專利名稱：：牛黃消炎片的質量控制方法牛黃消炎片的質量控制方法
技術領域：
：本發明屬于中藥
技術領域：
，具體涉及牛黃消炎片的質量控制方法。
背景技術：
：牛黃消炎片是由牛黃、蟾酥等7味中藥組成的中藥復方制劑，具有清熱解毒、消腫止痛的功效.臨床上用于治療咽喉腫痛、疔、癰、疥瘡各證.具有服用劑量少，療效肯定等優點。牛黃消炎片的處方為牛黃4.8g，珍珠母9.6g，蟾酥2.9g，青黛3.8g，天花粉9.6g，大黃9.6g，雄黃9.6g。牛黃消炎片具體制法為以上七味，雄黃、珍珠母分別水飛或粉碎成極細粉；大黃、天花粉粉碎成細粉；青黛研細；蟾酥加白酒研成糊狀，與上述粉末及輔料適量混勻，制成顆粒，干燥；將牛黃研細，加入上述顆粒中，混勻，壓制成1000片，包糖衣，即得。牛黃消炎片性狀為糖衣片，除去糖衣后顯黃棕色；味苦，有麻辣感。重金屬檢査取本品適量，除去糖衣，研細，精密稱取1.0g，加乙醇洗滌2次，每次10毫升，離心分離，棄去乙醇液，沉淀加稀鹽酸20毫升，不斷攪拌30分鐘，濾過，殘渣用稀鹽酸洗滌2次，每次10毫升，攪拌10分鐘。洗液與濾掖合并，置500毫升量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密量取2毫升，加鹽酸5毫升與水21毫升，照砷鹽檢査法(中國藥典2005年版一部附錄KF第一法)檢查，所顯砷斑顏色不得深于標準砷斑。其他應符合片劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄ID)。目前采用的質控方法為取本品，置顯微鏡下觀察淀粉粒類球形、半圓形或盔帽形，直徑27-48iim，臍點點狀、短縫狀、人字狀或星狀，層紋隱約可見。草酸鈣簇晶大，直徑60-140um。不規則片狀或顆粒藍色。不規則碎塊金黃色或橙黃色，有光澤。本品的質量標準收載于《衛生部藥品標準-中藥成方制劑》第7冊中。此標準只用顯微鑒別方法控制其中藥的內在質量，現行的牛黃消炎片的質量標準，在實驗檢驗因加工等方面的原因，有時個別藥材組織的顯微特征無法看到，很難對其下定不符合規定判斷，這達不到監督藥品安全的目的。蟾酥為蟾蜍科動物中華大蟾蜍或黑眶蟾蜍等的耳后腺及皮膚腺分泌的白色漿液，經加工干燥而成。
發明內容本發明的目的在于提供牛黃消炎片的質量控制方法。蟾酥的皮膚刺激性很強，本發明通過對蟾酥中中華蟾酥毒基、脂蟾毒配基的參數控制，對牛黃消炎片的安全性提供了有益的安全指標。具體地說，本發明所述質控方法采用以下方法取本品20片，除去糖衣，研細，加甲醇40毫升，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至5毫升，作為供試品溶液。另取膽酸對照品，加乙醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10微升，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己垸一乙酸乙酯一醋酸一甲醇一甲酸(20:25:2:3:o.i)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。本發明所述質控方法也可以采用以下方法取本品15片，除去糖衣，研細，加三氯甲烷50毫升，加熱回流提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至l毫升，作為供試品溶液。另取靛藍和靛玉紅對照品，分別加三氯甲烷制成每l毫升各含l毫克的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各10微升，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一丙酮(19:2)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。本發明所述質控方法也可以采用以下方法取本品20片，除去糖衣，研細，加甲醇30毫升，加熱回流提取30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15毫升溶解，再加鹽酸l毫升，置熱水浴中加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取兩次，每次10毫升，合并乙醚提取液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯1毫升使溶解，作為供試品溶液。另取大黃酚、大黃素對照品，加甲醇制成每l毫升中各含l毫克的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30-6(TC)—甲酸乙酯一甲酸(15:5:1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，涼干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。上述質控方法優選采用以下方法照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；乙腈一O.5%磷酸二氫鉀溶液(50:50)為流動相；檢測波長為296nm。理論板數按華蟾酥毒基峰、脂蟾毒配基峰計算應分別不低于4000。對照品溶液的制備精密稱取華蟾酥毒基、脂蟾毒配基對照品適量，加甲醇制成每l毫升含華蟾酥毒基、脂蟾毒配基各50微克的混合溶液，即得。供試品溶液的制備取本品10片，除去糖衣，研細，取細粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20毫升，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20微升，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每片含蟾酥以華蟾酥毒基(C26H3406)和脂蟾毒配基((:2晶204)總量計，應為0.10-0.30毫克，優選O.10-0.20毫克，更優選O.10-0.15毫克。具體實施方式隨機挑選7個批號的牛黃消炎片(批號為20070712-1、20070814-1、20070910-1、20071018-1、20071119-1、20080108-1、20080204-1)和3個特別生產的牛黃消炎片(批號為20080314-2、20080316-2、20080319-2)，其蟾酥投料比正常投料增加80%，其余處方和工藝不變。實驗例l取本品20片，除去糖衣，研細，加甲醇40毫升，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至5毫升，作為供試品溶液。另取膽酸對照品，加乙醇制成每l毫升含l毫克的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各10微升，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷一乙酸乙酯一醋酸一甲醇一甲酸(20:25:2:3:o.i)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。采用本方法重復10個批次的牛黃消炎片測試，均顯陽性。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實驗例2取本品15片，除去糖衣，研細，加三氯甲烷50毫升，加熱回流提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至1毫升，作為供試品溶液。另取靛藍和靛玉紅對照品，分別加三氯甲烷制成每l毫升各含l毫克的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各10微升，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一丙酮(19:2)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。采用本方法重復10個批次的牛黃消炎片測試，均顯陽性。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實驗例3取本品20片，除去糖衣，研細，加甲醇30毫升，加熱回流提取30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15毫升溶解，再加鹽酸l毫升，置熱水浴中加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取兩次，每次10毫升，合并乙醚提取液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯l毫升使溶解，作為供試品溶液。另取大黃酚、大黃素對照品，加甲醇制成每1毫升中各含1毫克的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30-6(TC)—甲酸乙酯一甲酸(15:5:1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，涼干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。采用本方法重復10個批次的牛黃消炎片，均顯陽性。<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實驗例4三氧化二砷含量取本品適量，除去糖衣，研細，精密稱取1.0g，加乙醇洗滌2次，每次10毫升，離心分離，棄去乙醇液，沉淀加稀鹽酸20毫升，不斷攪拌30分鐘，濾過，殘渣用稀鹽酸洗滌2次，每次10毫升，攪拌10分鐘。洗液與濾掖合并，置500毫升量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密量取2毫升，加鹽酸5毫升與水21毫升，照砷鹽檢査法(中國藥典2005年版一部附錄KF第一法)檢査，所顯砷斑顏色不得深于標準砷斑。其他應符合片劑項下有關的各項規定(中國藥典2005年版一部附錄ID)。采用本方法重復10個批次的牛黃消炎片，均顯陽性。批號檢測結果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實驗例5照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈一O.5%磷酸二氫鉀溶液(50:50)為流動相；檢測波長為296nm。理論板數按華蟾酥毒基峰、脂蟾毒配基峰計算應分別不低于4000。對照品溶液的制備精密稱取華蟾酥毒基、脂蟾毒配基對照品適量，加甲醇制成每l毫升含華蟾酥毒基、脂蟾毒配基各50微克的混合溶液，即得。供試品溶液的制備取本品10片，除去糖衣，研細，取細粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20毫升，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20微升，注入液相色譜儀，測定，即得。采用本方法重復IO個批次的牛黃消炎片，折算后每片牛黃消炎片中華蟾酥毒基、脂蟾毒配基合計含量如下<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實驗例6由于牛黃消炎片還可外用，為了驗證本發明的安全性。挑選5只家兔，雌性，體重(2.5-3.0公斤)剪去家兔腹部的毛，將家兔腹部等分為IO個等面積的區域，每個區域內正中取0.5X0.5厘米皮膚內，涂用10個批號片劑研磨后的粉末各0.3克，兔保持翻轉狀態60分鐘。觀察皮膚用藥部位是否出現紅斑、水腫等皮膚刺激反應。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由此可以看出，后3個扣:號的牛黃消炎片的外用安全性有隱患，而在前7個批號的片劑安全性更有保證。蟾酥的皮膚刺激性很強，本發明通過對蟾酥中中華蟾酥毒基、脂蟾毒配基的參數控制，對牛黃消炎片的安全性提供了有益的指標。權利要求1.一種牛黃消炎片的質量控制方法，其特征在于采用以下方法取本品20片，除去糖衣，研細，加甲醇40毫升，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至5毫升，作為供試品溶液；另取膽酸對照品，加乙醇制成每1毫升含1毫克的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10微升，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇-甲酸按照20∶25∶2∶3∶0.1配比的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。2.—種牛黃消炎片的質量控制方法，其特征在于采用以下方法-取本品15片，除去糖衣，研細，加三氯甲垸50毫升，加熱回流提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至1毫升，作為供試品溶液；另取靛藍和靛玉紅對照品，分別加三氯甲垸制成每1毫升各含1毫克的混合溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各10微升，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一丙酮按照19:2配比為展開劑，展開，取出，晾干；供試品色譜在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。3.—種牛黃消炎片的質量控制方法，其特征在于采用以下方法取本品20片，除去糖衣，研細，加甲醇30毫升，加熱回流提取30分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15毫升溶解，再加鹽酸l毫升，置熱水浴中加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取兩次，每次10毫升，合并乙醚提取液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯l毫升使溶解，作為供試品溶液；另取大黃酚、大黃素對照品，加甲醇制成每l毫升中各含l毫克的混合溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5微升，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚一甲酸乙酯一甲酸按照15:5:1配比的上層溶液為展開劑，展開，取出，涼干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。4.根據權利要求1-3任一所述的質量控制方法，其特征在于采用以下方法-照高效液相色譜法測定用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；乙腈一0.5%磷酸二氫鉀溶液按照50:50配比為流動相；檢測波長為296nm，理論板數按華蟾酥毒基峰、脂蟾毒配基峰計算應分別不低于4000;對照品溶液的制備精密稱取華蟾酥毒基、脂蟾毒配基對照品適量，加甲醇制成每1毫升含華蟾酥毒基、脂蟾毒配基各50微克的混合溶液，即得；供試品溶液的制備取本品10片，除去糖衣，研細，取細粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20毫升，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20微升，注入液相色譜儀，測定，即得。5、根據權利要求4所述的質量控制方法，其特征在于所述片劑每片含蟾酥以華蟾酥毒基(C26H3406)和脂蟾毒配基((:24仏204)總量為0.10-0.30毫克。6、根據權利要求5所述的質量控制方法，其特征在于所述片劑每片含蟾酥以華蟾酥毒基(C26H3406)和脂蟾毒配基((:2凡204)總量為0.10-0.20毫克。7、根據權利要求6所述的質量控制方法，其特征在于所述片劑每片含蟾酥以華蟾酥毒基(C』m06)和脂蟾毒配基((:2晶204)總量為0.10-0.15毫克。全文摘要牛黃消炎片是由牛黃、珍珠母、蟾酥、青黛、天花粉、大黃、雄黃7味中藥組成的中藥復方制劑，具有清熱解毒、消腫止痛的功效。臨床上用于治療咽喉腫痛、疔、癰、疥瘡各證，具有服用劑量少，療效肯定等優點，但是由于該制劑中動物藥和毒性藥較多，其臨床使用上需要非常謹慎，現行的牛黃消炎片的質量標準尚不能完全達到監督藥品安全的目的。本發明的目的在于從定性和定量方面提供更加完善的質控方法。文檔編號A61P11/04GK101249148SQ200810089490公開日2008年8月27日申請日期2008年4月3日優先權日2008年4月3日發明者楊文龍申請人:楊文龍