一種陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠及其制備方法

專利名稱：：一種陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠及其制備方法
技術領域：
：本發明涉及婦科疾病的防治
技術領域：
，尤其涉及一種陰道用納米銀耙向溫敏噴霧凝膠及其制備方法。
背景技術：
：銀在生物醫學領域有廣泛的應用，1893年，C.VonNageli經過系統的研究，首次報道了金屬(尤其是銀)對細菌和其它低等生物的致死效應，使銀有可能成為一種消毒劑。而作為金屬銀的一種特殊形態的納米銀粉體，是指粒徑在1~100nm之間的金屬銀微粒組成的粉體。由于其顆粒極其微小，表面積較大，使其具有顯著的表面效應、量子尺寸效應和量子隧道效應，因而納米銀具有超強的活性及更強的組織滲透性，其殺菌作用是普通銀的數百倍。另外，由于納米尺度的金屬銀的表面電子特性，它可以與細菌的蛋白質分子上的疏基、胺基等吸電子基團形成配體，從而進一步增強了抗菌效果。其抗菌原理為，金屬銀離子與細菌接觸后，Ag+會與細菌體蛋白酶上的疏基(-SH)結合，使細胞的蛋白酶喪失活性，造成細胞固有成分被破壞，產生功能障礙而死亡，因而細菌的生長和繁殖便得到抑制。近年來，細菌性陰道炎(Bacterialvaginosis,簡稱BV)是^皮確定為與性傳才番有關的疾病，是廣大婦女的常見病、多發病，且隨著性病病原體感染語變化，其發病率有逐年上升的趨勢。目前臨床上的治療主要有口服和陰道局部給藥兩種方式。口服抗生素，達到陰道局部的濃度較低，難以達到有效的抗菌效果，且抗生素及其代謝產物對全身會產生毒副作用。陰道局部給藥優于口服給藥，局部濃度高，抗菌效果好，毒副作用低。到目前為止，無論是口服給藥還是陰道局部給藥，沒有一種抗生素能同時殺死這些致病菌。臨床上需聯合給藥，而聯合給藥副作用大，用藥不方便，費用高，抗生素產生耐藥性，治療時短期內有效，但停藥后容易復發。隨著抗生素的細菌耐藥性日益嚴重，納米銀在消毒殺菌領域的研究和應用受到了廣泛的關注。研究表明，納米銀具有強大抑菌、殺菌作用及其廣譜的抗菌活性，且由于量子效應、小尺寸效應和具有極大的比表面積，因而具有傳統無機抗菌劑無法比擬的抗菌效果。目前上市的納米銀劑型主要有片劑、普通凝膠劑和噴劑。凝膠型為當前納米銀最為常見的劑型，市場上也有很多相關產品。然而很多廠家所開發的納米銀凝膠為普通凝膠型，其使用方法睡前去除納米銀凝膠前端的保護帽，將裝有凝膠的給凝膠器緩慢插入陰道深部，利用助推桿將凝膠推入陰道這種方式。中國專利(專利號CN1672689A，公開日2005年9月28日)公開了一種治療婦女下生殖道感染的外用抗菌納米銀凝膠，它可以通過陰道給藥，作為治療婦科陰道炎，宮頸炎或混合感染的藥物，可以作為治療皮膚科或外科感染的藥物，還可以作為化妝品中的抗菌成分。這種直接以半固體形式給藥，在陰道深部融化或軟化，患者順應性差，且可能引起藥物的首過效應。中國專利(專利號CN1857309A，公開日2005年9月28日)公開了一種婦女用納米銀噴劑及其制備方法，通過在納米銀噴劑中加入起泡劑，以延長藥物在病灶部位的作用時間，獲得較好的療效，然而該噴劑通過泡沫的形式實現與病灶部位結合，其結合不夠緊密，同時泡沫形式也容易導致結合不均勻，而且還易使患者產生不適。
發明內容鑒于以上現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種陰道用納米銀耙向溫敏噴霧凝膠，主要用于治療婦女細菌性陰道炎，克服了傳統陰道中藥物滯留時間短的特點，使納米銀均勻分布和持久滯留在陰道的炎癥病變部位處，大大延長了藥物的作用時間，提高了納米銀的生物利用度。本發明的目的還在于提供一種陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，將生物黏附性和生物相容性良好的溫敏高分子聚合物作為載體，使納米銀室溫下以液體方式靶向噴入陰道中，在陰道的生理環境下形成半固體狀的凝膠，增加了患者的順應性。為了達到以上技術效果，一方面，本發明的具體實施方式中提供了一種陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，含有納米銀膠粒，溫敏高分子聚合物和稀釋劑，所述納米銀膠粒的粒徑80%在10nm以下。優選地，所述納米銀膠粒的含量為300~權ppm。其中，所述的溫敏高分子聚合物為波洛沙姆407和波洛沙姆188。優選地，所述波洛沙姆407的重量百分含量為18%-22%，更優選地，所述波洛沙姆407的重量百分含量為20%。優選地，所述波洛沙姆188的重量百分含量為3%-9%，更優選地，所述波洛沙姆188的重量百分含量6%。相應地，在本發明的較佳實施例中陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠還含有保濕劑甘油和防腐劑尼泊金乙酯。另一方面，本發明的實施例提供了一種納米銀靶向溫敏噴霧凝膠的制備方法，包含以下步驟步驟一、精密量取蒸餾水，將其置于水水浴中，邊攪拌邊緩緩加入準確稱量的波洛沙姆407和波洛沙姆188,使波洛沙姆407和波洛沙姆188顆粒;故水潤濕;步驟二、將步驟一中混合液在4。C的水箱中保存，直至得到澄清，無團塊，分散均勻的溶液。步驟三、向步驟二中溶液中加入納米銀，甘油，尼泊金乙酯；攪拌混合均勻，形成凝膠狀，分裝即可。根據本發明公開的技術方案，通過對細菌性陰道炎常見菌如金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌的抑菌作用研究，表明其在治療細菌性陰道炎時的良好效果。將本發明的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠在室溫下以液體方式靶向噴入陰道中，在陰道的生理環境下形成半固體狀的凝膠，并均勻分布和持久滯留在陰道的炎癥病變部位，提高了患者的順應性和納米銀的生物利用度，從而在使用方便的前提下，達到療效確切且無藥物依賴性的效果。本發明的抗菌機理如下1.納米銀通過把菌體中賴以生存的酶中的一SH基團轉換成一SAg，使酶喪失活性，導致病菌死亡，且其生成物是酶一SAg和H20,不存在二次致病因素。2.納米銀和細菌細胞壁上的膚聚糖結合，阻斷氧從細菌細胞外進入細胞內，使細菌無法代謝死亡。3.納米4艮和病原體的DNA結合，阻止病菌復制時DNA雙鏈分離，從而殺滅病原體。基于以上抗菌機理，本發明的產品，對治療婦女下生殖道感染，如:陰道炎，宮頸炎或混合感染等，具有優異的療效，可以通過陰道直接給藥，由于本發明的納米銀的粒徑80%在10nm以下，分布窄，比表面積大，所以使處于表面層的原子數迅速增加，導致原配位不足，不飽和鍵外露增多，原子的表面能增高，所以具有極強的化學活性，加上粒徑小，所以滲透性好，可以直接作用于患處，廣i普抗菌，對革蘭氏陽性細菌，革蘭氏陰性細菌，真菌、滴蟲等多種病原體都有較強的抑制或殺滅作用，并且無毒性，無過敏性，無刺激性。所以本發明的產品起效快，療效好，無毒副作用，且不影響陰道正常菌群和陰道酸堿度，殺菌作用不受PH值影響。另外，本發明還結合了溫敏凝膠的優點和納米銀的特點，將生物黏附性好和生物相容性良好波洛沙姆407和波洛沙姆188的溫敏高分子聚合物作為載體，使納米銀凝膠室溫下以液體方式靶向噴入陰道中，在陰道特殊的生理環境下形成半固體狀的凝膠，增加了患者的順應性；使納米銀均勻分布和持久滯留在陰道的炎癥病變部位處，大大延長了藥物的作用時間，提高了納米銀的生物利用度。該凝膠不產生耐藥性，不需聯合用藥，用藥方便，既對正常粘膜組織起滋潤和保護作用，又修復受損的炎癥粘膜組織，最大限度的發揮了納米銀的廣語殺菌效果。具體實施方式以下結合具體實施例對本發明進行進一步的描述。實施例1陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠基質的優化組合對選定的聚合物波洛沙姆407和波洛沙姆188按質量分別為18g和3g，18g和6g,18g和9g,20g和3g,20g和6g,20g和9g，22g和3g，22g和6g，22g和9g,混合后加至100ml水中，充分攪拌使其完全溶脹，在4。C的冰箱中保存，直至得到澄清，無團塊，分散均勻的溶液，即得樣品；為了得到澄清，無團塊，分散均勻的溶液，4。C的冰箱中保存的時間在24小時以上。將得到的樣品加熱，測定抖>品，各自不同的相變溫度，其結果見表l。表1相變溫度的測量結果(單位:。C)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>表l中的測量結果表明，選擇波洛沙姆407占凝膠重量比的20%和波洛沙姆188占凝膠重量比的6%的組合，相變溫度為36.8±0.3°C，最接近體溫，為優化組合。同時考慮到需要添加的微量納米銀膠粒和少量添加劑并不會對陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠的相變溫度產生明顯的影響，即選擇此高分子化合物的組合為陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠優化組合。實施例2陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠的制備按以下步驟及相應的組分比例配制陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠步驟一、準確量取蒸餾水，將其置于冰水浴中，邊攪拌邊緩緩加入準確稱量的波洛沙姆407和波洛沙姆188,使波洛沙姆407和波洛沙姆188顆粒被水潤、、曰/業，步驟二、將步驟一中混合液在4。C的冰箱中保存，直至得到澄清，無團塊，分散均勻的溶液。步驟三、向步驟二中溶液中加入納米銀膠體，甘油，尼泊金乙酯；攪拌混合均勻，形成凝膠狀，分裝即可。其中各組分的配比為納米4艮膠體175mL波洛沙姆407200g波洛沙姆18860g甘油10g尼泊金乙西旨_lg加蒸餾水定容至1000mL本實施例中納米銀膠體，可以是外購的，生產廠家是韓國NANUX.INC公司，其含納米銀粒徑納米銀的粒徑80%在10nm以下，納米銀濃度為2000ppm。以上配比中采用了實施例1中優化的納米銀靶向溫敏噴霧凝膠基質組合，該組合中選擇波洛沙姆407占凝膠重量比的20%和波洛沙姆188占凝膠重量比的6%的組合，相變溫度最接近體溫。為了得到澄清，無團塊，分散均勻的溶液，4。C的冰箱中保存的時間在24小時以上；同時，為了得到澄清，無團塊，分散均勻的溶液，4°C的冰箱中保存的時間在24小時以上。另外，采用MJ-22透反射金相顯微鏡拍攝優化的空白凝膠和陰道用納米銀革巴向溫敏噴霧凝膠。可以觀察到空白凝膠和納米銀靶向溫敏噴霧凝膠中凝膠都呈均勻緊密的形態結構，提示納米銀藥物在凝膠的形成過程中不起作用，藥物在凝膠中M均勻，含量均勻。實施例3陰道用納米銀耙向溫敏噴霧凝膠納米銀含量測定方法建立采用原子吸收光譜(AAS)測定凝膠中納米銀的含量。通過線性范圍的確定，精密度(RSD),穩定性，回收率等試驗考察，驗證了該方法測定納米4艮含量準確可行。取按照實施例2的方法配制的三批樣品，分別精確稱取納米銀凝膠0.3g溶解于25mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖均后采用原子吸收光譜(AAS)測定凝膠中納米銀的含量，其結果列于表2中。表2樣品含量測定結果(n=3)樣品名稱測定值(ppm)RSD(%)相當于標示量(％)樣品14.55150.8畫.37樣品24.32830.2103.05樣品34.52110.1107.65從表2可見，陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠中納米銀的含量與標識量相當，說明實施例2中陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠中納米銀有很好穩定性。實施例4陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠抑菌作用的研究在本實施例中按照中華人民共和國衛生部2002版"消毒技術規范"對本發明的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠進行抑菌作用評估。對按照實施例2中方法和組分制備的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠進行以下抑菌研究(1)納米銀靶向溫敏噴霧凝膠的MIC和MBC測定結果(見表3和表4):表3納米銀耙向溫敏噴霧凝膠最、抑菌濃度的測定結果(MIC)試驗菌藥物不同稀釋度的細菌生長情況(濃度C:ppm)25612864321684210.5陽性對照陰性對照金黃色葡萄球菌一一一一一一一一一i+—大腸埃希菌—————————++—銅綠假單胞菌______一一+++—表中"-"號表示無菌生長；"+"號表示細菌生長表4納米銀靶向溫敏噴霧凝膠最小殺菌濃度的測定結果(MBC)組別(濃度C:ppm)"~~金黃色葡萄球菌大腸埃希菌銅綠假單胞菌_納米銀溫敏凝股￡5JJ(2)納米銀靶向溫敏噴霧凝膠的體外抑菌效果(見表5):表5不同濃度的納米銀靶向溫敏噴霧凝膠的抑菌環測定結果組別抑菌環直徑(mm)(濃度C:PPM)金黃色葡萄球菌大腸埃希菌銅綠假單胞菌00.00.00.05010.75±0.348.20±0.669.25±0.2310013.35±0.528.55±0.5011.20±0.4220015.30±0.759.50±0.4313.20±0.36權17.90±0.5510.35±0.2914.85±0.41從以上抑菌實驗研究可以看出，本發明所制備的納米銀靶向溫敏噴霧凝膠具有廣譜的抗菌性和長效性，對引起常見婦科病的細菌或真菌具有良好的殺滅作用，且符合中華人民共和國衛生部2002版"消毒技術規范"的要求。以上所述是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也視為本發明的保護范圍。權利要求1、一種陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，含有納米銀膠粒，溫敏高分子聚合物和稀釋劑，所述納米銀膠粒的粒徑80％在10nm以下。2、如權利要求1所述的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，其特征在于所述納米銀膠粒的含量為300400ppm。3、如權利要求1所述的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，其特征在于所述的溫敏高分子聚合物為波洛沙姆407和波洛沙姆188。4、如權利要求3所述的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，其特征在于所述波洛沙姆407的重量百分含量為18%-22%。5、如權利要求4所述的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，其特征在于所述波洛沙姆407的重量百分含量為20%。6、如權利要求3所述的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，其特征在于所述波洛沙姆188的重量百分含量為3%-9%。7、如權利要求6所述的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，其特征在于所述波洛沙姆188的重量百分含量6%。8、如權利要求1所述的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，其特征在于還含有保濕劑甘油。9、如權利要求1所述的陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠，其特征在于還含有防腐劑尼泊金乙酯。10、一種納米4艮靶向溫敏噴霧凝膠的制備方法，該方法釆用冷溶法制備凝膠溶液，其特征在于包含以下步驟步驟一、精密量取蒸餾水，將其置于冰水浴中，邊攪拌邊緩緩加入準確稱量的波洛沙姆407和波洛沙姆188,使波洛沙姆407和波洛沙姆188顆粒被水潤濕;步驟二、將步驟一中混合液在4。C的冰箱中保存，直至得到澄清，無團塊，分散均勻的溶液。步驟三、向步驟二中溶液中加入納米銀膠體，甘油，尼泊金乙酯；攪拌混合均勻，形成凝膠狀，分裝即可。全文摘要本發明涉及一種陰道用納米銀靶向溫敏噴霧凝膠及其制備方法，所述納米銀靶向溫敏噴霧凝膠由納米銀溶液、溫敏高分子聚合物波洛沙姆407以及波洛沙姆188、甘油、尼泊金乙酯和蒸餾水攪拌混合均勻制成的。采用本發明的納米銀靶向溫敏噴霧凝膠可以在室溫下以液體方式靶向噴入陰道中，在陰道的生理環境下形成半固體狀的凝膠，并均勻分布和持久滯留在陰道的炎癥病變部位，能有效地提高了患者的順應性和納米銀的生物利用度，其使用方便、療效確切、且無藥物依賴性。文檔編號A61K9/00GK101618009SQ20081002920公開日2010年1月6日申請日期2008年7月3日優先權日2008年7月3日發明者吳傳斌,陳美婉申請人:中山大學