專利名稱：：結膜下給藥用藥物組合物的制作方法
技術領域：
：本發明涉及用于視網膜、脈絡膜、視神經、玻璃體、或晶狀體等眼球后部的藥物釋放系統(以下簡稱為DDS)。
背景技術：
：在-見網膜、脈絡膜、視神經、玻璃體、及晶狀體等眼球后部的疾病中，難治性疾病很多，目前迫切希望開發出有效的藥物治療方法。對于眼部疾病，最常見的是點眼給藥治療，但藥物基本上不向視網膜、脈絡膜、視神經、玻璃體、及晶狀體等眼球后部轉移。而且，就算轉移也很難維持組織中的藥物濃度。所以，對于眼^求后部疾病的纟會藥方法，已經嘗試了,爭"永注射、口服給藥、玻璃體注射。靜脈注射或口服給藥時，藥物向作為靶部位的眼球后部的轉移量極其微小，而且顯著地表現出了所不希望的藥物全身作用(副作用)。玻璃體注射是將藥物直接注入眼內，因此其向眼球后部的藥物轉移量比靜脈注射或口服給藥多。關于玻璃體注射的眼球后部藥物釋放，眼科藥學與治療學雜志(JournalofOcularPharmacologyandtherapeutics),(2001)17/4,393-401中已有綜述。但是玻璃體注射是需要高度技術的給藥方法，由于伴隨有相當的痛苦，因此患者的負擔也很大，多次給藥非常困難。相對于上述給藥方法，結膜下注射的手法較簡單，比玻璃體注射對眼部組織的傷害小，且患者的負擔小。結膜下注射后藥物向眼球后部的轉移性也已有報告(參見Invest.Ophthalmol.VisualSci.18(3)250-255,1979),但是，因其半衰期非常短，而難以長時間維持藥物在眼球后部組織中的濃度。因此，為了維持藥物在組織中的濃度必須頻繁多次給藥，但頻繁多次給藥使患者的負擔加大。為了避免頻繁多次給藥，必須長時間維持藥物濃度。已知的一種方法為，在基質中使用高分子使其凝膠化以增加制劑的粘度而長時間維持藥物濃度的方法。作為上述增加制劑粘度的高分子已知有廣泛使用的羥丙曱基纖維素、羥乙基纖維素、羧基乙烯基聚合物、羧甲基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇等。除了上述高分子之外，還已知有因生物體方面某些因素的改變而引起凝膠化的物質，例如，溫度變化引起凝膠化的熱敏感性凝膠、由離子引起凝膠化的離子敏感性凝膠、pH變化引起凝膠化的pH敏感性凝膠等。作為熱敏感性凝膠，已知有在低于體溫的溫度下為液體、當溫度升至體溫時發生凝膠化的由甲基纖維素、枸櫞酸及聚乙二醇形成的混合物(參見專利2729859號公報)；或者在高于體溫的溫度下為液體、當溫度下降至體溫時發生凝膠化的由聚己酸內酯和聚乙二醇形成的聚合物(參見特開平8-176016號公報)。適于使用的凝膠劑并不受到舉例的限定。作為目前應用凝膠的眼科領域DDS的實例，已有將噻嗎洛爾(timolol)溶解在熱敏感性凝膠中得到的制劑滴眼給藥時，房水中噻嗎洛爾的濃度得以維持的報告(參見專利2729859號公報)，以及關于將自力霉素(mitomycin)C溶解在熱敏感性凝膠基質中得到的制劑結膜下給藥時，藥物向鞏膜、結膜的轉移性的報道(參見BritishJournalofOphthalmology1997;81:72-75)。但是，現有的技術還不足以長時間維持藥物在眼球后部組織中的濃度，期待開發出藥物向眼球后部緩慢釋放的、能夠長時間維持藥物有效濃度的DDS。
發明內容本發明人等首先著眼于將含有藥物和基質的藥物組合物結膜下給藥并由基質形成儲存庫(depot),對使藥物從儲存庫緩慢釋放以便能夠維持藥物有效濃度的方法進行了深入的研究。結果發現，通過使藥物以不發生瞬間溶解的狀態含有在至少在結膜下給藥后呈凝膠狀態的基質中，能夠獲得優良的DDS。即，本發明的DDS是將含有藥物和基質的藥物組合物結膜下給藥并由基質形成儲存庫，使藥物從該儲存庫緩慢釋放以便能夠維持藥物有效濃度的、用于眼球后部的藥物釋放系統，其中，所述藥物組合物由所含的基質和藥物組成，所述基質在結膜下(即，至少在結膜下給藥后)呈凝膠狀態，所述藥物懸浮在所述基質中。另外，本發明的結膜下注射劑是在結膜下(即，至少在結膜下給藥后)呈凝膠狀態的基質中懸浮藥物而形成的注射劑，其中，注射劑的基質在結膜下形成儲存庫，通過從該儲存庫緩慢釋放出藥物而能夠維持藥物在眼球后部組織中的濃度。此處，"至少在結膜下給藥后"是指在將藥物組合物結膜下給藥之前(即給藥時)基質可以呈凝膠狀態，亦可不呈凝膠狀態，但給藥后必須呈凝膠狀態。本發明中所謂儲存庫(depot)是指藥物組合物在組織中至少經1周或1周以上的長時間不發生分散、以集中的狀態貯存在組織中，即，藥物在上述期間內儲存在組織中呈凝膠狀態的基質中，并且，該儲存庫是由組織中呈凝膠狀態的基質形成的，而藥物在上述期間內儲存在所述儲存庫中。本發明中使用的基質是在結膜下呈凝膠狀態的基質。通過在結膜下呈凝膠狀態，基質可作為滯留于結膜組織中的藥物的儲存庫(depot)發揮作用。本發明的基質可以在給藥時呈凝膠狀態，也可以給藥時呈溶液狀態、而給藥后在結膜下成為凝膠狀態。給藥時呈凝膠狀態的基質含有凝膠化的高分子。作為凝膠化的高分子可以舉出，羥丙曱基纖維素、羥乙基纖維素、羧基乙烯基聚合物、羧曱基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇等。給藥時呈溶液狀態、而給藥后在結膜下呈凝膠狀態的基質含有在結膜下發生凝膠化的高分子。作為在結膜下發生凝膠化的高分子可以舉出，溫度改變引起凝膠化的高分子、由離子引起凝膠化的高分子、pH變化引起凝膠化的高分子等。溫度改變引起凝膠化的高分子優選在結膜下的溫度(接近37°C)下發生凝膠化的高分子。由離子引起凝膠化的高分子優選由存在于結膜下的離子，例如鈉離子、鈣離子等引起凝膠化的高分子。另夕卜，pH變化引起凝膠化的高分子優選在結膜下的pH下(接近中性)發生凝膠化的高分子。只要使用滿足上述條件的高分子，就可以在注入時呈溶液狀態，而在注入結膜下之后高分子發生凝膠化形戍儲存庫。號日本專利記載的凝膠、注冊商標"Pluronic"(旭電化工業制)、注冊商標"ReGel"(MacroMed社制)等。例如、專利2729859號記載的凝膠為1.4重量％的甲基纖維素、3.5重量％的枸櫞酸及2重量°/0的聚乙二醇的混合物，在32。C或32。C以上時發生凝膠化。作為由離子引起凝膠化的高分子的具體例可以舉出結冷膠(Gellangum)、海藻酸鈉等。結冷膠在鈉離子等陽離子、海藻酸鈉在鈣離子等2價或2價以上陽離子存在的情況下發生凝膠化。通常在結冷膠中并用氨丁三醇或甘露糖醇。作為由pH變化引起凝膠化的高分子可以舉出例如，聚丙蹄酸和羥丙曱基纖維素的混合物等。上述高分子在pH4.0時為低粘度溶液i:,而在pH7.4時發生凝膠化(JpharmSci1995Mar;84(3):344-8)。也可以將上述多種高'分子組合使用。本發明通過使藥物以不發生瞬間溶解的狀態含有在至少在結膜下給藥后呈凝膠狀態的基質中，能夠獲得優良的藥物緩慢釋放效果以及維持有效濃度的效果。當藥物為水難溶性時，以懸浮在基質中的狀態含有藥物。當藥物較易溶于水時，也可以將其轉換成酯類等水難溶性前藥進行使用。另外，通過使藥物以微球化的形態含有在基質中也可以使藥物在呈凝膠狀態的基質中不發生瞬間溶解。本發明的DDS優選作為注射劑進行結膜下給藥。本發明中所謂眼球后部是指眼睛的內部組織，即，視網膜、脈絡膜、視神經、玻璃體、或晶狀體。在
背景技術：
部分已經闡明，藥物基本上不向視網膜、脈絡膜、及視神經等眼球后部轉移。而且，就算轉移也很難維持組織中的藥物濃度。因此，對于眼球后部疾病的給藥方法，已經嘗試了靜脈注射、口服給藥、玻璃體注射。但是靜脈注射或口服給藥時，藥物向作為靶部位的眼球后部的轉移量極其微小，而且顯著地表現出了所不希望的藥物全身作用(副作用).。玻璃體注射是將藥物直接注入眼內，因此其向眼球后部的藥物轉移量比靜脈注射或口服給藥多。但是玻璃體注射是需要高度技術的給藥方法，由于伴有相當的痛苦，因此患者的負擔也很大，極難多次給藥。'.與上述給藥方法不同，本發明的DDS為將藥物組合物經結膜下注射進行給藥的方法，因此手法較簡單，比玻璃體注射對眼組織的傷害小、且患者的負擔小。作為用本發明的DDS治療的眼球后部疾病，可以舉出各種原因引起的炎癥，病毒或細菌的感染癥，由視網膜脈絡膜的血管新生、血管滲透性亢進引發的疾病，青光眼引發的視神經障礙。具體而言，可舉出葡萄膜炎、巨細胞病毒視網膜炎、老年性黃斑變性、糖尿病性視網膜病變、增殖性玻璃體視網膜病變、視網膜剝離、視網膜色素變性、伴隨青光眼的視野狹窄、視野缺損等。作為本發明中使用的藥物，只要是對上述眼球后部疾病的治療或者預防有效的藥物即可，并無特別的限制，可以舉出以下具體例。倍他米松、地塞米松、去炎松、強的松龍、氟甲龍、氫化可的松、黃體酮等類固醇藥；溴芬酸、雙氯芬酸鈉等抗炎劑；TNF-a抑制劑、PDE-IV抑制劑、ICE抑制劑等細胞因子抑制劑；環孢菌素、藤霉素等免疫抑制劑；更昔洛韋、阿昔洛韋、P干擾素等抗病毒劑；氧氟沙星、克拉霉素、紅霉素等抗菌劑；5-氟尿嘧啶、曱氨蝶呤、MMP抑制劑等抗癌劑；血管內皮抑素、VEGF抑制劑、反義寡核苷酸、PKC抑制劑、粘合因子抑制劑、血管靜止性類固醇等血管新生抑制劑；MK-801、噻馬洛爾、肌酸、牛璜酸、腦源性神經營養因子(brain-derivedneurotrophicfactor，BDNF)等神經保護劑/神經營養因子等。本發明的特征為，藥物以懸浮的狀態含在基質中。藥物能否在基質中懸浮取決于藥物的水溶性及濃度。如果藥物為水難溶性，則除了藥物濃度較低的情況，均可懸浮在基質中。例如，下述的實施例所示，當含有1重量％倍他米松時可以制成懸浮的狀態。當藥物水溶性較高，或者雖然為水難溶性但其濃度較低、不能直接形成懸浮狀態時，可將藥物前藥化以使其成為水難溶性、或者通過毫微球化、微球化而使其懸浮在基質中。作為經前藥化以使其成為水難溶性的具體例可以舉出，胰島素被制成胰島素鋅從而將其變為水難溶性、或者將青霉素的親水性基團進行化學修飾而制成水難溶性的普魯卡因青霉素的方法。將藥物毫微球化或者微球化不需要特殊的方法，可以使用廣泛應用的方法，有使用研磨機的粉碎法、相分離法(凝聚法)、噴霧干燥法、超臨界流體法、界面沉淀法、界面反應法等。具體可以舉出作為界面沉淀法的浸漬干燥法(J.Control.Release,2，343-352,(1985))、作為界面反應法的界面聚合法(Int丄Pharm.,28,125-132(1986))、自乳化溶劑擴散法(J.Control.Release,25,89-98,(1993))等。根據微粒的粒徑或所含藥物的種類、'性質或含量等，從這些制造方法中，適當地選擇出合適的制造方法即可。本發明的DDS優選以注射劑的形式結膜下給藥，可以采用廣泛使用的注射劑制劑化技術進行制備，下面就一例制備方法進行簡單說明。首先，將凝膠化的高分子或在結膜下發生凝膠化的高分子加入溶劑中制成基質。作為溶劑，只要是生理上可接受的溶劑即可，優選注射用蒸餾水。上述高分子的濃度優選滿足下述條件，即，所述濃度使其在給藥前具有不難以注射的粘度、在給藥后具有足以形成儲存庫的粘度。具體根據高分子的種類而異，但在0.5~30重量％的范圍內。將水難溶性藥物加入到上述基質中使其均勻分散、懸浮從而制成注射劑。使藥物在基質中懸浮無需特殊的方法，可以采用廣泛應用的方法。例如，藥物為倍他米松時，將其加入到基質中用研缽充分粉碎，使其均勻分散在基質中即可。同樣，對于微球化的藥物，也只要將其加入基質中使其均勻分散、懸濁，制成注射劑即可。另外，對于液態的藥物，可用乳化代替懸浮。作為乳化方法，可以采用廣泛應用的方法，例i口,表面"f匕學享L^匕法(surfacechemicalemulsification)、才幾才成乳化法、膜乳化法等。本發明的基質中可以使用通常用于注射劑的添加劑，例如可以加入氯化鈉等滲透壓調節劑、磷酸鈉等緩沖劑等作為添加劑。本發明的藥物釋放系統用于治療或者預防眼球后部，即，視網膜、脈絡膜、3見神經、玻璃體、及晶狀體的疾病。具體的疾病例可以舉出，各種原因引起的炎癥，病毒或細菌的感染癥，由視網膜脈絡膜的血管新生、血管滲透性允進引發的疾病，青光眼引發的視神經障礙。更具體而言，可舉出葡萄膜炎、巨細胞病毒視網膜炎、老年性黃斑變性、糖尿病性視網膜病變、增殖性玻璃體視網膜病變、一見網膜剝離、視網膜色素變性、伴隨青光眼的視野狹窄、視野缺損等。本發明的效果在下述的視網膜脈絡膜藥物濃度測定試驗部'分給予詳細說明，用倍他米松作為藥物的例子，將倍他米松懸浮在各種凝膠基質中得到的制劑結膜下給藥，測定視網膜脈絡膜中的藥物濃度時，發現視網膜脈絡膜中的藥物濃度得以持續保持。本發明的藥物釋放系統的制劑經結膜下給藥。結膜下給藥的方法可以是通常采取的結膜下注射。如
背景技術：
部分所述，結膜下注射手法較簡單且對患者的負擔也小。另外，運用本發明的系統時，由于能高效率地將藥物輸送到作為耙部位的一見網膜、脈絡膜或碎見神經等眼球后部，因此能減少給藥量，可望有減輕副作用的效果。具體實施例方式下面給出本發明的DDS中使用的制劑的制備例、以及本發明的DDS的藥代動力學實驗結果。l.制劑的制備下面給出可使用于本發明的藥物釋放系統的制劑的具體例。制劑例l.倍他米松-熱敏感性凝膠懸浮劑將枸櫞酸三鈉二水合物(1.75g)及聚乙二醇400(l.Og)溶解在加熱至約70。C的超純水(50mL)中。溶解后，邊攪拌邊少量逐步添加甲基纖維素(0.7g)使其均勻分散。將得到的分散液在冰水浴中攪拌直至變為無色透明。然后將其恢復到室溫，并少量添加1N的鹽酸調節pH為6.5。由此制備熱敏感性凝膠懸浮劑。在該熱敏感性凝膠懸浮劑UOmL)中加入倍他米松(O.lg),用研缽充分粉碎使其均勻分散。制劑例2.倍他米松-離子敏感性凝膠懸浮劑將氨丁三醇(0.091g)及D-(-)-甘露糖醇(4.5g)溶解在加熱至約70。C的超純水(約80mL)中。在得到的溶液中攪拌下少量逐步加入結冷膠(0.6g),使其溶解。然后加入超純水使總量為100mL。由此制備離子敏感性凝膠懸浮劑。在該離子敏感性凝膠懸浮劑UOmL)中加入倍他米松(O.lg)，用研缽充分粉碎后以混合型攪拌器使其均勻分散。制劑例3.倍他米松-曱基纖維素凝膠懸浮劑將50mL超純水加熱至約為70。C,在攪拌下向其中少量逐步加入曱基纖維素0.7g使其均勻分散。將得到的分散液在冰水浴中攪拌直至變為無色透明。由此制備甲基纖維素凝膠懸浮劑。在該曱基纖維素凝膠懸浮劑(10mL)中加入倍他米松(100mg),用研缽充分粉碎使其均勻分散。制劑例4，微球化的5-氟尿嘧啶-熱敏感性凝膠懸浮劑將5-氟尿嘧啶(0.5g)及重均分子量為20000的聚乳酸U.5g)溶解在醋酸(200mL)中。利用冷凍干燥法除去醋酸，從而得到5-氟尿嘧啶和聚乳酸的均勻混合物。將其在約10(TC下熔融，熔融物成形為針狀。將得到的針狀物研磨并粉碎制成微粒。將制成的微粒過篩從而得到粒徑為10~75iam的含有5-氟尿嘧啶的微球。在按照制劑例l的方法制備的熱敏感性凝膠懸浮劑(10mL)中加入上述含有5-氟尿嘧啶的微球(O.lg),用研缽充分粉碎使其均勻分散。2.視網膜脈絡膜中藥物濃度的測定試驗用上述制劑例1~3的倍他米松-凝膠懸浮劑，按下述方法測定視網膜脈絡膜內倍他米松的濃度。用倍他米松懸浮劑作為對照，比較倍他米松-凝膠懸浮劑給藥組和倍他米松懸浮劑給藥組的倍他米松在視網膜脈絡膜內的濃度。倍他米松懸浮劑是將倍他米松懸浮在溶劑(0.4重量％吐溫80/2.6重量％甘油的溶液)中得到的懸浮液。制備上述制劑例1~3中含有生物體敏感性高分子的倍他米松懸浮劑，使倍他米松濃度與倍他米松懸浮劑相同為1重量％。'1)將日本白色家兔兩眼中點入鹽酸奧布卡因(0.5重量％)滴眼液進行眼表面麻醉。2)用27G針的注射器，將含有高分子的1重量％倍他米松懸浮劑在上部結膜下按每只眼睛50juL給藥。倍他米松的給藥量約為500jjg。對照組中，用27G針的注射器，將1重量％的倍他米松懸浮劑在上部結膜下按每只眼睛50jaL給藥。3)家兔給藥后，一部分在2日后、其余在7日后殺死，分別摘除眼球后，回收視網膜脈絡膜，用高效液相色譜法測定視網膜脈絡膜內倍他米松的濃度。表1給出了藥物的經時濃度變化結果(表1的值為4只眼的平均值)。從表l可以明確，倍他米松懸浮劑的視網膜脈絡膜內倍他米松濃度在2日后約為0.72Mg/g組織，而7日后在檢出限以下。與其相對，倍他米松-熱敏感性凝膠懸浮劑的視網膜脈絡膜內倍他米松濃度在7天后仍為約10.55jug/g組織，倍他米松-離子敏感性凝膠懸浮劑在視網膜脈絡膜中的倍他米松濃度在7天后仍為約1.02jag/g組織，兩種懸浮劑均能在視網膜脈絡膜中維持有效的藥物濃度。另外，倍他米松-甲基纖維素凝膠懸浮劑在7天后約為1.30Mg/g組織，也能在視網膜脈絡膜中維持有效的藥物濃度。表1、視網膜脈絡膜內倍他米松濃度(|Llg/g組織)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>產業實用性本發明能夠提供一種經結膜下給藥用于眼球后部的良好的DDS。權利要求1.一種結膜下給藥用藥物組合物，是在結膜下呈凝膠狀態的基質中懸浮藥物而形成的結膜下給藥用藥物組合物，其特征為，該藥物組合物的基質在結膜下形成儲存庫，該基質在給藥時為溶液狀態而給藥后在結膜下呈凝膠狀態，該基質含有在結膜下進行凝膠化的高分子，通過從該儲存庫緩慢釋放出藥物從而能夠維持在眼球后部組織中的藥物濃度。2.如權利要求1所述的結膜下給藥用藥物組合物，其中，在結膜下進行凝膠化的高分子是因溫度改變引起凝膠化的高分子、由離子引起凝膠化的高分子或因pH變化引起凝膠化的高分子。3.如權利要求1所述的結膜下給藥用藥物組合物，其特征為，所述藥物是用于治療或者預防視網膜、脈絡膜、視神經、玻璃體、或者晶狀體疾病的藥物。4.如權利要求1所述的結膜下給藥用藥物組合物，其特征為，所述藥物為抗炎劑、免疫抑制劑、抗病毒劑、抗癌劑、血管新生抑制劑、視神經保護劑、抗菌劑。5.如權利要求4所述的結膜下給藥用藥物組合物，其特征為，所述抗菌劑為抗真菌劑。6.如權利要求1所述的結膜下給藥用藥物組合物，其特征為，所述藥物為水難溶性藥物。7.如權利要求6所述的結膜下給藥用藥物組合物，其特征為，所述水難溶性藥物為具有不溶于基質的脂溶性、且能夠懸浮在基質中的藥物。8.如權利要求1所述的結膜下給藥用藥物組合物，其特征在于，其中的藥物為水溶性藥物，所述藥物組合物是將所述藥物毫微球化或者微球化后使其懸浮于在結膜下呈凝膠狀態的基質中而形成的。9.如權利要求1所述的結膜下給藥用藥物組合物，其中，所述藥物為倍他米松、地塞米松、去炎松、強的松龍、氟甲龍、氫化可的松、黃體酮、溴芬酸、雙氯芬酸鈉、環孢菌素、藤霉素、更昔洛韋、阿昔洛韋、P千擾素、氧氟沙星、克拉霉素、紅霉素、5-氟尿嘧啶、曱氨蝶呤、血管內皮抑素、反義寡核苷酸、噻馬洛爾、肌酸、牛璜酸或腦源性神經營養因子。10.如權利要求19任一項所述的結膜下給藥用藥物組合物，其特征為，所述藥物組合物的給藥劑型為注射劑。全文摘要本發明提供一種結膜下給藥用藥物組合物，是在結膜下呈凝膠狀態的基質中懸浮藥物而形成的結膜下給藥用藥物組合物，其特征為，該藥物組合物的基質在結膜下形成儲存庫，該基質在給藥時為溶液狀態而給藥后在結膜下呈凝膠狀態，該基質含有在結膜下進行凝膠化的高分子，通過從該儲存庫緩慢釋放出藥物從而能夠維持在眼球后部組織中的藥物濃度。文檔編號A61K31/00GK101336887SQ20081013132公開日2009年1月7日申請日期2003年12月3日優先權日2002年12月4日發明者山田和人,桑野光明申請人:參天制藥株式會社