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一種從煙草下腳料提取液中分離煙草總生物堿的方法

文檔序號:1178679閱讀:380來源:國知局
專利名稱:一種從煙草下腳料提取液中分離煙草總生物堿的方法
技術領域
本發明涉及一種中藥有效成分的提取分離方法,特別是涉及一種從煙草下腳料提取液中 提取分離煙草總生物堿的方法,屬中藥領域。
背景技術
生物堿是自然界中廣泛存在的一大類堿性含氮化合物,是許多中草藥的有效成分,是自 然界中存在的一類重要物質。煙草起源于美州、大洋州和南太平洋的一些島嶼。目前發現有 66個種,被栽培利用的僅有2個種,即普通煙草(N.tabacum丄.)又叫紅花煙草、和黃花煙 草(NrusticaL.)。由于當今煙民已達數億人之多,煙草已經成為世界范圍內的主要經濟作物。 在巻煙生產中,不可避免地產生了大量煙草下腳料、煙梗等,造成了巨大的浪費和污染。現 今,煙草下腳料主要用于提取煙堿。煙草中含有以煙堿為代表的總生物堿,其中煙堿具有多 種生理活性。煙堿俗稱尼古丁,屬于中藥生物堿中的吡啶族生物堿,它對人類有很強的生理 作用,攝入適量的煙堿,能興奮精神,消除疲勞,增加思維能力,提高工作效率,但過量的 煙堿能起抑制和麻痹作用。煙堿具有廣泛的用途(1)作為制造參與人體新陳代謝,改善末 梢神經功能、擴張血管、治療心血管疾病藥物的天然原料。(2)用于制造高效農藥,對各類 害蟲,觸殺、薰蒸效果都很好。由于它是天然物質,它的最大特點是沒有殘毒,不造成二次 污染,不產生抗藥性,是保護生態環境的生物活性農藥。(3)用于制造食品、營養保健品、 香精香料、化妝品、動物飼料的添加劑。(4)用于香煙加味劑、制造減肥藥,戒煙藥及其它 化工、生化試劑等。(5)煙堿酸可防老年癡呆(6)使用煙堿防治儲糧害蟲。因此合理利用煙 草下腳料,為煙堿的生產尤其是找到一條能耗小、工藝簡單、污染小的煙草總生物堿的制備 方法迫在必行。
現階段,中藥生物堿的提取工藝已較成熟,根據生物堿的理化特性,采用適宜的溶劑如 水、酸水、酸醇及堿醇等,利用浸漬、滲漉、煎煮、回流、超聲、酶解等技術將生物堿類成 分提取出來,提取率能達到90%以上。但由于生物堿在中藥中的相對含量較低(多數含量為 0. 01%-1%),提取時勢必引入大量的其他藥物成分和雜質類成分,要保證最后制劑的安全有效, 必須對其進行精制純化,制備成有效部位甚至有效成分來應用,因此生物堿有效部位的精制 純化技術就顯得十分重要。但由于其他多種成分的并存以及淀粉、樹膠、果膠、粘液質、色 素等雜質的干擾,生物堿有效部位的精制技術一直是中藥現代化的"瓶頸",嚴重影響了現代 中藥制劑對三效(高效、速效、長效)、三小(劑量小、毒性小、副作用小)、五方便(生產、 運輸、攜帶、貯存、應用方便)的要求。
3雖然在教科書及各種文獻中多有提取分離中藥總生物堿的方法,但這些方法僅停留于實 驗室的研究水平,多數是將含有生物堿的溶液過柱后,以氨液或NaOH溶液洗脫,收集洗脫液 后再以有機溶劑萃取生物堿;或者將上過樣品的樹脂以堿液浸泡,然后再用有機溶劑回流提 取生物堿。但這些方法具有步驟繁瑣,有機溶劑用量大、大設備無法實現和生物堿轉移率低 等缺點,因而一直處于實驗室研究水平,不能在大生產中應用。以碎次煙葉、煙梗等下腳料 為原料制取煙堿的方法,見諸報導的有水煮、干餾、離子交換或溶劑提取,均是從煙草中提 取出總生物堿后再經過其他工序精制后得煙堿。這些方法都或多或少存在一些缺陷,或步驟 繁瑣,或能耗大,或工藝要求苛刻,或溶劑、廢水污染環境等。在中國專利申請CN95110466.7 中提出了一種最新的從煙草下腳料中提取分離煙堿的技術是用離子交換樹脂法,基本過程為 將煙草藥材脫鈣后的酸性水液,通過強酸型陽離子交換樹脂柱,用混合堿液洗脫,收集洗脫 液,再通過蒸發濃縮、多級離心萃取和真空精餾等工序,即得煙堿純品。這種方法避免了大 量有機溶劑的使用,具有一定的進步性,但仍存在嚴重缺陷試驗中可以發現該法通過混合 堿液堿化煙草總生物堿進行洗脫,雖可以提高生物堿的純度,但由于混合堿液的存在,抑制 了煙堿的電離,降低了煙堿的水溶性,導致轉移率仍然不高;同時,步驟繁瑣,對設備要求 較高。故為了適應市場及生產,需要一種安全、低成本、收率高的提取分離方法。

發明內容
本發明的目的是提供一種安全、低成本、高效率的提取分離煙草總生物堿的方法。 該發明目的是通過如下工藝實現的取煙草提取液,調整pH值l至7,濾過,取濾液加
于陽離子交換樹脂柱上,先以水洗脫除雜,再用0.5% 15%酸液洗脫,收集洗脫液,加堿中 和,經脫鹽處理,即得煙草總生物堿。
在上述工藝過程中,將含有總生物堿的提取液調至合適的酸度后,生物堿電離成為陽離 子,非堿性物質不被電離,提取液過陽離子交換樹脂柱后,電離的生物堿有機離子與樹脂柱 上的氫離子交換而被牢固地吸附于樹脂柱上。這里提取液的pH值不宜過高或過低,如果過 高,提取液呈中性或堿性,生物堿不能電離,也就不能完成樹脂上的交換過程;如果過低, 提取液中的氫離子濃度太高,阻礙了樹脂柱上的氫離子解離,同樣不能很好地完成樹脂交換 過程,因而實驗中發現調整提取液的pH值為1至7是比較合適的。以水洗脫時,使用的是 去離子水,以確保不引入新的離子干擾,洗脫時那些沒有被樹脂吸附的非堿性物質就很容易 被水洗脫下來,從而與被吸附在樹脂柱上生物堿有機離子分離了。此后再加較高濃度的酸液 進行洗脫,由于此時酸液中的氫離子濃度很高,就會競爭性地與樹脂相結合,從而將吸附在樹脂柱上的生物堿有機離子交換下來,溶解在酸洗脫液中,流出樹脂柱,完成生物堿的富集 過程。之后,在洗脫液中加入堿中和掉多余的酸,再經常規脫鹽處理,即可得到純度較高的 煙草總生物堿了。
該工藝過程與現有技術相比,工藝流程簡單,不使用有機溶劑、無樹脂單體成分殘留、 生物堿轉移率高;其重要的貢獻還在于,打破了傳統理論認為的離子交換能力順序規律,艮P: Ca2+>K+^NH4+>Na+>H+。正是在這一傳統理論的影響下,所有關于煙草總生物堿的離子交換 樹脂分離法中都是堿液或氨液進行洗脫,或者先用堿液中和樹脂柱再用有機溶劑回流提取理 論上已經游離的生物堿,而實際應用中的效果非常不理想且不適于大生產。在本發明的技術 方案中,雖然氫離子的交換能力是最弱的,但通過提高酸洗脫液中氫離子的濃度,從而抵消 了其交換能力弱的缺點,同時在酸性條件下,可以使交換下來的生物堿迅速溶解到酸液中, 并被沖出柱子,由此保證了生物堿的洗脫效果。并且,以酸液進行洗脫,在洗脫的同時,也 使陽離子交換樹脂柱得以再生,從而可以循環使用,減少了堿液洗脫后再生樹脂柱的過程, 降低了成本。本發明的技術完全突破了現有技術中以堿液洗脫的傳統觀念和工藝過程,取得 了意想不到的效果,極大的提高了煙草總生物堿的得率,使陽離子交換樹脂在工業生產中用 于精制分離煙草總生物堿成為可能。
基于上述工藝過程,發明人又進行了進一步的研究,細化各步驟的參數,篩選出最優方
案,具體內容如下-
1、 上柱前調整藥液的pH值范圍優選為2至5,效果更加明顯。
2、 所用的陽離子交換樹脂可以是大孔型或凝膠型強酸型離子交換樹脂,在實際使用時可 以根據情況處理成氫型、鈉型或銨型中的任一種。
3、 所用陽離子交換樹脂柱的柱徑與柱高之比并無一定之規,但考慮生產實際,柱徑柱
高=1: 5 1: IO時可以取得最好的效果。
4、 給樹脂柱上樣的藥液濃度為每ml相當于生藥0.1 3g,具體情況可以根據藥液的前 處理方式決定,如果是采用浸漬、滲漉等方式,得到的藥液就會比較稀;而如果是回流提取、 煎煮等方式,尤其是經過濃縮處理,藥液的濃度就會比較大,但只要是在這個范圍內,都能 實現上樣。同時,上樣速度也根據藥液的濃度進行適時調整,基本滿足在0. 5 5倍柱體積/ 小時即可。
5、 上樣方式一般選擇為從柱上端上樣,藥液靠自流力而流過整個柱子;發明人發現,如 果逆流上樣,即將藥液從柱子底端上樣,通過一定的壓力,使藥液注滿整個柱子,這種上樣 方式可以發揮柱子的最大交換效率,也避免了從上端上樣時由于生物堿交換不完全而發生的提前穿透問題。這一點也是發明人創造性的發現。
6、 洗脫所用的酸液優選為鹽酸溶液或硫酸溶液,其濃度均優選為3% 6%。
7、 洗脫時洗脫液的流速不宜過快或過慢,如果過快,則氫離子與生物堿有機離子的交換 不充分,酸液浪費較多;如果過慢,則解離下來的生物堿有機離子可能又重新吸附回樹脂柱 上,影響洗脫效率。實驗發現,洗脫速度保持在2 6倍柱體積/小時為宜。進一步優選,洗 脫速度保持在4 6倍柱體積/小時最好。
8、 發明人還發現,如果想更高地提高洗脫效率,可以在水洗脫除雜后,不立即進行酸液 洗脫,而是先在樹脂柱中充滿酸液并靜置2小時以上, 一般不需超過12個小時,再進行洗脫。 經過靜置后,大量的生物堿有機離子己被氫離子交換下來,或者處于半吸附半解離的狀態, 此時進行洗脫,生物堿富集效果明顯,洗脫效率明顯提高。
9、 為了進一步提高洗脫效率,還可以在洗脫用的酸液中加入少量NHX1、 NaCl或CaCl2, 加入量不宜過少或過多,如果過少,則起不到作用;如果過多,則因鹽濃度過高易鹽析而影 響生物堿有機離子的溶解度。實驗發現,洗脫液中以NH/、 Na+或Ca2+濃度為0.1 lmol/L時 為佳,進一步優選,NH4+、 Na+或Ca2+的濃度為0.1 0.3mol/L時最好。
10、 工藝中所說的脫鹽方法可以是透析法除鹽、膜濾過除鹽以及其他各種藥物生物領域 常規的除鹽方法,目前這些方法都已經比較成熟,并可以管道化生產。
11、 該方法中所說的煙草下腳料提取液可以通過浸漬、滲漉、超聲、微波或煎煮中的任 一種方式提取制得,并且提取的溶媒可以是水、酸水、乙醇溶液、酸性乙醇溶液中的任一種, 但都屬于目前中藥領域的常規提取方法。區別點在于,如果是用浸漬或滲漉方法制得,可以 直接上樣;如果是用其他方法提取得到的,還要經過醇沉、過濾或離心除雜等步驟,以保證 上樣的順利。
需要說明的是,上述優選的技術參數,可以根據實際情況的需要,與基本工藝進行任意 組合,且均能取得良好的效果,解決技術問題,達到本發明的目的。 下面通過對比實驗來說明本發明的優點。 一、實驗方案-
取煙草下腳料1500g,加pH=4的酸水煎煮2次,每次10倍量,煎煮2小時,合并煎煮 液,離心,濾液稀釋至3000ml并調節p^3,均分成三份,分別按以下步驟處理
①根據現有技術,取上述提取液1000ml,上陽離子交換樹脂(001X7,氫型,徑高比l: 5),再用混合堿液(總堿含量6%,其中順3: NaOH=4: 1)洗脫,洗脫速度為5倍柱體積/小時, 至生物堿檢査為陰性,收集洗脫液,調至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。② 根據本發明的技術,取上述提取液1000ml,上陽離子交換樹脂(001X7,氫型,徑高 比h 5),以去離子水洗至注出液無色,再用3%鹽酸溶液洗脫,洗脫速度為5倍柱體積/小時, 至生物堿檢査為陰性,收集洗脫液,用氫氧化鈉中和至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總 生物堿。
③ 根據本發明的技術,取上述提取液1000ml,上陽離子交換樹脂(001X7,氫型,徑高 比l: 8),逆流上樣,以去離子水洗至注出液無色,加0.1mol/L的NaCl的3X鹽酸溶液至全 柱,靜置2個小時,再用上述溶液以5倍柱體積/小時的速度洗脫,至生物堿檢査為陰性,收 集洗脫液,用氫氧化鈉中和至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。
二、 結果計算分別稱量三種工藝所得煙草總生物堿的重量,并與藥材量相除,得總生 物堿的收率;以酸堿滴定法對三種方法所得總生物堿進行含量測定,計算總生物堿的純度。
三、 結果對比,見下表
三種工藝的效果評價表
工藝l工藝2工藝3
收率2. 7%3. 1%3.3%
純度68%85%89%
成本堿液用量很大,洗脫效率 低;最后成本高洗脫效率高,酸液用量少, 成本低酸洗脫液的用量減少,成 本更低
時間周期長,至少需8小時周期短,僅需要5小時周期短,僅需要4.5小時
復雜程度洗脫時間長,效率低;除 需要正常預處理樹脂柱, 最后還需要單獨再生樹 脂,增加了工序和成本過程簡單,只需正常預處 理樹脂柱,在酸洗脫的同 時也再生了樹脂柱過程簡單,只需正常預處 理樹脂柱,在酸洗脫的同 時也再生了樹脂柱
由以上對比結果可見,本發明的技術方案可以解決現有技術中的不足,并顯著地提高產 品的質量、降低成本、提高生產可行性,本發明達到了發明目的。
具體實施方式
實施例h
取煙草下腳料1000g,加水煎煮2次,每次10倍量,煎煮2小時,合并煎煮液,離心, 調節p^3,離心,上清液以4倍柱體積/小時通過陽離子交換樹脂(001X7,氫型,徑高比l: 8),水洗至流出液無顏色,再用15%鹽酸溶液洗脫,洗脫速度為2倍柱體積/小時,至生物堿 檢查為陰性(流出液滴加10%硅鎢酸無沉淀),收集洗脫液,用氫氧化鈉中和至中性,除鹽, 濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。實施例2:
取煙草下腳料1000g,加p^5的酸水滲漉,合并滲漉液加水稀釋至10000ml,離心,調 節pH4,離心,上清液以5倍柱體積/小時通過陽離子交換樹脂(Doulex 50,鈉型,徑高比 1: 5),水洗至流出液無顏色,再用5%鹽酸溶液洗脫,洗脫速度為4倍柱體積/小時,洗脫2 倍柱體積后浸泡5小時,再洗脫至生物堿檢查為陰性(流出液滴加10%硅鎢酸無沉淀),收集 洗脫液,用氫氧化鈣中和至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。 實施例3:
取煙草下腳料5kg,加70%乙醇超聲提取兩次,每次加5倍量,超聲0.5小時,合并提取 液,離心,回收乙醇,加水至5000ml,調節pH-2,離心,上清液以2倍柱體積/小時通過上 陽離子交換樹脂(001X10,鈉型,徑高比1: 7),水洗至流出液無顏色,再用1%鹽酸溶液(含 1%的氯化鈉)洗脫,洗脫速度為5倍柱體積/小時,至生物堿檢査為陰性(流出液滴加10%硅 鎢酸無沉淀),收集洗脫液,用氫氧化鈉中和至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。 實施例4:
取煙草下腳料10kg,加水煎煮2次,每次10倍量,煎煮2小時,合并煎煮液,濾過, 濾液濃縮至相對密度為1.1 (60°C),加乙醇至濃度為70%,靜置,上清液回收乙醇,加水至 3000ml,調節pH4,離心,上清液以3倍柱體積/小時通過上陽離子交換樹脂(AmberlitelR-120, 氨型,徑高比l: 9),水洗至流出液無顏色,再用10%鹽酸溶液洗脫,洗脫速度為6倍柱體積 /小時,至生物堿檢査為陰性(流出液滴加10%硅鎢酸無沉淀),收集洗脫液,用氫氧化鈉中 和至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。 實施例5:
取煙草下腳料10kg,加水煎煮2次,每次10倍量,煎煮2小時,合并煎煮液,濾過, 濾液濃縮至相對密度為1.1 (60°C),加乙醇至濃度為70%,靜置,上清液回收乙醇,加水至 5000ml,調節pH-5,離心,上清液以3倍柱體積/小時通過上陽離子交換樹脂(D001X4,氫 型,徑高比l: 10),水洗至流出液無顏色,再用3%鹽酸溶液洗脫,洗脫速度為3倍柱體積/ 小時,至生物堿檢查為陰性(流出液滴加10%硅鎢酸無沉淀),收集洗脫液,用氫氧化鈉中和 至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。 實施例6:
取煙草下腳料2000g,加pH=3的鹽酸溶液,微波提取2次,每次加5倍體積微波提取0. 5 小時,濾過,濾液加水稀釋至1600ml,調節pH-6,離心,上清液以2倍柱體積/小時通過上 陽離子交換樹脂(Doulex50,氫型,徑高比l: 6),水洗至流出液無顏色,再用2%鹽酸溶液
8(含0.2mol/L的氯化氨)洗脫,洗脫速度為5倍柱體積/小時,至生物堿檢査為陰性(流出 液滴加10%硅鎢酸無沉淀),收集洗脫液,用氫氧化鈉中和至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙 草總生物堿。
實施例7:
取煙草下腳料10kg,加水煎煮2次,每次10倍量,煎煮2小時,合并煎煮液,濾過, 濾液濃縮至相對密度為1.1 (60°C),加乙醇至濃度為70%,靜置,上清液回收乙醇,加水至 4000ml,調節pH=4,離心,上清液以0.5倍柱體積/小時通過上陽離子交換樹脂 (AmberiiteIR—120,氫型,徑高比1: 6),水洗至流出液無顏色,再用0. 5%硫酸溶液(含lmol/L 的氯化鈉)洗脫,洗脫速度為5倍柱體積/小時,至生物堿檢查為陰性(流出液滴加10%硅鎢 酸無沉淀),收集洗脫液,用氫氧化鈉中和至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。 實施例8:
取煙草下腳料10kg,加水煎煮2次,每次10倍量,煎煮2小時,合并煎煮液,濾過, 濾液濃縮至相對密度為1.1 (6(TC),加乙醇至濃度為70%,靜置,上清液回收乙醇,加水至 10000ml,調節pH-3,離心,上清液以3倍柱體積/小時通過上陽離子交換樹脂(001X5,氫 型,徑高比l: 8),水洗至流出液無顏色,再用2%鹽酸溶液(含0.3mol/L的氯化鈣)洗脫, 洗脫速度為6倍柱體積/小時,至生物堿檢査為陰性(流出液滴加10%硅鎢酸無沉淀),收集 洗脫液,用氫氧化鈉中和至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。 實施例9:
取煙草下腳料1000g,加水煎煮2次,每次10倍量,煎煮2小時,合并煎煮液,濾過, 濾液濃縮至相對密度為1.1 (6(TC),加乙醇至濃度為70%,靜置,上清液回收乙醇,加水至 1000ml,調節pH:3,離心,上清液以3倍柱體積/小時通過上陽離子交換樹脂(Doulex 50, 氫型,徑高比l: 8),水洗至流出液無顏色,再用錢硫酸溶液洗脫,洗脫速度為4倍柱體積/ 小時,至生物堿檢査為陰性(流出液滴加10%硅鎢酸無沉淀),收集洗脫液,用氫氧化鈉中和 至中性,除鹽,濾液濃縮干燥得煙草總生物堿。
9
權利要求
1、一種從煙草下腳料提取液中分離煙草總生物堿的方法,其特征在于該方法為取煙草提取液,調整pH值1至7,濾過,取濾液加于陽離子交換樹脂柱上,先以水洗脫除雜,再用0.5%~15%酸液洗脫,收集洗脫液,加堿中和,經脫鹽處理,即得煙草總生物堿。
2、 如權利要求1所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于上柱前調整藥液的pH值 范圍為2至5。
3、 如權利要求1所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于所用陽離子交換樹脂可以 是大孔型或凝膠型強酸型離子交換樹脂。
4、 如權利要求3所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于所用陽離子交換樹脂柱的 柱徑柱高=1: 5 1: 10。
5、 如權利要求1所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于該方法中上樣藥液的濃度 為每ml相當于生藥0.1 3g,上樣速度為0. 5 5倍柱體積/小時。
6、 如權利要求5所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于上樣方式優選為逆流上樣。
7、 如權利要求1所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于該方法中洗脫用的酸液是 3% 6%的鹽酸溶液或3% 6%的硫酸溶液。
8、 如權利要求7所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于洗脫速度為2 6倍柱體 積/小時。
9、 如權利要求8所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于洗脫速度為4 6倍柱體 積/小時。
10、 如權利要求1所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于在水洗脫除雜后,可以 先在樹脂柱中充滿洗脫用酸液并靜置2 12個小時,再進行洗脫。
11、 如權利要求7所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于洗脫用的酸液中還可以 加入0. 1 lmol/L的NH4C1、 NaCl或CaCl2。
12、 如權利要求ll所述的分離煙草總生物堿的方法,其特征在于酸液中鹽的濃度優選為 0. 1 0. 3mol/L。
13、 權利要求1-12中任何一項所述的方法制備的煙草總生物堿。
全文摘要
本發明公開了一種分離中藥總生物堿的方法,尤其是一種從煙草下腳料提取液中分離總生物堿的方法,屬中藥領域。該方法包括如下技術方案取煙草下腳料提取液,調整pH值1至7,濾過,取濾液加于陽離子交換樹脂柱上,先以水洗脫除雜,再用0.5%~15%酸液洗脫,收集洗脫液,加堿中和,經脫鹽處理,即得煙草總生物堿。該方法克服了現有技術提取率低、有機溶劑用量大、工藝復雜、無法大生產等不足,可以高效率地從煙草下腳料提取液中分離高純度的煙草總生物堿。
文檔編號A61K36/81GK101491618SQ20071009843
公開日2009年7月29日 申請日期2007年4月18日 優先權日2007年4月18日
發明者樸美善, 王廣錄 申請人:北京和潤創新醫藥科技發展有限公司
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