硬明膠膠囊中如下制備皮下制劑成分活性成分磷酸鹽緩沖鹽水制劑實施例9質量50mg.mLmg1.0ml制劑實施例10如下制備局部制劑成分活性成分乳化蠟液體石蠟白凡士林達到質量1-10g30g20g100g將白凡士林加熱至熔化。加入液體石蠟和乳化蠟，攪拌至溶解。加入活性成分并繼續攪拌直至分散。然后混合物冷卻至成為固體。制劑實施例11如下制備靜脈內制劑成分質量活性成分250mg等滲鹽水100ml在本發明的方法中使用的另一種優選制劑采用了透皮給藥裝置("貼片")。這種透皮貼片可用來以可控的用量連續或非連續的輸注本發明的化合物。用于遞送藥劑的透皮貼片的構造和應用在本領域中是公知的。參見，例如于1991年6月11日授權的美國專利第5,023,252號，該專利引入本文作為參考。這種貼片可被制成連續、脈沖式或根據需要的遞送藥劑。經常需要或必須將藥物組合物直接或間接地導入進腦中。直接技術通常涉及將藥物遞送導管放置進宿主的心室系統中以繞過血腦屏障。一種用于將生物學因子運輸至機體的特殊解剖部位的這種可植入遞送系統，在美國專利第5，011，472號中描述，該專利引入本文作為參考。69間接技術，通常是優選的，其經常涉及通過將親水性藥物轉化為脂溶性藥物對組合物進行配制從而提供藥物潛伏化。潛伏化通常是通過下面的方法來達到的封閉藥物上存在的羥基、羰基、硫酸根和伯胺基團，從而使藥物具有更大的脂溶性，使其能夠通過血腦屏障進行轉運。或者，可通過動脈內輸注高滲溶液來增強親水性藥物的遞送，這種方法可暫時地使血腦屏障開放。適合用于本發明中的其他劑型可見"雷明頓藥物科學(Remington'sPharmaceuticalSciences)"，MacePublishingCompany,Philadelphia,PA，第17版(1985)。如上所述，本文所述的化合物適合用于上述的各種藥物遞送系統中。另外，為了增強給藥的化合物在體內的血清半衰期，化合物可被包封，導入進脂質體腔內，制備成為膠體，或可使用其他的常規技術，使化合物的血清半衰期延長。有多種方法可以制備脂質體，如Szoka等人的美國專利第4,235,871號、第4,501,728號和第4,837,028號中所述，這些專利的每一篇都引入本文作為參考。應用本發明的共軛物是VLA-4拮抗劑。一些共軛物也至少對Ot卩7整合素具有部分親和性。與非共軛的化合物相比，該共軛物在體內的滯留時間延長。共軛物在體內滯留時間的延長使需要的藥物用量降低，因此導致不良反應更少，發生毒性的可能性更小。另外，藥物制劑可以以較少的次數對患者給藥，而達到相似或更大的治療效應。通過抑制(X4卩,或(X4卩7與細胞受體(如VCAM-1、纖維連接蛋白和MadCAM)的結合的介導，本發明的共軛物能增強對體內白細胞與內皮細胞的粘附的抑制。優選地，本發明的共軛物可，例如通過輸注或通過皮下注射或口服用藥，用于治療由(X4(3,禾口/或CX4P7(通常稱為白細胞粘附)介導的疾病。本發明的共軛物可用來治療多種炎性腦疾病，尤其是其中內皮細胞/白細胞粘附機制引起健康腦組織破壞的中樞神經系統疾病。因此，本發明的共軛物可用于，例如治療實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)、多發性硬化癥(MS)、腦膜炎和腦炎。本發明的共軛物也可用于治療其他器官系統中組織損傷引起的功能障礙和疾病，即，其中組織損傷也是經粘附機制導致白細胞遷移或活化而發生的。在哺乳動物患者中，這些疾病的實例是炎性疾病，如哮喘、阿耳茨海姆氏病、動脈粥樣硬化、AIDS癡呆癥、糖尿病(包括急性青少年型糖尿病)、炎性腸病(包括潰瘍性結腸炎和克羅恩氏病)、類風濕性關節炎、組織移植排斥、腫瘤轉移、中風、和其他腦外傷、腎炎、視網膜炎、異位性皮炎、銀屑病、心肌缺血和白細胞介導的急性肺損傷，如發生在成人呼吸窘迫綜合征中的急性肺損傷。使用本發明的共軛物可治療的其他疾病還包括結節性紅斑、變應性結膜炎、視神經炎、眼葡萄膜炎、變應性鼻炎、強制性脊柱炎、銀屑病性關節炎、血管炎、萊特爾綜合征、系統性紅斑狼瘡、進行性全身性硬化癥、多發性肌炎、皮肌炎、韋格內氏肉芽腫、主動脈炎、類肉瘤病、淋巴細胞減少癥、顳動脈炎、心包炎、心肌炎、充血性心力衰竭、結節性多動脈炎、高敏反應綜合征、變態反應、嗜酸細胞過多綜合征、變應性肉芽腫性血管炎(Churg-Strausssyndrome)、慢性阻塞性肺病、過敏性肺炎、慢性活動性肝炎、間質性膀胱炎、自身免疫性內分泌功能障礙、原發性膽汁性肝硬化、自身免疫性再生障礙性貧血、慢性遷延性肝炎和甲狀腺炎。本發明也提供了治療患者至少部分由CC4整合素介導的白細胞結合引起或加重的疾病的方法，該方法包括共同給予有效量的本發明的共軛物，例如式I的共軛物，和有效量的作為(14(37抑制劑的單獨化合物。共同給藥可同時進行或依次進行。例如，本發明共軛物的給藥可提前(X4卩7抑制劑的給藥幾分鐘或幾小時。或者，014(37抑制劑可在本發明的共軛物之前給藥。證明治療炎性反應功效的合適體內模型包括，EAE(實驗性自身免疫性腦脊髓炎)小鼠、大鼠、豚鼠或靈長類動物、以及其他依賴于(X4整合素的炎癥模型。炎性腸病是兩種稱為克羅恩氏病和潰瘍性結腸炎的類似疾病的總稱。克羅恩氏病是一種原發性、慢性潰瘍性炎性疾病，其特征是邊界非常明確，一般累及腸壁所有層次的透壁肉芽腫性炎性反應。從口至肛門的胃腸道的任何節段都可被累及，盡管該病最常見的是影響回腸和/或結腸的末端。潰瘍性結腸炎是主要局限在結腸粘膜和粘膜下層的71炎性反應。在炎性腸病病變內有大量的淋巴細胞和巨噬細胞，這些細胞可引起炎性損傷。哮喘的特征是氣管支氣管樹對多種刺激物的反應性增加，引起支氣管氣道的發作性收縮。剌激物引起多種炎癥介質從IgE包被的肥大細胞中釋放，這些介質包括組胺、嗜曙紅的和嗜中性的趨化因子、白三烯、前列腺素和血小板活化因子。這些因子的釋放募集了嗜堿性粒細胞、嗜曙紅細胞和嗜中性白細胞，引起炎性損傷。動脈粥樣硬化是一種動脈疾病(例如，冠狀動脈、頸動脈、主動脈和髂動脈)。其基本病變是粥樣斑，由內膜內隆起的局灶斑塊(focalplaque)組成，該斑塊具有脂質核心和外被的纖維帽。粥樣斑會補償動脈血流，使受累的動脈變弱。心肌和腦梗塞是這種疾病的主要結局。巨噬細胞和白細胞被募集至粥樣斑，并引起炎性損傷。類風濕性關節炎是一種慢性、復發性炎性疾病，主要引起關節損害和關節破壞。類風濕性關節炎通常首先影響四肢的小關節，但然后可累及腕、肘、踝和膝。關節炎是由滑膜細胞與從循環中浸潤至關節滑膜襯里(synoviallining)中的白細胞相互作用引起的。參見，例如Paul,"免疫學(Immunology)"(3ded"RavenPress,1993)。本發明的共軛物的另一適應癥是治療由VLA-4介導的器官或移植物排斥反應。最近幾年，對于組織和器官(如皮膚、腎臟、肝臟、心臟、肺、胰腺和骨髓)移植的外科技術的效率已經得到了相當大的提高。可能主要的突出問題是缺少滿意的藥物以誘導受者對移植的同種異體移植物或器官的免疫耐受性。當同種異體細胞或器官被移植進宿主體內(即，供體和受體是相同種屬的不同個體)時，宿主免疫系統可能會對移植物中的外來抗原發動免疫反應(宿主抗移植物病)，從而引起移植組織的破壞。CD8+細胞、CD4細胞和單核細胞都參與了移植組織的排斥反應。本發明的共軛物能與(X4整合素結合，尤其可用于阻斷同種異體抗原誘發的受體體內的免疫反應，因而阻止了這些細胞參與破壞移植組織或器官。參見，例如Paul等人，TransplantInternational9，420-425(1996);Georczynski等人，Immunology87，573-580(1996);Georcyznski等人，Transplant.Immunol.3，55-61(1995);Yang等人，Transplantation60,71-76(1995);Anderson等人，APMIS102,23-27(1994)。本發明的可與VLA-4結合的共軛物的一種相關用途是調節參與"移植物抗宿主"病(GVHD)的免疫反應。參見，例如Schlegel等人，J.Immunol.155，3856-3865(1995)。GVHD是一種當免疫活性細胞轉移至同種異體的受體體內時發生的有可能致死的疾病。在這種情況下，供體的免疫活性細胞可攻擊受體內的組織。皮膚、腸上皮和肝臟的組織都是經常的靶標，在GVHD過程中可被破壞。當免疫組織被移植時，如骨髓移植中，該疾病表現出尤其嚴重的問題；但也有報道在其他情況下，包括心臟和肝臟移植物中，GVHD不太嚴重。本發明的治療藥物尤其可用于阻斷供體T細胞的活化，因而干擾了它們溶解宿主體內革巴細胞的能力。本發明的制劑尤其可用于治療多發性硬化癥、類風濕性關節炎和哮喘。本發明的共軛物的進一步用途是抑制腫瘤轉移。已有報道幾種腫瘤細胞表達VLA-4，與VLA-4結合的化合物可阻斷這些細胞與內皮細胞的粘附。Steinback等人，Urol.Res.23，175-83(1995);Orosz等人，Int.J.Cancer60，867-71(1995);Freedman等人，Leuk.Lymphoma13,47-52(1994);Okahara等人，CancerRes.54，3233-6(1994)。具有所需生物學活性的化合物可根據需要被修飾以提供所需的特性，如藥理學特性(例如，體內穩定性、生物利用度)提高，或在診斷學應用中被檢測到的能力。穩定性可以以多種方式進行測定，如通過測定在與肽酶或人血漿或血清孵育過程中蛋白的半衰期。許多這種蛋白穩定性測定法都已有描述(參見，例如Verhoef等人，Eur.J,DrugMetab.Pharmacokinet，1990，15(2):83-93)。本發明的共軛物的進一步用途是治療多發性硬化癥。多發性硬化癥是一種進行性的神經自身免疫性疾病，估計在美國有250,000至350，000個患者。多發性硬化癥被認為是特異性自身免疫反應的結果，其中某些白細胞攻擊和引起髓鞘質(覆蓋神經纖維的絕緣鞘)的破壞。在多發性硬化癥的動物模型中，針對VLA-4的鼠單克隆抗體已經顯示能阻斷白細胞與內皮細胞的粘附，并因此阻止中樞神經系統的炎癥和隨后動物的癱瘓16。本發明的藥學組合物適合用于多種藥物遞送系統中。用于本發明中的合適劑型可見"雷明頓藥物科學(Remington'sPharmaceuticalSciences)",MacePublishingCompany,Philadelphia,PA，第17版，(1985)。給予患者的用量將取決于給藥的物質、給藥的目的(如預防或治療)、患者的狀態、給藥的方式和類似情況。在治療性應用中，組合物可以以如下量給予已經患有疾病的患者，其量足以治愈或至少部分解除疾病及其并發癥的癥狀。足以達到此目的的用量稱為"治療有效劑量"。有效用于此用途的用量取決于被治療的病情以及主治醫生根據一些因素所做的判斷，這些因素如炎癥的嚴重性、患者的年齡、體重和一般狀況、和類似因素。給予患者的組合物可以為上述的藥學組合物的形式。這些組合物可通過常規的滅菌技術進行滅菌，或可被無菌過濾。得到的水溶液可被包裝備用，或被凍干，在給藥之前該凍干制劑與無菌水性載體混合。本發明的共軛物的治療劑量將根據，例如進行治療的特殊用途、共軛物的給藥方式、患者的健康狀況和病情、以及處方醫生的判斷進行變化。例如，對于靜脈內給藥，劑量的范圍一般在大約20嗎至大約2000嗎/kg體重，優選大約20嗎至大約500嗎，更優選大約100嗎至大約300|ig/kg體重。鼻內給藥的合適劑量范圍通常在大約0.1pg至1mg/kg體重。有效劑量可從來自體外或動物模型檢測系統的劑量反應曲線中推知。本發明的共軛物也能結合或拮抗CX6卩,、(X9卩,、(X4卩7、(Xd卩2、(Xe(37整合素的作用(盡管(X4P,和(X9P,在本發明中是優選的)。因此，本發明的共軛物也可用于預防或逆轉由這些整合素與其各自配體結合所誘發的癥狀、功能紊亂或疾病。例如，于1998年12月3日公開的國際申請WO98/53817(該申請的公幵內容全部引入本文作為參考)和其引用的參考文獻描述了由014(37介導的疾病。該參考文獻也描述了測定拮抗OC4(37依賴性結合VCAM-Ig融合蛋白的化驗。另外，與0td卩2和(Xe(37整合素結合的化合物可特別用于治療哮喘和相關的肺部疾病。參見，例如M.H.Grayson等人，J！Met/.1998，747^(11)2187-2191。與Cte卩7整合素結合的化合物也可用于治療系統性紅斑狼瘡(參見，例如，M.Pang等人，爿W/7〃'^A/7ew/".1998，4/(8)，1456-1463);克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎和炎性腸病(IBD)(參見，例如，D.Elewaut等人，Sca"dJ.GaWroe"&ra/1998，33(7)743-748);干燥綜合征(Sjogren'ssyndrome)(參見，例如U.Kroneld等人，6ta""1998，27(3),215-218);和類風濕性關節炎(參見，例如Scflw/J.(7aWrae"fera/1996,(3)，293-298)。并且與o^,結合的化合物可用于防止受精(參見，例如H.Chen等人，C7/渭.腺.1999，6，1-10)。在本發明的另一個方面，在例如多發性硬化癥的情況下，本文所述的共軛物和組合物可用于抑制免疫細胞從血流中遷移至中樞神經系統，或遷移至引起炎癥誘發的破壞髓鞘質的區域。優選這些試劑抑制免疫細胞遷移的方式是抑制脫髓鞘作用，并可進一步促進髓鞘再生。對于先天性代謝疾病，這些試劑也可防止中樞祌經系統的脫髓鞘和促進髓鞘再生，在這些疾病中，浸潤的免疫細胞主要在CNS中影響髓鞘質的發展。當這些試劑給予由脫髓鞘疾病或病癥誘發麻痹的受試者時，還優選減少麻痹。包括在由本文所公開的組合物、共軛物和方法所治療的炎性疾病，通常包括與脫髓鞘相關的疾病。在組織學上，髓鞘質異常是脫髓鞘或髓鞘形成障礙。脫髓鞘表示髓鞘質的破壞。髓鞘形成障礙是指由于少突膠質細胞功能障礙引起的髓鞘質的形成或維持缺陷。優選本文公開的組合物和方法被考慮用來治療與脫髓鞘有關的疾病和病癥，并輔助髓鞘再生。考慮治療的其他疾病或病癥包括腦膜炎、腦炎和脊髓損傷、以及通常由于炎性反應誘發脫髓鞘的病癥。本文公開的共軛物、組合物和方法并不針對如下疾病和病癥，其中，例如是遺傳缺陷引起的不正常的髓鞘質形成，例如髓鞘形成障礙。本文公開的組合物、共軛物和混合物(cocktail)可考慮用于治療與脫髓鞘有關的病癥和疾病。涉及脫髓鞘的疾病和病癥包括但不限于，多發性硬化癥、先天性代謝性疾病(例如，苯丙酮尿癥、泰-薩二氏病(Tay-Sachsdisease)、尼-匹二氏病(Niemann-Pickdisease)、高歇氏病(Gaucher'sdisease)、赫爾勒氏綜合征(Hurler'ssyndrome)、克臘比氏病(Kmbbe'sdisease)和其他的腦白質營養不良)、具有異常髓鞘形成75的神經病變(例如，格林-巴利綜合征(GuillainBarr6)、慢性免疫性脫髓鞘性多神經病(CIDP)、多灶性CIDP、抗-MAG綜合征、GALOP綜合征、抗硫脂抗體綜合征、抗-GM2抗體綜合征、POEMS綜合征、神經束膜炎、IgM抗-GDlb抗體綜合征)、藥物相關性脫髓鞘(例如，由氯喹、FK506、哌克昔林、普魯卡因胺和齊美定(zimeldine)給藥引起的)、其他遺傳性脫髓鞘疾病(例如，糖類缺陷性糖蛋白、科凱恩綜合征(Cockayne'ssyndrome)、先天性髓鞘發育不良、先天性肌營養不良癥、法勃氏病(Farber'sdisease)、Marinesco-Sj6gren綜合征、異染性腦白質營養不良、佩利措伊斯-梅茨巴赫病(Pelizaeus-Merzbacherdisease)、雷夫敘姆病(Refsumdisease)、朊病毒相關疾病和Salla病)和其他的脫髓鞘病癥(例如，腦膜炎、腦炎或脊髓損傷)或疾病。有許多疾病模型可用來在體內研究這些疾病。例如，動物模型包括但不限于表in<table>tableseeoriginaldocumentpage76</column></row><table>多發性硬化癥最常見的脫髓鞘疾病是多發性硬化癥，但許多其他的代謝性和炎性疾病能引起缺陷性或異常的髓鞘形成。MS是一種慢性神經疾病，出現在早期成年期，大多數病例會進展成為明顯的殘疾。單在美國就有大約350,000個MS病例。除了創傷以外，MS是成人早期至中期神經殘疾的最常見病因。MS的原因仍然需要進一步確定。MS的特征是慢性炎癥、脫髓鞘和神經膠質增生(瘢痕形成)。脫髓鞘可引起軸突傳導的負性或正性作用。正性傳導異常包括軸突傳導延緩、可變的傳導阻滯(在有高頻但非低頻沖動序列(trainsofimpulses)存在時出現)或完全傳導阻滯。正性傳導異常包括自發性或在機械應激后產生異位性沖動和在脫髓鞘的凸瘤(e麗)之間產生異常的"干擾(cross-talk)"。已經觀察到T細胞對髓鞘質蛋白(髓鞘質堿性蛋白(MBP)或髓鞘質蛋白脂蛋白(PLP))的反應性介導了實驗性變應性腦脊髓炎中的CNS炎癥。也已經觀察到患者CNS免疫球蛋白(Ig)的水平升高。在MS中觀察到的一些組織損傷還有可能是由活化T細胞、巨噬細胞或星形膠質細胞的細胞因子產物介導的。目前，診斷有MS的患者80%在疾病發作后可生存20年。MS的治療包括(1)針對疾病病程的變化進行治療，包括治療急性惡化和針對疾病的長期抑制；(2)治療MS的癥狀；(3)預防和治療醫學并發癥；和(4)處理繼發的人際和社會問題，MS的發作可能很劇烈或很緩和以至于不引起患者注意去看醫生。最常見的癥狀包括一個或多個肢體虛弱、由于視神經炎引起的視力模糊、感覺障礙、復視和共濟失調。疾病的病程可分成三大類(1)復發性MS、(2)慢性進行性MS、和(3)不活動性MS。復發性MS的特征是神經功能障礙反復發作。MS的發作通常進行幾天至幾周，緊接著可能完全、部分或不復原。發作后從癥狀的高峰期復原通常在幾周至幾月內發生，盡管持續2年或2年以上的復原很少見。慢性進行性MS可引起逐漸地進行性惡化，沒有穩定期或緩解期。這種形式發生在有復發性MS既往史的患者中，盡管20%的患者回憶沒有復發。在進行性過程中也可發生急性復發。第三種形式是不活動性MS。不活動性MS的特征是不同程度的固定的神經缺陷。大多數不活動性MS患者都有較早的復發性MS既往史。疾病的病程也取決于患者的年齡。例如，較佳的預后因素包括早發(兒童期除外)、復發和發作后5年很少的殘疾。相反，不良預后與發作年齡較晚(即40歲的年齡或更老)和進行性病程有關。這些變量是相互依賴的，因為慢性進行性MS開始的年齡有比復發性MS晚的趨勢。患者中慢性進行性MS的殘疾通常是進行性截癱或四肢癱瘓(癱瘓)引起的。在本發明的一個方面，優選當患者在緩解期時而不是在疾病的復發階段進行治療。短期使用促腎上腺皮質激素或口服皮質類固醇(例如，口服的強的松或靜脈給藥的甲基強的松龍)是僅有的治療MS急性惡化患者的特殊治療措施。對于MS較新的治療方法包括用干擾素(3-lb、干擾素(3-la和Copaxone(以前稱為共聚物1)對患者進行治療。這三種藥物已經顯示能顯著地降低疾病的復發率。這些藥物可經肌肉內或皮下自行給藥。但目前沒有一種治療方式能抑制脫髓鞘，能單獨促進或使自發髓鞘再生發生或減少癱瘓。本發明的一個方面考慮了用本文公開的藥劑單獨或與其他標準的治療方式聯合治療MS。先天性代謝性疾病先天性代謝性疾病包括苯丙酮尿癥和其他的氨基酸尿癥、泰-薩二氏病、尼-匹二氏病、高歇氏病、赫爾勒氏綜合征、克臘比氏病和其他的腦白質營養不良，這些疾病可影響髓鞘的發育，下面將詳細進行描述。PKU是由苯丙氨酸羥化酶缺陷引起的一種遺傳性代謝錯誤。該酶的缺失引起智力遲鈍、器官損害、不正常的姿勢，在孕婦發生PKU時，嚴重者可危及妊娠。已經發現了研究PKU的小鼠模型。被鑒定有PKU的嬰兒優選要保持無或低苯丙氨酸飲食。本發明的一個方面將這種飲食與本文公開的共軛物和組合物結合在一起應用，以防止脫髓鞘和由于PKU而損害髓鞘再生細胞。典型的泰-薩二氏病出現在大約6月齡的受試者中，最后將引起受試者在5歲前死亡。該疾病是由于缺少己糖胺酶A(hexoaminidaseA，hexA)，該酶是在腦和神經細胞中降解某種脂肪物質所必需的。在缺少該酶時，這些物質積累，引起神經細胞破壞。另一種形式的hexA酶缺陷在生命中發生的較晚，被稱為青少年、慢性和成人發作型hexA缺陷。癥狀類似于典型的泰-薩二氏病的特征。也有酶缺陷的成人發作形式。目前對于該疾病/缺陷沒有治愈的病例或治療方法，僅有檢測胎兒疾病的子宮內預防性檢測。因此，本文公開的共軛物和組合物可用于改善或阻止這種患者中神經細胞的破壞。尼-匹二氏病分為三種類型急性嬰兒型、B型是一種較少見的慢性、非神經型，C型是該疾病的一種生物化學和遺傳獨特型。在正常的個體中，細胞膽固醇輸送至溶酶體進行加工，之后被釋放。從患尼-78匹二氏病受試者采集的細胞顯示在從溶酶體中釋放膽固醇的過程是有缺陷的。這引起膽固醇在溶酶體內部的過量積聚，引起加工障礙。NPC1發現具有與其他蛋白中類似的已知的甾醇敏感區，該區被認為在調節膽固醇運輸中具有重要地位。對于尼-匹二氏病的A型和C型還沒有建立成功的治療方法。對于C型，推薦患者進低膽固醇飲食。因此，本文公開的共軛物和組合物可用于改善或防止細胞的破壞。高歇氏病是一種由于基因突變引起的遺傳性疾病。通常，該基因是負責一種稱為葡萄糖腦苷脂酶的酶，機體需要該酶來分解脂肪、葡萄糖腦苷脂。在患有高歇氏病的患者中，身體不能正常地產生該酶，脂肪不能被分解。象泰-薩二氏病一樣，高歇氏病在來自東歐猶太人(德系猶太人)的后代中非常常見，盡管任何種屬的個體均可能被累及。在德系猶太人群體中，高歇氏病是最常見的遺傳病，發生率大約為1/450人。在公眾當中，高歇氏病影響大約1/100,000人。1991年，酶替代治療成為高歇氏病的首種有效治療方法。該治療方法包括靜脈給予葡萄糖腦苷脂酶的修飾形式。要理解的是，本文公開的組合物和共軛物可單獨使用或更優選地與葡萄糖腦苷脂酶聯合使用以治療患病的受試者。赫爾勒氏綜合征也稱為I型粘多糖增多癥，是一種重疊性疾病。這些遺傳疾病的共同點是在粘多糖細胞積聚在成纖維細胞中。這些疾病從遺傳學上是可區分的。成纖維細胞和骨髓移植似乎沒有什么幫助，因此需要可用于改善疾病嚴重程度和進展的共軛物和組合物。在此公開的共軛物和組合物可給予受試者以改善疾病的進展和/或嚴重性。克臘比氏病(也稱為球形細胞腦白質不良)是一種由半乳糖神經酰胺酶(或半乳糖腦苷脂酶)缺陷引起的常染色體隱性疾病，該溶酶體酶能分解代謝髓鞘質的主要脂質成分。在法國的發病率估計為1:150,000出生兒。該病引起中樞和外周神經系統的脫髓鞘。通常該病在出生的第一年內就可發生，并迅速進展，但也有報道少年、青年或成人發作型，其進展的速度變化更大。從酶化驗(半乳糖神經酰胺酶缺陷)來建立診斷。有幾種天然的動物模型(鼠、狗、猴)。克臘比氏病，象所有腦白質營養不良一樣，尚沒有治愈的病例或有效的治療方法。本發明的一個實施方式是使用本文公開的組合物和共軛物來治療79或改善克臘比氏病和其他的腦白質營養不良。腦白質營養不良是一組遺傳上確定的進行性疾病，其累及腦、脊髓和外周神經。這些疾病包括腦白質腎上腺萎縮癥(ALD)、腎上腺髓質神經病變(AMN)、Aicardi-Goutiers綜合征、亞歷山大病(Alexander'sdisease).CACH(即，伴有中樞神經系統髓鞘質形成減少或白質消失疾病的嬰幼兒共濟失調)、CADASIL(即，伴皮質下梗死及腦白質病的常染色體顯性腦動脈病)、Canavan病(海綿狀退行性變)、腦腱性黃瘤病(CTX)、克臘比氏病(如上所述)、異染性腦白質營養不良(MLD)、新生兒腦白質腎上腺萎縮癥、卵巢腦白質營養不良綜合征(ovarioleukodystrophysyndrome)、佩-梅病(Pelizaeus-Merzbacherdisease)(X-連鎖的痙攣性截癱)、雷夫敘姆病(Refsumdisease)、vanderKnaap綜合征(伴皮層下囊腫的空泡腦白質營養不良)和澤爾韋格氏綜合征(Zellwegersyndrome)。這些疾病沒有有效的治療方法，更不用說治愈的病例了。因此，需要治療或改善這些疾病癥狀的方法，如通過使用本文公開的組合物和共軛物。伴有異常髓鞘形成的神經病有多種慢性免疫多發性神經病變可引起患者的脫髓鞘。這些疾病的發作年齡根據病情而變化。這些疾病有標準的治療方法，且可與本文公開的組合物和共軛物聯合使用。或者，本文公開的組合物和共軛物可單獨使用。現有的標準治療方法包括下列方法表IV<table>tableseeoriginaldocumentpage80</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage81</column></row><table>藥物和放射線誘發的脫髓鞘某些藥物和放射線可誘發受試者發生脫髓鞘作用。引起脫髓鞘的藥物包括但不限于氯喹、FK506、哌克西林、普魯卡因胺和齊美定。放射線也可誘發脫髓鞘。由放射線引起的中樞神經系統(CNS)毒性被認為是由下列原因引起的(l)對血管結構的損害，(2)去除了少突膠質細胞-2星形膠質細胞的祖細胞和成熟的少突膠質細胞，(3)去除了海馬、小腦和皮質中的神經干細胞群，廣泛地改變細胞因子的表達。大多數放射線損害是由在治療某些癌癥中進行的放療所引起的。參見Belka等人的綜述，2001&乂Ca證85:1233-9。但對于航天員，接觸放射線可能也是病因之一(Hopewell,1994Jt/v.>S/ace14:433-42)，在接觸放射性物質的情況下也是如此。對于已經接受了藥物或偶爾接觸或有意接觸放射線的患者，通過給予本文公開的共軛物或組合物之一可能對于防止脫髓鞘或促進髓鞘再生是有益處的。涉及脫髓鞘的疾病其他引起脫髓鞘的遺傳性綜合征/疾病包括科凱恩綜合征(Cockayne'ssyndrome)、先天性髓鞘發育不良、法勃氏病(Farber'sdisease)、異染性腦白質不良、佩利措伊斯-梅茨巴赫病(Peliszaeus-Merzbacherdisease)、雷夫余又姆病(Refsum)、阮病毒相關疾病和Salla病。科凱恩綜合征(CS)是一種很少見的遺傳性疾病，此病癥者對陽光很敏感，身材矮小，外表過早衰老。在典型形式的科凱恩綜合征(I型)中，癥狀是進行性的，通常在1歲后出現明顯的癥狀。科凱恩綜合征的早期發作型或先天型(II型)在出生時就很明顯。有意思的是，不象其他DNA修復疾病，科凱恩綜合征與癌癥沒有關系。CS是一種多系統的疾病，該病引起軀體和腦深刻的生長障礙，以及進行性的惡病質，視網膜、耳蝸和神經變性，伴有腦白質營養不良和脫髓鞘性祌經病，但不增加癌癥發生率。在與UV(例如，陽光)接觸后，科凱恩綜合征患者不再發生轉錄耦合修復。現在已經鑒定出來在科凱恩綜合征中有兩種基因缺陷，CSA和CSB。CSA基因在第5號染色體上發現。兩種基因都編碼與轉錄結構組件和DNA修復蛋白相互作用的蛋白。目前，還沒有發現治愈病例或對該病癥者的有效治療方法。因此，本發明的一個方面是用本文公開的共軛物和組合物治療該病。先天性髓鞘發育不良有幾種名稱，包括先天性髓鞘形成障礙性神經病、先天性髓鞘發育不良性多發性神經病、先天性髓鞘發育不良(洋蔥球樣)多發性神經病、先天性髓鞘發育不良神經病、由髓鞘發育不良引起的先天性神經病、髓鞘發育不良神經病和CHN。在人類最常見的遺傳性疾病中，遺傳性外周神經病是一組復雜的、臨床上和遺傳學上不同類的疾病，可產生外周神經的進行性惡化。先天性髓鞘發育不良是該組疾病中之一。該組疾病包括易發生壓迫性麻痹的遺傳性神經病、夏科-馬里-圖思病(Charcot-Marie-Toothdisease)、代-索二氏綜合征(Dejerine-Sottassyndrome)和先天性髓鞘發育不良性神經病。對于這些疾病還沒有已知的治愈病例或有效的治療方法。法勃氏病有幾種名稱，包括法勃脂肪肉芽腫病、神經酰胺酶缺陷、酸性神經酰胺酶缺陷、AC缺陷、N-月桂基鞘氨醇脫酰基酶缺陷、和N-酰基鞘氨醇氨基水解酶。如某些名稱所揭示的那樣，該疾病是由于酸性神經酰胺酶(也稱為N-酰基鞘氨醇氨基水解酶，ASAH)缺陷引起的。酶缺乏引起未磺化的酸性粘多糖在神經元和神經膠質細胞中積聚。患有該疾病的患者通常在2歲之前死亡。異染性腦白質營養不良(MLD)是由芳基硫酸脂酶A缺陷引起的遺傳性疾病。它是影響髓鞘生長的稱為腦白質營養不良的一組遺傳性疾病中的一種。MLD有三種形式晚期嬰兒型、青少年型、和成人型。在最常見的晚期嬰兒型中，在6個月至2年之間癥狀開始發作。嬰兒通常在出生時是正常的，但最終喪失以前獲得的能力。癥狀包括張力減退(肌緊張性低)、說話異常、心智能力喪失、失明、強直(即，不受控制的肌緊張)、痙攣、吞咽損害、癱瘓和癡呆。青少年型的癥狀從4至14歲之間開始出現，包括學校表現不佳、精神頹廢、共濟失調、癲癇發作(seizure)和癡呆。在成人型中，癥狀在16歲以后開始發生，癥狀可包括注意力不集中、抑郁、精神病學紊亂、共濟失調、震顫和癡呆。癲癇發作可出現在成人型中，但不如其他型多見。在所有三種形式中，精神頹廢通常是首先出現的體征。佩利措伊斯-梅茨巴赫病(也稱為圍產期嗜蘇丹性腦白質營養不良)是一種引起蛋白脂質蛋白異常的X連鎖遺傳疾病。該異常通常在1歲前引起嬰兒死亡。對該疾病尚沒有已知的治療方法或治愈病例。雷夫敘姆病(也稱為植烷酸氧化酶缺陷、多神經炎型遺傳性運動失調或IV型遺傳性運動與感覺神經病，HMSNIV)是由于基因突變引起的，該基因編碼植垸酰輔酶A羥化酶(PAHX或PHYH)。主要的臨床表現是色素性視網膜炎、慢性多發性神經病和小腦體征。植烷酸，一種罕見的支鏈脂肪酸(3,7,11，15-四甲基-十六垸酸)，積累在該種疾病患者的組織液和體液中，由于缺乏PAHX不能被代謝。每月進行一次或兩次血漿除去法能有效地從體內將該酸去除，并允許放寬對限制植烷酸攝取的飲食限制。朊病毒相關疾病包括Gerstmann-Straussler病(GSD)、克洛伊茨費爾特-雅各布病(Creutzfeldt-Jakobdisease,CJD)、家族性致命性失眠，朊病毒蛋白異常亞型在這些疾病以及庫魯病和綿羊瘙癢病(在綿羊中發現的疾病)可作為傳染原。術語朊病毒來自"蛋白傳染原"(Pmsiner,^SWewce216:136-44，1982)。朊病毒相關蛋白(PRP)的蛋白水解裂解生成淀粉樣肽(amyloidogenicpeptide),該肽聚合成為不溶解的纖維。Salla病和其他類型的唾液酸尿癥(sialurias)是涉及唾液酸t'存問題的疾病。它們是常染色體隱性的神經變性疾病，可以以嚴重的嬰兒型(g卩，ISSD)或緩慢進行性的成人型(在芬蘭較常見)存在(即，Salla病)。主要的癥狀是張力減退、小腦性共濟失調和智力遲鈍。這些病癥和疾病也要考慮姑息性或改善性治療方法。引起脫髓鞘的其他病癥包括傳染后腦炎(也稱為急性播散性腦脊髓炎，ADEM)、腦膜炎和對脊髓的損傷。本文公開的組合物和共軛物也考慮用于治療這些其他的脫髓鞘疾患。下面提供了合成和生物學實施例來說明本發明，但這些實施例并不能被解釋為以任何方式限制本發明的范圍。除非另外說明，所有溫度均是攝氏度。實施例在下面的實施例中，下面的縮寫具有下面的含義。如果縮寫沒有定義，則它具有普遍接受的含義。ACN=乙腈bs=寬單峰d=雙重峰dd=雙組雙重峰Et3N=三乙胺g=克h和hr=小時HPLC=高效(或壓)液相色ilkg=千克kDa=千道爾頓L=升m=多重峰M=摩爾mg=毫克min=A牽中mL=毫升mm=暈米mM=毫摩爾mmol=毫摩爾s=單峰sat.=飽和的t=三重峰TFA=三氟乙酸TLC或tic=薄層色譜Ts=甲苯磺酰基=微升|ig=微克(im=微米一般方法使用Gemini2000或BrukerAvance300光譜儀獲得質子("H)和碳(13C)核磁共振譜(NMR)。通過在3.6ppm處大的、寬單峰可檢測到聚乙二醇(PEG)的存在。該信號的積分可根據PEG部分的大小而變化。共軛VLA-4拮抗劑的存在也可在共軛物的&NMR譜上檢測到。在二氧化硅60F254(EMD15341-1)預包被板或預包被的MKC18F二氧化硅60A(Whatman4803-110)上進行薄層色譜。在Agilent質譜儀(LC/MSDVL)上以陽離子單四級模式(singlequadmode)進行質譜。PEG產物和PEG共軛物的HPLC方法使用帶有VarianUV檢測器的VarianPrepStar(SD-1型)組件設定在210nm進行制備性反相HPLC。方法A:在VydacC18，300A孔徑柱(250mmx21.2mm)上使用反相HPLC純化PEG產物和PEG共85軛物的樣品，一般使用35-50%ACN+0.1%TFA的梯度，在100min內以20mL/min的速度進行。方法B:在VydacC18，300A孔徑柱(250mmx50mm)上使用反相HPLC純化PEG產物和PEG共軛物的樣品，一般使用35-50%ACN+0.1%TFA的梯度，在100min內以60mL/min的速度進行。方法C:經反相分析性HPLC確認PEG產物和共軛物的純度，使用裝有WatersSymmetry300A孔徑，3.5(iC18柱(150mmx4.6mm)的AgilentSeries1100四元系統，使用40-50%ACNw/0.1%TFA的梯度，以1.5mL/min的流速進行，該系統與設定在210nm的Agilent1100可變波長檢測器和Sedex75蒸發光散射檢測器(40°C，增益=5)連接。PEG試齊廿通過NOFCorporation(YebisuGardenPlaceTower，20-3Ebisu4-chome,Shibuya-ku，Tokyo150-6019)或NektarTherapeutics(150IndustrialRoad，SanCarlos,CA94070)獲得如下的PEG起始物質40kDa4-臂PEG醇(N〇FCat.SunbrightPTE-40000);40kDa3-臂PEG醇(NOFCat.SunbrightGL-400)。實施例1氫氧化鈉(10g，0.25m)溶解在水中(300ml)。向此溶液中加入4-硝基苯丙氨酸(50.3g，0.22m)，攪拌至完全溶解。向得到的溶液中加入碳酸鈉(28.8g，0.26m)，在冰浴中將攪拌的懸液冷卻至+8。C。逐滴加入氯甲酸芐基酯(44.7g，0.26m),劇烈攪拌，將內部溫度保持在+6T至+9T的范圍內。混合物在+6T另外攪拌lhr，并轉移至分液漏斗，用醚沖洗(2x150ml)。水相置于大的錐形瓶(2L)中，小心地用稀釋的HCl水溶液酸化至pf^2，用乙酸乙酯萃取(4x500ml)。合并的萃取物用水沖洗，用MgS04干燥。過濾溶液，蒸發濾液，殘渣溶解在乙酸乙酯(150ml)中，并用己垸稀釋(500ml)。濾出晶體物質，用冷的溶劑漂洗，空氣中干燥得到Cbz-4-硝基苯丙氨酸，75g(99.5。/。產率)。'H-NMR，86DMSO-d6,(5):12.85(bs,1H)，8.12(d，2H，J=9Hz)，7.52(d,2H,J=9Hz),7.30(m，5H),4.95(s，2H)，4.28(m，1H),3.32(bs,1H)，3.10(m,2H).13C-NMR(5):173.1，156.3，146.6,137.3,130.8,128.5,128,0，127.8,123.5，65.6,55.1，36.6.MS(m/z):367.1[M+23].Cbz-4-硝基苯丙氨斷75g，0.22m)溶解在二噁院(300ml)中。得到的攪拌溶液在干冰浴中冷卻至-2(TC(內部)。加入液化的異丁烯(大約290ml)，然后分別間隔30min加入三等分的濃硫酸(35ml)。酸的加入是一個很強烈的放熱過程，伴隨著主要的聚合作用。在此階段有效的機械攪拌是很重要的。得到的混合物攪拌20hr，然后升溫至室溫，小心地倒入進飽和的碳酸鈉水溶液(2L)中，并用乙酸乙酯(600ml)稀釋。分離有機層，用乙酸乙酯萃取水層(2x200ml)。合并的萃取物用水沖洗，用硫酸鈉干燥。過濾溶液，蒸發至干燥。殘渣投入進乙酸乙酯/己垸混合物(500ml;1:1)中，通過硅膠填料(ca.2x2in)進行過濾。另外用一定量的相同溶劑(總計2L)漂洗二氧化硅，蒸發濾液得到粘稠油狀的完全保護的4-硝基苯丙氨酸，73g(兩步后為83%)。'H-NMR,CDC13,(5):8.12(d，2H，J=8.4Hz),7.36(m,7H),5.35(m,1H)，5,10(m,2H)，4.57(m,1H)，3.31(m,2H),1,43(s,9H).'3C-NMR,CDC13，(5):169.7，155,3，146.9,143.9,136.0,130.2，128.4,128.2，128.0,123.3,82.9，66.9，54.7，38.2，31.4,27.8，13.9.MS(m/z):423.1[M+23].保護的4-硝基苯丙氨酸(73g，0.18m)溶解在乙醇(500ml)中，加入氧化鉑催化劑(1.5g)。得到的溶液在氫氣(50-60psi)中在室溫下劇烈攪拌直至氫吸附停止(3hr)。將催化劑過濾出，濾液蒸發至干燥，殘渣投入進乙酸乙酯(200ml)中，通過硅膠填料(2x2in)過濾，使用乙酸乙酯-己烷混合物(3:2，2L)漂洗二氧化硅。濾液濃縮至大約200ml，加入己烷(500ml)。過濾出結晶產物，用冷溶劑漂洗，并風干。產量-56g，84%。'H-NMR，CDC13,(5):7.30(bs,5H),6.92(d,2H,J=8.1Hz),6.58(d,2H，J=8.1Hz),5.21(m，1H)，5.10(d,2H，J=2.1Hz),4.46(m,1H)，3.59(bs,2H),2.97(s,2H，J=5.4Hz)，1.42(s,9H).13C-NMR,CDC13，(5):170.6,145.1,136.3，130.2，128.3，127.9，125.6，115.0,81.9,66.6，55.2,37.4,27.8MS(m/z):393.1[M+23].87實施例2實施例1產物，4-氨基苯丙氨酸(20g，0.054m)溶解在乙醇(200ml)中，用Himig堿(21g，0.162m,3當量)和2-氯-3-硝基吡啶(10.3g，0.65m,1.2當量)處理。得到的溶液在氮氣氣氛中攪拌，并加熱回流24hr。LC分析表明有小量未反應的胺存在。另外加入小量的氯硝基吡啶(l.lg，0.13當量)并繼續回流24hr。冷卻反應混合物，并蒸發至干燥。殘渣溶解在乙酸乙酯(600ml)中，獲得的溶液用水(lx200ml)、稀釋的檸檬酸水溶液(0.2N,2x200ml)、鹽水(lx200ml)沖洗，用硫酸鈉干燥。濾出固體，蒸發濾液得到37g深紅色油狀、含有預期產物，該產物中含有過量的氯硝基吡啶。不純的產物通過快速色譜(Biotage75L系統)純化，用乙酸乙酯:己垸(3:17)混合物洗脫。合并含有純產物的餾分，蒸發得到深紅色，粘稠油狀的產物，26g(99。/。)。'H-NMR，CDC13,(5):10.10(s,1H),8.49(m,2H),7.57(d，2H，J=9Hz)，7.35(bs，5H)，7.19(d,2H，J=9Hz),6,84(m,1H),5.30(m，1H),5.13(d,2H，J=3Hz),4.57(m，1H)，3.11(m,2H),1.45(s,9H).13C-NMR，CDC13,(5):170.4,155.5，155.1，150.0,136.7，136.3，135.4，132.4，129.9,128.5，128.3,128.0,127.9，122.2,113.7,82.2,66.7，55.1，37.7，27.8,20.9.MS(m/z):493.1[M+l]，515.1[M+23].紅色的硝基化合物(26g，0.054m)溶解在THF(350ml)中，加入氧化鉑催化劑(1.35g)。得到的混合物在氫氣氣氛(50-60psi)下劇烈攪拌直至氫吸附停止(2hr)。濾出催化劑，濾液蒸發至干燥。殘渣溶解在乙酸乙酯(100ml)中，用己烷(50ml)稀釋直至開始結晶。混合物進一步用乙酸乙酯/己烷(l:l)混合物(300ml)稀釋，在冰箱中靜置3hr。濾出結晶固體，用冷的溶劑漂洗，風干得到產物，23g，94%。'H-NMR,CDC13,(5):7.81(dd，1H，Jl=1.5Hz，J2=4.8Hz)，7.33(bs，5H),7.17(d，2H,J=8.4Hz)，7.03(d,2H,J=8.4Hz),6.96(dd,1H,JH.5Hz，J2=7.5Hz),6.75(dd,1H，Jl=5.0Hz,J2=7.7Hz)，6.22(s，1H)，5.31(m,1H)，5.09(bs，2H)，4.50(m,1H)，3.41(bs,2H)，3.02(m,2H),1.43(s，9H).13C-NMR，CDC13，(5):170.6，155.6,145.5,140.21，138.8,136.3,130.8,129.9，128.5,128.3,127.9,123.4,118.2,117.0，82,0,66.6,55.2,37.4，27.9.MS(m/z):407.1[M-56],463.1[M+l],485.1[M+23].氨基吡啶(19g，0.041m)懸浮在二氯甲垸(200ml)中并加入CDI(12g,0.074m，1.8當量)。得到的混合物在室溫下攪拌20hr。反應混合物用飽和的碳酸氫鹽水溶液(2x100ml)、鹽水(lx100ml)沖洗，用硫酸鈉干燥。濾出固體，濾液蒸發至干燥。殘渣溶解在乙酸乙酯(熱，300ml)中，并進行結晶。濾出結晶產物，用冷的乙酸乙酯漂洗，風干得到19.9g，81。/。的咪唑酮。'H扁NMR,CDC13,(5):10.63(s,1H),8.06(d,1H,J=3Hz),7.66(d，2H，J=9Hz),7.32(m,8H)，7.05(m,1H)，5.36(m，1H),5.13(s,2H)，4.59(m，1H),3.17(m，2H),1.45(s,9H).13C-NMR，CDC13,(5):170.4，155.6，154.3,143.8,141.0，136.2，135.8，131.8，130.2,128.3,128.0,125.9，122.2，118.3,116.0,82.4，66.8，55.0,37.7，27.8.MS(m/z):433.1[M-56],489.2[M+l],511.2[M+23].實施例、3HPCI5/POCI3oH2N\CH20、K^。H-—HS-、吡啶-3-磺酸(125g,0.78m)置于1L裝有機械攪拌器、回流冷凝器、溫度計和氮氣進氣口的3頸燒瓶中。下一步，加入五氯化磷(250g，1.19m，1.5當量)，然后立即加入三氯氧磷(330ml，3.8m，4.5當量)。開始燒瓶的內容物在室溫下攪拌30min，然后將其緩慢地進行溫和回流(內部溫度大約為110°C)1小時，在此溫度保持大約3.5hr,然后在后面的12hr冷卻至室溫。在此期間觀察到有氣體放出。在減壓條件(12mmHg/4(TC)下脫除揮發物，黃色的半固體殘渣用DCM(1L)稀釋。漿料緩慢地倒入攪拌的冰冷卻的飽和碳酸氫鹽水溶液中，保持pHN7。觀察到有氣體放出。分離有機層，水層用DCM反萃取。合并的萃取物用89冷的飽和碳酸氫鹽水溶液、鹽水沖洗，用硫酸鎂干燥。濾出固體，蒸發濾液，得到淡黃色油狀液體，吡啶-3-磺酰氯，123g(93。/。純度；理論值88%)。'H-NMR,CDC13,(5):9.26(d,1H)，8.98(dd,1H)，8.34(m,1H)，7.62(m,1H).13C-NMR,CDC13,(5):155.3,147.4,140.9,134.6,124.2.MS(m/z):178.0[M+l].L-青霉胺(150g，1.0m)溶解在DI水(1500ml)中并攪拌，在冰浴中冷卻至+8。C，用福爾馬林(150ml,37。/。水溶液)處理。反應混合物在+8。C攪拌2hr，然后去掉冷卻浴，繼續攪拌12hr。在減壓條件(14mmHg/5(T)下將清亮的溶液濃縮得到白色的殘渣。重新懸浮固體，然后溶解在熱的MeOH(2500ml)中，并在室溫下靜置12hr。濾出白色的蓬松沉淀物，用冷的甲醇漂洗。濃縮濾液，再次進行結晶。收集的沉淀物與首次收獲的產物合并，在真空箱中在55。C，45mmHg下干燥24hr。(R)-5,5-二甲基噻唑烷-4-羧酸的產量為138g(>99%純度；理論值86%)。'H-窗R，DMS0-d6，(5):4.25(d,1H)，4,05(d，1H)，3.33(s，1H),1.57(s，3H)，1.19(s,3H).13C-NMR，DMSO-d6,(5):170.8,74.4，57.6，51.8,28.9,27.9.MS(m/z):162.3[M+l].在裝有機械攪拌器和溫度計的4L反應器中，用磷酸二氫鉀(43g，0.31m)和磷酸氫二鉀(188.7g,1.08m)在DI水(2L)中制備緩沖溶液。加入(R)-5,5-二甲基噻唑烷-4-羧酸(107g，0.675m)，攪拌至完全溶解。在冰浴中溶液冷卻至+8°C。單獨制備的吡啶-3-磺酰氯(124g，0.695m)/DCM(125ml)溶液逐滴加入至反應器中，劇烈攪拌1hr。監測反應混合物的pH，4hr后發現pH:5，加入固體碳酸氫鹽調整至pEN6。混合物經過18hr升溫至室溫。用稀釋的硫酸水溶液將pH調整至2，攪拌lhr，將沉淀的黃色固體濾出，用水漂洗至中性。固體濾餅轉移至2L錐形瓶中，懸浮在DCM(500ml)中，偶爾回蕩5min，再次過濾。濾餅用DCM沖洗并風干。標題化合物(R)-5，5-二甲基-3-(吡啶-3-基磺酰基)噻唑烷-4-羧酸的產量為148.9g(98%純度；理論值73%)。'H-NMR，DMSO-d6，(5):9.05(d,1H)，8.89(m，1H)，8.32(m，1H)，7.69(m，1H)，4.68(q，2H),4.14(s,1H)，1.35(s，3H),1.29(s，3H).13C-NMR，DMSO-d6,(5):170,0，154.3，147.9，135.8，134.1，124.8，72.6,54.3,50.2,29.4,25.0.MS(m/z):303.2[M+l].實施例4實施例2產物(52g,0.106m)在MeOH(450ml)中混合成漿，加入氫化催化劑(8.7g，5%Pd/C，Degussa)，混合物在氫氣(60psi)中攪拌直至不再進一步吸附(大約2hr)。加入THF(150ml)溶解沉淀的固體，溶液通過Celite填料過濾，使用DCM清洗濾器。濾液蒸發至干燥，再次溶解在DCM(300ml)中，并再次汽提(stripped)。該操作重復2次。泡沫狀的固體在高度真空中保持3hr。標題化合物的產量為38.3g(理論值101%)。'H-固R，CDC13,(5):8.08(m,1H),7.56(ABq,4H),7.37(m,1H),7.06(m,1H),3.68(m，1H)，2.03(m,2H),1.49(s,9H),13C-NMR，CDC13，(5):173.8,154.6,143.9，141.0，137.4，131.5，130.2，126.1,122.3,118.0,116.1，81.4,56.0，40.6，27.9.MS(m/z):299.3[M-56],355.4[M+l],377.4[M+23].實施例4產物(38.3g,假設0.106m)溶解在DCM(500ml)中，并依次用下列的化合物處理N-甲基嗎啉(27g，30ml,0.266m;2.5當量)、HOBt(17.3g，0.128m;1.2當量)、和實施例3的產物(33.8g，0.11291m;1.06當量)。得到的不均勻溶液在冰浴中冷卻至+4T，一次性加入EDC(22.5g，0.117m;1.1當量)進行處理。攪拌反應混合物，使其在其后的4hr內升溫至室溫，然后繼續保持18hr。將溶劑汽提，殘渣溶解在乙酸乙酯(1.2L)中，用飽和的碳酸氫鹽水溶液(2x250ml)、水(250ml)、鹽水(300ml)沖洗，用硫酸鎂干燥。溶液過濾，蒸發至干燥，得到淡橙黃色、粘稠油狀產物，76g(>>100%)。粗產物通過快速色譜在硅膠(Biotage75L，在乙酸乙酯/甲醇(3%)混合物中)上進行純化。含有純產物的餾分合并，蒸發得到54g標題化合物(產率83%)。'H-NMR,CDC13,(S):10.37(s，1H),9.11(s,1H)，8.87(m,1H),8.19(m，1H),8.05(m:1H),7.56(ABq,4H),7.52(m,1H),7.36(m,1H),7.06(m,2H)，4.83(m，1H),4.58(ABa,2H),3.96(s,1H),3.19(m，2H),1.49(s,9H)，1.22(s,3H),1.18(s，3H).13C-NMR，CDC13,(5):169,7,167.6，153.9，148.4,143.8，140.9,135.8,135.6,132.9，131.9,130.2，125.9,123.8,122.1，118.0，115.9,82.8，73.6，60.3,54.8,53.7,50.6,37.8，29.1，27.8,23,9,14.1.MS(m/z):583.3[M-56],639.4[M+l],661.3[M+23].向冰冷卻的三氟丁酸乙酯(15g，89mmol)和甲酸乙酯(36mL，444mmol)的THF(200mL)溶液中，在N2中在25分鐘內加入1MKOtBu/THF(107mmo1,107mL)。15分鐘后，去除冰浴，反應混合物在室溫下攪拌1小時。然后另外加入甲酸乙酯(18mL，222mmol)，反應混合物攪拌過夜。濃縮反應混合物，殘渣在冷乙醚(100mL)和冷水(300mL)之間萃取。水相的pH用濃HCl調整至2。產物用二氯甲烷(lx100mL,45x75mL)萃取，合并的有機萃取物用鹽水(lx100mL)沖洗，干燥(MgS04)，過濾，濃縮得到稠厚的油狀標題化合物，靜置固化，10.2g(58.5%)。MS(m/z)=198(M+H)+。實施例6實施例7AN向實施例6產物(IOg，51mmol)和二乙基胍硫酸鹽(8.3g，25.2mmol)的EtOH(60mL)溶液中，在N2中在10分鐘內加入NaOEt的21%EtOH(20.7mL，55.5mmol)溶液。然后反應混合物加熱回流5小時。將不均勻的溶液冷卻，倒入冷水(100mL)中得到均勻的溶液。溶液的pH用濃HC1和1NHC1調整至大約3.5。從溶液中沉淀的固體通過過濾收集。淡褐色固體用水沖洗，風干，得到2.9g，(23%)標題化合物。MS(m/z)=250(M+H)+,'H畫R(300MHz，CD3OD)S7.65(brs，1H)，3.55(q,4H),3.30(q，2H)，1.25(t，6H).實施例7的產物(2.0g，8.02mmol)、DIEA(1,5mL，8.83mmol)、DMAP(.98g，0.8mmol)和二氯甲烷(30mL)投入燒瓶中。混合物冷卻至0。C，加入三氟乙酸酐(1.5mL，8.83mmo1)。反應變成均相，在0°C攪拌3小時。混合物用飽和的NaHC03淬滅，用二氯甲烷萃取。有機相用0.2N檸檬酸沖洗，經Na2S04干燥，過濾，真空濃縮得到2.87g(94%)褐色固體的標題化合物。NMR(300MHz,CDC13)58.28(s,1H)，3.65-3.52(m，4H),3.29-3.19(q,2H),1.22-1.17(t，6H).實施例8實施例8的產物(1.3g，3.5mmol)、H-Phe(p-N02)OtBu(1.1g，4.2mmol)和DIEA(0.9mL,5.3mmol)的CH3CN(14mL)溶液在N2中加熱回流過夜。第二天另外加入H-Phe(p-NO2)OtBu(0.8g，3mmo1)，繼續回流3天。然后反應混合物冷卻和濃縮。殘渣投入至EtOAc(50mL)中，有機部分用0.5NKHS04(3x50mL)、水(lx50mL)、鹽水(lx10mL)沖洗，干燥(MgS04)，過濾，濃縮為褐色的膠。粗物質通過快速色譜(5:1己烷/EtOAc)純化得到640mg(38%)金色膠狀的標題化合物。TLC:3:1己烷/EtOAc，Rf=0.30，MS(m/z)=498(M+H)+，'HNMR,(300MHz，CDC13)58.19(d，2H)，7.80(s，1H),7.25(d,2H)，5.19(brd,1H),4.95(q，1H)，3.70-3.50(m，4H),3.45-3.25(m，2H),3.10(q，2H)，1.40(s，9H)，1.05(t,6H).實施例10實施例9的產物(635mg，1.27mmol)溶解在純EtOH(5mL)中，向其中加入35mgPd/C，10wt%。反應氫化(45psiH2)2.5小時，期間加入50mgPd/C，10wt%，反應混合物再次氫化(45psiH2)過夜。反應混合物通過硅藻土墊過濾，濃縮濾液得到452mg(76。/。)標題化合物。MS(m/z)=468(M+H)+，'HNMR(300MHz，CDC13)57.75(s，1H)，6.90(d,2H)，6.60(d，2H)，5.05(brd，1H)，4.80(q，1H)，3.70—3.45(m，6H),3.10—2.90(m，4H)，1.40(s，9H),1,15(t，6H).94實施例11實施例10產物(59Smg,1.28mmol)、2-氯-3-硝基吡啶(243mg,1.53mmol)和DIEA(0.67mL，3.83mmol)的EtOH(5mL)溶液在N2中加熱回流。第二天，反應冷卻，另外加入2-氯-3-硝基吡啶(40mg，0.25mmol)禾口DIEA(O.llmL,0.60mmo1)，反應加熱回流1天。然后濃縮反應混合物，殘渣投入至EtOAc(20mL)中。有機相用水(2x20mL)沖洗。合并的洗滌水溶液用EtOAc(2x10mL)反萃取。合并的有機萃取物用0.2N檸檬酸(3x20mL)、水(lxlOmL)、飽和的NaHC03(3x20mL)、鹽水(lxlOmL)沖洗，干燥(MgS04)，過濾，汽提為橙黃色的膠。粗產物通過快速色譜純化，用4:1己烷/EtOAc(Rf=0.14)洗脫得到610mg(81%)紅色油狀的標題化合物。MS(m/z)=590(M+H)+，'HNMR(300MHz，CDC13)510.10(s,1H),8.55(d,1H),8.50(m，1H),7.79(s，1H),7.75(d,2H)，7,15(d，2H),6.80(q，1H)，5.10(brd，1H)，4.卯(m，1H)，3.70-3.45(m，4H)，3.25(m,2H)，3.10(q，2H),1.40(s,9H),U0(t，6H).實施例12向實施例11產物(610mg,1.03mmol)/純EtOH(5mL)溶液中加入60mgPd/C，10wt%。混合物氫化(45psiH2)過夜。第二天，反應混合物通過硅藻土過濾，濾液濃縮得到500mg(87。/。)標題化合物。MS(m/z)=560(M+H)+,'HNMR(300MHz,CDC13)57.85(d,2H)，7.80(s，1H)，7.20(d，2H)，7.05(d,2H),7.00(d,1H),7.75(m,1H),6.20(brs1H),5.15(brs,1H),4.85(m，1H),3.75—3.45(m,4H)，3.40(brs,2H)，3.15(m:2H)，3.05(q,2H),1.40(s,9H),1.15(t，6H).實施例13實施例12產物(141mg，0.250mmol)和CDI(62mg，0.378mmol)的CH2C12(3mL)溶液攪拌過夜。第二天，另外加入CDI(30mg,0.185mmol),反應另外攪拌1天。然后將反應混合物濃縮，投入至EtOAc(10mL)中，有機部分用0.2N檸檬酸(3x5mL)、水(lx5mL)、飽和NaHC03(3x5mL)、鹽水(lx5mL)沖洗，干燥(MgS04)，過濾，濃縮得到69mg(47n/。)泡沫狀的標題化合物，該化合物不需進一歩純化就可使用。MS(m/z)=586(M+H)+，'HNMR(300MHz,CDC13)58.20(brs，1H),8.05(d,1H),7.80(s,1H)，7.65(d,2H),7.90(m,3H),7.05(m，1H),5.15(brd,1H)，4.95(m，1H),3.70—3.45(m，4H)，3.25(appd，2H),3.10(q,2H),1.40(s，9H)，1.15(t,6H).實施例14N々N向4,6-二氯-5-氨基嘧啶(5.0g，30.7mmol)/DMSO(30mL)溶液中加入Na2S'9H20(7.4g，30.8mmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。然后向混合物中加入水(40mL)，溶液減壓蒸發至大約6mL。向此溶液中加入濃HCl(0.5mL)和水以沉淀產物。過濾溶液，用水沖洗橙黃色固體，干燥得到4.3g(86%)標題化合物。'HNMR(300MHz,DMSO-d6)55.84(2H,s)，7.79(1H,s),14.37(1H，brs);MS(m/z):MH+=162.實施例15向溶解在濃NH4OH(4mL)中的實施例14產物(4.3g,26mmol)中加入EtOH(40mL)。向此溶液中分批加入雷內鎳(過量)。反應在室溫下攪拌過夜，然后在8(TC加熱2hr。混合物通過硅藻土過濾，濃縮濾液。粗產物通過快速色譜在二氧化硅上使用EtOAc/己烷進行純化，得到1.6g(47%)的黃色固體標題化合物。'HNMR(300MHz,DMSO-d6)S5.90(2H,s),8.20(2H，s);MS(m/z)MH+=130.實施例16向MeOH(20mL)和HOAc(0.5mL)中的實施例15產物(0.51g，3.9mmol)中加入CH3CHO(0.52mL,9.2mmol)。然后一次性加入NaBH3CN(5卯mg，9.2mmol)。反應在室溫下攪拌過夜，另外加入HOAc、CH3CHO和NaBH3CN。反應攪拌過夜，濃縮，殘渣投入進EtOAc和飽和NaHC03中。分離的水層用EtOAc反萃取。合并的有機層干燥，濃縮成殘渣。殘渣溶解在MeOH中，如上所述用HOAc、CH3CHO和NaBH3CN處理。在上述處理步驟之后，粗產物通過快速色譜在二氧化硅上使用EtOAc/己烷進行純化，得到0.35g(57%)黃色油狀的標題化合物。'H麗R(300MHz，CDC3)51.35(3H，q，12Hz),3.29(2H,m)，4.21(1H，bs),8.04(1H，s),8.36(1H,s);MS(m/z):MH+=158,實施例17向溶解在DMF(1mL)中的實施例16產物(70mg，0.45mmol)中加入TEA(93^L)和異煙酰氯(0.12g,0.67mmol)。反應混合物在室溫下攪拌2天，然后在EtOAc和飽和的NaHC03之間萃取。分離的水層用EtOAc反萃取。合并的有機層干燥，濃縮得到67mg(57n/。)的標題化合物，該化合物不需進一步純化就可使用。'HNMR(300MHz,CDC13)S1.26(3H)，3.65-3,69(1H),4.21(1H)，7.17(2H),8.43(1H),8.54(2H)，8.86(1H)注意'HNMR顯示，所有峰都很寬大證明有旋轉異構體存在；MS(m/z):MH+=263。實施例18向含有實施例17產物(O.llg,0.42mmol)和實施例8產物(0.135g，0.38mmol)的IPA(2.5ml)溶液中加入DIEA(0.35ml,1.9mmol)。反應混合物在密封管中在13CTC下攪拌2天。粗混合物濃縮，油通過快速柱色譜使用0-10。/。MeOH/CH2Cl2溶劑梯度進行純化，得到油狀的標題化合物。'HNMR(300MHz,CDC13)51.16(1.2H,m)，1.26-1.31(1.8H,m):1.50-1.53(9H,d,J=9Hz),3.0(1H,m),3.2(0.8H,m)，3.36(1.2H,m)，4.12-4.18(1.2H，m)，4.96-5.10(.8H，m),5.80-5.95(1H，m),6.93-6.96(1H,m),7.07(1H,m),7.31-7.45(5H,m)，7,66-7.75(3H,m),8.06(1H,m):8.44-8.51(2H，m);HPLC/MS:1.29min的單峰，MH^581.實施例19,NN人NOMeN〇2在0°C下在N2中向2，4-二氯-5-石肖基嘧啶(2.0g，10.3mmol)/MeOH(7mL)中逐滴加入NaOMe(0.5M，于MeOH中，25mL)。添加結束后，反應混合物在0°C攪拌15min。然后加入二乙胺(5mL)，混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物濃縮，殘渣在EtOAc和H20之間萃取。干燥有機層，并濃縮成殘渣，通過快速色譜在二氧化硅上使用EtOAc/己烷純化，得到米白色固體的標題化合物(l.lg，4.9mmo1，47%產率)。NMR(300MHz，CDC13)51.26(6H，t,J=6.6Hz),3.70(4H,m)，4.08(3H，s),9.01(1H，s);HPLC/MS:MH+=227.實施例20,N、N人NOMeNH2實施例19產物(1.1g，4.9mmol)于MeOH/EtOAc(l:l，20mL)中用Pd/C(5%degussa，0.5g)和H2(50psi)在Parr振蕩器中還原過夜。過濾反應混合物，濾液減壓濃縮得到固體的標題化合物(0.85g，4.3mmol，88.5%產率)。'HNMR(300MHz，CDC13)5U8(6H,t，6.9Hz),3.03(2H,br)，3.57(6H,t，6.9Hz),3.96(3H,s)，7.71(1H,s);HPLC/MS:固+=197.99實施例21向含有實施例20產物(0.85g,4.3mmol)的CH2C12(15mL)和TEA(1.4mL，10mmol)中加入異煙酰氯鹽酸鹽(1.13g，6.3mmol)。15min后，TLC顯示沒有初始原料。混合物在EtOAc和飽和的NaHC03之間進行萃取。水層用EtOAc沖洗兩次。合并的有機層用飽和NaHC03和鹽水沖洗。在MgS04上干燥并過濾。濾液濃縮得到褐色固體的標題化合物(1.3g,4.3mmol，100%產率)。'H應R(300MHz,CDC13)51.20(6H，t,J=6.9Hz)，3.60(4H，q，6.9Hz)，3.96(3H，s)，7.72(2H,d,/=6.0Hz),7.75(m，bs),8.80(2H，d,J=6.0Hz)，8.89(1H，s);HPLC/MS:MH+=302.實施例22向實施例21產物(100mg,0.33mmol)/THF(1mL)中加入KOtBu(1M，在THF中，0.5mL)，然后緩慢地加入Etl(40pL，0.5mmol)。反應混合物在室溫下攪拌過夜。TLC顯示初始原料消失。混合物在EtOAc和H20之間進行萃取。水層用EtOAc沖洗。合并的有機層用飽和NaHC03和鹽水沖洗。干燥濃縮得到標題化合物(90mg，0.27mmol，83%)，該化合物不需進一步純化就可使用。"HNMR(300MHz，CDCl3)51.10(9H,m),3.47(5H，m),3.92實施例23向實施例22產物(200mg，0.61mmol)/DMF(4mL)中加入EtSNa(66mg，0.79mmol)，反應混合物在100°C加熱1hr。LC/MS顯示仍有初始原料存在。加入另一部分NaSEt(66mg，0.79mmo1)，反應另外加熱2hr。LC/MS顯示僅有產物。減壓去除DMF，加入水(10mL)，然后加入濃HC1(0.132mL)。蒸發溶劑得到殘渣。該殘渣溶解在EtOH中，并過濾。濃縮濾液得到標題化合物(190mg，100%)，該化合物不需進—步純化就可使用。'HNMR(300MHz,CD3OD)51.24(9H,m)，3.60(4H,m),3.60-4.00(2H，br)，8.12(3H，d，5.7Hz),8.92(2H，d，5.7Hz);HPLC/MS:MH+=316.實施例24向實施例23產物(70mg，0.22mmol)/POCl3(3mL)中在室溫下加入二乙基苯胺(30pL)。反應混合物加熱至10(TC30min。然后濃縮。殘渣在EtOAc和H20之間進行萃取。有機層用H20沖洗兩次。然后干燥，濃縮得到標題化合物(50mg，0.15mmol，68%)，該化合物不需進一步純化就可用于下一反應中。HPLC/MS:MH+=334。實施例25<formula>formulaseeoriginaldocumentpage102</formula>向含有實施例24產物(50mg,0.15mmol)和實施例8產物(60mg，0.17mmol)的IPA(0.75mL)溶液中加入D正A(0.15mL，0.8mmol)。反應混合物在密封管中在130度攪拌7天。粗混合物濃縮，殘渣通過制備性HPLC和硅膠快速色譜進行純化，得到米白色的固體(10mg)。1H麗R(300MHz,CDC13)S1.10-1.30(9H,m)，1.48(4.5H，s),1.51(4.5H,s)，2.80-3.38(3H,m),3.53(4H，m),4.05-4.30(1H，m)，4.83(0.5H，m)，4.96(0.5H,m),5.15-5.50(1H，m),6.95-7.10(2H,m),7.25-7.50(5H,m)，7.69(0.5H,d,J=8.4Hz),7.76(0.5H,d,J=8.4Hz),8.08(1H，d，J=5.1Hz),8.51(2H，m)，8.83(0.5H,br),8.95(0.5H,br);HPLC/MS:MH+=652.實施例26步驟AHQoHO'。力'nbH40kDa3-臂PEG醇NOF公司&oN—oVN、.No實施例26B實施例26A40kDa3-臂PEG醇(0.25g,0.00625mmol)、實〗的產物(0.04g,實施例實施例26Ao,一一t0.056mmol)和三苯基膦(0.025g，0.094mmol)通過共沸蒸餾從甲苯(5mL)中進行干燥。一半的體積被蒸餾掉(2.5mL)，混合物冷卻至室溫。加入CH2Cl2(0.5mL)使反應物成為均相。逐滴加入偶氮二羧酸二乙酯(0.015mL,0.094mmol)，反應攪拌48小時。HPLC方法C顯示初始的PEG醇完全消失。反應物真空濃縮得到白色固體的實施例26A的叔丁酯。實施例26B實施例26A(0,2g，0.005mmol)溶解在甲酸(3mL)中，在40°C加熱24小時。反應物真空濃縮，根據HPLC方法A純化得到0.1g(48。/。)白色固體的實施例26B。HPLC方法C測定共軛物>99°/。純度(滯留時間=8.1分鐘)。'HNMR(CDC13)59.08(bs,3H)，8.84(bs，3H),8.18-8.16(d,3H),8.02-8.00(d,3H)，7.67-7.61(m,6H)，7.47-7.38(m，9H),7.08-7.04(m，3H),6.91(m,3H),4.88(m，3H),4.62-4.49(dd,6H)，4.13(m,6H)，3.64(bs，5919HPEG),3.23(m，6H),1.25-1.24(d,18H).步驟BGL400SunbrightPEG(50.0g,NOFlot#M4N594)、實施例5的產物(7.19g，與GL400相比9當量，3當量/羥基)和三苯基膦(2.95g，9當量)的混合物投入至甲苯(300mL)中，并共沸蒸餾去除水。混合物冷卻至室溫，并經旋轉蒸發另外去除一定量的剩余甲苯。混合物再次溶解在無水二氯甲垸(180mL)中，并在冰浴中冷卻。經注射驅動裝置經1小時加入偶氮二羧酸二異丙酯(DIAD,2.27g，2.17mL，9當量)。混合物在冰浴中攪拌1.5h，期間HPLC分析指示完全轉變為實施例26A。粘性反應混合物緩慢并同時攪拌地經細頸漏斗加入至75:25MTBE/IPA(4.0L)混合物中，并攪拌1小時。經真空過濾收集沉淀物，用MTBE(200mL)洗滌，真空干燥得到純化的實施例26A(51.5g)。實施例26A(51.4g)投入至甲酸(250mL)中，并加熱接近回流1.0h，期間HPLC分析指示完成了去保護。混合物冷卻至室溫，通過旋轉蒸發去除一部分甲酸(100mL)。混合物用二氯甲烷(50mL)稀釋。然后粘性反應混合物加入至75:25MTBE/IPA(4.0L)的混合物中并同時攪拌，104且攪拌45min(Note4)。經真空過濾收集沉淀物，用MTBE(300ml)洗滌，并真空干燥(<1Torr，24h)得到實施例26B(50.0g)。該物質投入至二氯甲垸(400mL)中，并經燒結玻璃布氏漏斗("拋光過濾(polishfiltration)")過濾。濾液經旋轉蒸發濃縮至200mL的體積，緩慢地并同時攪拌地加入至MTBE/IPA(4.0L)的75:25混合物中。經真空過濾收集沉淀物，用MTBE(300ml)洗滌，并真空干燥(<1Torr,3天)，得到實施例26B(48.8g,94%)。使用類似的方法合成下列共軛物:實施例27實施例2740kDa4-臂PEG醇與實施例5的產物偶聯，并使用與實施例26類似的方法去保護成為終產物。根據HPLC方法A純化該產物。HPLC方法(3測定共軛物〉95%純度(滯留時間=7.5-8.1分鐘)。'HNMR(CDC13)59.08(bs,4H)，8,84(bs，4H)，8.18-8.16(d,4H)，8.02-8.00(d,4H),7.67-7.61(m,8H),7.47-7.38(m,12H),7.08-7.04(m,4H)，6.91(m，4H)，4.88(m，4H),4.62-4.49(dd，8H)，4.13(m，8H),3.64(bs,10101HPEG),3,23(m,8H)，1.25-1.24(d，24H).實施例28、,實施例2840kDa3-臂PEG醇與來自實施例18的叔丁酯產物偶聯(下面顯示)，使用與實施例26類似的方法去保護成為終產物。根據HPLC方法A純化產物。HPLC方法C測定共軛物〉95%純度(滯留時間=7.3分鐘)。'HNMR(CDC13)58.66(bs,3H),8.44(bs，3H),8.04-8.02(d,3H),7.75-7.30(m,24H)，7.10-7.06(m,3H),6.93(s,3H)，5.60-5.50(m，3H),4.15(m,6H),3.66(bs,4270HPEG),3.00(m,3H),3.40-3.20(m,6H),1.27(d,9H).<formula>formulaseeoriginaldocumentpage107</formula>實施例29實施例29A40kDa3-臂PEG醇(0.00625mmol)、來自實施例13的產物(0.056mmol)和三苯基膦(0.094mmol)通過共沸蒸餾從甲苯(5mL)中干燥。一半的體積被蒸餾掉(2.5mL)，該混合物冷卻至室溫。加入CH2C12(0.5mL)使反應物成為均相。逐滴加入偶氮二羧酸二乙酯(0.094mmo1)，反應攪拌48小時。反應物真空濃縮得到實施例29A的叔丁酯。實施例29B實施例29A(0.005mmol)溶解在甲酸(3mL)中，在40°C加熱24小時。反應物真空濃縮，根據HPLC方法A純化得到實施例29B。實施例30實施例3040kDa3-臂PEG醇與來自實施例25的叔丁酯產物偶聯，使用與實施例26類似的方法去保護形成終產物。根據HPLC方法A純化該產物。參考文獻下面的出版物、專利和專利申請以上標數字在本申請中引用1Hemler和Takada，歐洲專利申請公開第330,506號，于1989年8月30日公開2Elices等人，Cell,60:577-584(1990)3Springer,Nature,346:425-434(1990)4Osborn,Cell,62:3-6(1990)5Vedder等人，Surgery，106:509(1989)6Pretolani等人，J.Exp.Med.,180:795(1994)7Abraham等人，J.Clin.Invest"93:776(1994)8Mulligan等人，J.Immunology,150:2407(1993)9Cybulsky等人，Science,251:788(1991)10Li等人，Arterioscler.Thromb.,13:197(1993)11Sasseville等人，Am.J.Path.,144:27(1994)12Yang等人，Proc.Nat.Acad.Science(USA)，90:10494(1993)13Burkly等人，Diabetes,43:529(1994)14Baron等人，J.Clin.Invest"93:1700(1994)15Hai碰n等人，J.Immunology,152:3238(1994)16Yednock等人，Nature,356:63(1992)17Baron等人，J.Exp.Med.,177:57(1993)18vanDinther-Janssen等人，J.Immunology,147:4207(1991)19vanDinther-Janssen等人，Annals.RheumaticDis.,52:672(1993)20Elices等人，J.Clin.Invest.,93:405(1994)21Postigo等人，J.Clin.Invest"89:1445(1991)22Paul等人，Transpl.Proceed"25:813(1993)23Okarhara等人，Can.Res.，54:3233(1994)24Paa雨en等人，Int.J.Can.,58:298(1994)25Schadendorf等人，J,Path.,170:429(1993)26Bao等人，Diff.,52:239(1993)27L雄-i等人，BritishJ.Cancer,68:862(1993)28Kawaguchi等人，JapaneseJ.CancerRes"83:1304(1992)29Kogan等人，美國專利第5,510,332號，于1996年4月23日授權30國際專利申請公開WO96/0164431Thorsett等人，美國專利第6,489,300號，于2002年12月3日授權和Kom'adi等人，美國專利第66，492，372號，于2002年12月10曰授權。上面的所有出版物、專利和專利申請以其全部內容作為參考引入本文，引用的程度與各個獨立的出版物、專利或專利申請具體地和個別地指出以其全部內容作為參考引入的程度相同。權利要求1.一種制備活性化合物的共軛物的方法，其包括a)將聚合醇與具有酸性氫的親核活性化合物在Mitsunobu條件下反應；和b)分離共軛物。2.根據權利要求1所述的方法，其中所述的條件包括三價膦和偶氮二甲酰化合物。3.—種制備式I的共軛物的方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>B是任選地共價結合于有分支臂的主干分子的生物相容性聚合物部分;q為大約1至大約100;在每種情況下A都獨立地是式II化合物其中R"是與任選地包括連接基團的聚合物部分結合的共價鍵，或R"是-H、R31'、-NH2、-NHR31M-N(R31')2、-NC3-C6環基、-OR31'、-SR31'，其中每個R"'獨立地是任選取代的直鏈或支鏈的CrC6或其藥學上可接受的鹽J選自a)式(a)的基團烷基、任選取代的C3-C6環烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基，且R"是與任選地包括連接基團的聚合物部分結合的共價鍵，或R32是-H、-N02、卣代垸基或基團-N(MR")R42，其中M是共價鍵、-C(0)-或-S02-，R"是R"'、N(R"')2或陽OR41,，其中每個R"'獨立地是氫、任選取代的直鏈或支鏈的C,-C6烷基、任選取代的環烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜環或任選取代的雜芳基，其中任選的取代基是鹵素、d-C6烷基、或-OCi-C6烷基，且R42是氫或R"';禾口b)式(b)的基團其中R選自與聚合物部分結合的共價鍵、氨基、羥基、取代的氨基、烷基、烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、雜環氧基、硫醇、芳硫基、-K方訓L巫、水^T別li泰不w，1、口、」>兀泰，升丫^:'r安、簽、Ml、tTJ安、基、垸基和取代的烷基任選地與聚合物部分共價連接，其中，在每種情況下，聚合物部分任選地包括與聚合物部分共價連接的連接基團；Ar'選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與Ar1共價連接；A一選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中所述聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與A一共價連接；X選自-NR'-、-O-、-S-、-SO-、-802和任選取代的-0^2-，其中R1選自氫和烷基;T選自;a)式(c)的基團人其中Y選自-O-和-NR'-，其中R'選自氫和垸基；W選自與任選地包括連接基團的聚合物部分連接的共價鍵、和-NR2R3，其中W和P獨立地選自氫、烷基、取代的烷基、以及其中W和R3與其結合的氮原子一起形成雜環或取代的雜環，其中每個垸基、取代的垸基、雜環和取代的雜環任選地與聚合物部分共價結合，所述聚合物部分任選地進一步包括連接基團；m是等于0、l或2的整數；n是等于0、l或2的整數；和b)式(d)的基團其中G是任選取代的芳基或任選取代的含有0至3個氮的雜芳基5或6元環，其中所述的芳基或雜芳基任選地進一步包括與任選地包括連接基團的聚合物部分結合的共價鍵；W是與任選地包括連接基團的聚合物部分結合的共價鍵，或W是-H、垸基、取代的烷基或-CH2C(0)R17，其中R'7是-OH、-OR'8或-NHR18，其中R"是烷基、取代的垸基、芳基或取代的芳基;R"選自氨基、取代的氨基、垸氧基、取代的烷氧基、環烷氧基、取代的環垸氧基、芳氧基和取代的芳氧基、和-OH;A.R、Ar1、A一和T的至少一個含有與聚合物部分結合的共價鍵;B.當R與聚合物部分共價連接時，n是1且X不是-O-、-S-、-SO-條件是:C.當X是-O-或-NR'-時，則m是2;且D.式I的共軛物的分子量不超過100,000;所述方法包括下列的步驟c)將式Ia的聚合醇其中B如上所述，在式PR3的三價膦和偶氮二羧酸二垸基酯的存在下加入至式H-Nu的親核試劑，以形成式I的化合物，其中Nu是上述式A的基團；并分離式I的化合物。4.根據權利要求1所述的方法，其中J、A一和T中只有一個含有與聚合物部分結合的共價鍵。5.根據權利要求1所述的方法，其中q是從1至大約20的整數。6.根據權利要求1所述的方法，其中q是從1至大約8的整數。7.根據權利要求1所述的方法，其中在每種情況下A獨立地是式IIa的化合物8.根據權利要求1所述的方法，其中在每種情況下A獨立地是式lib的化合物9.根據權利要求1所述的方法，其中在每種情況下A獨立地是式IIc的化合物10.根據權利要求1所述的方法，其中所述的親核活性化合物是下式的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中J選自a)式(a)的基團其中R"是與任選地包括連接基團的聚合物部分結合的共價鍵，或R3'是-H、R31'、-NH2、->^1131'或->1(1131')2、-NC3-C6環基、-OR<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>SR31'，其中每個R"'獨立地是任選取代的直鏈或支鏈的C,-Q垸基、任選取代的C3-C6環烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基，且R"是與任選地包括連接基團的聚合物部分結合的共價鍵，或R32是-H、-N02、鹵代垸基或基團-N(MR")R42，其中M是共價鍵、-C(0)-或-S02-，R"是R"'、N(R"')2或-OR"'，其中每個R"'獨立地是氫、任選取代的直鏈或支鏈的C,-Q烷基、任選取代的環烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜環或任選取代的雜芳基，其中任選的取代基是鹵素、C,-C6垸基、或-OC,-C6院基，且R"是氫或R41、和b)式(b)的基團其中R選自與聚合物部分結合的共價鍵、氨基、羥基、取代的氨基、烷基、烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、雜環氧基、硫醇、芳硫基、雜芳硫基、雜環硫基和取代的烷基，其中每個氨基、取代的氨基、烷基和取代的烷基任選地與聚合物部分共價連接，其中，在每種情況下，聚合物部分任選地包括與聚合物部分共價連接的連接基團；Ar'選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與Ar1共價連接；A—選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基，其中每個芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基任選地與聚合物部分共價連接，其中所述聚合物部分任選地包括連接基團，所述連接基團將聚合物部分與A一共價連接；X選自-NR'-、-O-、-S-、-SO-、-S02和任選取代的-CHr，其中R1選自氫和烷基；T是帶有酸性氫的基團；且R"是酸保護基團。11.根據權利要求io所述的方法，其中所述的親核活性化合物具有下式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中R"是酸保護基團。12.根據權利要求ll所述的方法，其中R"是C「CV烷氧基。13.根據權利要求11所述的方法，其中m是l，X是S，且R在每種情況下都獨立地選自羥基、烷氧基、烷基或與聚合物部分連接的共價鍵。14.根據權利要求12所述的方法，其中n是2，且R在兩種情況下都是甲基。15.根據權利要求1所述的方法，其中所述的親核活性化合物具有下式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中R"是酸保護基團。16.根據權利要求15所述的方法，其中R"是CVC6烷氧基。17.根據權利要求15所述的方法，其中G是吡啶基，R"是氫或二垸基氨基，且R"是磺酰胺、酰胺或脲。18.根據權利要求1所述的方法，其中所述的親核活性化合物是19.根據權利要求1所述的方法，其中所述的聚合醇是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>:共軛物的總Mw為大約41,500)、(共軛物的總Mw為大約42，000)、或<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>(共軛物的總Mw為大約41,500》20.根據權利要求1所述的方法，其中所述的聚合醇選自A列中的基團，且親核活性化合物選自B列中的基團(共軛物的總Mw為大約42,000)(共軛物的總Mw為大約41,500)21.根據權利要求1所述的方法，其中所述的聚合醇在三價膦和偶氮二羧酸二烷基酯的存在下，在至少一種溶劑中加入至式H-Nu的親核試劑。22.根據權利要求21所述的方法，其中所述的偶氮二羧酸二垸基酯選自偶氮二羧酸二乙酯、偶氮二羧酸二異丙酯、4-甲基-l,2，4-三唑烷-3,5-二酮、N，N，N'，N'-四甲基偶氮二羧酰胺、偶氮二羧酸二哌啶、二(N-4-甲基哌嗪-l-基)偶氮二羧酰胺、二嗎啉代偶氮二羧酰胺和偶氮二羧酸二叔丁酯。23.根據權利要求22所述的方法，其中所述的偶氮二羧酸二烷基酯選自偶氮二羧酸二乙酯、偶氮二羧酸二異丙酯、4-甲基-l,2,4-三唑烷-3,5-二酮、N，N,N',N'-四甲基偶氮二羧酰胺、偶氮二羧酸二哌啶和偶氮二羧酸二叔丁酯。24.根據權利要求21所述的方法，其中所述溶劑是氯化溶劑或醚溶劑。25.根據權利要求24所述的方法，其中所述的溶劑是二氯甲烷或四氫呋喃。26.根據權利要求21所述的方法，其中所述的三價膦選自三苯基膦、三甲基膦、三乙基膦、三丁基膦、1,2-雙-(二苯基膦基)乙垸、聚合物結合的膦和水溶性膦。27.根據權利要求26所述的方法，其中所述的三價膦是三苯基膦。28.根據權利要求1所述的方法，其中所述的共軛物是使用聚合醇/親核活性化合物組合1、2或3制備的組合聚合醇親核活性化合物(共軛物的總Mw為大約42,000)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>全文摘要本發明公開了使用Mitsunobu條件制備農業用、治療用和食品添加劑化合物的聚合共軛物的方法。文檔編號A61K31/506GK101505800SQ200680031902公開日2009年8月12日申請日期2006年7月7日優先權日2005年7月8日發明者A·W·康拉迪,C·M·謝姆科,J·L·史密斯,M·S·達彭申請人:艾倫藥物公司